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1、生物安全實(shí)驗(yàn)室的個(gè)體防護(hù)生物安全實(shí)驗(yàn)室: 具有一系列特殊物理防護(hù)設(shè)施(屏障)、嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,能夠安全地進(jìn)行生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室。Physical protection(P1-P4)Biological safety laboratory(BSL1-4)生物安全防護(hù)三原則 安全設(shè)備 個(gè)體防護(hù)裝備和措施 嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序及規(guī)程確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象侵染,確保周圍環(huán)境不受其污染 不注意安全易導(dǎo)致的意外事故針刺傷(穿刺)碎玻璃刺傷(不穿鞋,刺傷手)載玻片割傷(顯微鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞)濺入口腔,濺入眼睛(分裝/凍存樣品)離心管破裂,滑倒跌傷,酒精燈損壞負(fù)壓泵接管損傷,過(guò)濾

2、分裝毒種過(guò)程美國(guó)CDC醫(yī)務(wù)工作者感染HIV數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)污染源情況暴露途徑利器類型47 HIV+血液45 針刺或割傷41 中空針頭1 HIV+帶血體液5 黏膜暴露2 破玻璃1 HIV+其他體液1 針刺+黏膜1 解剖刀3 HIV+病毒液 (實(shí)驗(yàn)室)1 不清 1 不清*截止到97年6月,52HCWs職業(yè)事故感染,另加114未證實(shí)感染的報(bào)告發(fā)生事故后可以造成嚴(yán)重危害安全事故 受傷者感染 發(fā)病 死亡受傷人員的生活及工作環(huán)境壓力 工作隊(duì)伍的穩(wěn)定性降低個(gè)體防護(hù)裝備( Personal Protective Equipment,PPE)是通過(guò)設(shè)立屏障保護(hù)工作人員免受工作場(chǎng)所生物危險(xiǎn)的傷害。PPE不能替代優(yōu)質(zhì)工程,

3、或嚴(yán)格的行政管理,或熟練的工作技能, 但應(yīng)與之相互結(jié)合,以確保工作人員的安全和健康。個(gè)體防護(hù)裝備項(xiàng)目包括: 管理人員、工作人員及生物安全部門(mén)的職責(zé);危險(xiǎn)性評(píng)估及個(gè)體防護(hù)裝備的選擇; 工作人員的培訓(xùn); 保存必要的培訓(xùn)記錄。 管理人員的職責(zé)管理人員對(duì)工作場(chǎng)所實(shí)施PPE負(fù)有主要責(zé)任,包括: 為工作人員提供合適的PPE; 確保工作人員接受過(guò)PPE正確使用、護(hù)理及清潔方面的培訓(xùn); 保存PPE分配及培訓(xùn)記錄; 監(jiān)督工作人員確保其遵循PPE項(xiàng)目、正確使用和保養(yǎng)PPE; 尋求生物安全委員會(huì)幫助,進(jìn)行危險(xiǎn)性評(píng)估; 出現(xiàn)新的危險(xiǎn),或?qū)嶒?yàn)進(jìn)程增加或更改時(shí),要及時(shí)報(bào)告OHS; 確保缺損儀器設(shè)備及時(shí)更換。 工作人員的職

4、責(zé)PPE使用者有責(zé)任遵循PPE項(xiàng)目的要求,包括:根據(jù)要求穿戴PPE;參加所要求的培訓(xùn)課程;按照要求護(hù)理、清潔及保養(yǎng)PPE;如有需要修理或替換的PPE,要及時(shí)報(bào)告管理人員。生物安全辦公室的職責(zé)(Office of Health and Safety, OHS )OHS負(fù)責(zé)啟動(dòng)、實(shí)施并管理PPE項(xiàng)目,包括: 指導(dǎo)工作場(chǎng)所危險(xiǎn)性評(píng)估,確定是否必須使用PPE;根據(jù)管理人員和或OHS的要求,指導(dǎo)工作場(chǎng)所定期危險(xiǎn)性評(píng)估;保存危險(xiǎn)性評(píng)估記錄;PPE經(jīng)核準(zhǔn)使用后,向管理人員提供關(guān)于其使用、保管及清潔方面的培訓(xùn)和技術(shù)指導(dǎo);向管理人員提供選擇和購(gòu)買PPE的指導(dǎo)意見(jiàn); 定期評(píng)估先前選擇的PPE的適用性;考察、更新并

