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文檔簡介
1、目的要求:目的要求:1、病毒粒子的結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生存的環(huán)境條件。、病毒粒子的結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生存的環(huán)境條件。2、毒性噬菌體的侵染循環(huán),溫和噬菌體和溶原細(xì)菌的特點(diǎn)。、毒性噬菌體的侵染循環(huán),溫和噬菌體和溶原細(xì)菌的特點(diǎn)。3、脊椎動(dòng)物病毒、昆蟲病毒、植物病毒的主要特點(diǎn)及代表、脊椎動(dòng)物病毒、昆蟲病毒、植物病毒的主要特點(diǎn)及代表 病毒所含核酸及侵染循環(huán)。病毒所含核酸及侵染循環(huán)。4、亞病毒的基本知識(shí)。、亞病毒的基本知識(shí)。重重 點(diǎn):點(diǎn): 噬菌體的一步生長曲線及溶原性。噬菌體的一步生長曲線及溶原性。難難 點(diǎn):點(diǎn): 1、DNA病毒的侵染循環(huán)。病毒的侵染循環(huán)。 2、RNA病毒的侵染循環(huán)。病毒的侵染循環(huán)。 3、溫和噬
2、菌體及其溶原化。、溫和噬菌體及其溶原化。 第一節(jié)第一節(jié) 病毒的概述病毒的概述病毒的基本概念和一般研究方法病毒的基本概念和一般研究方法第二節(jié)第二節(jié) 毒粒的性質(zhì)毒粒的性質(zhì)病毒的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)病毒的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)第三節(jié)第三節(jié) 病毒的復(fù)制病毒的復(fù)制病毒的復(fù)制(繁殖)的基本特點(diǎn)和過程病毒的復(fù)制(繁殖)的基本特點(diǎn)和過程第四節(jié)第四節(jié) 噬菌體噬菌體溫和噬菌體的概念及生活周期溫和噬菌體的概念及生活周期第五節(jié)第五節(jié) 植物病毒植物病毒第六節(jié)第六節(jié) 脊椎動(dòng)物病毒脊椎動(dòng)物病毒第七節(jié)第七節(jié) 昆蟲病毒昆蟲病毒第八節(jié)第八節(jié) 亞病毒亞病毒第一節(jié)第一節(jié) 病毒的概述病毒的概述一、病毒的發(fā)現(xiàn)和研究歷史一、病毒的發(fā)現(xiàn)和研究歷史1886年,
3、年,A. Mayer 發(fā)現(xiàn)具有傳染性的煙草花葉病;發(fā)現(xiàn)具有傳染性的煙草花葉病;1892年,年,D. Ivanovsky煙草花葉病病原體能通過細(xì)菌濾器:煙草花葉病病原體能通過細(xì)菌濾器: 一種能通過細(xì)菌濾器的一種能通過細(xì)菌濾器的”細(xì)菌毒素細(xì)菌毒素”或或極小的細(xì)菌極小的細(xì)菌18981898年,年,M W M W BeijerinckBeijerinck對煙草花葉病病原體的研究結(jié)果:對煙草花葉病病原體的研究結(jié)果:t 能通過細(xì)菌濾器;能通過細(xì)菌濾器;t 可被乙醇沉淀而不失去其感染性,可被乙醇沉淀而不失去其感染性,t 能在瓊脂凝膠中擴(kuò)散;能在瓊脂凝膠中擴(kuò)散;t 用培養(yǎng)細(xì)菌的方法不能被培養(yǎng)出來,推測只能在植
4、物活細(xì)胞中生活;用培養(yǎng)細(xì)菌的方法不能被培養(yǎng)出來,推測只能在植物活細(xì)胞中生活;比細(xì)菌小的具有傳染性的活的流質(zhì)(比細(xì)菌小的具有傳染性的活的流質(zhì)(contagium vivum fluidum)第一節(jié)第一節(jié) 概述概述1900年前后,包括口蹄疫(年前后,包括口蹄疫(foot and mouth disease)在內(nèi)的在內(nèi)的多種動(dòng)植物疾病病原體的濾過性特性被證明。多種動(dòng)植物疾病病原體的濾過性特性被證明。filterable viruses(濾過性病毒)濾過性病毒)viruses(病毒)病毒)F W Twort(1915年)、年)、F dHerelle(1917年),分別發(fā)現(xiàn)年),分別發(fā)現(xiàn)細(xì)菌(細(xì)菌(Sh
5、igella dysenteriae)病毒病毒bacteriophagesPhago:“to eat”噬菌體(噬菌體(phage)1935年,年,W M Stanley首次提純并結(jié)晶了煙草花葉病毒;首次提純并結(jié)晶了煙草花葉病毒; Bawden等證明煙草花葉病毒的本質(zhì)為核蛋白;等證明煙草花葉病毒的本質(zhì)為核蛋白;1940年,年,Kausche首先用電鏡觀察到煙草花葉病毒顆粒;首先用電鏡觀察到煙草花葉病毒顆粒;第一節(jié)第一節(jié) 概述概述1、定義、定義二、病毒的特點(diǎn)和定義二、病毒的特點(diǎn)和定義迄今仍無一個(gè)科學(xué)而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)亩x迄今仍無一個(gè)科學(xué)而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)亩x非細(xì)胞生物非細(xì)胞生物(真)病毒:至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分(
6、真)病毒:至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分亞病毒亞病毒類病毒:只含具侵染性的類病毒:只含具侵染性的RNA組分組分衛(wèi)星衛(wèi)星RNA:只含有不具侵染性的只含有不具侵染性的RNA組分組分朊病毒:只含蛋白質(zhì)朊病毒:只含蛋白質(zhì) 病毒是沒有細(xì)胞構(gòu)造病毒是沒有細(xì)胞構(gòu)造, , 活細(xì)胞內(nèi)專性寄生的實(shí)體活細(xì)胞內(nèi)專性寄生的實(shí)體, , 在寄在寄主內(nèi)表現(xiàn)生命特性,在寄主外表現(xiàn)大分子特性。主內(nèi)表現(xiàn)生命特性,在寄主外表現(xiàn)大分子特性。v 無細(xì)胞結(jié)構(gòu),專性活細(xì)胞內(nèi)寄生;無細(xì)胞結(jié)構(gòu),專性活細(xì)胞內(nèi)寄生;v 沒有酶或酶系統(tǒng)極不完全,不能進(jìn)行代謝活動(dòng);沒有酶或酶系統(tǒng)極不完全,不能進(jìn)行代謝活動(dòng);v 個(gè)體極小,個(gè)體極小,多在多在10-300 nm
7、之間,之間,能通過細(xì)菌濾器;能通過細(xì)菌濾器;v 對抗生素不敏感,對干擾素敏感。對抗生素不敏感,對干擾素敏感。v 只有只有DNA或或RNA一種核酸。病毒向寄主細(xì)胞提供自己的遺一種核酸。病毒向寄主細(xì)胞提供自己的遺傳信息,通過寄主的轉(zhuǎn)錄、翻譯和合成系統(tǒng)來復(fù)制病毒。傳信息,通過寄主的轉(zhuǎn)錄、翻譯和合成系統(tǒng)來復(fù)制病毒。v在宿主細(xì)胞協(xié)助下,通過核酸的復(fù)制和核酸蛋白裝配的形式在宿主細(xì)胞協(xié)助下,通過核酸的復(fù)制和核酸蛋白裝配的形式進(jìn)行增殖,不存在個(gè)體生長和二均等分裂等細(xì)胞繁殖方式。進(jìn)行增殖,不存在個(gè)體生長和二均等分裂等細(xì)胞繁殖方式。 2、病毒的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、病毒的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)幾乎所有的生物都可以幾乎所有的生物都可
