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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)常用試劑、緩沖液、培養(yǎng)基的配制方法實(shí)驗(yàn)常用試劑、緩沖液、培養(yǎng)基的配制方法 1、1M Tris-HCl 組份濃度 1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0) 配制量 1L 配置方法 1. 稱量 121.1gTris 置于 1L 燒杯中。 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的 pH 值。 pH 值 濃 HCl 7.4 約 70mL 7.6 約 60mL 8.0 約 42mL 4. 將溶解定容至 1L。 5. 高溫高壓滅菌后,室溫保存。 注意:應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定 pH 值,因?yàn)?Tris 溶液的 pH值隨溫度的變化差很大
2、,溫度每升高 1,溶液的 pH 值大約降低0.03 個單位。 2、1.5 M Tris-HCl 組份濃度 1.5 M Tris-HCl (pH8.8) 配制量 1L 配置方法 1.稱取 181.7gTris 置于 1L 燒杯中。 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 用濃鹽酸調(diào) pH 值至 8.8。 4. 將溶液定容至 1L。 5. 高溫高壓滅菌后,室溫保存。 注意:應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定 pH 值,因?yàn)?Tris 溶液的 pH 值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高 1,溶液的 pH 值大約降低 0.03 個單位。 3、10TE Buffer 組份濃度 100 mM T
3、ris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0) 配制量 1L 配置方法 1. 量取下列溶液,置于 1L 燒杯中。 1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mL 500 mM EDTA(pH8.0) 20mL 2. 向燒杯中加入約 800mL 的去離子水,均勻混合。 3. 將溶液定至 1L 后,高溫高壓滅菌。 4. 室溫保存。 4、3 M 醋酸鈉醋酸鈉 組份濃度 3 M 醋酸鈉 (pH5.2) 配制量 100mL 配置方法 1. 稱取 40.8gNaOAc3H2O 置于 100200mL 燒杯中,加入約 40mL 的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?
4、2. 加入冰乙酸調(diào)節(jié) pH 值至 5.2。 3. 加入去離子水將溶液定容至 100mL。 4. 高溫高壓滅菌后,室溫保存。 5、PBS Buffer 組份濃度 137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 配制量 1L 配置方法 1. 稱量下列試劑,置于 1L 燒杯中。 NaCl 8 g KCl 0.2g Na2HPO4 1.42 g KH2PO4 0.27g 2. 向燒杯中加入約 800 mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 滴加 HCl 將 pH 值調(diào)節(jié)至 7.4,然后加入去離子水將溶液定容至 1L。 4. 高溫高壓滅菌后,室溫保存。 注
5、意:上述 PBS Buffer 中無二價(jià)陽離子,如需要,可在配方中補(bǔ)充 1mM CaCl2 和 0.5 mM MgCl2。 6、10 M 醋酸銨醋酸銨 組份濃度 10 M 醋酸銨 配制量 100mL 配置方法 1. 稱量 77.1g 醋酸銨置于 100200 mL 燒杯中,加入約 30 mL 的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?2.加去離子水將溶液定容至 100mL。 3.使用 0.22m 濾膜過濾除菌。 4.密封瓶口于室溫保存。 注意:醋酸銨受熱易分解,所以不能高溫高壓滅菌。 7、Tris- HCl 平衡苯酚平衡苯酚 配置方法 1. 使用原料:大多數(shù)市售液化苯酚是清亮無色的,無需重蒸餾便可用于分子生物學(xué)實(shí)
6、驗(yàn)。但有些液化苯酚呈粉紅色或黃色,應(yīng)避免使用。同時(shí)也應(yīng)避免使用結(jié)晶苯酚,結(jié)晶苯酚必須在160對其進(jìn)行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物,這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或?qū)е?RNA 和 DNA 的交聯(lián)等。因此,苯酚的質(zhì)量對 DNA、RNA 的提取極為重要,我們推薦使用高質(zhì)量的苯酚進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。 2. 操作注意:苯酚腐蝕性極強(qiáng),并可引起嚴(yán)重灼傷,操作時(shí)應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡等。所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,與苯酚接觸過的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。 3. 苯酚平衡:因?yàn)樵谒嵝?pH 條件下 DNA 分配于有機(jī)相,因此使用苯酚前必須對苯酚進(jìn)行平衡使其 pH 值達(dá)到 7.8 以上,
7、苯酚平衡操作方法如下: 液化苯酚應(yīng)貯存于-20,此時(shí)的苯酚呈現(xiàn)結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫,然后在 68水浴中使苯酚充分溶解。 加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度 0.1。該化合物是一種還原劑、RNA 酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時(shí)因其呈黃色。有助于方便識別有機(jī)相。 加入等體積的 1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力攪拌器攪拌 15 分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。 重復(fù)操作步驟。 加入等體積的 0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力攪拌器攪拌 15 分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。 重復(fù)操作步驟,稍微
8、殘留部分上層水相。 使用 pH 試紙確認(rèn)有機(jī)相的 pH 值大于 7.8。 將苯酚置于棕色玻璃瓶中 4避光保存。 8、苯酚、苯酚/氯仿氯仿/異戊醇異戊醇 配置方法 1. 說明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯/酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白(25 :24 :1) 質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過程中出現(xiàn)的氣泡。 2. 配置方法:將 Tris-HCl 平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇(24:1)均勻混合后,移入棕色玻璃瓶中 4保存。 9、10(W/V)SDS 組份濃度 10(W/V)SDS 配制量 100mL 配置方法 1.稱量 10g 高純度的 SD
