臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)考試重點(diǎn)知識(shí)總結(jié)

1、臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)第一章 微生物感染與宿主免疫根據(jù)微生物與人體的關(guān)系：有益微生物條件致病微生物 病 原微生物。腸道中雙歧桿菌最為典型P11 *1潛伏感染：若宿主與病原病體在相互作用過(guò)程中暫時(shí) 處于平衡狀態(tài)，病原體潛伏在病灶內(nèi)或某些特殊組織內(nèi)，一般 不排除體外。（如果宿主的抗感染兔疫刃液期，或侵入的病爆體數(shù)量增多，毒力較福，機(jī)體的組織細(xì)胞受到不同程度的損害并 而規(guī)一系列臨床癥狀布體征，則禰為 顯性感染。）病原微生物的傳播V:空氣傳播飛沫傳播接觸傳播共同媒介 物傳播蟲(chóng)媒傳播多途徑傳播P21 2 ,（病原菌的毒力包括侵襲力和毒素。）侵襲力：病原菌 在宿主見(jiàn)傳播侵襲定植并逃避免疫的能力，稱為侵襲力。由

2、菌體表面結(jié)構(gòu)和侵襲物質(zhì)等構(gòu)成P25 3、胞內(nèi)菌感染免疫：胞內(nèi)菌分專(zhuān)職和兼職，兼職胞內(nèi)菌 在宿主體內(nèi)主要寄居在細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖，但是亦可在細(xì)胞外沒(méi) 有無(wú)活細(xì)胞的環(huán)境生存繁殖。（如結(jié)核分支桿菌麻風(fēng)分枝桿菌）第二卓細(xì)菌的基本形狀P38 1、細(xì)菌大小以微米u(yù)m為測(cè)量單位。人肉眼的最小分辨率 為0.2mm.按其外形：球菌桿菌螺旋菌 球形呈圓球形、 近圓球形、矛頭狀和腎形P41 2、鞭毛功能：1）動(dòng)力：鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，（旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)是由基礎(chǔ)小體的同心環(huán)旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生，推動(dòng)力來(lái)自質(zhì)子動(dòng)能， 即質(zhì)子濃度梯度流動(dòng)所釋放的ATP。鞭毛旋轉(zhuǎn)方向決定運(yùn)動(dòng)類(lèi)型，觀察細(xì)菌動(dòng)力用懸滴法或壓滴法在顯微鏡下觀察其運(yùn)動(dòng)， 也可將細(xì)菌接

3、種于半固體培養(yǎng)基觀察動(dòng)力）2）鑒別細(xì)菌；鞭毛及細(xì)，一般染色不能看見(jiàn)，常用特殊染色和鍍銀染色觀察細(xì)菌 有無(wú)鞭毛及鞭毛數(shù)量、分布，可用于鑒別細(xì)菌P42 3、性菌毛 可也結(jié)合的方式在細(xì)菌之間傳到DNA導(dǎo)致細(xì)菌毒性及耐藥性的變異6、糖萼功能1 ）與細(xì)菌毒力有關(guān)：有糖萼的細(xì)菌表面光滑， 不易被細(xì)菌細(xì)胞吞噬，消化，逃避免疫吞噬后的細(xì)菌可在機(jī)體 組織細(xì)胞中生長(zhǎng)繁殖引起感染。2）細(xì)菌的鑒別和分形：夾饃物質(zhì)具有特異性抗原，可作為細(xì)菌的鑒別和分形。3）形成生物膜7、革蘭陰性菌細(xì)胞壁特有組分 一- 磷壁酸8、芽胞功能：1）對(duì)熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒具有強(qiáng)大抵 抗力2）以是否能殺死芽泡作為物品消毒滅菌效果的判斷指標(biāo)

4、， 3）芽泡在菌體的位置和直徑的大小隨菌種的不同，這種形態(tài)特點(diǎn)有利于細(xì)菌的鑒別。9、細(xì)菌生長(zhǎng)曲線： 連續(xù)監(jiān)測(cè)細(xì)菌不同培養(yǎng)時(shí)間的菌落形成單位(CFU,以CFU為縱坐標(biāo)，培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)做由的反應(yīng)菌落生長(zhǎng)數(shù)變化規(guī)律的曲線 包括以下三期(1)遲緩期：細(xì)菌適應(yīng)環(huán)境的過(guò)程，為繁殖做準(zhǔn)備(2)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期：最大速率生長(zhǎng)分裂，細(xì)菌對(duì)數(shù)增加，此期細(xì) 菌代謝活躍穩(wěn)定，其大小形態(tài)、染色、染色性和生化反應(yīng)典型， 對(duì)外界反應(yīng)敏感(3)穩(wěn)定期：生長(zhǎng)繁殖和死亡處于動(dòng)態(tài)平衡，此期合成較多代謝產(chǎn)物。(4)凋亡期：死亡數(shù)大于增加數(shù)， 一般不用該期細(xì)菌作鑒定和 研究10、選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某些特殊化學(xué)物質(zhì)，抑制 某些細(xì)菌生

5、長(zhǎng)而有助于需要的細(xì)菌種類(lèi)生長(zhǎng)，使需要菌從混雜 的微生物群體中分離由來(lái)。11、高壓蒸汽滅菌：P:103.4KPa T121.3 度t15-20 分鐘，可 也殺死繁殖體的芽泡，&補(bǔ)充特性革蘭陽(yáng) 性菌革蘭陰性菌強(qiáng)度較強(qiáng)韌較疏松厚度厚20 80mm薄811mm化學(xué)組 成肽聚糖 磷壁酸肽聚糖脂蛋 白脂多糖外膜無(wú)有周漿間 隙窄窄孔蛋白無(wú)有分子滲 透性易滲透不易滲透&細(xì)菌的典型生長(zhǎng)曲線：遲緩期對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 穩(wěn)定期 衰亡期第三卓細(xì)菌的遺傳與變異1細(xì)菌的遺傳物質(zhì)包括染色體和質(zhì)粒，具化學(xué)組成為DNA2 *質(zhì)粒： 是細(xì)菌染色體外的 DNA攜帶某些編碼遺傳特性的基因，他能獨(dú)立于染色體外進(jìn)行自我復(fù)制。質(zhì)粒

6、功能：編碼多種蛋白質(zhì)，賦予宿主菌多種生物功能如毒力因子 致育性 耐藥性 解降酶 限制酶 修飾酶)3質(zhì)粒的特性：(1)不相容性：相似質(zhì)粒在同一細(xì)胞不能共存(2)可轉(zhuǎn)移性：質(zhì)?？稍诩?xì)胞間轉(zhuǎn)移， 還可自細(xì)菌轉(zhuǎn)移到真核細(xì)胞，及轉(zhuǎn)移到哺乳動(dòng)物細(xì)胞， (3)自主復(fù)制質(zhì)粒：利用宿主系統(tǒng)獨(dú)立于染色體進(jìn)行復(fù)制 (4)質(zhì)粒可自然丟失或用人工方法 消除4、細(xì)菌變異：可變現(xiàn)為形態(tài)、結(jié)構(gòu)、菌落、抗原性、毒力、 酶活性、耐藥性和宿主范圍等的變異5、細(xì)菌變異中的培養(yǎng)特性變異* S-R 變異：新從患者體內(nèi)分離的沙門(mén)菌通常為光滑型，經(jīng)人工培養(yǎng)后菌落呈粗糙型。S-R變異常伴有抗原、毒力和某些生化特性的改變。第四殖病毒的基本性質(zhì)P