8、以 感染相應(yīng)的病感染相應(yīng)的病毒。根據(jù)宿主可以分三類:毒。根據(jù)宿主可以分三類: 動(dòng)物病毒動(dòng)物病毒 植物病毒植物病毒 細(xì)菌病毒(或稱噬菌體)細(xì)菌病毒(或稱噬菌體)胚卵的病毒培養(yǎng)三、病毒的培養(yǎng)和純化三、病毒的培養(yǎng)和純化第二節(jié)第二節(jié) 毒粒的性質(zhì)毒粒的性質(zhì)l病毒的形狀有球形、卵圓形、磚形、桿狀、絲狀及蝌蚪狀等,病毒的形狀有球形、卵圓形、磚形、桿狀、絲狀及蝌蚪狀等,但以近似球形的多面體和桿狀為主。但以近似球形的多面體和桿狀為主。l動(dòng)物病毒多呈球形、卵圓形或磚形。動(dòng)物病毒多呈球形、卵圓形或磚形。l細(xì)菌病毒多為蝌蚪形,也有微球形和絲狀的。細(xì)菌病毒多為蝌蚪形,也有微球形和絲狀的。(一)病毒的形狀(一)病毒的形狀
9、一、病毒的形態(tài)與大小一、病毒的形態(tài)與大小(二)病毒的大小(二)病毒的大小10-300 nm。二二. 病毒的構(gòu)造病毒的構(gòu)造1、典型病毒粒子的構(gòu)造、典型病毒粒子的構(gòu)造基本成分基本成分核酸核酸位于中心,稱為核心位于中心,稱為核心蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)包圍在核心周圍,形成衣殼包圍在核心周圍,形成衣殼 核心和衣殼合稱核心和衣殼合稱核衣殼或核殼體核衣殼或核殼體nucleo-capsid ,為病毒的基本,為病毒的基本結(jié)構(gòu)。有些復(fù)雜的病毒在衣殼的外面包裹著一層由脂類和多糖組成結(jié)構(gòu)。有些復(fù)雜的病毒在衣殼的外面包裹著一層由脂類和多糖組成的的包膜包膜envelop 。有的包膜上還長有。有的包膜上還長有刺突刺突spike 。2
10、、病毒粒的殼體結(jié)構(gòu)、病毒粒的殼體結(jié)構(gòu)病毒的對稱性病毒的對稱性 螺旋對稱的病毒粒子螺旋對稱的病毒粒子 二十面體對稱病毒粒子二十面體對稱病毒粒子 復(fù)合對稱的病毒粒子復(fù)合對稱的病毒粒子(1)螺旋對稱殼體)螺旋對稱殼體(多見于植物病毒,如(多見于植物病毒,如TMV)亞基有規(guī)律地沿著中心軸亞基有規(guī)律地沿著中心軸(核酸)(核酸)呈螺旋排列,進(jìn)而形成高度有序、呈螺旋排列,進(jìn)而形成高度有序、對稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。對稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。(2) 二十面體對稱二十面體對稱殼體殼體蛋白質(zhì)亞基圍繞具立方對稱的正多面體的角或邊排列,進(jìn)而形蛋白質(zhì)亞基圍繞具立方對稱的正多面體的角或邊排列,進(jìn)而形成一個(gè)封閉的蛋白質(zhì)的鞘。成一個(gè)封閉的蛋白質(zhì)
11、的鞘。(3)雙對稱結(jié)構(gòu)(復(fù)合對稱):)雙對稱結(jié)構(gòu)(復(fù)合對稱): 具有雙對稱結(jié)構(gòu)的典型例子是具有雙對稱結(jié)構(gòu)的典型例子是有尾噬有尾噬菌體菌體(tailed phage),其殼體由頭部和尾其殼體由頭部和尾部組成。包裝有病毒核酸的部組成。包裝有病毒核酸的頭部頭部通常呈通常呈二二十面體對稱十面體對稱,尾部尾部呈呈螺旋對稱螺旋對稱。3、 病毒的包膜結(jié)構(gòu)病毒的包膜結(jié)構(gòu)病毒包膜的基本結(jié)構(gòu)與生物膜相似,是病毒包膜的基本結(jié)構(gòu)與生物膜相似,是脂雙層脂雙層膜膜。在包膜形成時(shí),細(xì)胞在包膜形成時(shí),細(xì)胞膜蛋白膜蛋白被病毒的包膜糖蛋被病毒的包膜糖蛋白取代。白取代。刺突刺突(spike):):包膜或核衣殼上的突起。包膜或核衣殼
12、上的突起。1、 病毒的核酸病毒的核酸核酸是病毒的遺傳物質(zhì),核酸是病毒的遺傳物質(zhì),控制著病毒的增殖控制著病毒的增殖及對宿主的感染性。及對宿主的感染性。病毒核酸病毒核酸單鏈單鏈DNA(ss DNA)雙鏈雙鏈DNA(ds DNA)單鏈單鏈RNA(ss RNA)雙鏈雙鏈RNA(ds RNA)三、病毒的化學(xué)組成三、病毒的化學(xué)組成一種病毒只含有一種核酸(一種病毒只含有一種核酸(DNA或或RNA)。)。 植物病毒絕大多數(shù)含植物病毒絕大多數(shù)含RNARNA,少數(shù)含,少數(shù)含DNADNA; 動(dòng)物病毒有的含動(dòng)物病毒有的含DNADNA,如天花病毒;有的含,如天花病毒;有的含RNARNA,如流感病毒。,如流感病毒。 細(xì)菌
13、病毒普遍含細(xì)菌病毒普遍含DNA,含,含RNA的的極少。極少。病毒的核酸類型極為多樣化,病毒的核酸類型極為多樣化,DNA與與RNA均有單鏈和雙鏈:均有單鏈和雙鏈: 病毒病毒DNA分子有線狀和環(huán)狀之分。分子有線狀和環(huán)狀之分。病毒核酸有正鏈()和負(fù)鏈(病毒核酸有正鏈()和負(fù)鏈()的區(qū)分:)的區(qū)分: 規(guī)定:將堿基序列與規(guī)定:將堿基序列與mRNA一致的核酸單鏈定位正鏈,一致的核酸單鏈定位正鏈,將堿基序列與將堿基序列與mRNA互補(bǔ)的核酸單鏈定位負(fù)鏈?;パa(bǔ)的核酸單鏈定位負(fù)鏈。因此,就病毒核酸鏈的單與雙以及正和負(fù)有以下因此,就病毒核酸鏈的單與雙以及正和負(fù)有以下6 種類型:種類型: ()DNA大部分大部分DNA
14、病毒病毒 ()RNA動(dòng)物呼腸孤病毒動(dòng)物呼腸孤病毒 ()()DNA 大腸桿菌大腸桿菌 X174噬菌體噬菌體 ()()RNA所有單鏈所有單鏈RNA病毒病毒大部分植物病毒大部分植物病毒 ()DNA腺病毒腺病毒 ()RNA 流感病毒流感病毒 2 2、病毒蛋白、病毒蛋白v 構(gòu)成病毒粒子外殼,保護(hù)病毒核酸免受核酸酶及其他理化構(gòu)成病毒粒子外殼,保護(hù)病毒核酸免受核酸酶及其他理化 因子的破壞;因子的破壞;v 決定病毒感染的特異性,與易感細(xì)胞表面存在的受體具特決定病毒感染的特異性,與易感細(xì)胞表面存在的受體具特 異性親和力,促使病毒粒子的吸附;異性親和力,促使病毒粒子的吸附;v 決定病毒的抗原性,并能刺激機(jī)體產(chǎn)生相
15、應(yīng)的抗體;決定病毒的抗原性,并能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體;v 某些病毒蛋白質(zhì)是一些具有特殊功能的酶,如噬菌體中的某些病毒蛋白質(zhì)是一些具有特殊功能的酶,如噬菌體中的 溶菌酶,溶菌酶,破壞宿主細(xì)胞壁與細(xì)胞膜。破壞宿主細(xì)胞壁與細(xì)胞膜。功功 能能 : 主要在構(gòu)成病毒結(jié)構(gòu)、病毒的侵染與增殖過程主要在構(gòu)成病毒結(jié)構(gòu)、病毒的侵染與增殖過程中發(fā)揮作用:中發(fā)揮作用: 3 3、脂、脂 類類功能:功能:與病毒的吸附和侵入有關(guān)。一些有包膜的病毒去掉與病毒的吸附和侵入有關(guān)。一些有包膜的病毒去掉 包膜后失去感染性。包膜后失去感染性。 主要以脂質(zhì)雙分子層的形式存在于病毒的包膜中。主要以脂質(zhì)雙分子層的形式存在于病毒的包膜中。病毒