5、評(píng)估PPE項(xiàng)目的全面效果。危險(xiǎn)性評(píng)估及個(gè)體防護(hù)裝備的選擇OHS及管理人員負(fù)責(zé):確定工作場(chǎng)所是否需要PPE;選擇每次工作所需要的合適PPE;每一工作場(chǎng)所均需檢查,列明檢查結(jié)果及所需的具體防護(hù)裝置。 OHS及管理人員共同負(fù)責(zé)指導(dǎo)對(duì)每一工作場(chǎng)所進(jìn)行初步檢查,確定危險(xiǎn)源,包括撞擊、刺傷、 壓力、化學(xué)試劑、熱、灰塵、電源、材料處理及光輻射。每次檢查均應(yīng)建檔,包括所檢查的工作場(chǎng)所、執(zhí)行檢查的人員、潛在危險(xiǎn)源的檢測(cè)結(jié)果 及檢查日期。 一旦確定危險(xiǎn)源, OHS將負(fù)責(zé)確定合適的PPE,確保防護(hù)水平大大高于保護(hù)工作人員免受傷害所需要的最低防護(hù)水平。 注意識(shí)別同時(shí)暴露于多種危險(xiǎn)源的可能性。提供或建議購(gòu)買對(duì)每一種危險(xiǎn)

6、因子最高水平的充分的防護(hù)裝備。 眼及面部防護(hù)戴護(hù)目鏡或眼部防護(hù)裝置:工作人員、參觀者、研究人員、承包商、或其他經(jīng)過(guò)對(duì)眼部有傷害區(qū)域的人。 危險(xiǎn)源:飛揚(yáng)的顆粒, 熔化的金屬, 酸或腐蝕性液體, 化學(xué)試劑, 氣體, 或蒸汽, 生物氣溶膠, 或潛在的有害的光輻射。 側(cè)面防護(hù)器:飛揚(yáng)物 護(hù)目鏡及面部防護(hù)器:化學(xué)試劑的飛濺 帶濾光鏡的裝備:光輻射戴近視遠(yuǎn)視眼鏡者?戴隱形眼鏡者?緊急洗眼設(shè)備在工作人員可能暴露于腐蝕性材料的所有場(chǎng)所均需提供緊急洗眼設(shè)備,且該設(shè)備應(yīng)位于緊急情況下易接近的位置。呼吸防護(hù)設(shè)備頭部防護(hù)使用人員:職員、建筑承包商、工程師、檢驗(yàn)員、參觀者及其他工作人員。 危險(xiǎn)源:墜落物或某些確定的物體

7、,或電擊。防撞帽頭盔:保護(hù)頭皮免受尖銳物體劃傷。但不能替代安全帽,因其不能承受高度撞擊力或墜落物體的穿透力。腳部防護(hù)防撞擊的防護(hù)鞋靴:搬運(yùn)或處理可能會(huì)掉落的包裹、物體、零件或重的工具時(shí);物體有可能砸到腳面時(shí)。防壓力的防護(hù)鞋靴:使用滑輪車或使用可能翻滾到工作人員腳上的材料或設(shè)備時(shí)。防刺穿的防護(hù)鞋靴:行走時(shí)可能被釘子、金屬絲、大頭針、螺絲釘、大U形釘、金屬片等尖銳物扎傷時(shí)。 手部防護(hù)戴手套:化學(xué)試劑、切割、劃傷、擦傷、刺傷、燒傷、生物學(xué)傷害及極端溫度傷害。手套的選擇:性能(厚度、滲透性)、條件、耐用性及危險(xiǎn)因子 One type of glove will not work in all situ

