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1、離子交換層析的基本原理離子交換層析的基本原理離子交換介質(zhì)分類離子交換介質(zhì)分類離子交換層析的基本操作離子交換層析的基本操作離子交換層析的應(yīng)用離子交換層析的應(yīng)用 離子交換層析(IEC)是以離子交換劑為固定相,以含特定離子的溶液為流動相,利用離子交換劑上的可交換離子與溶液中離子發(fā)生交換作用,由于不同的溶質(zhì)離子與離子交換劑上離子化的基團(tuán)的親和力和結(jié)合條件不同,洗脫液流過時,樣品中的離子按結(jié)合力的弱強(qiáng)先后洗脫,而將混合物中不同離子進(jìn)行分離的技術(shù)。 離子交換劑亦稱離子交換介質(zhì),為離子交換層析的的固定相。:一:聚苯乙烯型離子交換樹脂。樹脂骨架的多孔彈性顆粒.二:多糖類骨架的離子交換樹脂。如:離子離子 交換纖
2、維素(交換纖維素(DEAE-纖維素、纖維素、CM-纖維素)纖維素)離子交換葡聚糖離子交換葡聚糖陽離子交換劑陽離子交換劑 強(qiáng)酸型和弱酸型強(qiáng)酸型和弱酸型 磺酸基(-SO3H) 磷酸基(-PO3H2) 羧酸基(-COOH) 酚羥基(-OH) 陰離子交換劑陰離子交換劑強(qiáng)堿型和弱堿型強(qiáng)堿型和弱堿型 伯胺基(-NH2) 仲胺基(-NHCH3 ) 叔胺基(-N(CH3)2) 季胺基(-N+(CH3) 3 )交換樹脂的選擇交換樹脂的選擇酸性物質(zhì)用陰離子交換劑分離堿性物質(zhì)用陽離子交換劑分離 樹脂預(yù)處理樹脂預(yù)處理去除雜質(zhì)與細(xì)小顆粒:保證有較好的均勻度3.平衡平衡:稀酸或稀堿處理,使交換劑帶上需要的平衡離稀酸或稀堿
3、處理,使交換劑帶上需要的平衡離子。子。使使之成為帶之成為帶H+或或OH-,至所需的,至所需的pH和離子強(qiáng)和離子強(qiáng)度。度。4.裝柱裝柱:使用前要排除氣泡。使用前要排除氣泡。加樣與洗脫加樣與洗脫(1)樣品應(yīng)與起始緩沖液有相同的樣品應(yīng)與起始緩沖液有相同的PH和離子強(qiáng)度和離子強(qiáng)度(2)可通過改變?nèi)芤旱目赏ㄟ^改變?nèi)芤旱膒H或改變離子強(qiáng)度的方或改變離子強(qiáng)度的方 法將結(jié)合物洗脫法將結(jié)合物洗脫 最好的洗脫方法是最好的洗脫方法是連續(xù)梯度洗連續(xù)梯度洗脫 6.洗脫液的收集洗脫液的收集 7.離子交換劑的再生與保存離子交換劑的再生與保存 (1)再生劑常用HCl、NaCl、NaOH、乙醇等。 (2)保存離子交換劑時要加防腐劑,如:氯已定(洗必泰),乙基硫柳汞(0.005),0.02疊氮鈉產(chǎn)品的濃縮、脫鹽產(chǎn)品的濃縮、脫鹽 離子交換層析得到的樣
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