16、脂類病毒脂類磷磷 脂脂膽固醇膽固醇中性脂肪中性脂肪4、糖、糖 類類 功能:功能:1、與、與DNA堿基結(jié)合的葡萄糖殘基對核酸酶的降解堿基結(jié)合的葡萄糖殘基對核酸酶的降解 有抵抗作用。有抵抗作用。 2、與病毒的血清反應(yīng)有關(guān)。、與病毒的血清反應(yīng)有關(guān)。 龍膽二糖龍膽二糖巖巖 藻藻 糖糖半半 乳乳 糖糖葡葡 萄萄 糖糖主要有主要有常以糖蛋白,糖脂的形式存在或者以糖苷鍵直接與堿基相連。常以糖蛋白,糖脂的形式存在或者以糖苷鍵直接與堿基相連。包含體噬菌斑病斑和空斑枯斑 概念:概念:感染病毒的宿主細(xì)胞內(nèi),出現(xiàn)在光學(xué)顯微鏡下可見的大小、感染病毒的宿主細(xì)胞內(nèi),出現(xiàn)在光學(xué)顯微鏡下可見的大小、形態(tài)、數(shù)量不等的小體。形態(tài)、
17、數(shù)量不等的小體。形成部位:形成部位:細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞核內(nèi)如包疹病毒如包疹病毒 細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)如狂犬病毒等如狂犬病毒等 核內(nèi)和胞質(zhì)都有核內(nèi)和胞質(zhì)都有麻疹病毒麻疹病毒 本質(zhì)本質(zhì)-大多數(shù)是病毒粒子組成的,是病毒在寄主細(xì)胞中形成的聚大多數(shù)是病毒粒子組成的,是病毒在寄主細(xì)胞中形成的聚集體,包含未裝配的病毒亞基、完整的病毒體和寄主編碼的蛋白質(zhì)。集體,包含未裝配的病毒亞基、完整的病毒體和寄主編碼的蛋白質(zhì)。少數(shù)是細(xì)胞對病毒的反應(yīng)。少數(shù)是細(xì)胞對病毒的反應(yīng)。實(shí)踐意義實(shí)踐意義-病毒鑒定,臨床診斷依據(jù)病毒鑒定,臨床診斷依據(jù) 在宿主細(xì)胞內(nèi)形成包涵體是病毒的特征,不同的病毒其形在宿主細(xì)胞內(nèi)形成包涵體是病毒的特征,不同的病毒
18、其形成的包涵體具有不同的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和特性,可用于分類鑒定。成的包涵體具有不同的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和特性,可用于分類鑒定。概念:噬菌斑是指在宿主細(xì)菌的菌苔上,噬菌體使菌概念:噬菌斑是指在宿主細(xì)菌的菌苔上,噬菌體使菌體裂解而形成的空斑。體裂解而形成的空斑。應(yīng)用:應(yīng)用:1 1、噬菌體定量計(jì)數(shù)、噬菌體定量計(jì)數(shù) 2 2、噬菌體的鑒定、噬菌體的鑒定只要噬菌體稀釋倍數(shù)足夠高,就可以保證每一個(gè)噬菌斑是只要噬菌體稀釋倍數(shù)足夠高,就可以保證每一個(gè)噬菌斑是由一個(gè)噬菌體粒子形成的。由一個(gè)噬菌體粒子形成的。用于動(dòng)物病毒粒子的計(jì)數(shù)也可以采用噬菌斑法類似的技術(shù),但用于動(dòng)物病毒粒子的計(jì)數(shù)也可以采用噬菌斑法類似的技術(shù),但這種斑點(diǎn)只能稱
19、為空斑或病斑。這種斑點(diǎn)只能稱為空斑或病斑。 人工培養(yǎng)的單層動(dòng)物細(xì)胞感染病毒后,也會(huì)形成類似噬菌人工培養(yǎng)的單層動(dòng)物細(xì)胞感染病毒后,也會(huì)形成類似噬菌斑的動(dòng)物病毒群體,稱為斑的動(dòng)物病毒群體,稱為空斑空斑。 單層動(dòng)物細(xì)胞受到腫瘤病毒的感染后,會(huì)使動(dòng)物細(xì)胞惡性單層動(dòng)物細(xì)胞受到腫瘤病毒的感染后,會(huì)使動(dòng)物細(xì)胞惡性增生,形成類似細(xì)菌菌落的病灶,稱為增生,形成類似細(xì)菌菌落的病灶,稱為病斑病斑。植物病毒在植物葉片上形成的植物病毒在植物葉片上形成的一個(gè)個(gè)壞死的病灶一個(gè)個(gè)壞死的病灶稱為枯斑。稱為枯斑。 病毒的半數(shù)存活期:病毒的半數(shù)存活期:在在60以秒計(jì)以秒計(jì) 在在3737以分計(jì)以分計(jì) 在在2020以小時(shí)計(jì)以小時(shí)計(jì) 在
20、在44以天計(jì)以天計(jì) 在在-20-20以月計(jì)以月計(jì)五、環(huán)境對病毒的影響:五、環(huán)境對病毒的影響:1、溫、溫 度度: 病毒大都不耐熱,病毒大都不耐熱,5560幾分鐘就能殺死病毒,使病毒幾分鐘就能殺死病毒,使病毒失去感染力。病毒對低溫不敏感,低溫下病毒停止復(fù)制,但仍失去感染力。病毒對低溫不敏感,低溫下病毒停止復(fù)制,但仍能存活較長時(shí)間。能存活較長時(shí)間。2、pHpH X射線、射線、r射線和紫外線照射均可使病毒滅活。射線和紫外線照射均可使病毒滅活。 適合病毒的適合病毒的pHpH是是7.07.0左右,但不同的病毒對左右,但不同的病毒對pHpH的容許范圍限的容許范圍限不一樣。過酸過堿的溶液可使病毒裂解滅活或喪失
21、其感染性。不一樣。過酸過堿的溶液可使病毒裂解滅活或喪失其感染性。 煙草花葉病毒:煙草花葉病毒:pH pH 2.02.08.08.0 牛牛 痘痘 病病 毒毒: : pH pH 5.05.09.59.5 E.coli 噬菌體:噬菌體: pH pH 6.06.09.09.03 3、輻射、輻射:有包膜的病毒因包膜中含有脂類,故對脂溶劑敏感。有包膜的病毒因包膜中含有脂類,故對脂溶劑敏感。甲醛能使病毒滅活,所以常用甲醛來清洗污染了病毒的器具。甲醛能使病毒滅活,所以常用甲醛來清洗污染了病毒的器具。 氯、碘對病毒有高度的滅活作用。氯、碘對病毒有高度的滅活作用。 4、化學(xué)藥劑、化學(xué)藥劑:五、病毒的分類五、病毒的
22、分類 分類依據(jù)包括病毒形態(tài)、毒粒結(jié)構(gòu)、基因組、復(fù)制、化學(xué)組成分類依據(jù)包括病毒形態(tài)、毒粒結(jié)構(gòu)、基因組、復(fù)制、化學(xué)組成在內(nèi)的毒粒性質(zhì)、病毒的抗原性質(zhì)以及生物學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分類。在內(nèi)的毒粒性質(zhì)、病毒的抗原性質(zhì)以及生物學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分類。 ICTV(International Committee on Taxonomy of Virus)批準(zhǔn)批準(zhǔn)的病毒分類系統(tǒng)的病毒分類系統(tǒng)3個(gè)目,個(gè)目, 62個(gè)科,個(gè)科,216個(gè)屬,另加亞病毒感染因子衛(wèi)個(gè)屬,另加亞病毒感染因子衛(wèi)星病毒、類病毒(下分星病毒、類病毒(下分2科科7屬)和朊病毒,共約屬)和朊病毒,共約4000種。種。ldsDNAdsDNA 病毒:病毒:l有尾噬菌體目
23、(下分有尾噬菌體目(下分 3 3 科科 15 15 個(gè)屬)個(gè)屬)l未分目的科:未分目的科:17 17 個(gè)科(下分個(gè)科(下分 47 47 個(gè)個(gè) 屬)屬)lssDNAssDNA 病毒:病毒:l未分目的科:未分目的科:5 5 個(gè)科(下分個(gè)科(下分 17 17 個(gè)個(gè) 屬)屬)RNADNA 逆轉(zhuǎn)錄病毒:逆轉(zhuǎn)錄病毒:未分目的科:未分目的科:5 個(gè)科(下分個(gè)科(下分 19 個(gè)個(gè) 屬)屬)dsRNA 病毒:病毒:未分目的科:未分目的科:6 個(gè)科(下分個(gè)科(下分 22 個(gè)個(gè) 屬)屬)裸露裸露 RNA 病毒:病毒:未分目的科:未分目的科:1 個(gè)科(下分個(gè)科(下分 2 個(gè)個(gè) 屬)屬)ssRNA 病毒:病毒:單分子負(fù)