8、ations. PPE的清潔及養(yǎng)護(hù)眼及面部防護(hù)裝備的清潔尤其重要!定期檢查、清潔、及養(yǎng)護(hù)PPE未清潔消毒之前,工作人員不能共用培訓(xùn)何時(shí)必須穿戴PPE 需要什么樣的PPE 如何穿、脫、戴及調(diào)整PPE PPE的局限性 PPE的養(yǎng)護(hù)及處理記錄培訓(xùn)人員名單, 培訓(xùn)類型,培訓(xùn)時(shí)間人員培訓(xùn)記錄至少保持3年根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的安全級(jí)別選擇及使用不同的PPE基本要求工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)前,應(yīng)在專用的更衣室(或緩沖間)穿著背開(kāi)式工作服或其他防護(hù)服。工作完畢必須脫下工作服,不得穿工作服離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室??稍俅问褂玫墓ぷ鞣仨毾认竞笄逑?。 工作時(shí)必須戴手套(兩付為宜)。一次性手套必須先消毒后丟棄。 在實(shí)驗(yàn)室中必須配備有效

9、的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水,且易于取用??膳鋫鋺?yīng)急藥品。BSL1實(shí)驗(yàn)室的個(gè)體防護(hù)工作人員在實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)穿工作服,戴防護(hù)眼鏡工作人員手上有皮膚破損或皮疹時(shí)應(yīng)戴手套BSL2實(shí)驗(yàn)室的個(gè)體防護(hù)除符合BSL1的要求外,還應(yīng)該符合下列條件: 在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護(hù)服。離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí),防護(hù)服必須脫下并留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。不得穿著外出。用過(guò)的工作服應(yīng)先在實(shí)驗(yàn)室中消毒,然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時(shí)應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或?yàn)R出,宜戴兩副手套。不得戴著手套離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,而

10、必須采取外部操作時(shí),為防止感染性材料濺出或霧化危害,必須使用面部保護(hù)裝置(護(hù)目鏡、面罩、個(gè)體呼吸保護(hù)用品或其他防濺出保護(hù)設(shè)備)。BSL3實(shí)驗(yàn)室的個(gè)體防護(hù)除符合BSL2的要求外,還應(yīng)該符合下列條件: 在進(jìn)行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作時(shí),必須使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。 當(dāng)不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內(nèi)時(shí),應(yīng)使用呼吸保護(hù)裝置。工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)前,應(yīng)在專用的更衣室(或緩沖間)穿著背開(kāi)式工作服或其他防護(hù)服。工作完畢必須脫下工作服,不得穿工作服離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。可再次使用的工作服必須先消毒后清洗。 工作時(shí)必須戴手套(兩付為宜)。一次性手套必須先消毒后丟棄。 在實(shí)驗(yàn)室中必須配備有效的消

11、毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水,且易于取用。可配備應(yīng)急藥品。在使用傳染性物質(zhì)或已被污染的儀器時(shí),需戴手套。在使用電話、計(jì)算機(jī)等設(shè)備進(jìn)行文書(shū)工作前,必須 脫掉手套。 切記不能帶著手套離開(kāi)BSL-3實(shí)驗(yàn)室。所有離開(kāi)BSL-3實(shí)驗(yàn)室的物品必須正確消除污染,并放在干凈的容器或袋子中。有可能濺出或噴出傳染性物質(zhì)、危險(xiǎn)試劑時(shí),需使用面部和眼部防護(hù)器具。 當(dāng)有程序不能在生物安全柜內(nèi)處理時(shí),要組合使用適當(dāng)?shù)牟僮魅藛T防護(hù)設(shè)備(如面罩、呼吸器)和物理容器設(shè)備。BSL4實(shí)驗(yàn)室的個(gè)體防護(hù)除符合BSL3的要求外,還應(yīng)該符合下列條件: 在實(shí)驗(yàn)室中所有感染性材料的操作時(shí),都必須在III級(jí)生物安全柜中進(jìn)行。如果工作人員穿著整體的