7、83P83 1病毒的結(jié)構(gòu)可分為基本結(jié)構(gòu)和輔助結(jié)構(gòu)。病毒的基本 結(jié)構(gòu)包括核心、衣殼。輔助結(jié)構(gòu)是包膜（是包圍在病毒核衣殼 外面的雙層膜結(jié)構(gòu)），包膜對(duì)乙醍是敏感的， 若呈陽(yáng)性，則說(shuō)明 有乙醍存在。第五旗真菌的基本形狀P101 1真菌是真核細(xì)胞微生物細(xì)胞壁為多糖，&基質(zhì)（高分子復(fù)合物組成）：多糖，真菌細(xì)胞壁基質(zhì)中多糖種 類(lèi)很多，多糖含量在同一真菌細(xì)胞壁不同發(fā)育階段也明顯不同， 提示其含量直接影響真菌的形態(tài)變化，故細(xì)胞壁多糖含量可作 為真菌分類(lèi)依據(jù)及真菌感染實(shí)驗(yàn)診斷依據(jù)&真菌，在含有動(dòng)物蛋白的培養(yǎng)基上37攝氏度培養(yǎng)時(shí)為醉母菌型，在25攝氏度普通培養(yǎng)基上呈絲狀菌。真菌生長(zhǎng)條件：PH4一6

8、T30 （或室溫22254）P102 2、營(yíng)養(yǎng)體呈多細(xì)胞類(lèi)型的真菌是由菌絲和胞子交織組成，稱為絲狀菌或霉菌；營(yíng)養(yǎng)體呈單細(xì)胞類(lèi)型的真菌又稱 醉母第六旗微生物分類(lèi)與命名P113 1、細(xì)菌的科學(xué)名稱（學(xué)名）的生物雙命名式， 具備拉丁 化文字的形式和明i分類(lèi)等級(jí)的一兩個(gè)特點(diǎn)即一個(gè)著名和一個(gè) 種石構(gòu)成，屬一名叁前是名詞，目字殍大寫(xiě)，種命叁后，是帝容 詞，示論是否人居或她名均需小寫(xiě)一兩者用斜體要示，細(xì)窗學(xué) ,名的印支譯金則神茗叁前，扇茗叁后，細(xì)窗也習(xí)慣通店俗名女口 結(jié)核桿菌第七卓感染病病原學(xué)診斷與預(yù)防P126 1細(xì)菌感染病病原學(xué)檢查的標(biāo)本采集的原則：盡早采集：一旦懷疑細(xì)菌感染，應(yīng)及時(shí)采集標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌 學(xué)檢

9、驗(yàn)。選擇不同采集時(shí)機(jī)和標(biāo)本種類(lèi)：根據(jù)臨床癥狀和流行病學(xué) 資料可預(yù)測(cè)感染性疾病的病原體， 根據(jù)病程和感染部位的不同， 選擇合適時(shí)機(jī)采集不同種類(lèi)標(biāo)本。在抗生素應(yīng)用前采集：應(yīng)盡可能在抗生素留取前標(biāo)本。遵守?zé)o菌操作：應(yīng)嚴(yán)格注意無(wú)菌操作，不得被其他部位細(xì)菌污染。盛放標(biāo)本的容器應(yīng)無(wú)菌。正確保存和運(yùn)送：采集的標(biāo)本及時(shí)運(yùn)送，如路途遙遠(yuǎn)，一般應(yīng)冷藏（但對(duì)腦膜炎和淋病奈瑟菌，需保溫3537 C）P127 2、微生物檢驗(yàn)中常用的染料（1）酸性染料：電離后帶負(fù)電荷，能與帶正電荷的物質(zhì)結(jié)合，細(xì)菌一般帶負(fù)電荷，與酸性染料不著色3、革蘭染色的影響因素：涂片厚薄酒精脫色時(shí)間染液 儲(chǔ)存時(shí)間細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)期128 4、傾注平板接種法

10、常： 用的與接種 生乳、飲水、尿液 標(biāo)本的菌數(shù)測(cè)定P128 5、碳水化合物代謝實(shí)驗(yàn)氧化發(fā)醉實(shí)驗(yàn)（O-FS實(shí)驗(yàn)）又稱HL。 細(xì)菌在分解葡萄糖的過(guò)程中，必須以分子氧作為電子受體的稱為氧化型。這類(lèi)細(xì)菌通常是專(zhuān)性需氧菌，在無(wú)氧環(huán) 境中不能分解葡萄糖。細(xì)菌在分解葡萄糖的過(guò)程中，可以進(jìn)行 無(wú)氧降解的，稱為發(fā)醉型，此類(lèi)細(xì)菌無(wú)論在有氧無(wú)氧的環(huán)境都 能分解葡萄糖，通常為兼性厭氧菌。不分解葡萄糖的細(xì)菌，稱 為產(chǎn)堿型。利用此實(shí)驗(yàn)區(qū)分細(xì)菌代謝類(lèi)型。腸桿菌科細(xì)菌為發(fā)醉型，非發(fā)醉菌通常為氧化型和產(chǎn)堿型， 此外，微球菌屬可氧化葡萄糖，葡萄糖菌屬能發(fā)醉葡萄糖。P129 2、B-半乳糖昔酶實(shí)驗(yàn)（ONPG （總J吉）：只有B -

11、半乳糖昔酶而缺乏半乳糖昔滲透酶（或是其活性很弱）的細(xì)菌，不 能很快將乳糖運(yùn)送到細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，需要幾天時(shí)間乳糖才能被分 解。稱遲緩分解乳糖。ONPGJ乳糖分子結(jié)構(gòu)相似，且分子較小， 不需要半乳糖甘滲透酶的運(yùn)送就可進(jìn)入菌細(xì)胞內(nèi)。P131 3 氧化酶試驗(yàn)（是什么，怎么做，用途）：氧化酶或 稱細(xì)胞色素氧化酶，是細(xì)胞色素呼吸酶系統(tǒng)的終末呼吸酶。作 氧化酶試驗(yàn)時(shí)，此酶首先使細(xì)胞色素C氧化，然后氧化型細(xì)胞色素C再使對(duì)苯二胺氧化，產(chǎn)生顏色反應(yīng)。本試驗(yàn)?zāi)c桿菌科陰 性，弧菌科和非發(fā)醉菌陽(yáng)性（個(gè)別菌種除外），奈瑟菌屬陽(yáng)性。P130 4、蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝實(shí)驗(yàn)回噪（靛基質(zhì)）實(shí)驗(yàn)；細(xì)菌分解蛋白月東中的色氨酸生成阻噪，與

12、試劑中的對(duì)二氨基苯 甲醛作用，形成紅色玫瑰回噪P133 5、凝固酶試驗(yàn) （CNS金黃色葡萄糖球菌產(chǎn)生凝固酶， 使血漿凝固。而表皮及腐生葡萄糖球菌的凝固酶則陽(yáng)性，用于治病性葡萄球菌鑒別實(shí)驗(yàn)6、抗原測(cè)定 凝集試驗(yàn)玻片法凝集試驗(yàn)：用于細(xì)菌菌種鑒定 和分型，取已知型別的抗血清 1滴滴在玻片的一端，用接種環(huán) 取菌液混勻成懸液。另取生理鹽水一滴滴在載玻片另一端，用 接種環(huán)取細(xì)菌混勻成懸液。輕輕搖晃玻片，如果加入抗血清生 現(xiàn)凝集顆粒，而對(duì)照側(cè)仍然混勻渾濁，則凝集陽(yáng)性。特點(diǎn)：方 法簡(jiǎn)單，快速，特異性強(qiáng)7、莢膜腫脹實(shí)驗(yàn)：有莢膜的細(xì)菌如肺炎鏈球菌等，當(dāng)與相應(yīng) 的抗血清反應(yīng)時(shí)莢膜將明顯曾寬，在顯微鏡下可見(jiàn)在藍(lán)色細(xì)菌

13、 周?chē)羞吔缜逦沫h(huán)狀物，厚薄不等，而對(duì)照側(cè)無(wú)，則為莢膜 腫脹實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性8、外斐實(shí)驗(yàn)：為一種非特異血清學(xué)試驗(yàn)反應(yīng)，該實(shí)驗(yàn)用與立克次體有共同抗原的變形桿菌 OX19 OX2 OXk代替立克次體， 進(jìn)行凝集反應(yīng)，來(lái)判斷患者血清中有無(wú)抗立克次體抗體。是奧 些立克次體病的輔助診斷試驗(yàn)9、病毒大小的測(cè)定方法：1）電子顯微鏡直接測(cè)定，2）超過(guò)濾法，3）超速離心法10、病毒分離培養(yǎng)方法：動(dòng)物接種、雞胚接種、組織培養(yǎng)（主 流方法，包括原代和次代細(xì)胞培養(yǎng)、二倍體細(xì)胞培養(yǎng)：廣泛用 于病毒分離和疫苗接種、傳代細(xì)胞培養(yǎng)）第八旗抗微生物化學(xué)療法P157 1 .紙片擴(kuò)散法（K-B法）：培養(yǎng)基：pH為7.27.4 ,瓊 脂厚