24、鏈單分子負(fù)鏈 RNA 病毒目(下分病毒目(下分 4 個(gè)科,個(gè)科,14 個(gè)個(gè) 屬)屬)未分目的科:未分目的科:3 個(gè)科(下分個(gè)科(下分 13 個(gè)個(gè) 屬)屬)+ssRNA 病毒:病毒:未分目的科:未分目的科:16 個(gè)科(下分個(gè)科(下分 73 個(gè)個(gè) 屬)屬)套病毒目(下分套病毒目(下分 2 個(gè)科,個(gè)科,3 個(gè)個(gè) 屬)屬)第三節(jié)第三節(jié) 病毒的復(fù)制病毒的復(fù)制病毒生長繁殖的特點(diǎn):病毒生長繁殖的特點(diǎn):嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生物,只能在活細(xì)胞內(nèi)繁殖。嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生物,只能在活細(xì)胞內(nèi)繁殖。毒粒毒粒宿主細(xì)胞宿主細(xì)胞有繁殖性的病毒基因組有繁殖性的病毒基因組具有感染性的毒粒消失具有感染性的毒粒消失病毒基因組復(fù)制、表達(dá)病毒基因組
25、復(fù)制、表達(dá)病毒核酸和蛋白質(zhì)病毒核酸和蛋白質(zhì)裝配形成具有感染性的毒粒裝配形成具有感染性的毒粒釋放至細(xì)胞外釋放至細(xì)胞外原料;原料;能量;能量;生物合成場所;生物合成場所;一、病毒的復(fù)制周期一、病毒的復(fù)制周期1、一步生長曲線(、一步生長曲線(one step growth curve)1939年,年,Max Delbruck & Emory Ellis, E. coli / bacteriopage, 該實(shí)驗(yàn)標(biāo)志著該實(shí)驗(yàn)標(biāo)志著分子病毒學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的建立。分子病毒學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的建立。Max Delbruck因此榮獲因此榮獲1969年年Nobel Prize1、用噬菌體的稀釋
26、液感染高濃度的宿主細(xì)胞;、用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細(xì)胞;2、數(shù)分鐘后,加入抗噬菌體的抗血清(、數(shù)分鐘后,加入抗噬菌體的抗血清(中和未吸附的噬菌體中和未吸附的噬菌體););3、將上述混合物大量稀釋,終止抗血清的作用和防止新釋放的噬、將上述混合物大量稀釋,終止抗血清的作用和防止新釋放的噬菌體感染其它細(xì)胞;菌體感染其它細(xì)胞;4、保溫培養(yǎng)并定期檢測培養(yǎng)物中的噬菌體效價(jià)(、保溫培養(yǎng)并定期檢測培養(yǎng)物中的噬菌體效價(jià)(對噬菌體含量進(jìn)對噬菌體含量進(jìn)行計(jì)數(shù)行計(jì)數(shù)););5、以感染時(shí)間為橫坐標(biāo),病毒的感染效價(jià)為縱坐標(biāo),繪出病毒特、以感染時(shí)間為橫坐標(biāo),病毒的感染效價(jià)為縱坐標(biāo),繪出病毒特征性的繁殖曲線。征性的繁
27、殖曲線。噬菌體復(fù)制(繁殖):噬菌體復(fù)制(繁殖):(一步生長曲線)(一步生長曲線)1、吸附期;、吸附期;游離的噬菌體吸附到宿主細(xì)胞游離的噬菌體吸附到宿主細(xì)胞2、潛伏期;、潛伏期;從噬菌體吸附到細(xì)胞到釋放從噬菌體吸附到細(xì)胞到釋放出新噬菌體的最短時(shí)期出新噬菌體的最短時(shí)期3、裂解期;、裂解期;隨著菌體不斷破裂,新噬菌體隨著菌體不斷破裂,新噬菌體數(shù)目增加,直到最高值數(shù)目增加,直到最高值1、一步生長曲線(、一步生長曲線(one step growth curve)裂解量:裂解量:每個(gè)受染細(xì)胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒的平均數(shù)目。每個(gè)受染細(xì)胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒的平均數(shù)目。l一步生長曲線是指能定量描述烈性噬菌體生
28、長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲一步生長曲線是指能定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線線。通過測定噬菌體侵染和成熟病毒體釋放的時(shí)間間隔測定噬菌體侵染和成熟病毒體釋放的時(shí)間間隔, , 用用以估計(jì)每個(gè)被侵染的細(xì)胞釋放出來的新的噬菌體粒子的數(shù)量。以估計(jì)每個(gè)被侵染的細(xì)胞釋放出來的新的噬菌體粒子的數(shù)量。l 將高濃度的敏感菌培養(yǎng)物與適量相應(yīng)的噬菌體懸液相混合一將高濃度的敏感菌培養(yǎng)物與適量相應(yīng)的噬菌體懸液相混合一定時(shí)間。以離心或加入抗病毒血清除去過量的游離噬菌體,定時(shí)間。以離心或加入抗病毒血清除去過量的游離噬菌體,把經(jīng)過上述處理的菌懸液進(jìn)行高倍稀釋,以免發(fā)生第二次吸把經(jīng)過上述處理的菌懸液進(jìn)行高倍稀釋,以免發(fā)生第二次吸附和感染
29、,致使每個(gè)菌體只含有一噬菌體,培養(yǎng)后每隔一定附和感染,致使每個(gè)菌體只含有一噬菌體,培養(yǎng)后每隔一定時(shí)間取樣,接種于敏感菌培養(yǎng)物中培養(yǎng),通過固體培養(yǎng)物表時(shí)間取樣,接種于敏感菌培養(yǎng)物中培養(yǎng),通過固體培養(yǎng)物表面噬菌斑的多少,就可測知每個(gè)噬菌體感染細(xì)菌后釋放的新面噬菌斑的多少,就可測知每個(gè)噬菌體感染細(xì)菌后釋放的新的噬菌體數(shù)目,再以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo),以噬菌斑數(shù)為縱座的噬菌體數(shù)目,再以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo),以噬菌斑數(shù)為縱座標(biāo)作圖,繪成的曲線即為噬菌體的一步生長曲線。標(biāo)作圖,繪成的曲線即為噬菌體的一步生長曲線。2 侵入侵入3 脫殼脫殼4 mRNA的轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄5 早期蛋白質(zhì)翻譯早期蛋白質(zhì)翻譯6 DNA的復(fù)制的復(fù)制7