9、S 置于 100200mL 燒杯中,加入約 80mL 的去離子水,68加熱溶解。 2. 滴加數(shù)滴濃鹽酸調(diào)節(jié) pH 值至 7.2。 3. 將溶液定容至 100mL 后,室溫保存。 10、2 N NaOH 組份濃度 2N NaOH 配制量 100mL 配置方法 1.量取 80mL 去離子水置于 100200mL 塑料燒杯中(NaOH溶解過程中大量放熱,有可能使玻璃燒杯炸裂)。 2. 稱取 8g NaOH 小心地逐漸加入到燒杯中,邊加邊攪拌。 3. 待 NaOH 完全溶解后,用去離子水將溶液體積定容至100mL。 4. 將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后,室溫保存。 11、2.5 N HCl 組份濃度 2.5
10、 N HCl 配制量 100mL 配置方法 1. 在 78.4mL 的去離子水中加入 21.6mL 的濃鹽酸(11.6N),均勻混合。 2. 室溫保存。 12、5 M NaCl 組份濃度 5 M NaCl 配制量 1L 配置方法 1. 稱取 292.2g NaCl 置于 1L 燒杯中,加入約 800mL的去離子水后攪拌溶解。 2. 加去離子水將溶液定容至 1L 后,適量分成小份。 3. 高溫高壓滅菌后,4保存。 13、20(W/V)Glucose 組份濃度 20(W/V)Glucose 配制量 100mL 配置方法 1. 稱取 20g Glucose 置于 100200mL 燒杯中,加入約 8
11、0mL 的去離子水后,攪拌溶解。 2. 加去離子水將溶液定容至 100mL。 3. 高溫高壓滅菌后,4保存。 14、Solution I 組份濃度 25 mM Tris-HCl(pH8.0),10mM EDTA,50mM Glucose (質(zhì)粒提取用) 配制量 1L 配置方法 1. 量取下列溶液,置于 1L 燒杯中。 1M Tris-HCl(pH8.0) 25mL 0.5 M EDTA(pH8.0) 20mL 20Glucose(1.11M) 45mL dH2O 910mL 2. 高溫高壓滅菌后,4保存。 3. 使用前每 50 mL 的 Soliution I 中加入 2mL 的RNase A
12、(20mg/mL)。 15、Solution II 組份濃度 250mM NaOH,1(W/V)SDS (質(zhì)粒提取用) 配制量 500mL 配置方法 1. 量取下列溶液置于 500mL 燒杯中。 10SDS 50mL 2N NaOH 50mL 2. 加滅菌水定容至 500mL,充分混勻。 3. 室溫保存。此溶液保存時(shí)間最好不要超過一個月。 注意:SDS 易產(chǎn)生氣泡,不要劇烈攪拌。 16、Solution III 組份濃度 3M KOAc,5M CH3COOH (質(zhì)粒提取用) 配制量 500mL 配置方法 1. 量取下列溶液置于 500mL 燒杯中。 KOAc 147g CH3COOH 57.5
13、mL 2. 加入 300mL 去離子水后攪拌溶解。 3. 加去離子水將溶液定容至 500mL。 4. 高溫高壓滅菌后,4保存。 17、0.5M EDTA 組份濃度 0.5 M EDTA (pH8.0) 配制量 1L 配置方法 1. 稱取 186.1g Na2EDTA2H2O,置于 1L 燒杯中。 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢琛?3. 用 NaOH 調(diào)節(jié) pH 值值 8.0(約 20g NaOH)。 注意:pH 值至 8.0 時(shí),EDTA 才能完全溶解。 4. 加去離子水將溶液定容至 1L。 5. 適量分成小份后,高溫高壓滅菌。 6. 室溫保存。 18、1 M DTT 組份濃度
14、 1 M DTT 配制量 20mL 配置方法 1. 稱取 3.09g DTT,加入到 50mL 塑料離心管內(nèi)。 2. 加 20mL 的 0.01 M 的 NaOAc(pH5.2),溶解后使用 0.22m 濾器過濾除菌。 3. 適量分成小份后,-20保存。 19、10mM ATP 組份濃度 10mM ATP 配制量 20mL 配置方法 1. 稱取 121mg Na2ATP3H2O,加入到 50mL 塑料離心管內(nèi)。 2. 加 20mL 的 25mM Tris-HCl(pH8.0),攪拌溶解。 3. 適量分成小份,-20保存。 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用培養(yǎng)基的配制方法分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用培養(yǎng)基的配制方法1、
15、Ampicillin 組份濃度 100mg/ml Ampicillin (100mg/ml) 配制量 50mL 配置方法 1. 稱量 5g Ampicillin 置于 50mL 離心管中。 2. 加入 40mL 滅菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。 3. 用 0.22m 濾膜過濾除菌。 4. 小份分裝(1mL/份)后,-20保存。 2、IPTG 組份濃度 24mg/mL IPTG (24mg/mL) 配制量 50mL 配置方法 1. 稱量 1.2g IPTG 置于 50mL 離心管中。 2. 加入 40mL 滅菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。 3. 用 0.22m 濾膜過濾除菌。 4
16、. 小份分裝(1mL/份)后,-20保存。 3、X- Gal 組份濃度 20mg/mL X- Gal (20mg/mL) 配制量 50mL 配置方法 1. 稱取 1g X-Gal 置于 50mL 離心管中。 2. 加入 40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至 50mL。 3. 小份分裝(1mL/份)后,-20保存。 4、LB 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 1(W/V)Tryptone,0.5(W/V)Yeast Extract,1(W/V)NaCl 配制量 1L 配置方法 1. 稱量下列試劑,置于 1L 燒杯中 Tryptone 10g Yeast Extract 5g NaCl
17、10g 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 滴加 5N NaOH(約 0.2mL),調(diào)節(jié) pH 值至7.0。 4. 高溫高壓滅菌后,4保存。 5、LB/Amp 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 1(W/V) Tryptone 0.5(W/V) Yeast Extract 1(W/V) NaCl 0.1mg/mL Ampicillin 配制量 1L 配置方法 1. 稱量下列試劑,置于 1L 燒杯中 Tryptone 10g Yeast Extract 5g NaCl 10g 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 滴加 5N NaOH(約 0.2mL),調(diào)節(jié) p
18、H 值至7.0。 4. 加去離子水將培養(yǎng)基定容至 1L。 5. 高溫高壓滅菌后,冷卻至室溫。 6. 加入 1mL Ampicillin(100mg/mL)后均勻混合。 7. 4保存。 6、TB 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 1.2(W/V) Tryptone 2.4(W/V) Yeast Extract 0.4(V/V) Glycerol 17mM KH2PO4 72mM K2HPO4 配制量 1L 配置方法 1. 配制磷酸鹽緩沖液(0.17M KH2PO4,0.72M K2HPO4)100mL。 2.稱取下列試劑,置于 1L 燒杯中。 Tryptone 12g Yeast Extract 24g
19、Glycerol 4mL 3. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?4. 加去離子水將培養(yǎng)基定容至 1L 后,高溫高壓滅菌。 5. 待溶液冷卻至 60以下時(shí),加入 100mL 的上述滅菌磷酸鹽緩沖液。 6. 4保存。 7、TB/Apm 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 1.2(W/V) Tryptone 2.4(W/V) Yeast Extract 0.4(V/V) Glycerol 17mM KH2PO4 72mM K2HPO4 0.1mg/mL Ampicillin 配制量 1L 配置方法 1. 配制磷酸鹽緩沖液(0.17M KH2PO4,0.72M K2HPO4)100mL。溶解 2.