14、度為4mm對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌如鏈球菌、腸球菌屬、 流感嗜血桿菌和腦膜炎奈瑟菌等需加入相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)添加劑。細(xì)菌接種：用0.5麥?zhǔn)媳葷峁苄Ｕ簼舛龋?.5 xi08CFU/ml）, 在瓊脂表面均勻涂布接種 3次，每次旋轉(zhuǎn)平板60以保證接種 菌的均勻分布，各紙片中心相距 >24mm紙片距平板內(nèi)緣>15m, 苛養(yǎng)菌應(yīng)孵育在含 CO2的環(huán)境中，腸球菌檢測(cè)對(duì)苯咬西林和萬(wàn) 古霉素的耐藥性須孵育 24h。2、（K-B法）原理：將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測(cè) 試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸收瓊脂中水分溶解后 不斷向紙片周?chē)鷶U(kuò)散，形成梯度濃度，在紙片周?chē)志鷿舛戎?圍細(xì)菌生長(zhǎng)被抑制，從而

15、形成無(wú)菌生長(zhǎng)的透明圈或抑菌圈。抑菌圈的大小反應(yīng)測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感性，并與該藥對(duì)測(cè)試 菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負(fù)相關(guān)3、紙片擴(kuò)散法（K-B法影響因素：）1.培養(yǎng)基：培養(yǎng)基的質(zhì)量 如 pH、硬度、濕度、深度。2.藥敏紙片：藥敏紙片的含藥量、藥 敏紙片的保存和厚薄。3.接種菌量4.試驗(yàn)操作質(zhì)量：孵育條件和溫度、時(shí)間，抑菌圈測(cè)量工具精確度。P158 4、稀釋法 （稀釋法是定量測(cè)定抗菌藥物抑制細(xì)菌生長(zhǎng) 作用的體外方法分肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法）稀釋法測(cè)得的莫 抗菌藥物能抑制待測(cè)菌肉眼可見(jiàn)的最低生長(zhǎng)的最低藥物濃度稱 為最低抑菌濃度（MIC）,為體外藥敏實(shí)驗(yàn)中衡量細(xì)菌對(duì)抗菌藥 物敏感性的指標(biāo)。P160

16、 5、E-實(shí)驗(yàn)E實(shí)驗(yàn)室一種結(jié)合稀釋法和擴(kuò)散法的原理和 特點(diǎn)測(cè)定微生物對(duì)抗菌藥物敏感度的定量技P160 6、聯(lián)合藥物敏感試驗(yàn)：體外聯(lián)合藥物敏感試驗(yàn)的意義：1）治療混合性感染；2）預(yù)防或延遲細(xì)菌耐藥性的發(fā)生；3）聯(lián)合用藥可以減少劑量以避免達(dá)到毒性劑量；4）聯(lián)合用藥比單一用藥時(shí)常常效果好6.1 抗菌藥物聯(lián)合用藥由現(xiàn)的四種結(jié)果（ 1）拮抗作用（2） 無(wú)關(guān)作用：兩種藥物聯(lián)合作用活性等于單獨(dú)活性（3）協(xié)同作用：兩種藥物聯(lián)合作用顯著大于單獨(dú)的總和第九卓微生物檢驗(yàn)質(zhì)M保證與生物安全P177 1、培養(yǎng)基的一般質(zhì)量控制：（1 ）外觀：每種培養(yǎng)基均應(yīng)標(biāo)注清楚，體液培養(yǎng)基無(wú)渾濁，固體培養(yǎng)基應(yīng)無(wú)菌落生長(zhǎng)，不 干裂。（2

17、）無(wú)菌試驗(yàn)：培養(yǎng)基制作完成后，應(yīng)檢測(cè)每批培養(yǎng)基 的滅菌效果，無(wú)菌生長(zhǎng)為合格。（3）培養(yǎng)基的量：斜面培養(yǎng)基的長(zhǎng)度為試管長(zhǎng)度的 2/3 ,雙塘鐵培養(yǎng)基底層至少有1cm的直立段。MH¥板的厚度為 4mm即直徑為 90mml勺平皿，注入25ml 的培養(yǎng)基即可。其他平板厚度二般為3mm在90mm直徑的平皿中注入1520ml的培養(yǎng)基。（4）培養(yǎng)基pH:配制好的培養(yǎng)基 pH應(yīng)與規(guī)定的pH相差± 0.2匹內(nèi)。（5）性能試驗(yàn)：每一批新配 制的、新購(gòu)入的培養(yǎng)基，均應(yīng)用已知性質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行預(yù)測(cè)， 合格方可使用。2滅菌器：最好在溫度計(jì)上裝好溫度記錄裝置，或用生物指示 劑嗜熱脂肪芽胞桿菌的培養(yǎng)液或

18、菌片，化學(xué)指示劑如變色的指 示劑等監(jiān)視滅菌效果P188 3、生物安全水平及適用范圍：一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室BSL-1:是微生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行試驗(yàn)用的都是最低等級(jí)的污染物或安全的微生物，并且完全 符合標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室操作，如枯草芽泡桿菌等。二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室BSL-2:適用于對(duì)人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物，屬于第 三類(lèi)病原微生物的如：沙門(mén)菌屬、 乙型肝炎病毒等的試驗(yàn)操作。進(jìn)行規(guī)范的此等級(jí)的實(shí)驗(yàn)操作， 試劑需放在開(kāi)放的臺(tái)面上，特別注意帶上口罩、隔離衣、手套 等三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室BSL-3:操作對(duì)象一般是可以經(jīng)呼吸道傳播的危險(xiǎn)微生物，如：結(jié)核分枝桿菌。四生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室級(jí)BSL-4:進(jìn)行試

19、驗(yàn)研究的物質(zhì)是一些非常高危險(xiǎn)性并且可以致命的有毒物質(zhì)，可以通過(guò)空氣傳播 并且現(xiàn)今并沒(méi)有有效的疫苗或者治療方法來(lái)處理，如：由血熱病毒。第十卓醫(yī)院感染1、醫(yī)院感染（NI）又稱醫(yī)院獲得性感染：是指感染來(lái)自醫(yī)院或 醫(yī)療機(jī)構(gòu)，包括在醫(yī)院獲得而生院后才發(fā)現(xiàn)的感染，但不包括 入院前已經(jīng)感染或入院時(shí)處于潛伏期的感染。探視者在醫(yī)療機(jī) 構(gòu)獲得的感染，工作人員的職業(yè)性感染也屬于醫(yī)院感染，入院 48h后發(fā)生的感染通常認(rèn)為是醫(yī)院感染191 2醫(yī)院感染病原體特點(diǎn)（1）大多數(shù)為條件致病微生物（2）多數(shù)病原菌對(duì)抗菌藥物具有耐藥性或多重耐藥（3）免疫功能低下患者可以感染多種病原體（4）病原體以細(xì)菌最多見(jiàn)，真菌感染明顯增多第H一

20、旗血液感染P200 1 ,血培養(yǎng)的指征：當(dāng)患者發(fā)熱（大于或等于 38 C）,或 低體溫（小于或等于36 C）時(shí)，或外周白細(xì)胞計(jì)數(shù)超過(guò)10*10八9/L（特別是存在核左移時(shí)），或絕對(duì)粒細(xì)胞減少（成熟中 性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)少于1*10A9/L ）或合并有明顯感染癥狀體征和伴 有感染病灶存在時(shí)，就應(yīng)該采血進(jìn)行血液細(xì)菌培養(yǎng)。懷疑有膿 毒血癥的患者應(yīng)盡早血液細(xì)菌培養(yǎng)。P201 2如何正確的血液標(biāo)本的采集（1）采血時(shí)機(jī)：理想的血液細(xì)菌培養(yǎng)應(yīng)該是在患者接受抗生素治療之前進(jìn)行，細(xì)菌 入血大約在1h發(fā)生寒戰(zhàn)，故采集血培養(yǎng)應(yīng)盡可能在患者寒戰(zhàn)或 發(fā)熱前。（2）采血部位：應(yīng)行經(jīng)皮外周靜脈穿刺采血，常使用1%2%J碘伏進(jìn)行皮