30、 mRNA的轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄8 晚期蛋白質(zhì)的翻譯晚期蛋白質(zhì)的翻譯9 毒粒的裝配毒粒的裝配10 釋放釋放1 吸附吸附2、病毒的復(fù)制周期、病毒的復(fù)制周期吸附吸附侵入侵入早期:病毒特異性酶的合成早期:病毒特異性酶的合成病毒核酸復(fù)制病毒核酸復(fù)制病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)合成病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)合成裝配裝配釋放釋放病毒大分子合成病毒大分子合成以以噬菌體噬菌體代表,介紹各種代表,介紹各種病毒(動(dòng)植病毒、噬菌體)病毒(動(dòng)植病毒、噬菌體)復(fù)制周期各個(gè)階段的特點(diǎn)。復(fù)制周期各個(gè)階段的特點(diǎn)。l感染真核細(xì)胞的感染真核細(xì)胞的DNADNA病毒的復(fù)制過程病毒的復(fù)制過程吸附吸附侵入侵入脫殼,脫出的脫殼,脫出的DNADNA向核內(nèi)移動(dòng)向核內(nèi)移動(dòng)轉(zhuǎn)錄早期
31、轉(zhuǎn)錄早期mRNAmRNA翻譯翻譯“早期蛋白質(zhì)早期蛋白質(zhì)”, ( (主要是一些酶主要是一些酶) ) 復(fù)制子代復(fù)制子代DNA, DNA, 以子代以子代DNADNA為模板轉(zhuǎn)錄后期為模板轉(zhuǎn)錄后期mRNAmRNA帶有遺傳信息的后期帶有遺傳信息的后期mRNAmRNA在細(xì)胞質(zhì)中移動(dòng)并轉(zhuǎn)譯病毒蛋在細(xì)胞質(zhì)中移動(dòng)并轉(zhuǎn)譯病毒蛋白質(zhì)白質(zhì)( (結(jié)構(gòu)蛋白結(jié)構(gòu)蛋白) )合成的病毒蛋白質(zhì)向核內(nèi)移動(dòng)合成的病毒蛋白質(zhì)向核內(nèi)移動(dòng)病毒病毒DNADNA和蛋白質(zhì)在細(xì)胞核中組裝成成熟的病毒粒子和蛋白質(zhì)在細(xì)胞核中組裝成成熟的病毒粒子宿主細(xì)胞崩解,病毒釋放宿主細(xì)胞崩解,病毒釋放l感染真核細(xì)胞的感染真核細(xì)胞的RNARNA病毒的復(fù)制過程病毒的復(fù)制
32、過程吸附;吸附; 侵入;侵入; 脫殼;脫殼; 初期轉(zhuǎn)譯初期轉(zhuǎn)譯RNARNA多聚酶多聚酶, , 合成細(xì)胞代謝的抑制物;合成細(xì)胞代謝的抑制物; 形成復(fù)制型;形成復(fù)制型; 形成復(fù)制中間型;形成復(fù)制中間型; 形成子代形成子代RNARNA; 轉(zhuǎn)譯后期蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)譯后期蛋白質(zhì)( (合成病毒蛋白質(zhì)合成病毒蛋白質(zhì)) ); 子代子代RNARNA與病毒蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中組裝成病毒粒子:與病毒蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中組裝成病毒粒子:釋放。釋放。 1、吸、吸 附附 吸附是病毒表面蛋白與細(xì)胞受體特異性的結(jié)合,導(dǎo)致病毒吸附是病毒表面蛋白與細(xì)胞受體特異性的結(jié)合,導(dǎo)致病毒附著與細(xì)胞表面,這是病毒感染的第一步。附著與細(xì)胞表面,這是病毒感染的
33、第一步。(1)病毒吸附蛋白()病毒吸附蛋白(viral attachment protein,VAP) 能夠特異性地識(shí)別細(xì)胞受體并與之結(jié)合的毒粒表面的結(jié)構(gòu)能夠特異性地識(shí)別細(xì)胞受體并與之結(jié)合的毒粒表面的結(jié)構(gòu)蛋白分子。蛋白分子。 (2)細(xì)胞受體()細(xì)胞受體(receptor) 指能被病毒吸附蛋白特異性地識(shí)別并與之結(jié)合,介導(dǎo)病指能被病毒吸附蛋白特異性地識(shí)別并與之結(jié)合,介導(dǎo)病毒進(jìn)入細(xì)胞,啟動(dòng)感染發(fā)生的細(xì)胞表面組分毒進(jìn)入細(xì)胞,啟動(dòng)感染發(fā)生的細(xì)胞表面組分病毒吸附蛋白與細(xì)胞受體間的結(jié)合力來源于空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性,相病毒吸附蛋白與細(xì)胞受體間的結(jié)合力來源于空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性,相互間的電荷、氫鍵、疏水性相互作用及范得
34、華力?;ラg的電荷、氫鍵、疏水性相互作用及范得華力。2、侵、侵 入入動(dòng)物病毒的侵入機(jī)制:動(dòng)物病毒的侵入機(jī)制:1) 完整病毒穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,如呼腸孤病毒。完整病毒穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,如呼腸孤病毒。2) 利用細(xì)胞的內(nèi)吞功能進(jìn)入細(xì)胞,又稱病毒入胞,如痘病毒利用細(xì)胞的內(nèi)吞功能進(jìn)入細(xì)胞,又稱病毒入胞,如痘病毒3) 毒粒包膜與細(xì)胞質(zhì)膜融合,病毒的內(nèi)部組分釋放到細(xì)胞質(zhì)毒粒包膜與細(xì)胞質(zhì)膜融合,病毒的內(nèi)部組分釋放到細(xì)胞質(zhì)中,如流感病毒。中,如流感病毒。4) 毒粒與宿主細(xì)胞結(jié)合后,殼體蛋白發(fā)生重排,核酸浸入細(xì)毒粒與宿主細(xì)胞結(jié)合后,殼體蛋白發(fā)生重排,核酸浸入細(xì)胞,如脊髓灰質(zhì)炎病毒。胞,如脊髓灰質(zhì)炎病毒。植物病毒的
35、侵入機(jī)制:植物病毒的侵入機(jī)制:從植物傷口侵入和通過帶病毒昆蟲刺吸從植物傷口侵入和通過帶病毒昆蟲刺吸式口器感染式口器感染噬菌體的侵入機(jī)制:噬菌體的侵入機(jī)制:尾鞘收縮,將病毒核酸注入細(xì)胞,或從細(xì)尾鞘收縮,將病毒核酸注入細(xì)胞,或從細(xì)菌菌毛進(jìn)入菌菌毛進(jìn)入3 3、脫、脫 殼殼病毒侵入后,病毒的包膜和或殼體除去而釋放出病毒核酸病毒侵入后,病毒的包膜和或殼體除去而釋放出病毒核酸1) 靠胞飲方式進(jìn)入的病毒,靠細(xì)胞內(nèi)的溶酶體分泌的將靠胞飲方式進(jìn)入的病毒,靠細(xì)胞內(nèi)的溶酶體分泌的將殼體和包膜降解去掉。殼體和包膜降解去掉。2) 尾鞘收縮注入核酸進(jìn)入寄主細(xì)胞的病毒在吸附和侵入尾鞘收縮注入核酸進(jìn)入寄主細(xì)胞的病毒在吸附和侵
36、入時(shí)殼體就已破損,留在寄主細(xì)胞外。不存在侵入后的時(shí)殼體就已破損,留在寄主細(xì)胞外。不存在侵入后的脫殼問題。脫殼問題。3) 還有的病毒靠寄主細(xì)胞在病毒感染后合成的脫殼酶幫還有的病毒靠寄主細(xì)胞在病毒感染后合成的脫殼酶幫助脫殼。助脫殼。4、生物合成、生物合成生物合成包括:核酸的復(fù)制、生物合成包括:核酸的復(fù)制、mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成早期轉(zhuǎn)錄早期轉(zhuǎn)錄:發(fā)生在核酸復(fù)制以前的轉(zhuǎn)錄為早期轉(zhuǎn)錄,所轉(zhuǎn)錄:發(fā)生在核酸復(fù)制以前的轉(zhuǎn)錄為早期轉(zhuǎn)錄,所轉(zhuǎn)錄的基因?yàn)樵缙诨颉5幕驗(yàn)樵缙诨?。晚期轉(zhuǎn)錄晚期轉(zhuǎn)錄:病毒核酸復(fù)制開始或復(fù)制以后進(jìn)行的轉(zhuǎn)錄為晚期:病毒核酸復(fù)制開始或復(fù)制以后進(jìn)行的轉(zhuǎn)錄為晚期轉(zhuǎn)錄,