20、31g KH2PO4 和 2.54g K2HPO4 于 90mL 的去離子水中,攪拌溶解后,加去離子水定容至 100mL,高溫高壓滅菌。 2. 稱取下列試劑,置于 1L 燒杯中。 Tryptone 12g Yeast Extract 24g Glycerol 4mL 3. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?4. 加去離子水將培養(yǎng)基定容至 1L 后,高溫高壓滅菌。 5. 待溶液冷卻至 60以下時(shí),加入 100mL 的上述滅菌磷酸鹽緩沖液和 1mL Ampicillin(100mg/mL)。 6. 均勻混合后 4保存。 8、SOB 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 2(W/V) Trypton
21、e 0.5(W/V) Yeast Extract 0.05(W /V) NaCl 2.5mM KCl 10mM MgCl2 配制量 1L 配置方法 1. 配制 250mM KCl 溶液。 在 90mL 的去離子水中溶解 1.86g KCl后,定容至 100mL。 2. 配制 2M MgCl2 溶液。在 90mL 的去離子水中溶解 19g MgCl2后,定容至 100mL,高溫高壓滅菌。 3. 稱取下列試劑,置于 1L 燒杯中。 Tryptone 20g Yeast Extract 5g NaCl 0.5g 4. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?5 量取 10mL 250 mM
22、KCl 溶液,加入到燒杯中。 6. 滴加 5N NaOH 溶液(約 0.2mL),調(diào)節(jié) pH 值至 7.0。 7. 加入去離子水將培養(yǎng)基定容至 1L。 8. 高溫高壓滅菌后,4保存。 9. 使用前加入 5mL 滅菌的 2M MgCl2 溶液。 9、SOC 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 2(W/V) Tryptone 0.5(W/V) Yeast Extract 0.05(W /V) NaCl 2.5mM KCl 10mM MgCl2 20mM 葡萄糖 配制量 100mL 配置方法1. 配制 1M 葡萄糖溶液。將 18g 葡萄糖溶于 90mL 去離子水中,充分溶解后定容至 100mL,用 0.22m
23、濾膜過濾除菌。 2. 向 100mL SOB 培養(yǎng)基中加入除菌的 1M 葡萄糖溶液 2mL,均勻混合。 3. 4保存。 10、2YT 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 1.6(W/V)Tryptone, 1(W/V)Yeast Extract,0.5(W/V)NaCl 配制量 1L 配置方法 1.稱取下列試劑,置于 1L 燒杯中。 Tryptone 16g Yeast Extract 10g NaCl 5g 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 滴加 1N KOH,調(diào)節(jié) pH 值至 7.0。 4. .加水離子水將培養(yǎng)基定容至 1L。 5. 高溫高壓后,4保存。 11、bbroth
24、培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 2(W/V)Tryptone, 0.5(W/V)Yeast Extract,0.5(W/V)MgSO47H2O 配制量 1L 配置方法 1.稱取下列試劑,置于 1L 燒杯中。 Tryptone 20g Yeast Extract 5g MgSO47H2O 5g 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 滴加 1N KOH,調(diào)節(jié) pH 值至 7.5。 4. .加水離子水將培養(yǎng)基定容至 1L。 5. 高溫高壓后,4保存。 12、NZCYM 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 0.5(W/V) Yeast Extract 0.1(W/V) Casamino Acid 1
25、(W /V) NZ 胺 0.5(W /V) NaCl 0.2(W /V) MgSO47H2O 配制量 1L 配置方法 1.稱取下列試劑,置于 1L 燒杯中。 Yeast Extract 5g Casamino Acid 1g NZ 胺 10g NaCl 5g MgSO47H2O 2g 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 滴加 5N NaOH 溶液(約 0.2mL),調(diào)節(jié) pH 值至7.0。 4. .加水離子水將培養(yǎng)基定容至 1L。 5. 高溫高壓后,4保存。 13、NZYM 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 0.5(W/V) Yeast Extract 1(W /V) NZ 胺
26、0.5(W /V) NaCl 0.2(W /V) MgSO47H2O 配置方法 NZYM 培養(yǎng)基除不含 Casamino Acid(酪蛋白氨基酸)外,其他成份與 NZCYM 培養(yǎng)基相同。 14、NZM 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 組份濃度 1(W /V) NZ 胺 0.5(W /V) NaCl 0.2(W /V) MgSO47H2O 配置方法 NZM 培養(yǎng)基除不含 Yeast Extract(酵母提取物)外,其他成份與 NZYM 培養(yǎng)基相同。 15、一般固體培養(yǎng)基的、一般固體培養(yǎng)基的 配置方法 1. 按照液體培養(yǎng)基配方準(zhǔn)備好液體培養(yǎng)基,在高溫高壓滅菌前,加入下列試劑中的一種。 配制配制 Agar(瓊脂:鋪制
