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文檔簡介

1、2).硫化物共沉淀法 操作步驟廢液中重金屬的濃度要用水稀釋至1以下。加入Na2S或NaHS溶液,并充分攪拌。加入NaOH溶液,調整pH值至9.09.5。加入FeCl3溶液,調節(jié)pH值至8.0以上,然后放置一夜。用傾析法過濾沉淀,檢查濾液確實不含重金屬。再檢查濾液有無S2-離子。如果含有S2-離子時,用H2O2將其氧化,中和后即可排放。 分析方法 定性分析用檢測箱進行,或用二苯基硫巴腙(即雙硫腙)溶液,檢查有無產生顏色。定量分析則用二苯基硫巴腙吸光光度法或原子吸收光譜分析法(見JIS K 0102)。 備注 除上述的處理方法外

2、,還有碳酸鹽法(可用含碳酸鈉的堿灰漿)、離子交換樹脂法及吸附法(用活性炭)等。4.8  含重金屬的有機類廢液 處理方法 先將妨礙處理重金屬的有機物質,用氧化、吸附等適當?shù)奶幚矸椒ò阉?。然后才把它作無機類廢液處理。1).焚燒法 將含大量有機溶劑廢液及有機物的溶液,進行焚燒處理,保管好殘渣。2).氧化分解法 參照含有機汞廢液的處理方法。3).活性炭吸附法 調整pH值至5左右,加入活性炭粉末,經(jīng)常加以攪拌,經(jīng)23小時后進行過濾(此法適用于處理稀溶液)。4.9  含鋇廢液 處理方法 在廢液

3、中加入Na2SO4溶液,過濾生成的沉淀后,即可排放。4.10  含硼廢液 處理方法 把廢液濃縮,或者用陰離子交換樹脂吸附。對含有重金屬的廢液,按含重金屬廢液的處理方法進行處理。4.11  含氟廢液 處理方法 于廢液中加入消化石灰乳,至廢液充分呈堿性為止,并加以充分攪拌,放置一夜后進行過濾。濾液作含堿廢液處理。此法不能把氟含量降到8ppm以下。要進一步降低氟的濃度時,需用陰離子交換樹脂進行處理。4.12  含氧化劑、還原劑的廢液 注意事項1).原則上將含氧化劑、還原劑的廢液分別收集。但當

4、把它們混合沒有危險性時,也可以把它們收集在一起。2).含鉻酸鹽時可作為含Cr()的廢液處理。3).含重金屬物質時,可作為含重金屬的廢液處理。4).不含有害物質而其濃度在1以下的廢液,把它中和后即可排放。 處理方法 操作步驟1).查明各氧化劑和還原劑,如果將其混合也沒有危險性時,即可一面攪拌,一面將其中一種廢液分次少量加入另一種廢液中,使之反應。2).取出少量反應液,調成酸性,用碘化鉀淀粉試紙進行檢驗。3).試紙變藍時(氧化劑過量):調整pH值至3,加入Na2SO3(用Na2S2O3、FeSO4也可以)溶液,至試紙不變顏色為止。充分攪拌,然后把它放置一夜。4).試紙不變色時(

5、還原劑過量):調整pH值至3,加入H2O2使試紙剛剛變色為止。然后加入少量Na2SO3,把它放置一夜。5).不管哪一種情況,都要用堿將其中和至 pH為 7,并使其含鹽濃度在5以下,才可排放。4.13  含酸、堿、鹽類物質的廢液 注意事項1).原則上將酸、堿、鹽類廢液分別收集。但如果沒有妨礙,可將其互相中和,或用其處理其它的廢液。2).對含重金屬及含氟的廢液,要另外收集處理。3).對黃磷、磷化氫、鹵氧化磷、鹵化磷、硫化磷等的廢液,在堿性情況下,用H2O2將其氧化后,作為磷酸鹽廢液處理。對縮聚磷酸鹽的廢液,用硫酸酸化,然后將其煮沸23小時進行水解處

