心臟生化標(biāo)志物檢驗(yàn)

1、第十二章第十二章心臟生化標(biāo)志物心臟生化標(biāo)志物檢驗(yàn)檢驗(yàn)第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 心臟的傳導(dǎo)系統(tǒng)主要由特殊分化的心肌細(xì)心臟的傳導(dǎo)系統(tǒng)主要由特殊分化的心肌細(xì)胞組成，位于心壁內(nèi)，具有胞組成，位于心壁內(nèi)，具有產(chǎn)生興奮、傳導(dǎo)沖動(dòng)產(chǎn)生興奮、傳導(dǎo)沖動(dòng)和維持心臟正常節(jié)律性搏動(dòng)的功能。和維持心臟正常節(jié)律性搏動(dòng)的功能。 心肌細(xì)胞富含多種酶類和蛋白質(zhì)，有些酶心肌細(xì)胞富含多種酶類和蛋白質(zhì)，有些酶在心肌的含量較高，有些蛋白質(zhì)是心肌細(xì)胞特異在心肌的含量較高，有些蛋白質(zhì)是心肌細(xì)胞特異的。的。心臟的功能心臟的功能 心臟的功能為泵血。心臟實(shí)際上是個(gè)血心臟的功能為泵血。心臟實(shí)際上是個(gè)血液泵，由起搏傳導(dǎo)細(xì)胞和收縮細(xì)胞所組成，液泵，由起

2、搏傳導(dǎo)細(xì)胞和收縮細(xì)胞所組成，不停地進(jìn)行收縮和舒張，舒張時(shí)接納來自靜不停地進(jìn)行收縮和舒張，舒張時(shí)接納來自靜脈的回流血，收縮時(shí)將接納的血液等量地排脈的回流血，收縮時(shí)將接納的血液等量地排入動(dòng)脈，保證血液周而復(fù)始，循環(huán)不斷。入動(dòng)脈，保證血液周而復(fù)始，循環(huán)不斷。心臟的生化標(biāo)志物心臟的生化標(biāo)志物1.心臟的酶類標(biāo)志物心臟的酶類標(biāo)志物 血清中有多種酶，但各種酶的來源或組織、器血清中有多種酶，但各種酶的來源或組織、器官特異性不一。官特異性不一。 其中血清其中血清CK、CK-MB、AST、LDH、-HBD等主要來自于心肌，一起組成心肌酶譜，對診斷心等主要來自于心肌，一起組成心肌酶譜，對診斷心臟疾病有重要意義。臟疾

3、病有重要意義。 但但作為心臟的酶類標(biāo)志物主要有：作為心臟的酶類標(biāo)志物主要有：LDH、CK、AST及其同工酶等及其同工酶等，這些酶在血清中的活性變化可，這些酶在血清中的活性變化可反映心臟功能的好壞和心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完好程度。反映心臟功能的好壞和心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完好程度。2.蛋白類標(biāo)志物蛋白類標(biāo)志物 心肌中含有諸多蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)在體心肌中含有諸多蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)在體內(nèi)發(fā)揮著重要功能。但內(nèi)發(fā)揮著重要功能。但作為反映心臟結(jié)構(gòu)和心作為反映心臟結(jié)構(gòu)和心肌損傷的蛋白類標(biāo)志物主要有：肌紅蛋白（肌損傷的蛋白類標(biāo)志物主要有：肌紅蛋白（Mb）和肌鈣蛋白（和肌鈣蛋白（cTn）。）。 正常人血中正常人血中Mb含量很低

4、，當(dāng)心肌損傷時(shí)，含量很低，當(dāng)心肌損傷時(shí)，血中血中Mb明顯增高；肌鈣蛋白是心肌的結(jié)構(gòu)蛋白，明顯增高；肌鈣蛋白是心肌的結(jié)構(gòu)蛋白，由三個(gè)亞單位組成，即肌鈣蛋白由三個(gè)亞單位組成，即肌鈣蛋白C(cTnC)、肌、肌鈣蛋白鈣蛋白I(cTnI)、肌鈣蛋白、肌鈣蛋白T(cTnT)，其中，其中cTnI是是心肌損傷的特異指標(biāo)。心肌損傷的特異指標(biāo)。二、心臟疾病的實(shí)驗(yàn)診斷二、心臟疾病的實(shí)驗(yàn)診斷（一）急性心肌梗死（一）急性心肌梗死 基于基于AMI后梗死部位心肌細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)物后梗死部位心肌細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)將釋放到外周血中的病理生理改變，通過對質(zhì)將釋放到外周血中的病理生理改變，通過對這些化學(xué)的測定可診斷這些化學(xué)的測定可診斷A

