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文檔簡介
1、2014高考真題細胞胚胎工程1.(課標卷)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目40條),并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞?;卮鹣铝袉栴}:(1)制備融合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過 次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X
2、、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細胞的是 小鼠,理由是 。(2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,可能還有 ,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是 。(3)雜交瘤細胞中有 個細胞核,染色體數(shù)目最多是 條。(4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是 。2.(廣東卷)鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一,應用組織培養(yǎng)技術培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下:在固體培養(yǎng)基上,PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖17所示,請回答下列問題: 選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是 ,誘導
3、外植體形成PLBs的過程稱 。與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在 。脫落酸(ABA)能提高生物堿含量,但會抑制PLBs的生長。若采用液體培養(yǎng),推測添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學們擬開展探究實驗驗證該推測,在設計實驗方案時探討了以下問題:ABA的濃度梯度設置和添加方式:設4個ABA處理組,1個空白對照組,3次重復。因ABA受熱易分解,故一定濃度的無菌ABA母液應在各組液體培養(yǎng)基 后按比例加入。實驗進程和取樣:實驗50天完成,每10天取樣,將樣品(PLBs)稱重(g/瓶)后再測定生物堿含量。如初始(第0天)數(shù)據(jù)已知,實驗過程中還需測定的樣品數(shù)為 。依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的
4、ABA濃度和培養(yǎng)時間:當某3個樣品(重復樣)的 時,其對應的ABA濃度為適宜濃度,對應的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。 3.(福建卷)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞??蒲腥藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如圖:(1)步驟中,在核移植前應去除卵母細胞的 。(2)步驟中,重組胚胎培養(yǎng)到 期時,可從其內(nèi)細胞團分離出ES細胞。(3)步驟中,需要構(gòu)建含有基因Rag2的表達載體??梢愿鶕?jù)Rag2基因的 設計引物,利用PCR技術擴增Rag2基因片段。用HindIII和PstI限制酶分別在片段兩側(cè)進行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達載體,所選擇
5、的表達載體上應具有 酶的酶切位點。(4)為檢測Rag2基因的表達情況,可提取治療后小鼠骨髓細胞的 ,用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。4.杜泊羊以其生長速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點,被稱為“鉆石級”肉用綿羊??蒲泄ぷ髡咄ㄟ^胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示,相關敘述正確的是A.為了獲得更多的卵母細胞,需用雌激素對雌性杜泊羊進行處理B.從卵巢中采集的卵母細胞可直接與獲能的精子進行體外受精C.為避免代孕綿羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應,應注射免疫抑制劑D.為了進一步擴大繁殖規(guī)模,可通過胚胎分割技術獲得同卵雙胎2014高考真題細胞胚胎工程1.(1)四 Y Y小鼠的抗體效價最高(2)B淋巴細胞相互融合形成的細
6、胞,骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞 細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%(3)1 100(4)不能無限增殖2.(1)細胞分化程度低,容易誘導形成PLBs(2分); 細胞的脫分化(2分) (2)生長起始快(2分), 快速生長時間較長(2分); PLBs產(chǎn)量較高(2分);(3)滅菌、冷卻(2分); 75(2分); PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大(3分)【解析】【解析】(1)新生營養(yǎng)芽分裂能力強,全能性容易表達;根據(jù)題干可知,PLBs類似愈傷組織,外植體形成愈傷組織的過程是脫分化。(2)據(jù)圖分析,光照下PLBs的重量高于黑暗條件下,原因可能是光照有利于細胞增殖、葉綠體的形成和進行光合作用
7、制造有機物。(3)由于ABA受熱易分解,所以各種液體培養(yǎng)基滅菌后,冷卻,再加入不同濃度的ABA 根據(jù)題干可知,實驗50天完成,每10天取樣,需要取樣5次,4個ABA處理組,1個空白對照組,3次重復,因此每次取樣需要記錄15個樣品中的數(shù)據(jù),共需要測定樣品數(shù)75 適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量,當樣品的平均值最大時,所對應的ABA濃度和時間為最適。3.(1)細胞核(2)囊胚(3)核苷酸序列 Hind和Pst(4)蛋白質(zhì)【解析】(1)步驟是核移植過程。體細胞核移植前要除去受體卵母細胞的細胞核,原因是若不去掉卵母細胞的細胞核,就會造成細胞里面就有兩個細胞核,使得遺傳物質(zhì)是不穩(wěn)定的。(2)ES細胞是由早期
8、胚胎(囊胚)的內(nèi)細胞團分離出來的一類細胞。(3)步驟過程是導入目的基因Rag2基因于ES細胞中的基因表達載體的構(gòu)建過程。在生物體外可通過PCR技術擴增目的基因,其條件是模板DNA、Rag2基因的核苷酸序列設計引物、四種脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定DNA聚合酶等,另外根據(jù)題干可知,獲得Rag2目的基因需要用 Hind和Pst兩種限制酶,所以在構(gòu)建表達載體時,所選擇的表達載體上應具有Hind和Pst酶的酶切位點。(4)檢測目的基因是否翻譯相應蛋白質(zhì)時,應采用抗原抗體雜交(免疫)法,即提取蛋白質(zhì),用相應的抗體進行抗體抗原雜交,看是否有雜交帶4. D【解析】超數(shù)排卵用促性腺激素 而不是雌激素,A錯。根據(jù)采集部位而定,如果是從輸卵管采集的卵細胞,已發(fā)育成熟,
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