37、所轉(zhuǎn)錄的基因?yàn)橥砥诨?。轉(zhuǎn)錄,所轉(zhuǎn)錄的基因?yàn)橥砥诨?。不同核酸類型的病毒轉(zhuǎn)錄不同核酸類型的病毒轉(zhuǎn)錄mRNA的方式的方式A (+) RNA can be translated into viral protein. (+) and (-) strands are complementary. 5 5、裝、裝 配配 在病毒感染的細(xì)胞內(nèi),新合成的毒粒結(jié)構(gòu)組分以一定的方在病毒感染的細(xì)胞內(nèi),新合成的毒粒結(jié)構(gòu)組分以一定的方式結(jié)合,組裝成完整的新的病毒粒子的過程為裝配。式結(jié)合,組裝成完整的新的病毒粒子的過程為裝配。 大多數(shù)大多數(shù)DNA病毒核酸在寄主核內(nèi)復(fù)制病毒核酸在寄主核內(nèi)復(fù)制,蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中蛋白質(zhì)在細(xì)胞
38、質(zhì)中合成。合成好的蛋白質(zhì)再運(yùn)到核中組裝合成。合成好的蛋白質(zhì)再運(yùn)到核中組裝. 大多數(shù)大多數(shù)RNA病毒病毒,核酸的復(fù)制核酸的復(fù)制,蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成,病毒的病毒的裝配均在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行裝配均在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行. 6 6、釋、釋 放放成熟病毒粒子從被感染細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外的過程稱為釋放。成熟病毒粒子從被感染細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外的過程稱為釋放。 動(dòng)物病毒的釋放:動(dòng)物病毒的釋放: a. 通過細(xì)胞溶解或局部破裂釋放。通過細(xì)胞溶解或局部破裂釋放。 b. 通過通過“出芽出芽”釋放,一些有包膜的病毒靠此方式獲得包膜。釋放,一些有包膜的病毒靠此方式獲得包膜。 c. 沿核周與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相通部位從細(xì)胞內(nèi)逐漸釋放。沿核周與內(nèi)
39、質(zhì)網(wǎng)相通部位從細(xì)胞內(nèi)逐漸釋放。 d. 通過細(xì)胞間的接觸擴(kuò)散。通過細(xì)胞間的接觸擴(kuò)散。 植物病毒的釋放:植物病毒的釋放: a. 靠細(xì)胞破裂??考?xì)胞破裂。 b. 靠胞間連絲在細(xì)胞間傳播??堪g連絲在細(xì)胞間傳播。 細(xì)菌病毒(噬菌體):細(xì)菌病毒(噬菌體): a. 細(xì)胞裂解。細(xì)胞裂解。 b. 靠性菌毛從一個(gè)細(xì)菌傳到另一個(gè)細(xì)菌??啃跃珡囊粋€(gè)細(xì)菌傳到另一個(gè)細(xì)菌。 第四節(jié)第四節(jié) 噬噬 菌菌 體體 寄生在細(xì)菌和放線菌上的病毒稱為寄生在細(xì)菌和放線菌上的病毒稱為噬菌體噬菌體或者叫或者叫細(xì)菌病毒細(xì)菌病毒,其所含核酸多數(shù)為其所含核酸多數(shù)為DNA,少數(shù)為少數(shù)為RNA。 寄生在真菌上的病毒叫噬真菌體或叫寄生在真菌上的病毒叫
40、噬真菌體或叫真菌病毒真菌病毒,為雙鏈,為雙鏈RNA病毒。病毒。 寄生在藍(lán)細(xì)菌上的病毒叫寄生在藍(lán)細(xì)菌上的病毒叫噬藍(lán)藻體噬藍(lán)藻體。都是雙鏈。都是雙鏈DNA病毒。病毒。 噬菌體的發(fā)現(xiàn):噬菌體的發(fā)現(xiàn):1915 陶爾特;陶爾特;1917 第赫蘭爾第赫蘭爾 陶爾特陶爾特第赫蘭爾現(xiàn)象第赫蘭爾現(xiàn)象一、噬菌體的形態(tài)一、噬菌體的形態(tài)蝌蚪形、球形、和絲狀蝌蚪形、球形、和絲狀類類型型形態(tài)特征形態(tài)特征核核 酸酸類類 型型 噬菌體舉例噬菌體舉例 寄寄 主主 種種 類類 1具六角形頭部及具六角形頭部及伸縮性長尾伸縮性長尾 dsDNA T2,T4,T6 E.coli.,Pseudomonas, Bacillus, 粘球菌,沙
41、門氏菌粘球菌,沙門氏菌2 具六角形頭部及具六角形頭部及不伸縮的長尾不伸縮的長尾 dsDNA T1,T5 E.coli, Pseudomonas,棒桿菌棒桿菌,鏈霉菌鏈霉菌 3具六角形頭部及具六角形頭部及不伸縮短尾不伸縮短尾 dsDNA T3,T7,P P22 E.coli, PseudomonasBacillus, 土壤桿菌土壤桿菌,沙門氏菌沙門氏菌 4 無尾,六角形頭無尾,六角形頭部的頂點(diǎn)殼粒大部的頂點(diǎn)殼粒大 ssDNA X174,S13 E.coli, 沙門氏菌等沙門氏菌等 5 無尾,六角形頭無尾,六角形頭部頂點(diǎn)殼粒小部頂點(diǎn)殼粒小 ssRNA R17,f2,MS2,Q E.coli, Ps
42、eudomonas.柄細(xì)菌柄細(xì)菌等等 6無頭尾之分,病無頭尾之分,病毒粒子線狀毒粒子線狀 ssDNA Fd,M13,f1,Vb E.coli, Pseudomonas 蛋白質(zhì)外殼蛋白質(zhì)外殼核核 酸酸頭頭 部部 頸頸 圈圈 尾尾 髓髓尾尾 鞘鞘尾尾 釘釘尾尾 板板尾尾 絲絲尾尾 部部二、噬菌體的結(jié)構(gòu):二、噬菌體的結(jié)構(gòu):T-系噬菌體系噬菌體研究得最廣泛而研究得最廣泛而又深入的噬菌體,按發(fā)現(xiàn)的先后順又深入的噬菌體,按發(fā)現(xiàn)的先后順序從序從T1-T7編號(hào),后來發(fā)現(xiàn)其中偶編號(hào),后來發(fā)現(xiàn)其中偶數(shù)者的形態(tài)都相同(蝌蚪形收縮性數(shù)者的形態(tài)都相同(蝌蚪形收縮性長尾),故統(tǒng)稱長尾),故統(tǒng)稱T偶數(shù)噬菌體。偶數(shù)噬菌體。烈
43、性噬菌體、溫和噬菌體烈性噬菌體、溫和噬菌體溫和噬菌體溫和噬菌體( (temperate phrage or lysogenic phages )某某些噬菌體感染宿主細(xì)胞后,將其核酸或整合到宿主細(xì)胞些噬菌體感染宿主細(xì)胞后,將其核酸或整合到宿主細(xì)胞染色體上染色體上, , 或游離在宿主細(xì)胞質(zhì)中并隨宿主細(xì)胞的分裂或游離在宿主細(xì)胞質(zhì)中并隨宿主細(xì)胞的分裂把噬菌體的核酸傳給子細(xì)胞。這種感染宿主細(xì)胞后不引把噬菌體的核酸傳給子細(xì)胞。這種感染宿主細(xì)胞后不引起宿主細(xì)胞迅速裂解的噬菌體稱為溫和噬菌體。起宿主細(xì)胞迅速裂解的噬菌體稱為溫和噬菌體。烈性噬菌體(烈性噬菌體(virulent phage)感染細(xì)胞后感染細(xì)胞后,
44、 ,能在寄能在寄主細(xì)胞內(nèi)增殖,產(chǎn)生大量子代噬菌體并引起細(xì)菌裂解的主細(xì)胞內(nèi)增殖,產(chǎn)生大量子代噬菌體并引起細(xì)菌裂解的噬菌體。噬菌體。溶原細(xì)胞溶原細(xì)胞(lysogenic cells) 含有溫和噬菌體的細(xì)胞稱為溶原細(xì)菌含有溫和噬菌體的細(xì)胞稱為溶原細(xì)菌( (或溶原細(xì)胞或溶原細(xì)胞) )。 整合在宿主染色體上的噬菌體整合在宿主染色體上的噬菌體DNADNA稱為稱為前噬菌體前噬菌體。溶源性感染對細(xì)胞的影響:溶源性感染對細(xì)胞的影響:其它同類噬菌體可以再次感染該細(xì)胞,但不增殖,也不導(dǎo)致溶其它同類噬菌體可以再次感染該細(xì)胞,但不增殖,也不導(dǎo)致溶源性細(xì)菌裂解。源性細(xì)菌裂解。原噬菌體引起的溶源性細(xì)菌除免疫性外的其他的表形
