清洗與消毒(10)

1、第二章清洗與消毒清洗玻璃器皿的清洗 浸泡刷洗 浸酸 沖洗 膠塞的清洗 自來水沖洗 /水中浸泡 2NaOH(或洗潔精)煮沸1020 min l稀鹽酸浸泡/或蒸餾水沖洗后再煮沸1020 min 塑料制品的清洗必要時，用后經過無菌處理后，尚可反復使用23次 防止劃痕用后要立即浸入水中嚴防附著物干結 除菌濾器清洗 G6除菌濾器的清洗新的G6除菌濾器清洗方法 用過的G6除菌濾器的清洗 不銹鋼除菌濾器的清洗刷洗新的或使用后的濾器，流水沖洗15 min，去離子水浸泡24 h，最后用三蒸水浸泡24 h，然后枯燥備用。 包 裝 皺紋包裝紙、硫酸紙、牛皮紙、棉布、鋁飯盒、特制玻璃消毒筒、較大的培養(yǎng)皿、錫箔等進行包

2、裝。對培養(yǎng)瓶、濾器、存放培養(yǎng)液用鹽水瓶、裝吸管和膠塞(或培養(yǎng)瓶蓋子)的消毒管等的瓶口局部作局部包裝密封，再用牛皮包起來備用。比照較小的培養(yǎng)皿、加樣器吸頭等可以全包裝封閉。注射器、金屬器械可直接裝入鋁飯盒內。消 毒培養(yǎng)的每個環(huán)節(jié)的失誤均能導致培養(yǎng)失敗，細胞培養(yǎng)的每個環(huán)節(jié)都應嚴格遵守操作常規(guī)，防止發(fā)生污染。 物理滅菌法紫外線消毒用于空氣、操作臺外表和不能使用其他法進行消毒的培養(yǎng)器皿。直接照射，方便、效果好，經一定的時間照射后可以消滅空氣中大局部細菌。空氣中，革蘭氏陰性菌最為敏感，其次是革蘭氏陽性菌，再次是芽孢，真菌孢子的抵抗力最強。直接作用機制是通過破壞微生物的核酸和蛋白質等而使其滅活，間接作用是

3、通過紫外線照射產生的臭氧殺死微生物。培養(yǎng)室紫外線燈應距地面不超過2.5 m，照射不到的地方起不到消毒作用。紫外線照射工作臺面的距離不應超過1.5 m，照射時間以30 min左右為宜。紫外線可產生臭氧，污染空氣，對試劑及培養(yǎng)液都有不良影響，對人皮膚、眼睛都有傷害。因此，不能開著紫外燈進行實驗操作。電離輻射消毒用放射性核素產生的X線和加速器等發(fā)出的輻射進行滅菌消毒適用于消毒量大和不適于做高壓或濾過等培養(yǎng)用品，如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板、注射器、移液器吸頭、離心管等。優(yōu)點是滅菌時物品不會升溫，可直接對密封包裝的物品進行滅菌。但由于電離輻射的誘變作用很強，不適合消毒活的生物材料。濕熱消毒即高壓蒸汽消毒使

4、用最廣泛、效果最好的消毒方法不能裝得過滿，應保證其內氣體的流通，以防止消毒器內氣體阻塞而發(fā)生危險。在加熱升壓之前，先要翻開排氣閥門排放消毒器內的冷空氣，然后關閉排氣閥門，同時檢驗平安閥是否活動自如。當到達所需壓力時開始計算消毒時間。操作者不能離開工作崗位，要定時檢查壓力及平安，防止意外事件發(fā)生。常用物品消毒壓力及時問：培養(yǎng)液和橡膠制品為65 kPa(115)10 min；布類、玻璃制品及金屬器械為1013 kPa(1213)20 min。干熱消毒法加熱到160以上，并保持90120 min，以殺死細菌和芽孢。用于消毒玻璃器皿。消毒完畢后不可馬上將烤箱門翻開，以免冷溫度驟變而使箱內玻璃器皿破裂。

5、干熱消毒的優(yōu)點是消毒后的器皿枯燥、易于儲存，缺點是熱傳導慢。金屬器械和橡膠、塑料制品不能使用干熱消毒法。 灼燒也是干熱消毒滅菌的方法之一。進行細胞培養(yǎng)時，常常利用臺面上的酒精燈或煤氣燈的火焰對金屬器具及玻璃器皿口緣進行灼燒消毒。過濾除菌過濾除菌是將液體或氣體用微孔薄膜過濾，使大于孔徑的細菌等微生物顆粒阻留，從而到達除菌目的。用于遇熱易發(fā)生變性而失效的試劑或培養(yǎng)用液。微孔濾膜器為不銹鋼或塑料材質，中間可夾放濾膜。使用這種濾器的關鍵步驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。加壓方式有氣壓和液壓(采用蠕動泵)兩種方式。負壓過濾一般用抽氣裝置使收集瓶內形成真空，借助大氣壓液體流過濾膜。正壓過濾較負壓過濾具有流速高

6、、過濾快、不易污染，可防止蛋白質產生氣泡等優(yōu)點?；瘜W消毒法利用化學消毒劑來消毒那些不能用物理消毒等方法進行消毒的物品和場地。消毒劑主要是75酒精、甲醛、環(huán)氧乙烷、氯已定、戊二醛、碘伏和磺酊、過氧乙酸、乳酸、煤酚皂溶液(來蘇兒)等，最常見的是75酒精及1新潔爾滅。75酒精主要用于操作者的皮膚、操作臺外表及無菌室內的壁面處理，且對其他滅菌劑(如戊二醛、碘伏、氯已定等)有增效或協(xié)同作用。1新潔爾滅那么主要用于器械的浸泡及皮膚和操作室壁面的擦拭消毒。甲醛是一種廣譜滅菌劑，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。通常無菌室內的空氣和物體外表滅菌就是利用甲醛水溶液或甲醛氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物的殺滅作用。環(huán)氧乙烷氣體具有廣泛的殺菌作用，不損害消毒物品且穿透力強，主要用于消毒塑料用品、不耐高熱高壓以及不能受潮濕的物品。氯已定又稱洗必泰，化學名為1，6一雙(正一對氯苯雙胍)一己烷，是一種廣譜殺菌劑，其毒性低、刺激性小、不產生耐藥性，是目前廣泛應用的消毒劑之一，主要用于皮膚及創(chuàng)面消毒。戊二醛是一種廣譜、高效滅菌劑