黃芩中黃芩苷類化合物的提取

1、黃芩中黃芩中黃芩苷類黃芩苷類化合物的提取、化合物的提取、分離與鑒定分離與鑒定2022-7-3黃黃芩芩苷苷（B Ba ai ic ca al li in n）O OO OO OO OH HO OH HO OH HO OH HH HO OC CO OO OH HO O漢漢黃黃芩芩苷苷（W Wo og go on no os si id de e）O OO OO OO OH HO OH HO OH HO OH HC CO OO OH HO OO OC CH H3 3O OO OH HO OH HO OH HO O黃黃芩芩素素（B Ba ai ic ca al le ei in n）O OO OH H

2、O OO OC CH H3 3H HO O漢漢黃黃芩芩素素（W Wo og go on ni in n）水解水解黃芩中黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)黃芩中黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸苷元苷元黃芩苷的相關(guān)特性黃芩苷的相關(guān)特性淡黃色淡黃色的針晶，因含有的針晶，因含有-OH-OH、-COOH-COOH而顯酸性，可溶于堿性而顯酸性，可溶于堿性試劑中。試劑中。理化性質(zhì)藥理價值抗氧化抗氧化-清除氧自由基及抗氧化作用清除氧自由基及抗氧化作用抗菌抗菌-對微生物的抑制作用對微生物的抑制作用抗抗HIV-HIV-對人類免疫病毒對人類免疫病毒HIVHIV的抑制的抑制免疫調(diào)節(jié)免疫調(diào)節(jié)-對免疫功能的調(diào)節(jié)作用對免疫功

3、能的調(diào)節(jié)作用張喜平，田華，程琪輝.黃芩苷的藥理作用研究現(xiàn)狀.中國藥理學(xué)通報，2003,19（11）：12121215提提取取流流程程黃芩粗粉（100g）濾液1濾渣投入8倍量的沸水中，煎煮20min,用脫脂棉過濾（第一次）投入6倍量沸水煎煮2次（第二次、第三次），每次20min,用脫脂棉過濾濾液2、3濾渣合并濾液1、2、3，滴加濃硫酸至pH 1-2,充分?jǐn)嚢瑁訜嶂?0，保溫30min，濾過濾液沉淀原理：黃芩苷和苷元在熱水中的溶解度較大，在酸中不溶而析出。離心機(jī)的使用4 3000 34 3000 3轉(zhuǎn)子數(shù)轉(zhuǎn)子數(shù) 轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)速 時間時間原理：通過離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大原理：通過離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)

4、產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力離心力，懸浮液與，懸浮液與懸浮顆粒之間因為重力的差異，而導(dǎo)致不同的懸浮顆粒之間因為重力的差異，而導(dǎo)致不同的沉降速度沉降速度。樣品要對稱放置樣品要對稱放置停止后才能打開停止后才能打開離心機(jī)使用注意樣品瓶外面無水樣品瓶外面無水打開打開交交叉叉對對稱稱第二次下進(jìn)下進(jìn)上出上出索式提取器索式提取器沉淀轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加濃度95%的乙醇超聲洗滌2-3次，每次50 mL,離心乙醇液沉淀（主含黃芩苷）將其置于索式提取器中，加甲醇提取至液色極淡為止甲醇提取液結(jié)晶濃縮至10 mL，放置析晶，抽濾結(jié)晶結(jié)晶結(jié)晶法結(jié)晶法1.結(jié)晶法的操作結(jié)晶法的操作2.結(jié)晶溶劑的選擇結(jié)晶溶劑的選擇將需要結(jié)晶處理的固體物質(zhì)或

5、粗晶加熱溶解在一定量的溶劑中，制成過飽和溶液，趁熱過濾，除去不溶性雜質(zhì)，將濾液慢慢冷卻放置，析出結(jié)晶，過濾即得。結(jié)晶溶劑的選擇是關(guān)鍵。對結(jié)晶溶劑的要求：對欲純化成分加熱時溶解，冷卻時析出； 對雜質(zhì)則冷熱都不溶或都溶； 溶劑的沸點(diǎn)適中； 與欲結(jié)晶的成分不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)； 盡可能安全、價廉、易得等。常用結(jié)晶溶劑：水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等等。第三次第三次結(jié)晶（黃芩苷）取結(jié)晶1g置圓底燒瓶中，加甲醇100 mL,加熱回流20 min，趁熱過濾甲醇溶液濃縮至10 mL，放置析晶，抽濾精制黃芩苷由于上節(jié)課得到的黃芩苷結(jié)晶太少，回流這一步就暫時不做。鑒鑒 定定1.1.顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)鹽酸鎂粉

6、反應(yīng)：取樣品少許，加稀乙醇熱溶，加鎂粉少許，滴加濃鹽酸數(shù)滴，觀察溶液顏色的變化。 三氯化鐵反應(yīng)：取樣品少許，溶于水或乙醇中，加1%三氯化鐵醇溶液一滴，觀察溶液顏色的變化。Molish反應(yīng)：取樣品少許置于試管中，加0.5 ml 乙醇溶解，再加入1%-萘酚溶液數(shù)滴；然后沿管壁加入濃鹽酸約0.5ml，觀察兩溶液界面處顏色的變化。ABC上節(jié)課的黃芩苷結(jié)晶2.色譜鑒定（1 1）樣品的制備（黃芩苷的水解）：樣品的制備（黃芩苷的水解）： 精密稱取黃芩苷約0.5g，置干燥25ml錐形瓶中，加入濃硫酸3ml，用玻棒攪拌均勻，滴加蒸餾水約2ml使黃芩苷溶解，得透明橙紅色溶液。水浴加熱15min左右，放冷。將此溶液

7、在攪拌下傾入20ml冰水中，析出黃色沉淀，抽濾并用水洗滌至無酸性反應(yīng)，干燥。 水解所得黃色沉淀，用氯仿反復(fù)提取，合并氯仿溶液，濃縮回收氯仿至干，殘留物再用甲醇重結(jié)晶得黃色針晶，為黃芩素，供苷元的鑒定。(不做) 濾去苷元后的水溶液，加固體碳酸鋇使水溶液至中性，濾去碳酸鋇沉淀。濾液濃縮至23ml，供糖的鑒定。酚羥基的酚羥基的鑒別鑒別10 mL左右左右2 2個點(diǎn)個點(diǎn)樣品：水解所得糖的溶液。對照品：葡萄糖醛酸展開劑：正丁醇-醋酸-水（4:1:5，上層）顯色劑：苯胺-鄰苯二甲酸試液于105烘10min，顯色。（2）糖的紙色譜鑒定黃芩苷的聚酰胺薄層色譜鑒定 樣品：自制黃芩苷的乙醇溶液 對照品：黃芩苷對照品的乙醇溶液 展開劑：冰乙酸（610 mL） 顯色劑：2%的三氯