21、膚消毒。（3）采集分?jǐn)?shù)：對(duì)每名患者應(yīng)至少?gòu)牟煌课徊杉囵B(yǎng)23份，這樣可以提高檢測(cè)陽(yáng)性率。 對(duì)懷疑亞急性感染性心內(nèi)膜炎的患者，應(yīng)間隔 1h, 連續(xù)采集3分血進(jìn)行培養(yǎng)。要同時(shí)使用需氧和厭氧培養(yǎng)瓶，分 別注入。（4）采血量： 通常采血量應(yīng)是培養(yǎng)基 1/5或1/10 ,成人患者每次最后采集1015ml,血液注入一個(gè)血培養(yǎng)瓶。對(duì)于兒童患者，最好使用兒童專(zhuān)用培養(yǎng)瓶，每瓶至少注入血液 15ml.。（5）血培養(yǎng)瓶的使用：根據(jù)不同的血培養(yǎng)方法，采集到的血液標(biāo)本應(yīng)立即注入血培養(yǎng)瓶或含有聚茴香磺酸鈉即 SPS的無(wú)菌容器中。并盡快培養(yǎng)。（腦膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌 和厭氧消化鏈球菌不能用）的無(wú)菌容器中，并盡快進(jìn)行培

22、養(yǎng)。）無(wú)論是否已注入血液標(biāo)本，血液培養(yǎng)瓶均不應(yīng)冷藏或冷凍保存。 為了同時(shí)檢生厭氧菌，可同時(shí)培養(yǎng)。P202 3、血液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查全自動(dòng)法 全自動(dòng)血培養(yǎng)儀的檢測(cè)原理：微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中消耗培養(yǎng)基內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 產(chǎn)生二氧化碳，通過(guò) CO2感應(yīng)器反映二氧化碳濃度變化，以此 判斷瓶?jī)?nèi)有無(wú)微生物生長(zhǎng)，也可觀察瓶?jī)?nèi)細(xì)菌培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線。，檢測(cè)方法：（1）放射性細(xì)胞標(biāo)記法，（2）特異性CO2感受器培 養(yǎng)（3）熒光檢測(cè)培養(yǎng)第十二卓中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染1,中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的細(xì)菌真菌檢查標(biāo)本采集（收集腦脊液5ml10ml,分裝于3支無(wú)菌小瓶中立即送檢。取第二 支或最渾濁的一支做微生物學(xué)檢查。）標(biāo)本采集后應(yīng)在常溫下立即送檢

23、，培養(yǎng)腦脊炎奈瑟菌，流感嗜血桿菌等茍養(yǎng)菌時(shí)， 應(yīng)將標(biāo)本置于35*C保存送檢。用于常規(guī)細(xì)菌檢測(cè)的腦脊液 量應(yīng)1ml或大于1ml;用于檢測(cè)抗酸菌的腦脊液量應(yīng)為5ml或大于5ml2、直接圖片檢查：流行性腦脊髓膜炎患者可取皮膚瘀點(diǎn)滲 由液圖片檢查，若為革蘭陰性雙球菌，腎形或咖啡豆樣，凹 面相對(duì)，為于白細(xì)胞內(nèi)外，則提示腦膜炎奈瑟菌感染 第十三旗皮膚及軟組織感染1皮膚及軟組織感染細(xì)菌學(xué)檢查標(biāo)本采集：a封閉性膿腫：局部消毒后，用注射器抽取膿液和膿腫壁標(biāo)本置于厭氧運(yùn)送培 養(yǎng)基內(nèi)送檢 &b 放線菌感染標(biāo)本： 選取流由膿液的硫“硫磺 樣顆?！敝糜跓o(wú)菌試管內(nèi)送檢。第十四旗呼吸系統(tǒng)感染急性上呼吸道感染約有 7

24、0唯U 80燦病毒引起。2、痰液標(biāo)本的采集法中的氣管鏡采集法：通過(guò)支氣管鏡用保護(hù)性導(dǎo)管支氣管刷采取的呼吸道標(biāo)本，受上呼吸道菌群污染的 可能性最小，最適合進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)（包括需氧與厭氧培養(yǎng)）。3、上呼吸道標(biāo)本的檢查方法（1）、直接圖片檢查（2）分離培養(yǎng)：常規(guī)接種血平板、巧克力平板及麥康板平板。4、痰液標(biāo)本的檢查方法【 一般細(xì)菌、真菌涂片檢查目的是 確定標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng)，采用標(biāo)本直接涂片鏡檢，依據(jù) 在低倍視野中鱗狀上皮細(xì)胞 <10個(gè)，或白細(xì)胞>25個(gè)，同時(shí)幾乎 見(jiàn)不到鱗狀上皮細(xì)胞為符合要求的痰標(biāo)本，否則視為不合格痰 標(biāo)本初步判定是否有病原菌存在】。第十五章胃腸道感染 消化道感染病及

25、臨床特征常 見(jiàn)疾病崎床特征食物中毒餐后半小時(shí)至48h可出現(xiàn)腹痛、惡心、嘔吐、 麗等癥狀。有些表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，如 頭痛、怕冷、貪貳、乏力、瞳孔散大、視力模糊、 吞咽及呼吸困難等霍亂 腹瀉是發(fā)病的第一個(gè)癥狀， 其特點(diǎn)為無(wú)發(fā)熱， 急后重感，多數(shù)不伴腹痛，起初大便含糞質(zhì)， 后為黃色水樣便或“米沿水”樣便；噴射狀嘔吐。 不同程度的脫水、肌肉痙攣、低血鉀、尿毒 癥、酸中毒及循環(huán)衰竭等病毒性腹 瀉腹瀉嘔吐。輪狀病毒性腹瀉秋冬季發(fā)生率最 高，夏季發(fā)病率較低、水樣便、發(fā)熱者多為低熱傷寒高熱且持續(xù)不退；食欲不振，舌尖與舌緣的 年病紅，即傷寒舌。 腹脹，多有便秘，少數(shù) 則以腹瀉為主，右下腹可后輕度壓痛， 重者可

26、啟 昏迷或由現(xiàn)腦膜刺激征，脾月底。結(jié)腸炎黏液便及膿血便樣腹瀉，重者數(shù)十次或腹瀉 與便秘交替由現(xiàn)，左下腹或下腹陣痛，嚴(yán)重便秘， 還可有腹脹、消瘦、乏力、腸鳴、失眠、多夢(mèng)怕 冷等癥狀細(xì)菌性痢 疾發(fā)熱腹痛、黏液膿血樣腹瀉、里急后重。中毒型急性發(fā)作時(shí)， 可由現(xiàn)高熱、感染性休克癥 狀，啟時(shí)由現(xiàn)腦水腫和呼吸衰竭1.消化道感染細(xì)菌的檢測(cè)方法：直接涂片檢查：糞便標(biāo)本中由于含有大量的正常菌群，在直接涂片上根據(jù)其染色性和形態(tài) 無(wú)法區(qū)別病原菌，故一般不做直接涂片檢查。2 .分離培養(yǎng)與鑒定：常規(guī)糞便培養(yǎng)，同時(shí)選用腸道強(qiáng)選擇性培 養(yǎng)基（ss平板或XLD或H日和弱選擇性培養(yǎng)基（如 Mac或EM或中國(guó)藍(lán)平板）3 .與抗生素

