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1、實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的原理及應(yīng)用技術(shù)的原理及應(yīng)用平臺(tái)定量PCR儀器介紹第1頁/共38頁第2頁/共38頁第3頁/共38頁第4頁/共38頁第5頁/共38頁第6頁/共38頁value )。第7頁/共38頁第8頁/共38頁第9頁/共38頁第10頁/共38頁第11頁/共38頁第12頁/共38頁第13頁/共38頁第14頁/共38頁第15頁/共38頁第16頁/共38頁第17頁/共38頁第18頁/共38頁第19頁/共38頁第20頁/共38頁第21頁/共38頁第22頁/共38頁段的cDNAPCR的產(chǎn)物第23頁/共38頁第24頁/共38頁第25頁/共38頁第26頁/共38頁(calibrator)
2、3、計(jì)算表達(dá)水平比率:2 CT=表達(dá)量的比值第27頁/共38頁第28頁/共38頁第29頁/共38頁第30頁/共38頁第31頁/共38頁第32頁/共38頁第33頁/共38頁ABI 7500 fast使用96孔板,樣品量大,儀器穩(wěn)定,結(jié)果分析直觀ABI試劑ROX校正物理方面的誤差:槍的誤差(如試劑體積)、耗材質(zhì)量(如管蓋厚度、透光性能不一致)所導(dǎo)致的光能損失、儀器穩(wěn)定性(如孔間、批間溫度的波動(dòng))Rn= Normalization = Reporter / Referenc第34頁/共38頁36孔(普通透明0.2mlPCR管)或者72孔(特殊0.1ml管)離心式檢測(cè)可以做HRM。第35頁/共38頁可以使用8連排管或96孔板,軟件操作簡單第36頁/共38
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