45、改變,包原噬菌體引起的溶源性細(xì)菌除免疫性外的其他的表形改變,包括溶源菌細(xì)胞表面性質(zhì)的改變和致病性轉(zhuǎn)變被稱為括溶源菌細(xì)胞表面性質(zhì)的改變和致病性轉(zhuǎn)變被稱為溶源轉(zhuǎn)變?nèi)茉崔D(zhuǎn)變(lysogenic conversion)。溶源菌中的溫和噬菌體基因組:不影響細(xì)胞的繁殖功能,溶源菌中的溫和噬菌體基因組:不影響細(xì)胞的繁殖功能, 但可能引起但可能引起其他其他的細(xì)胞變化。的細(xì)胞變化。(1)免疫性免疫性(2)溶源轉(zhuǎn)變?nèi)茉崔D(zhuǎn)變白喉?xiàng)U菌白喉?xiàng)U菌只有在含有特定類型的原噬菌體時(shí)才能產(chǎn)只有在含有特定類型的原噬菌體時(shí)才能產(chǎn)生白喉毒素,引起被感染機(jī)體發(fā)病。生白喉毒素,引起被感染機(jī)體發(fā)病。噬菌體的溶源性循環(huán)噬菌體的溶源性循環(huán)裂解裂
46、解循環(huán)循環(huán)溶源性溶源性循環(huán)循環(huán)細(xì)菌染色體細(xì)菌染色體噬菌體噬菌體DNA噬菌體吸噬菌體吸附、侵入附、侵入噬菌體噬菌體DNA環(huán)化、環(huán)化、進(jìn)入循環(huán)進(jìn)入循環(huán) 細(xì)胞裂解,細(xì)胞裂解,噬菌體釋放噬菌體釋放新的噬菌體復(fù)新的噬菌體復(fù)制、組裝制、組裝噬菌體噬菌體DNA整合到細(xì)菌整合到細(xì)菌染色體中成為原噬菌體染色體中成為原噬菌體原噬菌體原噬菌體溶源細(xì)菌正溶源細(xì)菌正常復(fù)制常復(fù)制偶爾,原噬菌體偶爾,原噬菌體從細(xì)菌染色體上從細(xì)菌染色體上脫落下來從新進(jìn)脫落下來從新進(jìn)入循環(huán)入循環(huán)溶源細(xì)菌的基本特性:溶源細(xì)菌的基本特性: (1 1)自發(fā)消除)自發(fā)消除 (2)自發(fā)、誘發(fā)裂解)自發(fā)、誘發(fā)裂解 (3)可復(fù)愈性)可復(fù)愈性 (4)免疫性)
47、免疫性 (5)溶源轉(zhuǎn)變)溶源轉(zhuǎn)變可以自發(fā)地消除噬菌體可以自發(fā)地消除噬菌體DNADNA可以自發(fā)或人工誘發(fā)變?yōu)榱倚允删w可以自發(fā)或人工誘發(fā)變?yōu)榱倚允删wvirulent phage virulent phage 溶原細(xì)胞可失去噬菌體的核酸后復(fù)愈溶原細(xì)胞可失去噬菌體的核酸后復(fù)愈 溶原細(xì)菌對同源噬菌體的感染具有免疫性溶原細(xì)菌對同源噬菌體的感染具有免疫性 某些溶原細(xì)菌可以合成特殊的代謝產(chǎn)物某些溶原細(xì)菌可以合成特殊的代謝產(chǎn)物, , 如白喉?xiàng)U菌只如白喉?xiàng)U菌只有在被噬菌體感染形成溶原細(xì)菌后才能產(chǎn)生白喉毒素。有在被噬菌體感染形成溶原細(xì)菌后才能產(chǎn)生白喉毒素。 l噬菌體噬菌體DNA通常整合到宿主染色體上,并有特定通
48、常整合到宿主染色體上,并有特定位點(diǎn),在位點(diǎn),在bio和和gal基因之間。基因之間。 lPI 噬菌體感染宿主后主要游離在細(xì)胞質(zhì)中,如果整噬菌體感染宿主后主要游離在細(xì)胞質(zhì)中,如果整合到宿主染色體上也是隨機(jī)插入,沒有特定位點(diǎn)。合到宿主染色體上也是隨機(jī)插入,沒有特定位點(diǎn)。 l真菌病毒真菌病毒Mycoviruses:dsRNAl藻類病毒藻類病毒Phycoviruses:dsDNAl原生動(dòng)物病毒原生動(dòng)物病毒l噬菌體的應(yīng)用噬菌體的應(yīng)用l用于鑒定未知細(xì)菌用于鑒定未知細(xì)菌 l用于治療某些傳染性疾病用于治療某些傳染性疾病l利用噬菌體可以檢驗(yàn)由種子攜帶的植物病原菌利用噬菌體可以檢驗(yàn)由種子攜帶的植物病原菌l測定輻射劑
49、量測定輻射劑量l在分子生物學(xué)研究方面的應(yīng)用在分子生物學(xué)研究方面的應(yīng)用l通過對大腸桿菌噬菌體侵染過程的研究,闡明了遺傳學(xué)的基通過對大腸桿菌噬菌體侵染過程的研究,闡明了遺傳學(xué)的基本問題。本問題。l是基因工程的重要載體。是基因工程的重要載體。l噬菌體的防治噬菌體的防治l選育抗噬菌體的突變株選育抗噬菌體的突變株l定義:感染植物的病毒。定義:感染植物的病毒。l引起的癥狀:引起的癥狀: 葉綠體受到破壞而引起的花葉、黃化、紅化等葉綠體受到破壞而引起的花葉、黃化、紅化等植株矮化、從簇、畸形等植株矮化、從簇、畸形等形成枯斑、壞死等。形成枯斑、壞死等。l特點(diǎn)特點(diǎn)粒子形態(tài)多為桿狀粒子形態(tài)多為桿狀 核酸主要為單鏈核酸
50、主要為單鏈 RNA RNA 感染的?;圆粡?qiáng)感染的?;圆粡?qiáng), , 一種病毒可感染不同科、屬的植物一種病毒可感染不同科、屬的植物 混合感染常見混合感染常見, , 即一種植物可被多種病毒感染即一種植物可被多種病毒感染 在感染宿主細(xì)胞內(nèi)由病毒粒子堆疊成在感染宿主細(xì)胞內(nèi)由病毒粒子堆疊成結(jié)晶性內(nèi)含體結(jié)晶性內(nèi)含體或者是由病毒或者是由病毒粒子與細(xì)胞組分形成粒子與細(xì)胞組分形成非結(jié)晶性內(nèi)含體非結(jié)晶性內(nèi)含體。l單鏈或雙鏈,單鏈或雙鏈, DNA DNA (天花)或天花)或 RNARNA(流感)。流感)。l有的具有包膜,有的不具有包膜。有的具有包膜,有的不具有包膜。l多為球狀,大小變化很大。多為球狀,大小變化很大。
51、l有的動(dòng)物病毒參與了正常動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化成癌細(xì)胞的過程。有的動(dòng)物病毒參與了正常動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化成癌細(xì)胞的過程。l人類疾病:人類疾?。?80% 80%的傳染病由病毒引起。如:天花,流感,肝炎,麻疹,的傳染病由病毒引起。如:天花,流感,肝炎,麻疹,脊髓灰質(zhì)炎,愛滋病等脊髓灰質(zhì)炎,愛滋病等l畜禽疾病:口蹄疫,狂犬病,瘋牛病,豬瘟,雞新城疫等,其畜禽疾病:口蹄疫,狂犬病,瘋牛病,豬瘟,雞新城疫等,其中前三種為人畜共患。中前三種為人畜共患。動(dòng)物病毒的侵入AIDS(acquired immune deficiency syndrome)l最早分離到最早分離到HIVHIV的人是法國的盧克蒙塔博士。的人是法國的盧克蒙
52、塔博士。19831983年,他在年,他在ScienceScience報(bào)道從同性戀人血清中分離到新的逆轉(zhuǎn)錄病毒。報(bào)道從同性戀人血清中分離到新的逆轉(zhuǎn)錄病毒。19861986年,年,WHOWHO定名為定名為HIV HIV (human immuno deficiency virus) lHIV HIV 是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒,感染并殺死是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒,感染并殺死T T4 4淋巴細(xì)胞。球形,直徑淋巴細(xì)胞。球形,直徑約約100 100 nmnm,有包膜與刺突。有包膜與刺突。l全球:全球:500500萬感染者,萬感染者,40004000萬攜帶者,非洲比例最高,博茨瓦萬攜帶者,非洲比例最高,博茨瓦那,那,10%