27、平板用) 15g/L Agar(瓊脂:配制頂層瓊脂用) 7g/L Agarose(瓊脂糖:鋪制平板用) 15 g/L Agarose(瓊脂糖:配制頂層瓊脂用) 7g/L 2. 高溫高壓滅菌后,帶上手套取出培養(yǎng)基,搖動容器使瓊脂或瓊脂糖充分混勻(此時(shí)培養(yǎng)基溫度很高,小心燙傷)。 3. 待培養(yǎng)基冷卻至 5060時(shí),加入熱不穩(wěn)定物質(zhì)(如抗生素),搖動容器充分混勻。 4. .鋪制平板(3035mL 培養(yǎng)基/90mm 培養(yǎng)皿)。 16、LB/Amp/X-Gal/IPTG 組份濃度 1(W /V) Tryptone 平板培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基 0.5(W/V) Yeast Extract 1(W/V) NaCl
28、 0.1mg/mL Ampicillin 0.5(W /V) IPTG 0.04mg/mL X-Gal 1.5(W /V) Agar 配制量 1L 配置方法 1. 稱取下列試劑,置于 1L 燒杯中。 Tryptone 10g Yeast Extract 5g NaCl 10g 2. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?3. 滴加 5N NaOH 溶液(約 0.2mL),調(diào)節(jié) pH 值至7.0。 4. 加水離子水將培養(yǎng)基定容至 1L 后,加入15gAgar。 5. 高溫高壓滅菌后,冷卻至 60左右。 6. 加入 1mL Ampicillin(100mg/mL)、1mL IPTG(24
29、mg/mL)、2mL X-Gal(20mg/mL)后均勻混合。 7. 鋪制平板(3035mL 培養(yǎng)基/90mm 培養(yǎng)基)。 8. 4保存平板。 17、TB/Amp/X-Gal/IPTG 組份濃度 1.2(W /V) Tryptone 平板培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基 2.4(W/V) Yeast Extract 0.4(W/V) Glycerol 17mM KH2PO4 72mM K2HPO4 0.1mg/mL Ampicillin 0.024mg/mL IPTG 0.04mg/mL X-Gal 1.5(W /V) Agar 配制量 1L 配置方法 1.配制磷酸鹽緩沖液(0.17M KH2PO4,0.72
30、M K2HPO4)100mL。 2. 稱取下列試劑,置于 1L 燒杯中。 Tryptone 12g Yeast Extract 24g Glycerol 4mL 3. 加入約 800mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?4. 加水離子水將培養(yǎng)基定容至 1L 后,加入15gAgar。 5. 高溫高壓滅菌后,冷卻至 60左右。 6. 加入 100mL 的上述滅菌磷酸鹽緩沖液、1mL Ampicillin(100mg/mL)、1mL IPTG(24mg/mL)、2mL X-Gal(20mg/mL)后均勻混合。 7. 鋪制平板(3035mL 培養(yǎng)基/90mm 培養(yǎng)基)。 8. 4保存平板。 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常
31、用試劑的配制方法生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用試劑的配制方法 1、0.5mol/L 氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液 組份濃度 0.5mol/L 配制量 2L 配置方法 1.準(zhǔn)確稱取氫氧化鈉 40g。 2.用去離子水溶解并稀釋至 2L。 2、0.5mol/L 鹽酸溶液鹽酸溶液 組份濃度 0.5mol/L 配制量 2L 配置方法 1.準(zhǔn)確量取鹽酸 83.4mL。 2.用去離子水稀釋至 2L。 4、0.2葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 組份濃度 0.2 配制量 1L 配置方法 1.稱取葡萄糖 2.5g 置于稱量瓶中,在 70干燥 2 小時(shí)。 2.干燥器中冷卻至室溫,重復(fù)干燥,冷卻至恒重。 3.準(zhǔn)確稱取葡萄糖 2.000g
32、。 4.用去離子水溶解并定容至 1L 5.于 4保存。 5、250g/mL 牛血清牛血清 組份濃度 250g/mL 白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液 配制量 2L 配置方法 1.準(zhǔn)確稱取 250mg 標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白。 2.用 0.03mol/LpH7.8 的磷酸緩沖液溶解并定容至1L。 3.4保存。 6、Folin 試劑甲試劑甲 配置方法 1.稱取 10g 氫氧化鈉溶于 400mL 去離子水中, 加入 50g 無水碳酸鈉,溶解,待用。 2.稱取 0.5g 酒石酸鉀鈉,溶于 80mL 去離子水中, 加入 0.25g 硫酸銅5 水,溶解。 3.將 1:2:去離子水按 20:4:1 的比例混合即可。 4. 4保存,可