5、MI。 決定一種標(biāo)志物血濃度變化的因素有該物決定一種標(biāo)志物血濃度變化的因素有該物質(zhì)的分子大小、在細(xì)胞內(nèi)的分布（胞漿中的小質(zhì)的分子大小、在細(xì)胞內(nèi)的分布（胞漿中的小分子蛋白較結(jié)構(gòu)蛋白更易進(jìn)入血液循環(huán)）、釋分子蛋白較結(jié)構(gòu)蛋白更易進(jìn)入血液循環(huán)）、釋放率、清除率和心肌特異性等。放率、清除率和心肌特異性等。1.經(jīng)典酶組經(jīng)典酶組特性特性CKCK-MBASTLDH-HBD開始升高時(shí)間（開始升高時(shí)間（h）3-62-46-128-1212-24達(dá)峰值時(shí)間（達(dá)峰值時(shí)間（h）20-3012-244824-4848-72升高幅度（對照值倍數(shù)）升高幅度（對照值倍數(shù)）2-204-202-102-65-7.5陽性率（陽性率（

6、%）95100938998回復(fù)正常時(shí)間（回復(fù)正常時(shí)間（d）2-433-57-1411-16診斷價(jià)值診斷價(jià)值早期診早期診斷及預(yù)斷及預(yù)后后早期診早期診斷及預(yù)斷及預(yù)后后后期診后期診斷（特?cái)啵ㄌ禺愋圆睿┊愋圆睿┖笃谠\后期診斷（特?cái)啵ㄌ禺愋圆睿┊愋圆睿┖笃谠\后期診斷（特?cái)啵ㄌ禺愋愿撸┊愋愿撸?.LDH同工酶組同工酶組同工酶比例應(yīng)為：同工酶比例應(yīng)為：LDH2LDH1 LDH3 LDH4 LDH5 （小兒有時(shí)也出現(xiàn)（小兒有時(shí)也出現(xiàn)LDH1 LDH2 ） ，其中，其中LDH1/ LDH2 0.7。 AMI 發(fā)病后血清發(fā)病后血清LDH1和和LDH2顯著升高，顯著升高，約約95%的的病例病例LDH1/ LDH2

7、1，且比值升高早于，且比值升高早于LDH總酶活性總酶活性，多在多在3-5d達(dá)峰值，持續(xù)時(shí)間越達(dá)峰值，持續(xù)時(shí)間越3周，可彌補(bǔ)周，可彌補(bǔ)CK（4d內(nèi)）內(nèi)）和和AST（1周內(nèi)）活性升高時(shí)間短暫的不足；如周內(nèi)）活性升高時(shí)間短暫的不足；如LDH1/ LDH2 1，且出現(xiàn)，且出現(xiàn)LDH5增高時(shí)，提示并發(fā)肝臟淤血或肝增高時(shí)，提示并發(fā)肝臟淤血或肝功能衰竭，預(yù)后不良。功能衰竭，預(yù)后不良。3.CK/LDH比值比值 測定測定AMI病人病人CK/LDH比值發(fā)現(xiàn)，其峰值在發(fā)比值發(fā)現(xiàn)，其峰值在發(fā)病后病后12-16h，明顯早于，明顯早于CK和和CK-MB，其診斷陽性，其診斷陽性率在率在9-24h內(nèi)為內(nèi)為100%，且有很高的

8、特異性，是，且有很高的特異性，是對對AMI最有實(shí)用的酶學(xué)指標(biāo)最有實(shí)用的酶學(xué)指標(biāo)，而且測定方法簡單易行。，而且測定方法簡單易行。 除此，糖原磷酸化酶同工酶組、肌酸激酶同除此，糖原磷酸化酶同工酶組、肌酸激酶同工酶亞型的檢測與分析對工酶亞型的檢測與分析對AMI的診斷液非常有價(jià)值。的診斷液非常有價(jià)值。（二）心肌炎（二）心肌炎 通過測定和分析病毒心肌炎病人血清酶組通過測定和分析病毒心肌炎病人血清酶組證實(shí)：血清證實(shí)：血清LDH、AST、-HBD、CK、CK-MB，等，等各種酶活性升高的幅度均遠(yuǎn)不如各種酶活性升高的幅度均遠(yuǎn)不如AMI患患者者，血清，血清CK和和CK-MB活性恢復(fù)較早活性恢復(fù)較早，而血清，而血