6、理。4).對其稀溶液,用大量水把它稀釋到1以下的濃度后,即可排放。 處理方法 操作步驟1)查明即使將酸、堿廢液互相混合也沒有危險時,可分次少量將其中一種廢液,加入另一種廢液中。2).用pH試紙(或pH計)檢驗,使加入的酸或堿的廢液至溶液的pH約等于7。3).用水稀釋,使溶液濃度降到5以下,然后把它排放。葛所長 2014-3-24 21:48:075.6  含有機磷的廢液 此類廢液包括:含磷酸、亞磷酸、硫代磷酸及膦酸酯類,磷化氫類以及磷系農藥等物質的廢液。 對其濃度高的廢液進行焚燒處理(因含難于燃燒的物質多,故可與可

7、燃性物質混合進行焚燒)。對濃度低的廢液,經(jīng)水解或溶劑萃取后,用吸附法進行處理。5.7  含有天然及合成高分子化合物的廢液 此類廢液包括:含有聚乙烯、聚乙烯醇、聚苯乙烯、聚二醇等合成高分子化合物,以及蛋白質、木質素、纖維素、淀粉、橡膠等天然高分子化合物的廢液。 對其含有可燃性物質的廢液,用焚燒法處理。而對難以焚燒的物質及含水的低濃度廢液,經(jīng)濃縮后,將其焚燒。但對蛋白質、淀粉等易被微生物分解的物質,其稀溶液可不經(jīng)處理即可排放。 葛所長 2014-3-24 21:46:48注意事項 含烷基汞之類廢液,毒性特別大,處理時必

8、須十分注意。 處理方法(氧化分解法) 用下述處理方法,先將有機汞轉變成無機汞,然后再進行處理。 操作步驟 在500毫升廢液(含汞0.025毫克以下)中,加入濃硝酸60毫升及 6的KMnO4水溶液20毫升,加熱回流二小時。待KMnO4溶液的顏色消失時,把溫度降到60以下,然后加入2毫升KMnO4溶液,再加熱溶液。 分析方法 以烷基汞為對象的定量分析方法有:氣相色譜法(見JISK 0102 44.2.1)和薄層色譜分離二苯基硫巴腙吸光光度法(見JIS K 0102 44.2.2)

9、。全汞的定量分析方法,與上述JIS K 0102 44.1.1所述方法相同。 備注 除上述的處理方法外,還有用NaOCl和NaOH或KMnO4和H2SO4進行氧化,以及用活性炭吸附等方法。4.7  含重金屬的廢液 注意事項1).對含有機物、絡離子及螯合物量大的廢液,要先把它們分解除去(參照含重金屬的有機類廢液的處理方法)。2).含Cr()、CN等物質時,也要預先進行上述處理。3).廢液中含有兩種以上的重金屬時,因其處理的最適宜的pH值各不相同,必須加以注意。 處理方法 原理 把重金屬離

10、子轉變成難溶于水的氫氧化物或硫化物等的鹽類,然后進行共沉淀而除去。1).氫氧化物共沉淀法 操作步驟在廢液中加入FeCl3或Fe2(SO4)3,并加以充分攪拌。將Ca(OH)2制成石灰乳,然后加入上述廢液中,調整 pH至 911(如果pH值過高,沉淀會再溶解)。溶液經(jīng)放置后,過濾沉淀物。檢查濾液確實不含重金屬離子后,才把它中和排放。 備注如果含有螯合物時,往往不產生沉淀。但是,本法可以除去少量的螯合物。按照本法處理,可使Ca、Zn、Fe、Mn、Ni、Cr()、As、Sb、Al、Co、Ag、Sn、Bi、及其它很多重金屬生成氫氧化物沉淀而除去。共沉劑也可以用A

11、l2(SO4)3或ZnCl2等物質。因在強堿性下,兩性金屬的沉淀會發(fā)生溶解。故要注意其最適宜的pH值(兩性金屬沉淀溶解的pH值為:Al3+:8.5;Cr3+:9.2;Sn2+:10.6;Zn2+:11;Pb2+:11。但是,用共沉淀法處理時,由于產生沉淀的 pH值范圍相當寬,因而,在pH值為911的條件下,全都能完全沉淀)。中和劑與其用HaOH,不如用Ca(OH)2為好。因Ca(OH)2可防止兩性金屬的沉淀再溶解,且其沉降性能也較好。如果用碳酸鈉作中和劑,還可使Ca2+、Sr2+、Ba2+等離子生成難溶性的碳酸鹽而除去(pH1011)。葛所長 2014-3-24 