33、用一周。 7、Folin 試劑乙試劑乙 配置方法 1.在 500mL 的磨口回流裝置內(nèi)加入鎢酸鈉2 水 25.0359g, 鉬酸鈉2 水 6.2526g,去離子水 175mL,85磷酸 12.5mL, 濃鹽酸 25mL,充分混合。 2.回流 10 小時(shí),再加硫酸鋰 37.5g,去離子水 12.5mL 及數(shù)滴溴。 3.然后開口沸騰 15min,以驅(qū)除過量的溴,冷卻后定容到250mL。 4.于棕色瓶中保存,可使用多年 注意:上述制備地 Folin 試劑乙地貯備液濃度一般在 2mol/L 左 右,幾種操作方案都是把 Folin 試劑乙稀釋至 1mol/L 的 濃度作為應(yīng)用液,我們這時(shí)是把貯備液于使用
34、前稀釋 18 倍,使之濃度為0.1mol/L 略高。這種稀釋 18 倍后的 Folin 試劑乙就是上文稱之為的“應(yīng)用液”。Folin 試劑乙貯備 液濃度的標(biāo)定,一般是以酚酞為指示劑。用 Folin 試劑乙去滴定 1mol/L 左右的標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液,當(dāng)溶液顏色由紅變?yōu)樽匣遥偻蝗蛔兂赡G即為終點(diǎn),如果用氫氧化鈉去滴定 Folin 試劑乙,終點(diǎn)不太好掌握,溶液地顏色是由淺黃變?yōu)闇\綠,再變?yōu)榛易仙珵榻K點(diǎn)。 8、DNS 試劑試劑 配置方法 1.取 3,5-二硝基水楊酸 10g,加入 2mol/L 氫氧化鈉溶液 200mL。 (3,5-二硝基水楊酸試劑) 2.將 3,5-二硝基水楊酸溶解,然后加入酒石
35、酸鉀鈉 300g。3. 待其完全溶解,用去離子水稀釋至 2000mL,棕色瓶保存。 9、5蔗糖溶液蔗糖溶液 組份濃度 5 配制量 1L 配置方法 稱取蔗糖 50g,用去離子水溶解定容至 1L。 10、0.1mol/L 蔗糖溶液蔗糖溶液 組份濃度 0.1mol/L 配制量 1L 配置方法 稱取蔗糖 34.230g,用去離子水溶解并定容至 1L。 11、20乙酸溶液乙酸溶液 組份濃度 20 配制量 1.2L 配置方法 量取冰乙酸 300mL,用去離子水稀釋至 1200mL。 12、30(W/V)Acrylamide 組份濃度 30(W/V)Acrylamide 0.05 配制量 1L 配置方法 1
36、.稱量下列試劑,置于 1L 燒杯中 Acrylamide 290g BIS 10g 2.向燒杯中加入約 600mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙?3.加入去離子水將溶液定容至 1L,用 0.45m 濾膜濾去雜質(zhì)。 4.于棕色瓶中 4保存。 注意:丙稀銑胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性,并可通過皮膚吸收, 其作用有積累性,配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無 毒,但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作,因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞荨?13、40(W/V)Acrylamide 組份濃度 40(W/V)Acrylamide 0.05 配制量 1L 配置方法 1.稱量下列試劑,置于 1L 燒杯中 Acrylamide 380g BIS 20g
37、2.向燒杯中加入約 600mL 的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙?3.加入去離子水將溶液定容至 1L,用 0.45m 濾膜濾去雜質(zhì)。 4.于棕色瓶中 4保存。 注意:丙稀銑胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性,并可通過皮膚吸收, 其作用有積累性,配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無 毒,但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作,因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞荨?14、10(W/V)過硫酸銨)過硫酸銨 組份濃度 10(W/V)過硫酸銨 配制量 10mL 配置方法 1.稱取 1g 過硫酸銨。 2.加入 10mL 的去離子水后攪拌溶解。 3.貯存于 4。 注意:10過硫酸胺溶液在 4保存時(shí)間可使用 2 周左右, 超過期限會失去催化作用。 15、考馬斯亮藍(lán)
38、、考馬斯亮藍(lán) R-250 染色液染色液 組份濃度 0.1(W/V)考馬斯亮藍(lán) R-250,25%(V/V)異丙醇, 10(V/V)冰醋酸 配制量 1L 配置方法 1.稱取 1g 考馬斯亮藍(lán) R-250,置于 1L 燒杯中。 2.量取 250mL 的異丙醇加入上述燒杯中,攪拌溶解。 3.加入 100mL 的冰乙醋酸,均勻攪拌。 4.加入 650mL 的去離子水,均勻攪拌。 5.用濾紙出去顆粒物質(zhì)后,室溫保存。 16、考馬斯亮藍(lán)染色脫色液、考馬斯亮藍(lán)染色脫色液 組份濃度 10(V/V)醋酸,5(V/V)乙醇 配制量 1L 配置方法 1.量取下列溶液,置于 1L 燒杯中。 醋酸 100mL 乙醇 5
