畢業(yè)論文答辯-槲皮素脂質(zhì)納米粒的制備與表征

1、槲皮素脂質(zhì)納米粒的制備與表征班 級：10制藥二班學 號：06210211姓 名：徐敏潔指導教師：夏 強 老師 傅志賢 老師畢業(yè)設計答辯123研究背景與意義研究方案總結(jié)與展望畢業(yè)設計答辯4參考文獻研究背景與意義研究方案研究背景與意義槲皮素的概述 化學名：3,3, 4,5, 7-五羥基黃酮 分子式：C5H10O 7 結(jié)構(gòu) ：黃酮類化合物 功效：抗氧化作用 皮膚增色及保護作用槲皮素的理化性質(zhì) 外觀：黃色針狀結(jié)晶 熔點：313-314 分子量：302 化學性質(zhì)：呈弱酸性 不穩(wěn)定性：氧氣 光照 PH 金屬離子 3. 本課題旨在利用合適的微納米載體包裹槲皮素，改善其化學穩(wěn)定性，并提高該成分的生物利用度，使

2、其能夠更好的應用于食品和化妝品領域。1.解決槲皮素的穩(wěn)定性和水溶性問題，提高該成分的生物利用度。 2.與此同時，活性物載體可提高活性物的溶解性，使活性物易于吸收；研究方案制備制備 在篩選良好脂質(zhì)和在篩選良好脂質(zhì)和乳化劑的基礎上，將槲乳化劑的基礎上，將槲皮素、脂質(zhì)以及乳化劑皮素、脂質(zhì)以及乳化劑溶解于油相，在水浴鍋溶解于油相，在水浴鍋中與水相混合，制成初中與水相混合，制成初乳，經(jīng)冷卻和分散，制乳，經(jīng)冷卻和分散，制備成水溶性穩(wěn)定性較好備成水溶性穩(wěn)定性較好的槲皮素脂質(zhì)納米粒。的槲皮素脂質(zhì)納米粒。槲皮素槲皮素脂質(zhì)納米粒脂質(zhì)納米粒表征表征 考察槲皮素脂質(zhì)納米考察槲皮素脂質(zhì)納米粒的理化穩(wěn)定性，不同粒的理化穩(wěn)

3、定性，不同儲存條件（溫度、時間儲存條件（溫度、時間、稀釋倍數(shù)、離心、升、稀釋倍數(shù)、離心、升溫、凍融條件）對溫、凍融條件）對QT-NLCs水分散液的影響水分散液的影響，以及槲皮素脂質(zhì)納米，以及槲皮素脂質(zhì)納米粒的抗氧化功能評價。粒的抗氧化功能評價。脂質(zhì)篩選一：脂質(zhì)（2g）廠家75/g冷卻后狀態(tài)硬脂酸上海聯(lián)試0.0011槲皮素析出羊毛脂方登化工0.0025槲皮素析出PGMS河南正通0.0037槲皮素析出三山俞精萊寶康日化0.0092槲皮素析出C-18A上海和一0.0013槲皮素析出GMS浙江碩亞0.0086相容性較好單桂酸甘油酯GML河南正通0.0153相容性好乙?；瘑胃术ズ幽险?.0100相容性

4、好GMS山東新星0.0098相容性好肉豆蔻酸國藥集團0.0012幾乎不溶SSL鄭州奧尼斯特0.0009幾乎不溶大豆磷脂上海聯(lián)合0.0011幾乎不溶脂質(zhì)篩選二：脂質(zhì)（2g）廠家75/g冷卻后狀態(tài)雙乙酸酒石酸單甘油酯鄭州奧尼斯特0.0010幾乎不溶大豆卵磷脂北京美亞斯0.0012幾乎不溶十八酸十八酯上海倍特0.0056槲皮素析出檸檬酸單甘脂鄭州食品0.0013幾乎不溶PGFE-3上海和一0.0008幾乎不溶FSL007興泰0.0007幾乎不溶S-40南京威爾0.0147相容性較好三乙酸甘油酯北化試劑0.0102相容性較好維生素E醋酸酯上海和一0.0021槲皮素析出丙二醇北化試劑0.2012槲皮素析