9、清AST和和LDH恢復(fù)較慢恢復(fù)較慢，患者，患者心電圖改變幾乎與心電圖改變幾乎與心肌酶活性高低無關(guān)心肌酶活性高低無關(guān)。隨病情好轉(zhuǎn)上述酶活性。隨病情好轉(zhuǎn)上述酶活性逐漸恢復(fù)正常。逐漸恢復(fù)正常。（三）其他疾?。ㄈ┢渌膊?充血性心力衰竭但無心肌梗死病人充血性心力衰竭但無心肌梗死病人，其血，其血清清AST及及LDH活性常升高活性常升高，LDH活性升高主要是活性升高主要是由由LDH5升高所致；但升高所致；但血清血清CK活性正?；钚哉?，主要由，主要由于心力衰竭引起肝淤血、缺氧、肝細(xì)胞受損害所于心力衰竭引起肝淤血、缺氧、肝細(xì)胞受損害所致。這些病人還可有血清致。這些病人還可有血清ALT升高。升高。 慢性肺心

10、病患者慢性肺心病患者血清超氧化物歧化酶（血清超氧化物歧化酶（SOD）明顯升高，急性加重期患者又明顯高于緩解期的明顯升高，急性加重期患者又明顯高于緩解期的病人。病人。（四）心臟手術(shù)（四）心臟手術(shù) 心臟手術(shù)包括心臟瓣膜置換術(shù)、二尖瓣成形術(shù)、心臟手術(shù)包括心臟瓣膜置換術(shù)、二尖瓣成形術(shù)、房間隔缺損修補(bǔ)術(shù)、室間隔缺損修補(bǔ)術(shù)、肺動(dòng)脈狹窄房間隔缺損修補(bǔ)術(shù)、室間隔缺損修補(bǔ)術(shù)、肺動(dòng)脈狹窄切開術(shù)、冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)等。切開術(shù)、冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)等。 體外循環(huán)心臟手術(shù)需暫時(shí)阻斷升主動(dòng)脈和冠狀體外循環(huán)心臟手術(shù)需暫時(shí)阻斷升主動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈，造成心肌缺血、缺氧、心肌細(xì)胞無法進(jìn)行糖的動(dòng)脈，造成心肌缺血、缺氧、心肌細(xì)胞無法進(jìn)行糖的有氧

11、分解。有氧分解。ATP顯著減少，故顯著減少，故CK活性代償性增強(qiáng)活性代償性增強(qiáng)，保，保證能量來自磷酸肌酸的分解；證能量來自磷酸肌酸的分解； 心肌細(xì)胞缺氧時(shí)，心肌細(xì)胞缺氧時(shí)，細(xì)胞膜通透性增加細(xì)胞膜通透性增加，使，使CK、CK-MB、AST、LDH、-HBD漏至細(xì)胞外，導(dǎo)致血清漏至細(xì)胞外，導(dǎo)致血清中酶活性升高。中酶活性升高。第二節(jié)第二節(jié)心臟酶類標(biāo)志物心臟酶類標(biāo)志物檢驗(yàn)檢驗(yàn)一、乳酸脫氫酶及其同工酶一、乳酸脫氫酶及其同工酶1.乳酸脫氫酶乳酸脫氫酶 LDH屬糖酵解酶，廣泛存在于各種組織中，屬糖酵解酶，廣泛存在于各種組織中，以心肌、骨骼肌、腎臟、肝臟中含量最豐富，以心肌、骨骼肌、腎臟、肝臟中含量最豐富，L

12、DH測定常用于診斷心肌梗死，肝病和某些惡測定常用于診斷心肌梗死，肝病和某些惡性腫瘤。性腫瘤?！緟⒖挤秶鷧⒖挤秶?速率法速率法 109-145U/L109-145U/L（3737） 比色法比色法 190-437190-437金氏單位金氏單位【臨床意義臨床意義】 心肌梗死患者在發(fā)生胸痛后心肌梗死患者在發(fā)生胸痛后8-12h LDH開始升開始升高，高，24-48h達(dá)高峰，酶活性升高可維持達(dá)高峰，酶活性升高可維持7d左右或更左右或更長，可作為急性心肌梗死后期的輔助診斷指標(biāo)。升長，可作為急性心肌梗死后期的輔助診斷指標(biāo)。升高水平通常為正常的高水平通常為正常的3-4倍，最高可達(dá)倍，最高可達(dá)10倍。倍。 LD