39、0mL dH2O 850mL 2.充分混合后使用。 17、凝膠固定液、凝膠固定液 組份濃度 50(V/V)甲醇,10(V/V)醋酸 (SDS-PAGE 銀氨染色用) 配制量 100L 配置方法 1.量取下列溶液,置于 1L 燒杯中。 甲醇 500mL 醋酸 100mL dH2O 400mL 2.均勻混合后室溫保存。 18、凝膠處理液、凝膠處理液 組份濃度 50(V/V)甲醇,10(V/V)戊二醛 (SDS-PAGE 銀氨染色用) 配制量 1L 配置方法 1.量取下列溶液,置于 1L 燒杯中。 甲醇 50mL 戊二醛 10mL dH2O 40mL 2. 均勻混合后室溫保存。 19、凝膠染色液、凝
40、膠染色液 組份濃度 0.4(W/V)硝酸銀,1(V/V)濃氨水, (SDS-PAGE 銀氨染色用) 0.04(W/V)氫氧化鈉 配制量 100L 配置方法 1.量取下列試劑,加入 100200mL 試劑瓶中。 20硝酸銀 2mL 濃氨水 1mL 4氫氧化鈉 1mL dH2O 96mL 2.均勻混合。該溶液應(yīng)為無色透明狀。如氨水濃度過低時(shí)溶液 會呈現(xiàn)混濁狀,此時(shí)應(yīng)補(bǔ)加濃氨水,直至透明。 3.本染色液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,不宜保存。 20、顯影液、顯影液 組份濃度 0.005(V/V)檸檬酸,0.02(V/V)甲醛 (SDS-PAGE 銀氨染色用) 配制量 1L 配置方法 1.稱取下列試劑,置于 1L 試劑
41、瓶中。 檸檬酸 50mg 甲醛 0.2mL 2.加入 1L 去離子水后,搖動混合后溶解。 3.室溫保存。 21、45乙醇溶液乙醇溶液 組份濃度 45 配制量 1L 配置方法 量取無水乙醇 450mL,加入去離子水 550mL,混勻。 22、5的十二烷基硫酸鈉溶液的十二烷基硫酸鈉溶液 組份濃度 5 (W/V) 配制量 0.1L 配置方法:稱取 5.0g 十二烷基硫酸鈉,溶于 100mL4的乙醇溶液中。 23、三氯甲烷、三氯甲烷-異戊醇混合試劑異戊醇混合試劑 配置方法 取 500mL 三氯甲烷試劑,加入 21mL 異戊醇試劑,混勻。 24、1.6乙醛溶液乙醛溶液 組份濃度 1.6 配制量 0.1L
42、 配置方法 取 47乙醛 3.4mL,用去離子水定容至 100mL。 25、二苯胺試劑、二苯胺試劑 配置方法 1.稱取二苯胺試劑 0.8g,溶解于 180mL 冰乙酸中, 2.再加入 8mL 高氯酸混勻。 3. 臨用前加入 0.8mL 1.6乙醛溶液。 注意:配制完成后試劑應(yīng)為無色。 26、15三氯乙酸溶液三氯乙酸溶液 組份濃度 15 配制量 2L 配置方法 稱取三氯乙酸 300g,用去離子水溶解定容至2000mL。 27、1谷氨酸溶液谷氨酸溶液 組份濃度 1 配制量 0.5L 配置方法 1.稱取 5g 谷氨酸,先用適量得用去離子水溶解。 2. 再用氫氧化鉀溶液中和至中性。 3. 最后用去離子
43、水定容至 0.5L。 28、1丙酮酸溶液丙酮酸溶液 組份濃度 1 配制量 0.5L 配置方法 1.稱取 5g 丙氨酸,先用適量得用去離子水溶解。 2. 再用氫氧化鉀溶液中和至中性。 3. 最后用去離子水定容至 0.5L。 29、0.1的碳酸氫鉀溶液的碳酸氫鉀溶液 組份濃度 0.1 配制量 0.5L 配置方法 稱取碳酸氫鉀 0.5g,用去離子水溶解定容至0.5L。 30、0.05的碘乙酸溶液的碘乙酸溶液 組份濃度 0.05 配制量 0.25L 配置方法 稱取 0.125g 碘乙酸,用去離子水溶解定容至0.25L。 31、Locke 氏溶液氏溶液 配制量 2L 配置方法 稱取 18g 氯化鈉,0.
44、84g 氯化鉀, 48g 氯化鈣,0.3g 碳酸 氫鈉,2g 葡萄糖,用去離子水溶解定容至 2000mL。 32、0.2mol/L 的丁酸溶液的丁酸溶液 組份濃度 0.2mol/L 配制量 1L 配置方法 1.量取 18mL 正丁酸試劑。 2.用 1mol/L 的氫氧化鈉中和。 3.再用去離子水定容至 1L。 33、0.1mol/L 的硫代硫酸鈉溶液的硫代硫酸鈉溶液 組份濃度 0.1mol/L 配制量 10L 配置方法 稱 248.17g 硫代硫酸鈉,用去離子水溶解并定至10L。 34、0.1mol/L 的碘溶液的碘溶液 組份濃度 0.1mol/L 配制量 1L 配置方法 1.稱取碘 12.7
45、g 和碘化鉀 25g。 2.用去離子水溶解并定容至 1L。 3.用 0.1mol/L 的硫代硫酸鈉標(biāo)定。 35、10氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液 組份濃度 10 配制量 2L 配置方法 稱取 200g 氫氧化鈉,用去離子水溶解并定容至2L。 36、10鹽酸溶液鹽酸溶液 組份濃度 10 配制量 0.2L 配置方法 量取濃鹽酸 49.3mL,用去離子水定至 0.2mL。 37、0.1標(biāo)準(zhǔn)丙氨酸溶液標(biāo)準(zhǔn)丙氨酸溶液 組份濃度 0.1 配制量 0.5L 配置方法 稱取丙氨酸 0.5g,用去離子水溶解并定容至0.5mL。 38、0.1標(biāo)準(zhǔn)谷氨酸溶液標(biāo)準(zhǔn)谷氨酸溶液 組份濃度 0.1 配制量 0.5L 配置方法
46、稱取谷氨酸 0.5g,用去離子水溶解并定容至500mL。 39、0.1水合茚三酮乙醇溶液水合茚三酮乙醇溶液 組份濃度 0.1 配制量 1L 配置方法 稱取 1g 水合茚三酮試劑,溶于 1000mL 無水乙醇中。 40、酚溶液、酚溶液 配置方法 在大燒杯中加入 80mL 去離子水,再加入 300g 苯酚,在水 浴中加熱攪拌、混合至苯酚完全溶解。將該溶液倒入盛有200mL 去離子水的 1000mL 分液漏斗內(nèi),輕輕振蕩混合,使其成為乳狀液。靜止 710 小時(shí),乳狀液變成兩層透明溶液,下層為被水飽和的酚溶液,放出下層,貯存于棕色瓶中備用。 41、0.5淀粉溶液淀粉溶液 組份濃度 0.5 配制量 0.