12、21:45:45 【注】:如果有Cu+、Ni+等離子存在,必須加入過量的氧化劑。4.3  含鎘及鉛的廢液注意事項1).含重金屬兩種以上時,由于其處理的最適宜pH值各不相同,因而,對處理后的廢液必須加以注意。2).含大量有機物或氰化物的廢液,以及含有絡離子的時候,必須預先把它分解除去(參照含有重金屬的有機類廢液的處理方法)。鎘的處理方法(氫氧化物沉淀法)原理用Ca(OH)2將Cd2+轉化成難溶于水的Cd(OH)2而分離。            &#

13、160;              當pH值在11附近時,Cd(OH)2的溶解度最小,因此調節(jié)pH值很重要。但是,若有金屬離子共沉淀時,那么,即使pH值較低也會產生沉淀。操作步驟1).在廢液中加入 Ca(OH)2,調節(jié)pH至10.611.2,充分攪拌后即放置。2).先過濾上層澄清液,然后才過濾沉淀。保管好沉淀物。3).檢查濾液中確實不存在Cd2+離子時,把它中和后即可排放。分析方法定性分析用鎘試劑試紙法或檢測箱進行檢測;定量分析則用二苯基硫巴腙(

14、即雙硫腙)吸光光度法(見JIS K 0102 40.1)或原子吸收光譜分析法進行測定。鉛的處理方法(氫氧化物共沉淀法)原理用Ca(OH)2把Pb2+轉變成難溶性的Pb(OH)2,然后使其與凝聚劑共沉淀而分離。                              &

15、#160;   為此,首先把廢液的pH值調整到11以上,使之生成Pb(OH)2。然后加入凝聚劑,繼而將pH值降到78,即產生Pb(OH)2共沉淀。但如果pH值在11以上,則生成HPbO2-而沉淀會再溶解。操作步驟1).在廢液中加入Ca(OH)2,調整pH值至11。2).加入Al2(SO4)3(凝聚劑),用H2SO4慢慢調節(jié)pH值,使其降到78。3).把溶液放置,待其充分澄清后即過濾。檢查濾液不含Pb2+后,即可排放。分析方法定性分析用檢測箱進行(注意干擾離子)。定量分析用二苯基硫巴腙(即雙硫腙)吸光光度法(見JIS K 0102 39

16、.1)或原子吸收光譜分析法。備注1).除上述處理方法外,還有硫化物沉淀法(其生成的硫化物溶解度較小,但因形成膠體微粒而難于分離);碳酸鹽沉淀法(生成的沉淀微粒細小,分離困難);吸附法(使用強酸性陽離子交換樹脂,幾乎能把它們完全除去)。2).堿性藥劑也可以用NaOH,但是由于生成微粒狀沉淀而難于過濾,故用Ca(OH)2較好。4.4  含砷廢液注意事項1).As2O3是劇毒物質,其致命劑量為0.1克。因此,處理時必須十分謹慎。2).含有機砷化合物時,先將其氧化分解,然后才進行處理(參照含重金屬有機類廢液的處理方法)。處理方法(氫氧化物共沉淀法)原理用中和法處理不能把 

17、As沉淀。通常使它與Ca、Mg、Ba、Fe、Al等的氫氧化物共沉淀而分離除去。用Fe(OH)3時,其最適宜的操作條件是:鐵砷比(Fe/As)為3050;pH為710。操作步驟1).廢液中含砷量大時,加入Ca(OH)2溶液,調節(jié)pH至9.5附近,充分攪拌,先沉淀分離一部份砷。2).在上述濾液中,加入FeCl3,使其鐵砷比達到50,然后用堿調整pH至710之間,并進行攪拌。3).把上述溶液放置一夜,然后過濾,保管好沉淀物。檢查濾液不含As后,加以中和即可排放。此法可使砷的濃度降到0.05ppm以下。分析方法定量分析有鐵共沉淀、濃縮溶劑萃取鉬藍法(見JIS K 0102 