27、相關(guān)性腹瀉（ADD有關(guān)的病原菌主要有：艱難梭菌、金黃色葡萄糖菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌等。4 .葡萄球菌：將懷疑為金黃色葡萄球菌的感染的黃綠色水樣糞 便，接種高鹽甘露醇培養(yǎng)基或高鹽卵黃平板培養(yǎng)。第十七章泌尿系統(tǒng)感染1 .膀胱穿刺法：常采用恥骨上膀胱穿刺抽取尿液法，該方法是 目前判斷膀胱內(nèi)有無(wú)細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，常在懷疑厭氧菌感染 時(shí)采用。用于懷疑厭氧菌感染。2 .懷疑結(jié)核分枝桿菌感染時(shí)用 集尿法采集。3 .尿液中一般細(xì)菌及假絲醉母菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)>105CFU/ml提示可能為泌尿系統(tǒng)感染。第十八章生殖系統(tǒng)感染1 、培養(yǎng)法是WHO1I薦的淋病篩查的唯一方法，也是實(shí)驗(yàn)室診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。2 .腦脊液VDR

28、L（性病研究實(shí)當(dāng)僉室實(shí)驗(yàn)）實(shí)驗(yàn)有助于神經(jīng)梅毒的 診斷。神經(jīng)梅毒腦脊液檢查淋巴細(xì)胞Lo3 .淋病奈瑟菌、衣原體、生殖道支原體、杜克嗜血桿菌的分離 培養(yǎng)是淋病、生殖道沙眼衣原體感染、生殖道支原體感染、軟 下疳實(shí)驗(yàn)室診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，陽(yáng)性者可確診。4 . 梅毒的實(shí)驗(yàn)診斷：神經(jīng)梅毒腦脊液檢查淋巴細(xì)胞 高0X10A6/L ,蛋白>50mg/dl陰道分泌物濕片高倍顯微鏡下可 見(jiàn)有成簇吸附小桿菌、細(xì)胞邊緣晦暗、呈鋸齒形的上皮細(xì)胞即 線索細(xì)胞，提示可能為細(xì)菌性陰道病。第二十章先天及新生兒感染1.孕期婦女的TORCH勺檢測(cè)成為優(yōu)生優(yōu)育最主要的檢測(cè)項(xiàng)目。 “T”代表弓形蟲(chóng)、“R”代表風(fēng)疹病毒、“C”代表巨細(xì)

29、胞病毒、 “H”代表單純皰疹病毒、"O'代表其它的感染因素。第二十二章球菌1 .肺炎鏈球菌：在平板上形成灰白色、 圓形、扁平的細(xì)小菌落， 若培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可因產(chǎn)生自溶酶而形成臍狀凹陷。2 .血標(biāo)本應(yīng)先增菌培養(yǎng)、膿液、尿道分泌物、腦脊液沉淀物直 接接種平板，金黃色葡萄球菌在周?chē)型该鳎?B）溶血環(huán)。3 . A群鏈球菌（也稱化膿性鏈球菌）：治病力強(qiáng)，引起急性呼吸 道感染、丹毒、軟組織感染、猩紅熱等，還可致急性腎小球 腎炎，風(fēng)濕熱等變態(tài)反應(yīng)性疾病。4 . B群鏈球菌（又稱無(wú)浮鏈球菌）：引起新生兒敗血癥和腦膜炎。5 .草綠色鏈球菌：引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。6 .抗鏈球菌溶素 O試驗(yàn)常

30、用于風(fēng)濕熱的輔助診斷。7 .腦膜炎奈瑟菌： 引起化膿性腦脊髓膜炎菌血癥期取血液，有由血點(diǎn)或瓶阮者取瘀斑滲生液，由現(xiàn)腦商新激癥狀 時(shí)取腦脊液。上呼吸道感染、帶菌者取鼻咽分泌物。置 35 培養(yǎng)24h。（3）直接顯微鏡檢查：腦脊液離心，取沉淀物涂片， 或取瘀斑滲河?xùn)|涂片做革蘭染色或美藍(lán)染色鏡檢。如在中性粒細(xì)胞內(nèi)、外有格蘭陰性雙球菌，可作由初步診斷。陽(yáng)性率 達(dá)80%&右。0）血液或腦脊液標(biāo)本先經(jīng)血清肉湯培養(yǎng)基增菌 后，在接種巧陶平板，5%CO潴養(yǎng)。分離培養(yǎng)：腸球菌 分為天然耐藥性和獲得耐藥性。8 .淋病奈瑟菌：（。引起性傳播疾病淋病 直接顯微鏡檢查膿 性分泌物涂片，里蘭染色鏡檢。如在中性病前胞

31、內(nèi)發(fā)現(xiàn)有革 蘭陰性雙球菌時(shí)，結(jié)合臨床癥狀可初步診斷。男性尿道分泌 物陽(yáng)性檢生率可達(dá) 98%女性較低，僅50%-70% （3）分離培 養(yǎng)：細(xì)菌培養(yǎng)仍是目前世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病患而隹一可靠的方法。標(biāo)本應(yīng)接種于預(yù)溫的巧克力平板，5%-10%CO2培養(yǎng)。為提高陽(yáng)性率，常采用含有萬(wàn)古霉素、多黏菌素、制 霉菌素等多種抗菌藥物的選擇性培養(yǎng)基（MTM MD。9 .淋病奈瑟菌與腦膜炎奈瑟菌的鑒別：色主要特征：革蘭陰性球菌，腎性或咖啡豆?fàn)?，成雙排列，凹湎E列，常位于中 性粒細(xì)胞內(nèi)外。 氧化酶與觸酶陽(yáng)性，腦膜炎奈瑟菌分解 葡萄糖、麥芽糖產(chǎn)甑木產(chǎn)氣；淋病奈瑟菌只分解葡萄糖，產(chǎn) 酸不產(chǎn)氣。*9. CAM嗓驗(yàn)（原理

32、、方法、用途）：原理：無(wú)乳鏈球菌 能產(chǎn)生CAMF0子，它可促進(jìn)金黃色葡萄球而血能力，使其產(chǎn)生顯著的協(xié)同溶血作用。方法：實(shí)驗(yàn)時(shí)先將金黃色葡萄球菌（ATCC25923,沿直徑劃處種，再沿該線垂直方向接種無(wú)乳鏈球菌，兩線不得相接，間隔約34mm 35 c孵育過(guò)夜，兩種劃線交界處由現(xiàn)箭頭狀溶血，即為陽(yáng)性反應(yīng)。 用途：本法可作為無(wú)氧鏈球菌的初步鑒定試驗(yàn)。腸球菌與化膿性鏈球菌的鑒別：（12/13）10 . PYR試驗(yàn)：是一種快速篩選鑒定試驗(yàn)，用于鑒定能產(chǎn)生 叱咯烷酮芳基酰胺酶的細(xì)菌，如腸球菌、化膿性鏈球菌、草綠 色氣球菌和某些凝固酶陰性葡萄球菌等。11 .鹽耐受試驗(yàn)：腸球菌能在含 6.5%NaCl的心浸液

33、肉湯中生12 .奈瑟菌生物學(xué)特性：為革蘭陰性雙球菌，需氧型，營(yíng)養(yǎng)要 求高，需在含有血液、血清等培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)35C,最適PH7.4-7.6,5%CO2可促進(jìn)生長(zhǎng)，腦膜炎奈瑟菌在巧克力平 板上35c培養(yǎng)18-24h ,形成直徑1-2mm圓形凸起，光滑濕潤(rùn)、 半透明、邊緣整齊菌落，血平板上不要求比腦膜炎奈瑟菌更高， 只能在巧克力平板和專(zhuān)用培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。第二十三章腸桿菌科1 、腸桿菌科生物學(xué)特性：共同特性：革蘭陰性桿菌，大小為0.3-1.0um x1-6um,無(wú)芽泡，有菌毛，多數(shù)有周身鞭毛。 需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良 好，血平板生長(zhǎng)為灰白、濕潤(rùn)、光滑的菌落，在腸道選