47、1L 配置方法 稱取淀粉 0.5g,用去離子水溶解定容至 0.1L。 42、對羥基聯(lián)苯試劑、對羥基聯(lián)苯試劑 配置方法 稱取對羥基聯(lián)苯 1.5g,溶于 100mL0.5氫氧化鈉溶液中, 配制成 1.5的溶液。若對羥基聯(lián)苯顏色較深,應(yīng)用丙酮或 無水乙醇重結(jié)晶,放置時(shí)間較長后,會出項(xiàng)針狀結(jié)晶,應(yīng)搖勻后使用。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用緩沖液的配制方法生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用緩沖液的配制方法 1、0.2 mol/L 磷酸緩沖液磷酸緩沖液 組份濃度 0.2mol/L (pH 6.0) 配制量 1L 配置方法 1. 稱取磷酸氫二鈉12 水 8.82 g。 2. 稱取磷酸二氫鈉2 水 27.34g。 3. 用去離子水溶解并定容
48、至 1L。室溫保存。 注意:此為母液,使用時(shí)稀釋 40 倍使用。2、洗脫液、洗脫液 組份濃度 0.15mol/L (含(含 0.15mol/L 氯氯 配制量 10L 化鈉的化鈉的 0.005mol/L 配置方法 1.稱取氯化鈉 87.66g。 pH 6.0 的磷酸緩沖液)的磷酸緩沖液) 2. 用 0.2mol/L pH6.0 的 磷酸緩沖液 250mL 溶解。 3. 用去離子水稀釋至 10 L。室溫保存。 3、0.3mol/L 磷酸緩沖液磷酸緩沖液 組份濃度 0.3mol/L (pH7.8) 配制量 0.5L 配置方法 1.準(zhǔn)確稱取磷酸氫二鈉12 水 49.150g。 2.磷酸二氫鈉2 水 2
49、.000g。 3. 用去離子水溶解并定容至 0.5L。室溫保存。 注意:此為母液,使用時(shí)稀釋 10 倍使用。4、0.2mol/L 乙酸緩沖液乙酸緩沖液 組份濃度 0.2mol/L (pH4.6) 配制量 2L 配置方法 1.準(zhǔn)確稱取乙酸鈉3 水 54.44g。 2. 加入 23mL 冰乙酸,溶解。 3. 用去離子水溶解并定容至 2L。4保存。 5、0.2mol/L 磷酸磷酸-檸檬酸檸檬酸 組份濃度 0.2mol/L 緩沖液緩沖液 配制量 各 1L (pH 2.6、4.6、6.6) 配置方法 1. 母液 A(0.2mol/L 的 Na2HPO4溶液):稱取Na2HPO412 水 143.256g
50、, 用去離子水定容至 2L。 2. 母液 B(0.1mol/L 的檸檬酸溶液):稱取檸檬酸1水 42.028g 用去離子水溶解定容至 2L。 3. pH2.6、4.6、6.6 的三種緩沖液如下表配制: pH 值 A(mL) B(mL) 2.6 109.0 891.0 4.6 467.5 532.5 6.6 727.5 272.5 4. 按上表混勻后,4保存。6、20SSC 緩沖液緩沖液 配制量 1L (pH7.0) 配置方法 1.準(zhǔn)確稱取 175.2g 氯化鈉。 2.準(zhǔn)確稱取 88.2g 檸檬酸鈉2 水。 3.溶解于 800mL 去離子水中。 4.加入數(shù)滴 10mol/L 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) p
51、H 值至7.0。 5.加去離子水定容至 1L。 注意:按實(shí)驗(yàn)需要可分裝后高壓滅菌。 10SSC、5SSC、1SSC 可由 20SSC 做相應(yīng)稀釋得到。 7、0.15mol/L 氯化鈉氯化鈉- 組份濃度 0.15mol/L 乙二胺四乙酸二鈉乙二胺四乙酸二鈉 配制量 1L 緩沖液緩沖液 配置方法 1.準(zhǔn)確稱取氯化鈉 8.77g。 (pH8.0) 2. 稱取乙二胺四乙酸二鈉37.2g。 3. 溶于 800mL 去離子水中。 4.用固體的氫氧化鈉調(diào) pH 值為8.0。 5.加去離子水定容至 1L。 8、1/15mol/L 的磷酸鹽的磷酸鹽 組份濃度 0.15mol/L 緩沖液緩沖液 配制量 1L (p
52、H7.6) 配置方法1.溶液甲(1/15mol/L 的 KH2PO4溶液):稱取 KH2PO4 9.078g,用去離子水溶解定容至 1L。 2. 溶液乙(1/15mol/L 的 Na2HPO4溶液):稱取 Na2HPO4 2 水11.876g(或磷酸氫二鈉12 水 23.894g)用去離子水溶解定容至1L。 3.pH7.6 磷酸鹽緩沖液:將和按 1.4:8.6 比例混合即可。9、5Tris-GlycineBuffer 組份濃度 0.125M Tris,1.25M Glycine,0.5(w/v)SDS (SDS-PAGE 電泳緩沖液)電泳緩沖液) 配制量 1L 配置方法 1.稱取下列試劑,置于
53、 1L 燒杯中。 Tris 15.1g Glycine 94g SDS 5.0g 2.加入約 800mL 的去離子水,攪拌溶解。 3.加去離子水將溶液定容至 1L 后,室溫保存。 10、5SDS-PAGE 組份濃度 250mM Tris-HCl(pH6.8) Loading Buffer 10(W/V) SDS 0.5(W/V) BPB 50(V/V) 甘油 5(W/V) -巰基乙醇 配制量 5mL 配置方法 1.量取下列試劑,置于 10mL 塑料離心管中。 1M Tris-HCl 1.25mL SDS 0.5g BPB 25mg 甘油 2.5mL 2.加入去離子水溶解后定容至 5mL。 3.