13、H中中度升高見于心肌炎。度升高見于心肌炎。同工酶及其亞基同工酶及其亞基組成組成心肌心肌肝肝骨骼肌骨骼肌紅細(xì)胞紅細(xì)胞LDH1(H4)602442LDH2(H3M)336744LDH3(H2M2)7151710LDH(HM3)113164LDH4(M4)16456 LDH1 LDH3 LDH4LDH5。LDH1 （28.4 5.3）% LDH2 （41.0 5.0）% LDH3 （19.0 4.0）% LDH4 （6.6 3.5）%LDH5 （4.6 3.0）%【臨床意義臨床意義】 通常在通常在AMI后后6h， LDH1開始出現(xiàn)升高，總開始出現(xiàn)升高，總LDH升高略為滯后。由于升高略為滯后。由于AM

14、I時(shí)時(shí)LDH1較較LDH2釋放釋放多，多，因此因此LDH1 /LDH2 1.0， LDH1 /LDH2比值的比值的峰時(shí)約在發(fā)病后峰時(shí)約在發(fā)病后24-36h，然后開始下降，發(fā)病后，然后開始下降，發(fā)病后4-7d恢復(fù)正常。恢復(fù)正常。 LDH1 LDH2也可出現(xiàn)在心肌炎、肺栓塞、也可出現(xiàn)在心肌炎、肺栓塞、巨細(xì)胞性貧血和溶血性貧血，但體外溶血通常不巨細(xì)胞性貧血和溶血性貧血，但體外溶血通常不會(huì)導(dǎo)致會(huì)導(dǎo)致LDH1 LDH2。 二、肌酸激酶及其同工酶二、肌酸激酶及其同工酶1.血清肌酸激酶血清肌酸激酶肌酸激酶主要存在于骨骼肌、心肌、腦組織中。肌酸激酶主要存在于骨骼肌、心肌、腦組織中。【參考范圍參考范圍】 男性（

15、男性（U/L） 女性（女性（U/L） 25 10-65 7-55 30 15-105 10-80 37 38-174 26-140【臨床意義臨床意義】 1.CK測定臨床上主要用于診斷心肌梗死。測定臨床上主要用于診斷心肌梗死。急性心肌梗死后急性心肌梗死后3-6h就開始急劇升高，可高達(dá)就開始急劇升高，可高達(dá)正常上限的正常上限的10-12倍，倍，20-30h達(dá)高峰。達(dá)高峰。CK對診對診斷心肌梗死較斷心肌梗死較AST、LDH的的特異性高，但此酶特異性高，但此酶增高持續(xù)時(shí)間較短，增高持續(xù)時(shí)間較短，在在2-4d后就恢復(fù)正常。后就恢復(fù)正常。 2.病毒性心肌炎時(shí)，病毒性心肌炎時(shí)，CK活性也可明顯升活性也可明顯

16、升高。高。 3.心臟手術(shù)和非心臟手術(shù)后都將導(dǎo)致心臟手術(shù)和非心臟手術(shù)后都將導(dǎo)致CK活性的增高，且增高的幅度與肌肉的損活性的增高，且增高的幅度與肌肉的損傷范圍的大小以及手術(shù)時(shí)間的長短密切相關(guān)。傷范圍的大小以及手術(shù)時(shí)間的長短密切相關(guān)。 4.在急性腦外傷、腦膜炎、惡性腫瘤、在急性腦外傷、腦膜炎、惡性腫瘤、肺梗死、甲狀腺功能低下時(shí)，肺梗死、甲狀腺功能低下時(shí)，CK可可增高?？煽稍龈摺?.肌酸激酶同工酶肌酸激酶同工酶 肌酸激酶（肌酸激酶（CK）分子是由）分子是由M亞基和亞基和B亞基亞基組成的二聚體。在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)共有三種同工酶：組成的二聚體。在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)共有三種同工酶：即即CK-BB（CK-1）、）、CK-MB（