34、擇性 培養(yǎng)（MAC EMB SS）上，因乳糖分解或不分解，生長(zhǎng)為不 同特征的菌落。生化反應(yīng)活躍，發(fā)醉葡萄糖，氧化酶陰性（鄰單胞菌除外），觸酶陽(yáng)性（痢疾志賀菌除外），能還原硝 酸鹽為亞硝酸鹽。腸桿菌科抗原構(gòu)成主要的有菌體抗原（O抗原）、鞭毛抗原（H抗原）、表面抗原和菌毛抗原等； 表面抗原可阻斷 O抗原與相應(yīng)抗體之間的反應(yīng)。腸桿菌科細(xì)菌抵抗力不強(qiáng)。大部分腸道致病菌不分解乳糖，在MAC 上形成無(wú)色。2 .肥達(dá)反應(yīng)：（1）用來(lái)輔助診斷傷寒和副傷寒。通常傷寒沙門(mén) 菌。凝集效價(jià)蘭1 : 80, H效價(jià)呈1 : 160;副傷寒A、B、C的H 效價(jià)蘭1: 80有診斷意義。（2）需要?jiǎng)討B(tài)觀察。單次檢測(cè)效價(jià) 增高

35、不能定論，應(yīng)在病程中逐周動(dòng)態(tài)復(fù)查。效價(jià)遞增或恢復(fù)期 比初次效價(jià)蘭4倍者有診斷意義。（3） O抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM 抗體，生現(xiàn)較早而在血清中存在時(shí)間較短。3 .志賀菌屬的微生物學(xué)檢驗(yàn)：標(biāo)本采集分離培養(yǎng)：將標(biāo) 本接種于 MAC/EMBSS, 35 c培養(yǎng)1824h觀察結(jié)果，有無(wú)色半 透明菌落生長(zhǎng)，應(yīng)作進(jìn)一步檢查。鑒定：氧化酶陰性，KIA:KA,不產(chǎn)生月尿酶，動(dòng)力陰性，IMViC為一/+ + o血清學(xué)鑒定：首先志賀菌屬4種多價(jià)血清做玻片凝集試驗(yàn)，如凝 集，再進(jìn)一步做血清定型鑒定。4 .鼠疫耶爾森菌 是烈性傳染病鼠疫的病原菌，是我國(guó)甲類(lèi)傳染 病。（屬腸桿菌科）5 .腸由血性大腸埃希菌：其主要血清類(lèi)型

36、為O157:H7。6 .沙門(mén)菌屬性生物學(xué)特性：大多數(shù)菌株因產(chǎn)生 H2S,在SS瓊脂 上形成黑色中心的菌落。7 .沙門(mén)菌素標(biāo)本采集：疑為傷寒、副傷寒可于第1周采集血液， 第2、3周取糞便，第3周取尿液，全病程取骨髓做培養(yǎng)。8 .急性細(xì)菌性痢疾：典型菌痢臨床表現(xiàn)為腹痛、發(fā)熱、水樣便， 后轉(zhuǎn)為膿血粘液便，伴里急后重。9 .志賀氏菌微生物學(xué)檢驗(yàn)：標(biāo)本采集、直接顯微鏡檢查、分離 培養(yǎng)、鑒定（生化反應(yīng)鑒別、血清學(xué)鑒定）。10 .變形桿菌的遷徙生長(zhǎng)：在營(yíng)養(yǎng)瓊脂和血平板上普通變形桿 菌和奇異變形桿菌的大多數(shù)菌株可呈波紋薄膜狀生長(zhǎng)。11 .變形桿菌的鑒定：根據(jù)典型的遷徙現(xiàn)象，迅速分解尿素， 苯丙氨酸脫氨酶陽(yáng)性，

37、 KIA為KA+ IMViC為-/ + + - ，可 鑒定為變性桿菌。12 .外-斐試驗(yàn)：臨床上以變形桿菌 X菌株的O抗原與立克次 體病患者血清做定量凝集試驗(yàn)，輔助診斷立克次體病。13 .小腸結(jié)腸炎耶爾森菌為革蘭陰性球桿菌，4-40 C均能生長(zhǎng)，（4C增菌試驗(yàn)）。第二十四章 非發(fā)醉革蘭陰性桿菌1 、銅綠假單胞菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)：（1）標(biāo)本采集：不同的標(biāo)本，如痰、傷口分泌物、尿液、膿及穿刺液、血液、腦脊 液、胸腹水、關(guān)節(jié)液。（2）直接顯微鏡檢查：分泌物直接涂 片革蘭染色鏡為革蘭陰性桿菌。（3）分離培養(yǎng)：將標(biāo)本接種血平板，3537 C, 1824h,典型的銅綠假單胞菌落，中等 大小，表面菌屬光澤。（

38、4）鑒定：產(chǎn)生水溶性藍(lán)綠色、特殊 的氣味、氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，作非發(fā)醉菌微量生化鑒定。（5）生物學(xué)特性：在血平板、麥康凱平板上形成的菌落表現(xiàn)為：扁平濕潤(rùn)、鋸齒狀邊緣，常呈融合性生長(zhǎng)，表面?？梢?jiàn)金屬 光澤。2 .不動(dòng)桿菌 屬為一群不發(fā)醉糖類(lèi)、氧化酶陰性、硝酸鹽還原 陰性、不能運(yùn)動(dòng)的革蘭陰性桿菌。不動(dòng)桿菌致病物質(zhì)與所致疾?。翰粍?dòng)桿菌廣泛分布于自然界和醫(yī)院環(huán)境中，是長(zhǎng)期住院 患者第二位的非發(fā)醉革蘭陰性桿菌，為條件致病菌。3 .非發(fā)醉革蘭陰性桿菌：是一群不發(fā)醉葡萄糖或僅以氧化形式 利用葡萄糖的需氧或堿性厭氧、無(wú)芽胞的革蘭陰性桿菌；在分 類(lèi)學(xué)上分別屬于不同的科、屬何種，但具有類(lèi)似的表型特征， 如，多為需氧菌

39、，菌體直而細(xì)長(zhǎng)，大小為（1-5） umx （0.5-1 ）um,絕大多數(shù)動(dòng)力陽(yáng)性，最適生長(zhǎng)溫度一般為30-37 C。（主要有假單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬）4 .不動(dòng)桿菌微生物學(xué)檢驗(yàn)：鑒定：一些培養(yǎng)物經(jīng)涂片、染色，如為革蘭陰性成雙排列的球桿菌，形態(tài)似奈瑟菌；KIL底層及斜面均不變色、無(wú)動(dòng)力；氧化酶陰性，硝酸鹽還原試驗(yàn)陰性， 可初步確定為不動(dòng)桿菌屬的細(xì)菌。5 .窄食單胞菌藥物敏感試驗(yàn)：本菌對(duì)大多數(shù)臨床常用的抗生素 如氨基糖昔類(lèi)和很多B -內(nèi)酰胺類(lèi)（包括對(duì)銅綠假單胞菌很有效的抗生素，如碳青霉烯類(lèi)）天然耐藥主要與該菌存在一種鋅 離子依賴金屬B-內(nèi)酰胺酶有關(guān)，但對(duì)甲氧節(jié)氨喀陡-磺胺甲嗯 嚏一般均敏感。6 .嗜

40、麥芽窄食單胞菌：鑒定：在血平板或麥康凱平板上生長(zhǎng)良好；動(dòng)力陽(yáng)性；氧化酶陰性，氧化麥芽糖產(chǎn)酸，但氧化葡萄 糖較慢可產(chǎn)弱酸性反應(yīng)；賴氨酸脫竣酶陽(yáng)性、DNA酶陽(yáng)性；一些菌株產(chǎn)生黃色色素；對(duì)碳青霉烯類(lèi)抗生素天然耐藥。生化反應(yīng)特征：氧化酶陰性，DNA酶（這是將本菌與其他氧化分解 葡萄糖革蘭陰性桿菌相區(qū)別的關(guān)鍵因素）和賴氨酸脫竣酶陽(yáng)性，葡萄糖氧化分解緩慢，可快速氧化分解麥芽糖明膠水解試驗(yàn)陽(yáng) 性，部分菌株（約占 39%）硝酸鹽還原試驗(yàn)陽(yáng)性；分解硝酸鹽 產(chǎn)氮?dú)怅幮?，精氨酸雙水解酶實(shí)驗(yàn)陰性， 精氨酸雙水解酶陰性， 鳥(niǎo)氨酸脫竣酶陰性，回噪生成陰性，一般不分解尿素。第二十五章弧菌屬和氣單胞菌屬1 .古典生物型和El