54、小份(500l/份)分裝后,于室溫保存。 4.使用前將 25l 的 2-ME 加到每小份中。 5.加入 2-ME 的 Loading Buffer 可在室溫下保存一個月左右生生物物化化學(xué)學(xué)實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)常常用用柱柱料料數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)及及性性質(zhì)質(zhì)1、DEAE 陰離子交換纖維素(1)纖維素的處理 取纖維素干品用蒸餾水浸泡,充分溶漲并攪拌均勻,過夜。次日再攪勻,靜止 30min 留下沉集部分(重復(fù) 3 次),用真空泵抽干。然后用適量的 0.5mol/L 的氫氧化鈉溶液浸泡 30min,抽干,蒸餾水洗至中性;再用適量的0.5mol/L 的鹽酸溶液浸泡 30min,抽干,蒸餾水洗至中性;重復(fù)用 0.5mol/L 的
55、氫氧化鈉溶液浸泡 30min,抽干,蒸餾水洗至中性。最后用 0.005mol/L pH6.0 的磷酸緩沖液浸泡待用。 (2)纖維素的重生 回收的纖維素先用 0.5mol/L 氯化鈉-0.5mol/L 氫氧化鈉溶液浸泡,再按上述(1)操作處理,即可再次投入使用。 (3)纖維素的保存 回收后,用 0.5mol/L 氫氧化鈉溶液浸泡 30min 后,蒸餾水洗至中性,抽干,于鼓風(fēng)干燥箱中 60烘干后,保存。2、SephadexG 型葡聚糖凝膠 (1)凝膠的特性要點(diǎn)葡聚糖 G 后面的數(shù)字代表不同的交聯(lián)度,數(shù)值越大交聯(lián)度越小,吸水量越大。其數(shù)值大致為吸水量 X 的 10 倍。Sephadex對堿和弱酸穩(wěn)定
56、(在 0.1mol/L 鹽酸中可以浸泡 12 小時(shí))。在中性時(shí)可以高壓滅菌。不同型號中又有顆粒粗細(xì)之分。顆粒粗的分離效果差,流速快。顆粒越細(xì)分離效果越好,但流速也越慢。交聯(lián)葡聚糖工作時(shí)的 pH 穩(wěn)定在 211 的范圍內(nèi)。葡聚糖 G 型凝膠分離的分子量分級范圍為7008105。SephadexG 型葡聚糖凝膠的數(shù)據(jù)見下表。*本表數(shù)值取自 Pharmacia Biotech Biodirectory 1996。 *為2.630cm 層析柱在 25用蒸餾水測定之值。 DDarcys law(2)凝膠的溶脹* G 系交聯(lián)葡聚糖凝膠親水性強(qiáng),只能在水中溶脹(僅有少量的有機(jī)溶劑也可以使之溶脹),有機(jī)溶劑或
57、含有有機(jī)溶劑較多的水溶液會改變其孔隙,使之收縮失去或降低凝膠的分離能力。在水中溶脹時(shí)如在室溫則需要較長時(shí)間,才能達(dá)到充分溶脹的程度,但可煮沸到 100,以縮短其溶脹時(shí)間。見下表 Sephadex G 型葡聚糖凝膠溶脹所需時(shí)間型葡聚糖凝膠溶脹所需時(shí)間 所需最小溶脹時(shí)間* 凝膠型號 G-10G-200 2022(室溫) 100(沸水?。?Sephadex G-10 3 1 G-15 3 1 G-25 3 1 G-50 3 1 G-75 24 3 G-100 72 5 G-150 725 G-200 72 5 *溶脹時(shí)要將凝膠浸泡在過量的水或緩沖液中。在整個溶脹過程中應(yīng)避免劇烈地?cái)嚢?,尤其不能使用?/p>
58、磁攪拌,以免破壞了它的顆粒結(jié)構(gòu),以及產(chǎn)生許多碎末而影響洗脫時(shí)的流速。 (3)凝膠的回收與保存 凝膠的再生最好不要在柱上進(jìn)行(有些凝膠可以在位清洗),可將凝膠在 0.5mol/L 氯化鈉及 0.5mol/L 氫氧化鈉的混合溶液中浸泡;一般約需 30 分鐘以上。然后用蒸餾水洗至中性,最后用緩沖液平衡即可恢復(fù)使用。 經(jīng)常使用的凝膠,一般加入一些抗菌劑放在普通冰箱中,即可保存較長的時(shí)間。如確切在相當(dāng)長的時(shí)間里不準(zhǔn)備使用時(shí),則以保存干凝膠為好。處理時(shí)可先用較濃的氯化鈉浸泡(如 0.5mol/L),在用 0.5mol/L 的氫氧化鈉處理并用蒸餾水洗至中性,然后用遞增百分比濃度的乙醇分多次作脫水處理。一般可
59、從30的乙醇開始;每次均應(yīng)讓凝膠在乙醇中多浸泡一些時(shí)間。在無水乙醇處理后,最后再用乙醚處理一次以加速乙醇的揮發(fā)。處理后的凝膠宜在 80以下的溫度烘干。在進(jìn)行凝膠的回收時(shí),如在每一步操作時(shí),均使用布氏漏斗抽濾可大大地加快整個回收過程。 【注意】 a凝膠在氫氧化鈉溶液中浸泡的時(shí)間不要太長。 b不要圖快過早地使用百分濃度太大地乙醇,以免凝膠顆粒收縮太快,破壞了它地結(jié)構(gòu),因而影響了它地分離能力。 c在乙醚未充分揮發(fā)完以前,切不可將含有多量乙醚地凝膠放入烘箱,以免發(fā)生危險(xiǎn)。 d溶脹了地凝膠不可放入低溫冰箱中凍結(jié),以免其球形結(jié)構(gòu)被破壞。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用培養(yǎng)基的配制微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用培養(yǎng)基的配制1、牛肉膏蛋白
60、胨培養(yǎng)基(培養(yǎng)細(xì)菌用)、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(培養(yǎng)細(xì)菌用) 牛肉膏 3g 蛋白胨 5g 氯化鈉 10g 瓊脂1520g pH 7.07.2 水 1000mL 121滅菌 20min。 2、高氏(、高氏(Gause)1 號培養(yǎng)基(培養(yǎng)放線菌用)號培養(yǎng)基(培養(yǎng)放線菌用) 可溶性淀粉 20g 硝酸鉀 1g 氯化鈉 0.5g 磷酸氫二鉀 0.5g 硫酸鎂 0.5g 硫酸亞鐵 0.01g 瓊脂 20g 水 1000mL pH 7.27.4 配制時(shí),先用少量冷水將淀粉調(diào)成糊狀,倒入煮沸的水中,在火上加熱,邊攪拌邊加入其他成分,溶化后,補(bǔ)足水分至1000mL。121滅菌 20min。 3、查氏(、查氏(Cza
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