17、CK-2）、）、 CK-MM（CK-3）。）?！緟⒖挤秶鷧⒖挤秶緾K-MB CK-MB 小于小于10U/L10U/L（3737）CK-MB/CKCK-MB/CK總活性總活性 小于小于5%5%【臨床意義臨床意義】 血漿中血漿中CK-MB主要來自心肌，升高常被認(rèn)主要來自心肌，升高常被認(rèn)為心肌損害特異性指標(biāo)，對為心肌損害特異性指標(biāo)，對心肌梗死早期診斷很心肌梗死早期診斷很有價(jià)值。有價(jià)值。 在急性心肌梗死發(fā)病在急性心肌梗死發(fā)病2-4h血清血清CK-MB即開即開始升高（大于始升高（大于15u/L），），12-24h達(dá)到峰值，如無達(dá)到峰值，如無并發(fā)癥并發(fā)癥3d后恢復(fù)正常水平。后恢復(fù)正常水平。 胸痛發(fā)作胸痛

18、發(fā)作3小時(shí)后用小時(shí)后用CK-MB診斷診斷AMI陽性率陽性率可達(dá)可達(dá)50%，6小時(shí)的診斷陽性率可達(dá)小時(shí)的診斷陽性率可達(dá)80%。 一般認(rèn)為一般認(rèn)為CK-MB CK6%時(shí)為陽性。時(shí)為陽性。 CK-MB對心肌并不完全特異，急性骨骼肌損對心肌并不完全特異，急性骨骼肌損傷時(shí)傷時(shí)CK-MB可一過性增高，但可一過性增高，但CK-MB/CK常常6%，可與心肌損傷鑒別?？膳c心肌損傷鑒別。三、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶及其同工酶三、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶及其同工酶1.1.天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 AST AST廣泛分布于全身各組織器官，在心廣泛分布于全身各組織器官，在心肌細(xì)胞內(nèi)含量最多。肌細(xì)胞內(nèi)含量最多?！?/p>

19、參考范圍參考范圍】速率法速率法 8-40U/L8-40U/L（反應(yīng)溫度為（反應(yīng)溫度為3737）比色法比色法 8-288-28卡門單位（反應(yīng)溫度為卡門單位（反應(yīng)溫度為3737）【臨床意義臨床意義】 當(dāng)心肌梗死時(shí)，血清中當(dāng)心肌梗死時(shí)，血清中ASTAST活性增高，在發(fā)活性增高，在發(fā)病后病后6-12h6-12h之內(nèi)顯著增高，增高的程度可反映損之內(nèi)顯著增高，增高的程度可反映損害的程度，在害的程度，在48h48h達(dá)到高峰，約在達(dá)到高峰，約在3-5d3-5d恢復(fù)正常。恢復(fù)正常。 心肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎等也可引起心肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎等也可引起血清血清ASTAST的輕度增高。的輕度增高。 AST AS

20、T與與CK-MBCK-MB、LDHLDH等聯(lián)合測定有助于對急性等聯(lián)合測定有助于對急性心肌梗死的病程判斷。心肌梗死的病程判斷。2.2.天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶同工酶天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶同工酶 AST AST有兩種受不同基因控制的同工酶，分別有兩種受不同基因控制的同工酶，分別存在于細(xì)胞質(zhì)（存在于細(xì)胞質(zhì)（c-ASTc-AST）和線粒體（）和線粒體（m-ASTm-AST）中。）中?！緟⒖挤秶鷧⒖挤秶?m- AST 15U/L m- AST 15U/L（3737）【臨床意義臨床意義】 m-AST m-AST一般要在細(xì)胞壞死、線粒體破壞后一般要在細(xì)胞壞死、線粒體破壞后才釋放入血，當(dāng)細(xì)胞不再破壞和修復(fù)時(shí)血清中

21、才釋放入血，當(dāng)細(xì)胞不再破壞和修復(fù)時(shí)血清中m-ASTm-AST值很快降至正常水平。因此，值很快降至正常水平。因此，測定測定m-ASTm-AST有利于判定細(xì)胞壞死嚴(yán)重程度，也有利于推測有利于判定細(xì)胞壞死嚴(yán)重程度，也有利于推測患者預(yù)后?；颊哳A(yù)后。 m-AST m-AST的動(dòng)態(tài)活性與病程密切相關(guān)，一般的動(dòng)態(tài)活性與病程密切相關(guān)，一般在心肌梗死發(fā)生后在心肌梗死發(fā)生后12h12h明顯升高（較明顯升高（較CKCK晚），晚），24h24h達(dá)峰值并持續(xù)至達(dá)峰值并持續(xù)至48h48h。 m-AST m-AST診斷心肌梗死的敏感性（為診斷心肌梗死的敏感性（為100%100%）和特異性（為和特異性（為93.5%93.5%