53、10%。l中國:中國:2020萬感染者,萬感染者,100100萬攜帶者。萬攜帶者。傳播途徑傳播途徑l輸血與血制品輸血與血制品l母乳傳播母乳傳播l性生活傳播性生活傳播l防治防治l潔身自好,嚴(yán)格控制血制品潔身自好,嚴(yán)格控制血制品l雞尾酒療法(何大一),雞尾酒療法(何大一), 死亡率減半死亡率減半口蹄疫口蹄疫(FMD:foot and mouth disease)病毒特點(diǎn)病毒特點(diǎn)l烈性傳染性烈性傳染性RNA病毒。病毒。l主要感染牛、羊、豬等偶蹄動(dòng)物,人畜共患,春季最勝,使主要感染牛、羊、豬等偶蹄動(dòng)物,人畜共患,春季最勝,使仔豬大批死亡,成年動(dòng)物感染較少,不致死,掉膘、少奶、仔豬大批死亡,成年動(dòng)物感染
54、較少,不致死,掉膘、少奶、少毛。少毛。l對日光、熱、酸、堿敏感。對日光、熱、酸、堿敏感。l癥狀癥狀l體溫升高體溫升高,精神不振,食欲降低,口腔、鼻吻部、蹄部產(chǎn)生精神不振,食欲降低,口腔、鼻吻部、蹄部產(chǎn)生水皰和潰爛。水皰和潰爛。l傳播傳播l呼出氣體、排泄物。呼出氣體、排泄物。l預(yù)防預(yù)防l檢疫、封鎖檢疫、封鎖l消毒:消毒: 1-2% 1-2%火堿、火堿、3-5%3-5%福爾馬林、福爾馬林、0.2-0.3%0.2-0.3%過氧乙酸過氧乙酸l注射疫苗注射疫苗l危害危害l無食品安全問題,人感染無食品安全問題,人感染4040例,較輕。例,較輕。l對畜牧業(yè)危害遠(yuǎn)大于瘋牛病。對畜牧業(yè)危害遠(yuǎn)大于瘋牛病。l英國:
55、至英國:至2001.42001.4屠宰屠宰220220萬頭牛、羊、豬。萬頭牛、羊、豬。l中國:只進(jìn)口魚粉一種動(dòng)物性蛋白原料。中國:只進(jìn)口魚粉一種動(dòng)物性蛋白原料。瘋牛病(瘋牛?。∕CD:mad cow disease)l是牛海綿狀腦病的俗稱,瘋牛病的病因是朊病毒,是牛海綿狀腦病的俗稱,瘋牛病的病因是朊病毒,朊病毒(朊病毒(PrionPrion ProteinProtein,PrPPrPcscs)是一種糖蛋白,是一種糖蛋白,分子量分子量27-30 27-30 kdkd,極端耐熱,抵抗對各種射線及消極端耐熱,抵抗對各種射線及消毒劑,毒劑,1321320 0C 3C 3小時(shí)或小時(shí)或2 2 mol/Lm
56、ol/L的的NaOHNaOH 12 12小時(shí)才失活。小時(shí)才失活。l傳染性:人畜共患,人庫魯病、克雅病、羊癢病等。傳染性:人畜共患,人庫魯病、克雅病、羊癢病等。l癥狀:癡呆、震顫不穩(wěn)、智力減退,腦海綿狀病變,癥狀:癡呆、震顫不穩(wěn)、智力減退,腦海綿狀病變,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損。中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損。l危害:危害:1985.4英國首先報(bào)道,已有英國首先報(bào)道,已有18萬頭牛發(fā)病。萬頭牛發(fā)病。100多人吃多人吃牛肉感染新型克雅病。牛肉感染新型克雅病。l傳播:吃病牛肉,主要方式傳播:吃病牛肉,主要方式l自然界中存活自然界中存活 草草 羊羊 人人l防治對策:進(jìn)口檢疫,封、殺。禁止以反芻動(dòng)物蛋白的飼料喂防治對策:進(jìn)口
57、檢疫,封、殺。禁止以反芻動(dòng)物蛋白的飼料喂養(yǎng)反芻動(dòng)物。養(yǎng)反芻動(dòng)物。l發(fā)現(xiàn)與研究發(fā)現(xiàn)與研究l1950年年Daniel Carleton Gajdusek調(diào)查大洋州巴布亞新幾內(nèi)亞的福調(diào)查大洋州巴布亞新幾內(nèi)亞的福爾族爾族(Fore),婦女多發(fā)婦女多發(fā)Kuru病,步不穩(wěn),陣攣,病,步不穩(wěn),陣攣,1-2 年死亡。年死亡。1956年,腦組織切片,海綿狀病變,腦漿內(nèi)空泡。隨后轉(zhuǎn)接其他年,腦組織切片,海綿狀病變,腦漿內(nèi)空泡。隨后轉(zhuǎn)接其他靈長類動(dòng)物,證實(shí)病原相同靈長類動(dòng)物,證實(shí)病原相同 l1976年年D. C. Gajdusek獲得獲得Nobel prizel1982年,美國神經(jīng)生物學(xué)家年,美國神經(jīng)生物學(xué)家Sta
58、nley Prusiner提出朊病毒是病原,提出朊病毒是病原,是一種蛋白(朊蛋白);是一種蛋白(朊蛋白);1997年,獲得年,獲得Nobel prize。lSerious actue respiratory syndrome (SARS)lCanine corona virus (Coronaviridae)lAtypical pneumoniaslH5N1 病毒與人類流感病毒的病毒與人類流感病毒的4500個(gè)氨基酸個(gè)氨基酸只有只有19個(gè)不同,一旦差異性降到個(gè)不同,一旦差異性降到10個(gè)氨基酸,禽個(gè)氨基酸,禽流感就會(huì)突變。流感就會(huì)突變。l世界衛(wèi)生組織指出,目前的世界衛(wèi)生組織指出,目前的H5N1型病
59、毒株僅能型病毒株僅能通過禽類傳染給人體,但是這種病毒很容易變種,通過禽類傳染給人體,但是這種病毒很容易變種,必須防范它與人類的流行性感冒病毒株接觸進(jìn)行必須防范它與人類的流行性感冒病毒株接觸進(jìn)行基因重組,突變出基因重組,突變出“人傳人人傳人”的禽流感病毒。禽的禽流感病毒。禽流感一旦在人際傳播,數(shù)億人生命將受到威脅。流感一旦在人際傳播,數(shù)億人生命將受到威脅。l昆蟲病毒昆蟲病毒-寄生在昆蟲體內(nèi)的病毒寄生在昆蟲體內(nèi)的病毒 l特點(diǎn)特點(diǎn) 病毒粒子與宿主細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)形成包含體病毒粒子與宿主細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)形成包含體, , 包含體有一包含體有一定的立體形狀定的立體形狀, , 故又稱故又稱多角體多角體。l昆蟲病
60、毒可分為昆蟲病毒可分為: : 核型多角體病毒核型多角體病毒 質(zhì)型多角體病毒質(zhì)型多角體病毒 顆粒體病毒顆粒體病毒 無包含體病毒無包含體病毒 核形多角體病毒(核形多角體病毒(NPV):多個(gè)桿狀病毒粒子封閉在一個(gè)多個(gè)桿狀病毒粒子封閉在一個(gè)多角形包函體中,這種包函體存在于宿主細(xì)胞核中,多角形包函體中,這種包函體存在于宿主細(xì)胞核中,NPV所含的核酸為所含的核酸為dsDNA。 質(zhì)形多角體病毒(質(zhì)形多角體病毒(CPV):近球形的多個(gè)病毒粒子封閉近球形的多個(gè)病毒粒子封閉在一個(gè)多角形的包含體中,這種包含體存在于宿主細(xì)在一個(gè)多角形的包含體中,這種包含體存在于宿主細(xì)胞質(zhì)胞質(zhì)中,中,CPV的核酸是的核酸是dsRNA。
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