18、;48.1);或鐵共沉淀、濃縮分離砷化氫二乙基氨荒酸銀法進行測定(見JIS K 0102 48.2)。備注除上述處理方法外,還有硫化物沉淀法(用鹽酸酸化,然后用H2S或NaHS等試劑使之沉淀)及吸附法(用活性炭、活性礬土作吸附劑)。4.5  含汞廢液注意事項1).廢液毒性大,經(jīng)微生物等的作用后,會變成毒性更大的有機汞。因此,處理時必須做到充分安全。2).含烷基汞之類的有機汞廢液,要先把它分解轉變?yōu)闊o機汞,然后才進行處理(參照有機汞的處理方法)。3).不能含有金屬汞。 處理方法之一(硫化物共沉淀法)原理用Na2S或NaHS把Hg2+轉變

19、為難溶于水的HgS,然后使其與Fe(OH)3共沉淀而分離除去。如果使其pH值在10以上進行反應,HgS即變成膠體狀態(tài)。此時,即使用濾紙過濾,也難于把它徹底清除。如果添加的Na2S過量時,則生成HgS22-而沉淀容易發(fā)生溶解。腘a2S過量時,則生成HgS22-而沉淀容易發(fā)生溶解。操作步驟1).于廢液中加入對于FeSO4(10ppm)及Hg2+之濃度的11當量的Na2S9H2O,充分攪拌,并使廢液之pH值保持在68范圍內。2).上述溶液經(jīng)放置后,過濾沉淀并妥善保管好濾渣(用此法處理,可使Hg濃度降到0.05ppm以下)。3).再用活性炭吸附法或離子交換樹脂等方法,進一步處理濾液。4).在處理后的廢

20、液中,確證檢不出Hg后,才可排放。處理方法之二(活性炭吸附法)先稀釋廢液,使 Hg濃度在1ppm以下。然后加入NaCl,再調整pH值至6附近,加入過量的活性炭,攪拌約2小時,然后過濾,保管好濾渣。此法也可以直接除去有機汞。處理方法之三(離子交換樹脂法)于含汞廢液中加入NaCl,使之生成HgCl42-絡離子而被陰離子交換樹脂所吸附。但隨著汞的形態(tài)不同,有時此法效果不夠理想。并且,當有有機溶劑存在時,此法也不適用。分析方法全汞的定量分析,用高錳酸鉀分解二苯基硫巴腙吸光光度法(見JIS K 0102 44.1.1)或用原子吸收光譜分析法。定性分析雖然也可以用檢

21、測箱進行,但若從其檢出限度考慮,用它不能檢測達到排放標準那樣低濃度的廢液。備注1).因為汞容易形成絡離子,故處理時必須考慮汞的存在形態(tài)。2).若用NaHS和ZnCl2代替Na2S+FeSO4,可以把汞清除到極微量的程度。例如,對含Hg 10ppm的廢液1升,pH值在10.3,加入32毫克NaHS及80毫克ZnCl2進行處理。處理后,Hg的濃度降至0.003ppm。4.6  含有機汞的廢液葛所長 2014-3-24 21:47:434.14  含無機鹵化物的廢液 處理方法 操作步驟1).將含AlBr3、Al

22、Cl3、ClSO3H、SnCl4及TiCl4等無機類鹵化物的廢液,放入大號蒸發(fā)皿中,撒上高嶺土碳酸鈉(11)的干燥混合物。2).把它充分混合后,噴灑11的氨水,至沒有NH4Cl白煙放出為止。3).把它中和后放置,過濾沉淀物。檢查濾液有無重金屬離子。若無,則用大量水稀釋后,即可排放。5.  有機類實驗廢液的處理方法 注意事項1).盡量回收溶劑,在對實驗沒有妨礙的情況下,把它反復使用。2).為了方便處理,其收集分類往往分為:a)可燃性物質;b)難燃性物質;c)含水廢液;d)固體物質等。3).可溶于水的物質,容易成為水溶液流失。因此,回收時要加以注意。但是,對甲醇、乙醇