22、）均不低于）均不低于CK-MBCK-MB（分別（分別為為92.8%92.8%和和93.5% 93.5% ），且峰值時(shí)間較長，可），且峰值時(shí)間較長，可作為診斷心肌梗死的新酶學(xué)指標(biāo)。作為診斷心肌梗死的新酶學(xué)指標(biāo)。 心臟手術(shù)前的預(yù)后判斷：心臟手術(shù)前的預(yù)后判斷：術(shù)前術(shù)前m-ASTm-AST值值在在20U/L20U/L以上時(shí)，術(shù)后死亡率升高；而術(shù)前以上時(shí)，術(shù)后死亡率升高；而術(shù)前m-m-ASTAST值在值在20U/L20U/L以下時(shí)，術(shù)后預(yù)后良好。以下時(shí)，術(shù)后預(yù)后良好。第三節(jié)第三節(jié)心臟蛋白類標(biāo)志物心臟蛋白類標(biāo)志物檢驗(yàn)檢驗(yàn)一、血清肌紅蛋白一、血清肌紅蛋白 肌紅蛋白，是由一條肽鏈和一個(gè)血紅素輔基肌紅蛋白，是由

23、一條肽鏈和一個(gè)血紅素輔基組成的結(jié)合蛋白，是組成的結(jié)合蛋白，是肌肉內(nèi)儲(chǔ)存氧的蛋白質(zhì)肌肉內(nèi)儲(chǔ)存氧的蛋白質(zhì)，與，與氧的親和力比氧的親和力比Hb強(qiáng)，在極低的氧張力情況下，肌強(qiáng)，在極低的氧張力情況下，肌肉缺氧時(shí)，可釋放氧供肌肉收縮的急需。肉缺氧時(shí)，可釋放氧供肌肉收縮的急需。 肌紅蛋白是肌紅蛋白是組成骨骼肌和心肌的主要蛋白質(zhì)組成骨骼肌和心肌的主要蛋白質(zhì)，當(dāng)肌肉損傷時(shí)，可以從肌肉組織中漏到循環(huán)血液當(dāng)肌肉損傷時(shí)，可以從肌肉組織中漏到循環(huán)血液中，使血清肌紅蛋白濃度增加，該指標(biāo)用于判斷中，使血清肌紅蛋白濃度增加，該指標(biāo)用于判斷是否發(fā)生肌肉損傷。是否發(fā)生肌肉損傷。 測定方法測定方法：分光光度法、電泳法、層析法、：分

24、光光度法、電泳法、層析法、免疫化學(xué)法。免疫化學(xué)法。 現(xiàn)在普遍采用現(xiàn)在普遍采用乳膠增強(qiáng)透射比濁法乳膠增強(qiáng)透射比濁法 特點(diǎn)特點(diǎn)：靈敏度高、特異性好、測定速度快，：靈敏度高、特異性好、測定速度快，適用于各類型生化自動(dòng)分析儀。適用于各類型生化自動(dòng)分析儀?！驹碓怼?Mb致敏乳膠顆粒是大小均一的聚苯丙烯致敏乳膠顆粒是大小均一的聚苯丙烯乳膠顆粒懸液，顆粒表面包被有兔抗人乳膠顆粒懸液，顆粒表面包被有兔抗人Mb抗抗體。體。血清樣本中的血清樣本中的Mb與乳膠顆粒表面的抗體與乳膠顆粒表面的抗體結(jié)合后，使相鄰的乳膠顆粒彼此交聯(lián)，發(fā)生聚結(jié)合后，使相鄰的乳膠顆粒彼此交聯(lián)，發(fā)生聚集反應(yīng)產(chǎn)生濁度集反應(yīng)產(chǎn)生濁度。該濁度與樣

25、本中的。該濁度與樣本中的Mb濃度濃度成正比，在成正比，在570nm處測定吸光度，可計(jì)算樣本處測定吸光度，可計(jì)算樣本中中Mb的濃度。的濃度?！驹噭┡c器材試劑與器材】1.試劑試劑：甘氨酸緩沖液（甘氨酸緩沖液（pH9.0），）， NaN31.0g/L2.試劑試劑：致敏乳膠懸液，兔抗人肌紅蛋白致敏乳膠懸液，兔抗人肌紅蛋白IgG 致敏乳膠顆粒，致敏乳膠顆粒， NaN31.0g/L3.校準(zhǔn)品：校準(zhǔn)品：Mb校準(zhǔn)品校準(zhǔn)品4.器材器材【實(shí)踐步驟實(shí)踐步驟】1.測定條件：溫度、波長、光徑、時(shí)間測定條件：溫度、波長、光徑、時(shí)間2.操作操作加入物（加入物（ml）測定管測定管標(biāo)準(zhǔn)管標(biāo)準(zhǔn)管空白管空白管試劑試劑0.20.20