12、(生命維持系統(tǒng)供氣的正壓工作服),則相關(guān)操作可在II級(jí)B型生物安全柜中進(jìn)行。所有工作人員進(jìn)入BSL4實(shí)驗(yàn)室時(shí)都必須換上全套實(shí)驗(yàn)室服裝,包括內(nèi)衣、內(nèi)褲、襯衣或連衫褲、鞋和手套等。所有這些實(shí)驗(yàn)室保護(hù)服在淋浴和離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前均必須在更衣室內(nèi)脫下。 當(dāng)不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內(nèi)時(shí),應(yīng)使用呼吸保護(hù)裝置。與靈長(zhǎng)類動(dòng)物接觸時(shí),應(yīng)考慮其粘膜暴露對(duì)人的感染危險(xiǎn),要戴防護(hù)眼鏡和面部防護(hù)器具。 室內(nèi)有傳染性靈長(zhǎng)類動(dòng)物時(shí),必須使用面部保護(hù)裝置(護(hù)目鏡、面罩、個(gè)體呼吸保護(hù)用品或其他防濺出保護(hù)設(shè)備)。進(jìn)行容易產(chǎn)生高危險(xiǎn)氣溶膠的操作時(shí),包括對(duì)感染動(dòng)物和雞胚的尸體、體液的收集、動(dòng)物鼻腔接種,都要同時(shí)使用生物安全柜或

13、其它物理防護(hù)設(shè)備和個(gè)人防護(hù)器具(例如口罩和面罩)。 在危害評(píng)估的基礎(chǔ)上使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。操作感染動(dòng)物和傳染性材料時(shí)都要使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備實(shí)驗(yàn)室污染及其防護(hù)實(shí)驗(yàn)室污染問(wèn)題是:實(shí)驗(yàn)?zāi)芊襁M(jìn)行及維護(hù)實(shí)驗(yàn)室安全的重要問(wèn)題,污染是多向及多因素的,可由病毒污染人或人污染細(xì)胞,細(xì)胞與病毒間的交叉污染。病毒污染的防護(hù)病毒對(duì)人的污染是一個(gè)重要的實(shí)驗(yàn)安全問(wèn)題,除上述實(shí)驗(yàn)操作中應(yīng)嚴(yán)格按照要求穿無(wú)菌服,帶手套、口罩、帽子,眼鏡外,還應(yīng)注意以下事項(xiàng): 實(shí)驗(yàn)室中必備下述消毒液體,并由值日人員及時(shí)更換以保證其有效的消毒作用:(1)0.5%的次氯酸鈉溶液;(2)1.0%的來(lái)蘇爾溶液;(3)70%乙醇溶液及棉球?qū)嶒?yàn)室內(nèi)不可有銳器(

14、刀、針、碎玻璃等)暴露,剪刀用完后應(yīng)立即放回盒中,一次性針頭用完要放入飯盒內(nèi)高壓消毒;不慎打破玻璃器皿必須立即將全部碎片收集干凈 手套在使用前應(yīng)檢查是否漏氣; 遇到有手部或其它身體暴露部位有皮膚破損時(shí)應(yīng)停止一切工作,待創(chuàng)面愈合后才能從事實(shí)驗(yàn)工作;如在帶毒實(shí)驗(yàn)中割傷皮膚,應(yīng)立即將傷部浸泡入消毒液中,并盡量擠出傷部血液。 在實(shí)驗(yàn)中遇到其它意外事故(如火災(zāi)等)在排除事故的同時(shí)應(yīng)立即消滅傳染源,嚴(yán)防被感染或感染其他人; 實(shí)驗(yàn)完成后,必須消毒工作臺(tái)面及打開(kāi)紫外燈照射30分鐘。細(xì)胞污染的防護(hù)應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作; 每批培養(yǎng)液或血清必須預(yù)先作培養(yǎng)后才能使用; 含抗生素的培養(yǎng)液不應(yīng)長(zhǎng)期存放于4,因PS易失效,若用已放置過(guò)久的生長(zhǎng)液,應(yīng)追加新鮮的抗生素;為防止霉菌污染可加入10ul/ml制霉菌素;細(xì)胞污染應(yīng)立即放棄培養(yǎng),對(duì)必需保留的輕度霉菌污染的培養(yǎng)物,可將細(xì)胞與霉菌盡量分開(kāi),然后加大制霉菌素的量(30ul/ml); 實(shí)驗(yàn)前應(yīng)做好充分準(zhǔn)備,實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后不應(yīng)再出實(shí)驗(yàn)室,或盡量不要離開(kāi)生物安全柜。操作者間交互污染的防護(hù)帶毒操作時(shí)應(yīng)盡量減少接觸其它無(wú)關(guān)物品,工作中污染的區(qū)域或物品必須立即消毒,以免忘記,實(shí)驗(yàn)后必須立即處理實(shí)

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