23、及醋酸之類溶劑,能被細菌作用而易于分解。故對這類溶劑的稀溶液,經(jīng)用大量水稀釋后,即可排放。4).含重金屬等的廢液,將其有機質分解后,作無機類廢液進行處理。 處理方法1).焚燒法將可燃性物質的廢液,置于燃燒爐中燃燒。如果數(shù)量很少,可把它裝入鐵制或瓷制容器,選擇室外安全的地方把它燃燒。點火時,取一長棒,在其一端扎上沾有油類的破布,或用木片等東西,站在上風方向進行點火燃燒。并且,必須監(jiān)視至燒完為止。對難于燃燒的物質,可把它與可燃性物質混合燃燒,或者把它噴入配備有助燃器的焚燒爐中燃燒。對多氯聯(lián)苯之類難于燃燒的物質,往往會排出一部份還未焚燒的物質,要加以注意。對含水的高濃度有機類廢液,此法亦能

24、進行焚燒。對由于燃燒而產生NO2、SO2或HCl之類有害氣體的廢液,必須用配備有洗滌器的焚燒爐燃燒。此時,必須用堿液洗滌燃燒廢氣,除去其中的有害氣體。對固體物質,亦可將其溶解于可燃性溶劑中,然后使之燃燒。2).溶劑萃取法對含水的低濃度廢液,用與水不相混合的正己烷之類揮發(fā)性溶劑進行萃取,分離出溶劑層后,把它進行焚燒。再用吹入空氣的方法,將水層中的溶劑吹出。對形成乳濁液之類的廢液,不能用此法處理。要用焚燒法處理。3).吸附法 用活性炭、硅藻土、礬土、層片狀織物、聚丙烯、聚酯片、氨基甲酸乙酯泡沫塑料、稻草屑及鋸末之類能良好吸附溶劑的物質,使其充分吸附后,與吸附劑一起焚燒。4).氧化分解法(

25、參照含重金屬有機類廢液的處理方法) 在含水的低濃度有機類廢液中,對其易氧化分解的廢液,用H2O2、KMnO4、NaOCl、H2SO4+HNO3、HNO3+HClO4、H2SO4+HClO4及廢鉻酸混合液等物質,將其氧化分解。然后,按上述無機類實驗廢液的處理方法加以處理。5).水解法 對有機酸或無機酸的酯類,以及一部份有機磷化合物等容易發(fā)生水解的物質,可加入NaOH或Ca(OH)2,在室溫或加熱下進行水解。水解后,若廢液無毒害時,把它中和、稀釋后,即可排放。如果含有有害物質時,用吸附等適當?shù)姆椒右蕴幚怼?).生物化學處理法 用活性污泥之類東西并吹入空氣進行處理。例

26、如,對含有乙醇、乙酸、動植物性油脂、蛋白質及淀粉等的稀溶液,可用此法進行處理。5.1  含一般有機溶劑的廢液 一般有機溶劑是指醇類、酯類、有機酸、酮及醚等由C、H、O元素構成的物質。 對此類物質的廢液中的可燃性物質,用焚燒法處理。對難于燃燒的物質及可燃性物質的低濃度廢液,則用溶劑萃取法、吸附法及氧化分解法處理。再者,廢液中含有重金屬時,要保管好焚燒殘渣。但是,對其易被生物分解的物質(即通過微生物的作用而容易分解的物質),其稀溶液經(jīng)用水稀釋后,即可排放。5.2  含石油、動植物性油脂的廢液 此類廢液包括:苯、已烷、二甲苯、甲苯