26、.2待檢血清待檢血清0.02-Mb校準(zhǔn)品校準(zhǔn)品-0.02-蒸餾水蒸餾水-0.02 混勻，混勻，37保溫保溫5min，空白管調(diào)零，讀取各管吸光度，空白管調(diào)零，讀取各管吸光度A1試劑試劑0.150.150.15 混勻，混勻，37保溫保溫5min，空白管調(diào)零，讀取各管吸光度，空白管調(diào)零，讀取各管吸光度A2【計(jì)算計(jì)算】 A= A2 A1 采用非線性多點(diǎn)定標(biāo)模式，以不同濃度標(biāo)采用非線性多點(diǎn)定標(biāo)模式，以不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)品的A，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用測定管，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用測定管A從標(biāo)準(zhǔn)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出測定結(jié)果。曲線上查出測定結(jié)果?！緟⒖挤秶鷧⒖挤秶拷】党扇私】党扇薓b 70ug/L 建議各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)自己的條

27、件，建立本地建議各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)自己的條件，建立本地的正常參考范圍的正常參考范圍?！咀⒁馐马?xiàng)注意事項(xiàng)】 1.本試劑應(yīng)避光，于本試劑應(yīng)避光，于2-8可保持可保持1年，年，-20可保持更長時(shí)間，但不宜反復(fù)凍融。可保持更長時(shí)間，但不宜反復(fù)凍融。 2.若用半自動(dòng)、全自動(dòng)生化分析儀測定應(yīng)嚴(yán)若用半自動(dòng)、全自動(dòng)生化分析儀測定應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說明書設(shè)定參數(shù)進(jìn)行操作。格按照儀器說明書設(shè)定參數(shù)進(jìn)行操作。 3.由于由于Mb也存在于骨骼肌中，而且僅從腎也存在于骨骼肌中，而且僅從腎臟清除，所以急性肌肉損傷、急性或慢性腎衰臟清除，所以急性肌肉損傷、急性或慢性腎衰竭、嚴(yán)重的充血性心力衰竭、長時(shí)間休克及各竭、嚴(yán)重的充血性心力衰竭、

28、長時(shí)間休克及各種原因引起的肌病患者、肌肉注射、劇烈的鍛種原因引起的肌病患者、肌肉注射、劇烈的鍛煉、某種毒素和藥物攝入后，煉、某種毒素和藥物攝入后，Mb都會(huì)升高。都會(huì)升高。 因此，采用血清因此，采用血清Mb水平作為診斷水平作為診斷AMI的早的早期指標(biāo)，僅限于那些沒有上述疾病的患者。要期指標(biāo)，僅限于那些沒有上述疾病的患者。要注意鑒別注意鑒別Mb升高的真正原因升高的真正原因?！九R床意義臨床意義】 血清血清Mb增高增高：見于急性心肌梗死早期、急：見于急性心肌梗死早期、急性肌損傷、肌營養(yǎng)不良、肌萎縮、多發(fā)性肌炎、性肌損傷、肌營養(yǎng)不良、肌萎縮、多發(fā)性肌炎、急性或慢性腎功能衰竭、嚴(yán)重充血性心力衰竭和急性或慢

29、性腎功能衰竭、嚴(yán)重充血性心力衰竭和長期休克等。長期休克等。 血、尿中肌紅蛋白均升高血、尿中肌紅蛋白均升高：見于急性心?。阂娪诩毙孕募」Ｋ馈⑿慕g痛、心源性休克、心肌病、肌疾病梗死、心絞痛、心源性休克、心肌病、肌疾病(進(jìn)進(jìn)行性肌營養(yǎng)不良、多發(fā)性肌炎、重癥肌無力行性肌營養(yǎng)不良、多發(fā)性肌炎、重癥肌無力)等。等。Mb在在AMI中的判斷應(yīng)用中的判斷應(yīng)用 (1)由于由于Mb的分子量小，可以很快從破損的的分子量小，可以很快從破損的細(xì)胞中釋放出來，在細(xì)胞中釋放出來，在AMI發(fā)病后發(fā)病后12小時(shí)血中濃小時(shí)血中濃度迅速上升，度迅速上升，69小時(shí)達(dá)峰值，小時(shí)達(dá)峰值，12小時(shí)內(nèi)幾乎所小時(shí)內(nèi)幾乎所有有AMI患者患者M(jìn)b都