5、出1,3-丁二醇國藥集團0.0212槲皮素析出乙酸乙酯河南正通0.0028幾乎不溶脂質(zhì)篩選三：脂質(zhì)（2g）廠家75/g冷卻后狀態(tài)丁基辛醇水楊酸酯上海上德0.0103相容性較好油茶籽油上海嘉里0.0019槲皮素析出葵花籽油上海嘉里0.0011幾乎不溶椰子油上海嘉里0.0031幾乎不溶花生油中糧食品0.0021槲皮素析出辛癸酸甘油酯河南正通0.0052相容性較好橄欖油品利0.0021槲皮素析出葡萄籽油廣州博誼0.0023槲皮素析出玉米油福臨門0.0024槲皮素析出一縮二丙二醇方登化工0.0028幾乎不溶甘油方登化工0.0390相容性較好乙氧基二甘醇上海浦恩0.4102相容性好復配脂質(zhì)對QT的溶解情

6、況：脂質(zhì)（2g）比例75/g冷卻后狀態(tài)CG:BHB1：10.2黃色澄清溶液CG:GMS4：10.32黃色澄清溶液CG:BHB:GMS4：4：10.30黃色澄清溶液 根據(jù)以上單一的脂質(zhì)篩選結(jié)果，選擇GMS、CG、BHB進行復配。乳化劑篩選：乳化劑（0.5g）脂質(zhì)（1g）75/g冷卻后狀態(tài)P-6CG:BHB:GMS=4：4：10.0103溶液粘稠P-10CG:BHB:GMS=4：4：10.0101溶液粘稠F-17CCG:BHB:GMS=4：4：10.0101槲皮素析出PGPRCG:BHB:GMS=4：4：10.0106槲皮素析出PGECG:BHB:GMS=4：4：10.0101槲皮素析出Tween

7、20CG:BHB:GMS=4：4：10.0104溶液粘稠Tween80CG:BHB:GMS=4：4：10.0107溶液粘稠SPCCG:BHB:GMS=4：4：10.0104槲皮素析出SE-15CG:BHB:GMS=4：4：10.0103槲皮素析出SE-11CG:BHB:GMS=4：4：10.0105溶液粘稠A2010CG:BHB:GMS=4：4：10.0102溶液粘稠P-135CG:BHB:GMS=4：4：10.0803溶液澄清均一L-23CG:BHB:GMS=4：4：10.0201溶液澄清均一Olivem-1000CG:BHB:GMS=4：4：10.0203溶液澄清均一脂質(zhì)篩選及乳化劑篩選結(jié)

8、果：成分成分名稱名稱脂質(zhì)液態(tài)脂質(zhì)CG,BHB固態(tài)脂質(zhì)GMS乳化劑油包水P-135水包油L-23，O-1000圖1：制備流程圖圖2：三個體系的原液樣品槲皮素脂質(zhì)納米粒表征 1.物理穩(wěn)定性考察： 靜置穩(wěn)定性 離心穩(wěn)定性 稀釋穩(wěn)定性 升溫穩(wěn)定性 凍融穩(wěn)定性 pH穩(wěn)定性 2.化學穩(wěn)定性檢測： 紫外-可見光譜法測含量： 對制備得到的槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體進行破乳，利用紫外 分光光度計檢測槲皮素的含量。 超濾離心法測包封率： 3. 抗氧化功能評價： 清除DPPH自由基法 抑制率 = .(%)1100%WfreeE EW（）總0S1-1AAA 槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征靜置穩(wěn)定性方法： 將樣品分別密封存放于4、

9、25、40下，避光靜置7天、15天和30天，通過PCS測量其粒徑、PDI變化情況。-0.2-0.10.00.10.20.30.40.5140160180200220Mean SizeDaysMean Size 0% water system 6% water system 11% water systemPDI6122030 PDI 0% water system 6% water system 11% water system-0.10.00.10.20.30.40.50.60.7150180210240270300Mean Size/nmDaysMean Size 0% water sys

10、tem 6% water system 11% water systemPDI6122030 PDI 0% water system 6% water system 11% water system-0.2-0.10.00.10.20.30.4140160180200Mean Size/nmDaysMean Size 0% water system 6% water system 11% water system6122030 PDI 0% water system 6% water system 11% water systemPDI4 25 40 槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征離心穩(wěn)定性方法： 考