27、、煤油、輕油、重油、潤滑油、切削油、機器油、動植物性油脂及液體和固體脂肪酸等物質的廢液。 對其可燃性物質,用焚燒法處理。對其難于燃燒的物質及低濃度的廢液,則用溶劑萃取法或吸附法處理。對含機油之類的廢液,含有重金屬時,要保管好焚燒殘渣。5.3  含N、S及鹵素類的有機廢液 此類廢液包含的物質:吡啶、喹啉、甲基吡啶、氨基酸、酰胺、二甲基甲酰胺、二硫化碳、硫醇、烷基硫、硫脲、硫酰胺、噻吩、二甲亞砜、氯仿、四氯化碳、氯乙烯類、氯苯類、酰鹵化物和含N、S、鹵素的染料、農藥、顏料及其中間體等等。 對其可燃性物質,用焚燒法處理。但必須采取措施除去由燃燒而產生

28、的有害氣體(如SO2、HCl、NO2等)。對多氯聯(lián)苯之類物質,因難以燃燒而有一部分直接被排出,要加以注意。 對難于燃燒的物質及低濃度的廢液,用溶劑萃取法、吸附法及水解法進行處理。但對氨基酸等易被微生物分解的物質,經(jīng)用水稀釋后,即可排放。5.4  含酚類物質的廢液 此類廢液包含的物質:苯酚、甲酚、萘酚等。 對其濃度大的可燃性物質,可用焚燒法處理。而濃度低的廢液,則用吸附法、溶劑萃取法或氧化分解法處理。5.5  含有酸、堿、氧化劑、還原劑及無機鹽類的有機類廢液 此類廢液包括:含有硫酸、鹽酸、硝酸等酸類和氫氧化鈉、碳酸鈉

29、、氨等堿類,以及過氧化氫、過氧化物等氧化劑與硫化物、聯(lián)氨等還原劑的有機類廢液。 首先,按無機類廢液的處理方法,把它分別加以中和。然后,若有機類物質濃度大時,用焚燒法處理(保管好殘渣)。能分離出有機層和水層時,將有機層焚燒,對水層或其濃度低的廢液,則用吸附法、溶劑萃取法或氧化分解法進行處理。但是,對其易被微生物分解的物質,用水稀釋后,即可排放。葛所長 2014-3-24 21:57:57菌株的保藏方法      1、傳代保存法:有些微生物當遇到冷凍或干燥等處理時,會很快死亡,因此在這種情況下,只能求助于傳代

30、培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進行菌種轉接、培養(yǎng)后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生產菌種的保存。傳代保存時,培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。一般地,大多數(shù)菌種的保藏溫度以5為好,像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物菌種則可以使用37進行保存,而蕈類等大型食用菌的菌種則可以室溫直接保存。傳代培養(yǎng)保存法雖然簡便,但其缺點也很明顯,如:菌種管棉塞經(jīng)常容易發(fā)霉;菌株的遺傳性狀容易發(fā)生變異;反復傳代時,菌株的病原性、形成生理活性物質的能力以

31、及形成孢子的能力等均有降低;需要定期轉種,工作量大;雜菌的污染機會較多。          通派(上海)生物科技有限公司是供應國內/外各類細胞(人/大鼠/小鼠細胞 等),菌種,ELISA試劑盒(人/大鼠/豬),PCR試劑盒,免疫組化試劑盒,單克隆抗體,多克隆抗體,移液器,培養(yǎng)皿,BD培養(yǎng)基,實驗室耗材,實驗室小型耗材等產品的國內一流服務商。公司集生物科技產品生產、銷售于一體,公司實驗室熱門提供:傳代細胞,原代細胞,耐藥株,細胞染色,免疫組化,ELISA試劑盒 等。 

32、 2、液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。此法可防止干燥,并通過限制氧的供給而達到削弱微生物代謝作用的目的。其具有方法簡便的優(yōu)點,同時也適用于不宜冷凍干燥的微生物(如產孢能力低的絲狀菌)的保存,而某些細菌如固氮菌、乳酸桿菌、明串珠菌、分枝桿菌、紅螺菌及沙門氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克銀漢霉、毛霉、根霉等不宜采用此法進行保存。 3、懸液保存法:即使微生物混懸于適當溶液中進行保存的方法。常用的有, 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意