30、有升高，升高幅度大于各心都有升高，升高幅度大于各心肌酶，因此可以肌酶，因此可以作為作為AMI的早期診斷標(biāo)志物的早期診斷標(biāo)志物。 在在AMI發(fā)作后一天內(nèi)即返回基礎(chǔ)濃度，當(dāng)有發(fā)作后一天內(nèi)即返回基礎(chǔ)濃度，當(dāng)有再梗死時(shí)則又迅速上升，形成再梗死時(shí)則又迅速上升，形成“多峰現(xiàn)象多峰現(xiàn)象”。 (2)由于由于Mb半壽期短半壽期短(15min)，胸痛發(fā)作后，胸痛發(fā)作后612小時(shí)不升高，有助于排除小時(shí)不升高，有助于排除AMI的診斷，是篩的診斷，是篩查查AMI很好的指標(biāo)。很好的指標(biāo)。 (3)由于在由于在AMI后血中后血中Mb很快從腎臟清除，很快從腎臟清除，發(fā)病發(fā)病1830小時(shí)內(nèi)可完全恢復(fù)到正常水平。故小時(shí)內(nèi)可完全恢復(fù)

31、到正常水平。故Mb測定有助于在測定有助于在AMI病程中病程中觀察有無再梗塞或者梗塞觀察有無再梗塞或者梗塞再擴(kuò)展再擴(kuò)展。Mb頻繁出現(xiàn)增高，提示原有心肌梗死仍頻繁出現(xiàn)增高，提示原有心肌梗死仍在。在。 (4)Mb是溶栓治療中是溶栓治療中判斷有無再灌判斷有無再灌的較敏感的較敏感而準(zhǔn)確的指標(biāo)。而準(zhǔn)確的指標(biāo)。二、肌鈣蛋白二、肌鈣蛋白I測定測定 肌鈣蛋白是肌肉收縮的調(diào)節(jié)蛋白，由三個(gè)肌鈣蛋白是肌肉收縮的調(diào)節(jié)蛋白，由三個(gè)結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，即肌鈣蛋白結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，即肌鈣蛋白T（cTnT）、）、肌鈣蛋白肌鈣蛋白I（cTnI）和肌鈣蛋白）和肌鈣蛋白C（cTnC）. 心肌鈣蛋白心肌鈣蛋白T、I（CTnT、CTn

32、I）由于分子）由于分子量小，分別為量小，分別為37000D和和24000D，所以發(fā)病后血，所以發(fā)病后血中濃度迅速升高。中濃度迅速升高。膠乳增強(qiáng)透射比濁法膠乳增強(qiáng)透射比濁法【原理原理】 應(yīng)用特異的抗肌鈣蛋白應(yīng)用特異的抗肌鈣蛋白I（抗（抗-cTnI）抗體使）抗體使之與膠乳顆粒表面結(jié)合，血清標(biāo)本與膠乳試劑在之與膠乳顆粒表面結(jié)合，血清標(biāo)本與膠乳試劑在緩沖液中混合后，緩沖液中混合后，血清樣本中的血清樣本中的cTnI與乳膠顆粒與乳膠顆粒表面的抗體結(jié)合后，使相鄰的乳膠顆粒彼此交聯(lián)，表面的抗體結(jié)合后，使相鄰的乳膠顆粒彼此交聯(lián)，發(fā)生聚集反應(yīng)產(chǎn)生濁度發(fā)生聚集反應(yīng)產(chǎn)生濁度。該濁度與樣本中的。該濁度與樣本中的cTnI濃度成正比，在濃度成正比，在600nm處測定吸光度，可計(jì)算樣處測定吸光度，可計(jì)算樣本中本中cTnI的濃度。的濃度?！驹噭┡c器材試劑與器材】1.緩沖液：緩沖液：含增敏劑和表面活性劑，貯存于含增敏劑和表面活性劑，貯存于2-8，久置后可有部分沉淀，搖勻使用。，久置后可有部分沉淀，搖勻使用。