41、 Tor生物型的不同生物學(xué)特征特征古典生物型El Tor生物型羊紅細(xì)胞溶血D雞紅細(xì)胞凝集+V-P試驗(yàn)+多黏菌屬B敏感試 驗(yàn)+IV組噬菌體裂解+V組噬菌體裂解+2 .副溶血弧菌：鑒定：在TCBS平板上形成綠色或藍(lán)綠色菌落。3 .創(chuàng)傷弧菌：該菌引起的疾病最為嚴(yán)重。引起的菌血癥和傷口 感染病程進(jìn)展快而致命。4 .神奈川現(xiàn)象：從腹瀉患者標(biāo)本中分離到的95%上菌株在含人。型紅細(xì)胞或兔紅細(xì)胞的我萋培養(yǎng)基上可產(chǎn)生B-溶血現(xiàn)象5 .副溶血弧菌：副溶血弧菌是一種嗜鹽性細(xì)菌，主要存在 于近海的海水和海產(chǎn)品種。是我國(guó)沿海地區(qū)最常見(jiàn)的食物中毒 病原菌。其主要通過(guò)菌毛的粘附， 產(chǎn)生耐熱直接溶血素和耐 熱相關(guān)溶血素兩種致

42、病因子，THD有2個(gè)亞單位，能耐受100C、 10min不被破壞。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明有細(xì)胞毒性、心臟毒性和腸毒 性，可致人和兔紅細(xì)胞溶血， 其致病性與溶血能力呈平行關(guān)系。 TRH生物學(xué)性與 THD相似。6 .微生物學(xué)檢驗(yàn)：（1）標(biāo)本采集：霍亂是烈性傳染病，盡量在 發(fā)病早期，使用抗生素之前采集標(biāo)本?？扇』颊摺懊籽厮睒?便，亦可采取嘔吐物或肛門(mén)拭子。（2）直接顯微鏡檢查：圖片染色鏡檢：取標(biāo)本直接涂片兩張。干后用乙醇或甲醇固定， 革蘭染色。鏡檢有無(wú)“魚(yú)群”樣排列的革蘭陰性弧菌。動(dòng)力和制動(dòng)試驗(yàn)：直接取“米沿水”樣便制成懸滴標(biāo)本，用暗視野或相差顯微鏡觀察呈穿梭樣運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌。同法制備另一懸滴標(biāo) 本，在懸液中加

43、入1滴不加防腐劑的多價(jià)診斷血清，可見(jiàn)最初 呈穿梭樣運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌停止運(yùn)動(dòng)并發(fā)生凝集，則為制動(dòng)試驗(yàn)陽(yáng)性?？沙醪酵茢嘤谢魜y弧菌存在。（3）分離培養(yǎng)：將標(biāo)本直接接種 于堿性腺水，或?qū)⑦\(yùn)送堿性培養(yǎng)基的表層接種于堿性腺水 35 C、6-8h后，接種至TCBC平板或4號(hào)瓊脂平板或慶大霉素 瓊脂平板，35 C、12-18h觀察菌落形態(tài)。在 TCBC平板上形成 黃色，4號(hào)瓊脂或慶大霉素瓊脂平板上呈灰褐色中心的菌落， 均為可以菌落。（4）鑒定：霍亂弧菌主要特征：革蘭染色陽(yáng)性、動(dòng)力陽(yáng)性，TCBC平板上形成黃色、4號(hào)瓊脂或慶大霉素瓊 脂平板上呈灰褐色中心的菌落，氧化酶陽(yáng)性，發(fā)醉葡萄糖和蔗 糖，賴氨酸、鳥(niǎo)氨酸脫竣酶陽(yáng)性精

44、氨酸雙水解酶陰性，無(wú)鹽培 養(yǎng)基上生長(zhǎng)，在含有高于 6%M化鈉的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)。7 .溶血弧菌的分離培養(yǎng)：可將標(biāo)本直接接種于 TCBC平板或嗜鹽菌選擇平板，在TCBC平板上形成綠色或藍(lán)綠色。8 .霍亂弧菌的生物學(xué)特性：霍亂弧菌為兼性厭氧菌，營(yíng)養(yǎng)要 求不高，在普通瓊脂上生成良好。16-44 C均可生長(zhǎng),37 c最適。具有耐堿性，在PH6.8-10.2 范圍均可生長(zhǎng)，在PH8.2-9.0的堿性蛋白陳水或堿性平板生長(zhǎng)迅速。在TCBC選擇性培養(yǎng)基上，發(fā)醉蔗糖產(chǎn)酸，菌落呈黃色。 在含有亞磷酸鉀的選擇 培養(yǎng)基上可將磷離子還原成磷，形成灰褐色菌落中心。在血平板上菌落較大可在無(wú)鹽培養(yǎng)基上生成O131群霍亂弧菌

45、在含明膠的培養(yǎng)基上可形成不透明淺灰色菌落，周?chē)幸蝗Σ?透明帶，有莢膜。第二十六章 彎曲菌屬和螺桿菌屬1 .彎曲菌屬：為微需氧菌，多氧或無(wú)氧的環(huán)境下均不生長(zhǎng)，最 適生長(zhǎng)環(huán)境是5% 02、10%CO2 85%N2勺微氧環(huán)境。2 .常見(jiàn)彎曲菌的主要鑒定菌種鑒定特征馬尿酸鹽 水解25 C生長(zhǎng)42 C生長(zhǎng)空腸彎曲 菌空腸亞 種十一十大腸彎曲 菌一一十胎兒彎曲 菌胎兒亞 種一十一胎兒彎曲 菌性病亞 種一十一3 .螺桿菌屬其他診斷方法：活檢組織快速尿素酶試驗(yàn)（RUT）、 13C或14C標(biāo)記尿素呼氣試驗(yàn)（UBT）第二十七章苛養(yǎng)菌1 .衛(wèi)星現(xiàn)象：將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌共同培養(yǎng)時(shí)，因金黃色葡萄球菌能合成

46、較多的V因子，靠近金黃色葡萄球菌周?chē)牧鞲惺妊獥U菌菌落較大，距離越遠(yuǎn)的菌落越小，這 種現(xiàn)象稱為衛(wèi)星現(xiàn)象。2 .鮑特菌屬：的所有菌種均為專(zhuān)性需氧菌。其中百日咳鮑特菌 對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求最為復(fù)雜，血培養(yǎng)基和巧克力培養(yǎng)基上均不能生 長(zhǎng)，常用的培養(yǎng)基為 鮑一金培養(yǎng)基 （BG）。 軍團(tuán)菌屬常 用的培養(yǎng)基是BCYEaW養(yǎng)基，不能在血平板上生長(zhǎng)。3 .軍團(tuán)菌屬：常用的是BCYE*養(yǎng)基，主要成分是活性炭醉母 浸由液，加上鐵、L-半胱氨酸和a-酮戊二酸4 .嗜肺軍團(tuán)菌：在空調(diào)冷凝水中的檢生率最高第二十八章需氧革蘭陽(yáng)性桿菌1 .炭疽芽胞桿菌：簡(jiǎn)稱炭疽桿菌，是最早發(fā)現(xiàn)的病原菌，也 是芽胞桿菌屬中致病力最強(qiáng)的一種，引起人、獸

47、共患的烈性傳染病一一炭疽。邊緣不整呈卷發(fā)狀2 .串珠試驗(yàn) 將待檢菌種于含 0.050.5U/ml青霉素的培養(yǎng) 基中35 c培養(yǎng)6h后，炭疽桿菌形態(tài)發(fā)生變化，菌體成為 大而均勻的圓球狀成串排列，為炭3 .李斯特菌屬：兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基上即 可生長(zhǎng)。在平板4 .上形成圓形、光滑的灰白色菌落，有狹窄B溶血環(huán)。在肉湯培養(yǎng)基中渾濁生長(zhǎng)， 表面形成菌膜。在半固體培養(yǎng)基中 沿穿刺線向四周蔓延生長(zhǎng)，形成倒傘狀。能在4攝氏度條件下生長(zhǎng)，可形成冷增菌5 .加特納菌屬：直接顯微鏡檢查 革蘭染色可見(jiàn)上皮細(xì)胞（細(xì) 胞漿呈紅色，細(xì)胞核為藍(lán)紫色）被大量革蘭陽(yáng)性或染色不定小桿菌覆蓋，導(dǎo)致細(xì)胞邊緣不清，稱為線索

