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1、幾個問題 為什么傳統(tǒng)上腎素檢測活性? 為什么如今腎素要變?yōu)闇y濃度?檢測步驟檢測步驟Ang I 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化將預(yù)冷的將預(yù)冷的200ul酶抑制劑參與酶抑制劑參與200ul血漿樣本中,混合均勻后,分為兩份,分別置于冰血漿樣本中,混合均勻后,分為兩份,分別置于冰水浴和水浴和37度中孵育度中孵育1小時,孵育后將小時,孵育后將37度的樣本置于冰水浴中迅速冷卻備用。度的樣本置于冰水浴中迅速冷卻備用。放免競爭法檢測放免競爭法檢測Ang IAng I加樣孵育檢測在多抗包被管中加入:l校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、待測 樣本各50ul。l加入125I標(biāo)記的Ang I 200ul。l充分混勻室溫(18-25C)振蕩孵育2小時將包被管
2、用洗液洗兩次后,檢測。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣本中的Ang I濃度結(jié)果轉(zhuǎn)換結(jié)果轉(zhuǎn)換血管緊張素原血管緊張素原腎素腎素血管緊張素血管緊張素I I降解片段降解片段血管緊張素血管緊張素IIII血管緊張素原酶血管緊張素原酶微生物污染微生物污染血管緊張素轉(zhuǎn)化酶血管緊張素轉(zhuǎn)化酶PRA帶給臨床最大的困擾 反復(fù)性差 周期長 依賴外送Perschel et al. Clin Chem. 2004 美國Quest實(shí)驗(yàn)室集團(tuán) 腎素濃度檢測Renin, Direct,運(yùn)用化學(xué)發(fā)光法檢測濃度,當(dāng)天反響結(jié)果,85%。 腎素活性檢測放棄了RIA法,改用LC-MS法,一周后出結(jié)果,15%。安圖安圖PRC和和Aldosterone診
3、斷效能研討診斷效能研討中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院-曹教授曹教授放免放免RIA 與化學(xué)發(fā)光與化學(xué)發(fā)光CLIA測醛固酮濃度呈正相關(guān)測醛固酮濃度呈正相關(guān)r=0.967放免放免RIA 腎素活性與化學(xué)發(fā)光腎素活性與化學(xué)發(fā)光CLIA腎素濃度呈正相關(guān)腎素濃度呈正相關(guān)r=0.905放免放免RIARIA法醛固酮腎素活性比值法醛固酮腎素活性比值 ARR ARR以以3030為為切點(diǎn),靈敏度為切點(diǎn),靈敏度為90.2% 90.2% ,特異度為,特異度為92.6% 92.6% ;化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光CLIACLIA法法 醛固酮腎素濃度比值醛固酮腎素濃度比值A(chǔ)ARRAARR以以2525為切點(diǎn),靈敏度為為切點(diǎn),靈敏度為95.1%95.1%,特異度為,特異度為83.3%83.3%;兩種方法檢測結(jié)果計算所得醛固酮兩種方法檢測結(jié)果計算所得醛固酮/ /腎素比腎素比值的值的ROCROC曲線下面積分別為曲線下面積分別為 0.94 0.94 和和 0.92 0.92 ,ROCROC曲線下面積比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義曲線下面積比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義P=0.52P=0.52。已開展PRC的醫(yī)院北大人民 北京阜外 北
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