33、避免水分的蒸發(fā)。 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。 4、載體保存法:即將微生物吸附在適當載體上進行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下幾種,如 土壤保存法:主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏。方法是在滅菌的土壤中加入菌液,立即在室溫下進行干燥或使菌體繁殖后再干燥,然后冷藏或在室溫下密封保存。保存用的土壤原則上以肥沃的耕土為宜,土壤需風干、粉碎、過篩和滅菌。使微生物在土壤中繁殖后進行干燥保存的方法是:取適量土壤(5克)置于塞有棉塞的試管中,加水或加入充分

34、稀釋的液體培養(yǎng)基(以含水量為土壤最大持水量的60%為宜),然后高壓滅菌。再將需保存的微生物進行大量接種,培養(yǎng)至菌絲能用肉眼確認的程度為止,移入干燥器中經(jīng)短時間干燥或風干后密封,冷藏或室溫保存。 砂土保存法:取清潔的砂,過60目篩去掉大砂粒,并用磁鐵吸去砂中鐵屑,再用NaOH溶液、10% HCl溶液和水交替清洗數(shù)次,干燥后,置于試管或安瓶管中保持23cm深,再經(jīng)干熱滅菌后,加入1ml菌種培養(yǎng)液,經(jīng)充分混勻后,放入真空干燥器中,完全干燥后熔封保存。也可用二份洗凈的砂(經(jīng)HCl預處理)和一份貧瘠、過篩的黃土攙和后滅菌,再進行菌種保藏。 硅膠保存法:以616目的無色硅膠代

35、替砂子,干熱滅菌后,加入菌液。加菌液時,由于硅膠的吸附熱常使溫度升高,因而需設法加以冷卻。 磁珠保存法:將菌液浸入素燒磁珠(或多孔玻璃珠)后再進行干燥保存的一種方法。在螺旋口試管中裝入1/2管高的硅膠(或無水CaSO4),上鋪玻璃棉,再放上1020粒磁珠,經(jīng)干熱滅菌后,接入菌懸液,最后冷藏、室溫保藏或減壓干燥后密封保藏。本法對酵母菌很有效,特別適用于根瘤菌,可保存長達兩年半時間。 麩皮保存法:在麩皮內加入60%的水,經(jīng)滅菌后接種培養(yǎng),最后干燥保藏。 紙片(濾紙)保存法:將滅菌紙片浸入培養(yǎng)液或菌懸液中,常壓或減壓干燥后,置于裝有干燥劑的容器內進行保存。 5

36、、寄主保存法:即令微生物侵入其寄主后加以保存的方法。  6、冷凍保存法:適用于抗凍力強的微生物。這些微生物可在其菌體細胞外遭受凍結的情況下而不受損傷,而對其它大多數(shù)微生物而言,無論在細胞外凍結還是在細胞內凍結,都會對菌體造成損傷,因此當采用這種保藏方法時,應注意以下幾點, 要選擇適于冷凍干燥的菌齡細胞; 要選擇適宜的培養(yǎng)基,因為某些微生物對冷凍的抵抗力,常隨培養(yǎng)基成分的變化而顯示出巨大差異; 要選擇合適的菌液濃度,通常菌液濃度越高,生存率越高,保存期也越長; 最好在菌液內不添加電解質(如食鹽等); 可在菌液內添加甘油等保護劑,以防止在冷凍過程中出現(xiàn)菌體大量死亡的現(xiàn)象。同樣,也可添加各種糖類、去纖維血液和脫脂牛乳等具有良好保護效果的溶劑,但對有些微生物而言,不加保護劑時更有效。 原則上應盡快進行冷凍處理,但當加入保護劑時,可靜置一段時間后再進行處理。 就動物細胞而言,應在20范圍內以1/min左右的速度緩慢降溫,此后必須盡快降到貯藏溫度;而對絕大多數(shù)微生物而言,則不必如此,如結構較為復雜的原蟲則可在35范圍內進行緩慢降溫,而噬菌體則必需采用上述的二階段法進行冷凍; 若進行長期保存,則貯藏溫度越低越好; 取用冷凍保存的菌種時,應采取速融措施,即在35

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