11、察三個體系在10000 rpm的高速離心不同時間后的粒徑、PDI及外觀變化。-0.2-0.10.00.10.20.30.40.5100150200250300350400Mean Size 0% water system 6% water system 11% water systemMean Size/nm05PDIPDI 0% water system 6% water system 11% water system Time/min102030槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征升溫穩(wěn)定性方法： 取QT-NLC樣品，將其平均分成6份，將這6份放入不同的恒溫培養(yǎng)箱儲存，溫度分別為20、30、40、50、

12、60和70 ，通過PCS考察粒徑和PDI。-0.3-0.2-0.10.00.10.20.30.40.50.6180210240270Mean Size/nmMean Size 0% water system 6% water system 11% water system Temperature/oCPDI 0% water system 6% water system 11% water systemPDI203040506070槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征凍融穩(wěn)定性-0.8-0.40.00.40.81.21.6100200300400500600700800900100011001200Mean

13、 Size/nmMean Size 0% water system 6% water system 11% water systemPDI Time/minPDI 0% water system 6% water system 11% water system03060120180方法： 取QT-NLC樣品，將其平均分成5份，將這5份放入-20的冰箱冷凍0、30、60、120和180 min，取出后進行PCS測試，進行粒徑和PDI的考察。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征pH穩(wěn)定性-0.45-0.30-0.150.000.150.300.450.600.75200250300350Mean Size/nm

14、pHMean Size 0% water system 6% water system 11% water systemPDI3.04.05.06.07.08.0 PDI 0% water system 6% water system 11% water system方法： 利用檸檬酸緩沖液和磷酸鹽緩沖液將QT-NLC水分散液稀釋成不同pH的水分散液，對不同pH條件下的粒徑和PDI進行測試。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征稀釋穩(wěn)定性方法： 將同一批次的槲皮素脂質(zhì)納米粒，分別在稀釋不同倍數(shù)后進行離心，觀察是否分層，隨后測量其粒徑與分布情況，來判斷體系的穩(wěn)定性。-0.45-0.30-0.150.000.15

15、0.300.450.60150180210240270Mean Size/nmMean Size 0% water system 6% water system 11% water system2050100200Dilution factorPDIPDI 0% water system 6% water system 11% water system槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征包封率測試2003004005006000.00.20.40.60.8Abs.Wavelength nm. Abs.圖1：QT-無水乙醇溶液的紫外掃描圖圖2：QT-無水乙醇溶液的標準曲線體系體系吸光吸光度度濃度濃度/ug*m

16、l-1Wt/ug*ml-1 Wf/ug*ml-1包封率包封率/%無水0.13770.33767.46.7486.36%6%水0.31192.084416.841.6891.34%11%水0.34742.44048848.894.52%373.5nm02468100.20.40.60.81.0 B Linear Fit of BAbsconcentration/ug*ml-1Equationy = a + b*Adj. R-Squa0.99995ValueStandard ErrBIntercept0.10410.00138BSlope0.09972.4604E-4y=0.1041+0.0997

17、x清除DPPH自由基法測抗氧化性DPPH水水待測樣待測樣乙醇乙醇517nmA03.9ml100ulA13.9ml100ulAS100ul3.9ml體系體系抑制率抑制率抑制率（空白）抑制率（空白）無水體系56.7%5.12%6%水體系90.6%17.03%11%水體系90.3%16.20% 可見三種負載槲皮素2%的體系具有較好的DPPH自由基抑制率，并且是由于槲皮素本身的抗氧化功效性，而非配方內(nèi)的其他物質(zhì)。0S1-1AAA DPPH自由基抑制率 =總結(jié)與展望02468100.20.40.60.81.0 B Linear Fit of BAbsconcentration/ug*ml-1Equati

18、ony = a + b*Adj. R-Squa0.99995ValueStandard ErrBIntercept0.10410.00138BSlope0.09972.4604E-4y=0.1041+0.0997x1Torchilin, V.Drug targetingJ. European Journal of Pharmaceutical Sciences2000.S81-S91.2溫濤, 賈濤, et al.納米載體藥物應用的研究進展J. 藥學學報2003.003:236-240.3鮑廷錚，王慶倫，廖志輝.槲皮素的研究近況J. 江西中醫(yī)學院學報 1998.2:90-91.4袁鵬群，納米技術在藥物研究領域中的應用J. 解放軍藥學學報2001.