48、細(xì)胞6 .白喉棒狀桿菌：所致的疾病白喉為急性呼吸道傳染病。用亞甲蘭、Albert法、Neisser法等染色可顯示菌體有濃 染的異染顆粒，排列成念珠狀或位于菌體兩段，是本菌的形態(tài)鑒別特征。假膜：在黏膜局部定植并產(chǎn)生外毒素，引 起局部炎癥和敗血癥，黏膜上皮細(xì)胞滲生的纖維蛋白和局 部細(xì)菌、炎癥細(xì)胞、壞死組織凝結(jié)在一起形成灰白色膜成 為假膜。7 .微生物學(xué)檢查：（1）標(biāo)本采集：從疑似假膜的邊緣采集分 泌物，未見(jiàn)假膜者采集鼻咽部或扁桃體粘膜分泌物。（2）直接顯微鏡檢查：涂片、革蘭染色，鏡檢發(fā)現(xiàn)革蘭陽(yáng)性棒 狀桿菌，形態(tài)典型且有明顯異色顆粒，可初步報(bào)告。（3）分離培養(yǎng)：標(biāo)本分離可用亞硫酸鉀血平板、血平板，純

49、培 養(yǎng)用呂氏血清斜面。（4）鑒定：陽(yáng)性；分解葡萄糖，麥芽 糖、半乳糖、糊精，不分解乳糖、甘露醇，重型遲緩分解 蔗糖，還原硝酸鹽、不液化明膠，阻噪和月尿酶試驗(yàn)陰性。第三十章分支桿菌屬1 .分枝桿菌屬 是分枝桿菌科的唯一菌屬。 根據(jù)其生物學(xué)特性和 致病性，可分為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群、非結(jié)核分枝桿菌和麻 風(fēng)分枝桿菌2 .肺結(jié)核最可靠微生物方法分離培養(yǎng)。3 .結(jié)核分枝桿菌： 革蘭染色不易著色，抗酸染色陽(yáng)性。經(jīng)萋 - 尼抗酸染色后，結(jié)核分枝桿菌呈紅色，其他細(xì)菌和背景物資呈藍(lán)色。有毒力的菌株在液體培養(yǎng)基中呈束狀生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)室 常用酸或堿處理標(biāo)本中的粘稠物質(zhì)并殺死雜菌，以利于分離培養(yǎng)涂片鏡檢結(jié)果 應(yīng)報(bào)告“找到抗

50、酸菌”或“未找到抗酸菌”， 而不能報(bào)告為“找到結(jié)核分枝桿菌”。4 .結(jié)核菌素試驗(yàn)：是應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)來(lái)測(cè)定機(jī)體對(duì) 結(jié)核分枝桿菌是否產(chǎn)生 遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng) 的一種試驗(yàn)。利用機(jī) 體感染結(jié)核分枝桿菌后， 抗結(jié)核免疫與遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時(shí) 并存的原理，通過(guò)檢測(cè)機(jī)體對(duì)結(jié)核菌素有無(wú)遲發(fā)型超敏反 應(yīng)，從而了解機(jī)體是否有過(guò)結(jié)核分枝桿菌感染，或?qū)Y(jié)核分 枝，是否具有免疫力。5 .結(jié)核菌素試驗(yàn)：結(jié)核菌素是結(jié)核桿菌的菌體成分，有兩種： 舊結(jié)核菌素（OT）和純蛋白衍生物（PPD .目前都用PPD.PPD 有兩種：結(jié)核分枝桿菌制成的 PPD-C和卡介苗制成BCG-PPD, 每0.1ml含五個(gè)單位。試驗(yàn)時(shí)，取0.1m

51、lPPD注射兩前臂皮內(nèi)，4872h后，紅腫硬節(jié)超過(guò) 5mm#為陽(yáng)性，表示感染 過(guò)結(jié)核分枝桿菌或接種過(guò)卡介苗，但不一定患結(jié)核 ?。?15mmj強(qiáng)陽(yáng)性，表示可能有活動(dòng)性結(jié)核，應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步檢查；5mm#為陰性，表示未感染過(guò)結(jié)核分枝桿菌， 但應(yīng) 排除原發(fā)結(jié)核病早期、老年人、嚴(yán)重結(jié)核病（如粟粒性肺結(jié) 核、結(jié)核性腦膜炎）或有其他嚴(yán)重疾病（如麻疹、淋巴瘤、 白血病、艾滋?。┮约坝妹庖咭种苿┑?。此試驗(yàn)主要用于：1.選才i BCG接種對(duì)象及測(cè)定接種效果 2.作為嬰幼兒結(jié)核病診斷的參考 3.在未接種BCG的人群中做 結(jié)核分枝桿菌感染的流行病學(xué)檢查4.測(cè)定腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能第三十一章厭氧菌1 .在臨床厭氧菌感染

52、中，絕大多數(shù)是由無(wú)芽胞厭氧菌引起的內(nèi) 源性感染。2 .厭氧菌感染的臨床及細(xì)菌學(xué)特征：1.感染局部有氣體產(chǎn)生2.發(fā)生在粘膜附近的感染3.深部外傷 4.有特殊的分泌物5.某些抗生素治療無(wú)效的感染6.細(xì)菌學(xué)特征3 .培養(yǎng)方法：經(jīng)接種的厭氧培養(yǎng)基應(yīng)立即放入?yún)捬醐h(huán)境，置 35-37攝氏度條件下培養(yǎng) 48-72h。常用有厭氧罐（盒）培養(yǎng) 法、厭氧氣袋法、厭氧手套箱培養(yǎng)法4 .厭氧手套箱 是目前國(guó)際上公認(rèn)的厭氧菌培養(yǎng)箱最佳設(shè)備。5 .產(chǎn)氣莢膜梭菌在牛乳培養(yǎng)基中，可產(chǎn)生大量氣體將凝固的酪蛋白沖散形成蜂窩狀，有“洶涌發(fā)醉”現(xiàn)象，可作為產(chǎn)氣莢 膜梭菌的鑒定之一。6 .革蘭陰性無(wú)芽胞厭氧桿菌的類(lèi)桿菌屬：包括脆弱內(nèi)桿

53、菌、多形類(lèi)桿菌、普通類(lèi)桿菌、吉氏類(lèi)桿菌、糞類(lèi)桿菌、埃氏類(lèi)桿 菌、屎類(lèi)桿菌、卵形類(lèi)桿菌、糞便類(lèi)桿菌、單形類(lèi)桿菌第三十二章螺旋體和支原體1.支原體一群沒(méi)有細(xì)胞壁、介于細(xì)胞與病毒之間、能在人工培 養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的最小的原核細(xì)胞型微生物，形態(tài)上呈高度多形性，最小個(gè)體直徑 200以m左右，可通過(guò)濾菌器。性狀支原體細(xì)菌L型形態(tài)多形性多形性大小0.2 0.3um0.6 1.0um細(xì)胞壁無(wú)無(wú)細(xì)胞膜含膽固醇不含膽固醇菌落油煎蛋狀油煎蛋狀通過(guò)濾器能能遺傳性與細(xì)菌無(wú)關(guān)與原細(xì)菌相同回復(fù)成菌落不能臺(tái)匕 目匕對(duì)青霉素不敏感不敏感致病性支原體肺炎等慢性感染2.血清學(xué)檢查：1.非密螺旋體抗原試驗(yàn) 2.密螺旋體抗原試驗(yàn) 患者血、尿標(biāo)本培3.養(yǎng)后，若培養(yǎng)基呈云霧狀混濁，暗視野鏡鑒有鉤端螺旋體的群、型特異性血清鑒定菌群、菌型后，可報(bào)告：“培養(yǎng)由XXX 型鉤端螺旋體”。如培養(yǎng)1個(gè)月仍無(wú)生長(zhǎng)者，可報(bào)告“血（尿） 鉤端螺旋體培養(yǎng)陰性”。人類(lèi)主要支原體生物學(xué)性狀支原