科研項(xiàng)目的策劃與實(shí)施醫(yī)學(xué)科學(xué)研究入門

1、會(huì)計(jì)學(xué)1科研項(xiàng)目的策劃與實(shí)施醫(yī)學(xué)科學(xué)研究入科研項(xiàng)目的策劃與實(shí)施醫(yī)學(xué)科學(xué)研究入門門 檢查各項(xiàng)準(zhǔn)備工作是否完善；檢查各項(xiàng)準(zhǔn)備工作是否完善； 確定實(shí)驗(yàn)操作方法是否正確可行確定實(shí)驗(yàn)操作方法是否正確可行 ； 獲得某些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，確定合適的樣本數(shù)和必獲得某些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，確定合適的樣本數(shù)和必要的統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)，以確保后續(xù)正式實(shí)驗(yàn)的順利要的統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)，以確保后續(xù)正式實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行；進(jìn)行； 摸索最佳實(shí)驗(yàn)條件；摸索最佳實(shí)驗(yàn)條件； 初步檢驗(yàn)假說。初步檢驗(yàn)假說。 Nat Immunol. 2004 Nov;5(11):1124-33.控制實(shí)驗(yàn)方法質(zhì)量的關(guān)鍵是規(guī)范意識(shí)控制實(shí)驗(yàn)方法質(zhì)量的關(guān)鍵是規(guī)范意識(shí) ！ 實(shí)驗(yàn)名稱，對(duì)于具體課題

2、的實(shí)驗(yàn)操作，名稱應(yīng)是特異性和實(shí)驗(yàn)名稱，對(duì)于具體課題的實(shí)驗(yàn)操作，名稱應(yīng)是特異性和具體的，勿僅標(biāo)示通用性實(shí)驗(yàn)名稱；具體的，勿僅標(biāo)示通用性實(shí)驗(yàn)名稱； 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?；?shí)驗(yàn)?zāi)康模?實(shí)驗(yàn)方法；實(shí)驗(yàn)方法； 實(shí)驗(yàn)流程，指在實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹笇?dǎo)下的特定流程，每個(gè)具體步實(shí)驗(yàn)流程，指在實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹笇?dǎo)下的特定流程，每個(gè)具體步驟均應(yīng)詳細(xì)注明實(shí)驗(yàn)中實(shí)際應(yīng)用的試劑名稱或劑量等，避免驟均應(yīng)詳細(xì)注明實(shí)驗(yàn)中實(shí)際應(yīng)用的試劑名稱或劑量等，避免通用性的實(shí)驗(yàn)流程；通用性的實(shí)驗(yàn)流程； 實(shí)驗(yàn)材料及儀器設(shè)備等。實(shí)驗(yàn)材料及儀器設(shè)備等。 圖表：由自動(dòng)記錄儀打印的圖表和數(shù)據(jù)資料應(yīng)按順序粘貼于記錄本相應(yīng)位圖表：由自動(dòng)記錄儀打印的圖表和數(shù)據(jù)資料應(yīng)按順序粘貼于記錄本相

3、應(yīng)位置，若圖表較多，可先將圖表按順序裝訂在一起，然后粘貼于記錄本上置，若圖表較多，可先將圖表按順序裝訂在一起，然后粘貼于記錄本上 。壓。壓邊簽字邊簽字 。熱敏紙打印的數(shù)據(jù)，打印后立即復(fù)印，并將原件和復(fù)印件一并粘貼在實(shí)驗(yàn)記熱敏紙打印的數(shù)據(jù)，打印后立即復(fù)印，并將原件和復(fù)印件一并粘貼在實(shí)驗(yàn)記錄的相應(yīng)位置并壓邊簽字。錄的相應(yīng)位置并壓邊簽字。 照片：各種照片直接粘貼于實(shí)驗(yàn)記錄本相應(yīng)位置，壓邊簽字。細(xì)胞或病理組照片：各種照片直接粘貼于實(shí)驗(yàn)記錄本相應(yīng)位置，壓邊簽字。細(xì)胞或病理組織照片須標(biāo)記顯微鏡倍數(shù)、染色方式等信息。腫瘤照片須含標(biāo)尺刻度。此外，織照片須標(biāo)記顯微鏡倍數(shù)、染色方式等信息。腫瘤照片須含標(biāo)尺刻度。此

4、外，照片背后應(yīng)寫明實(shí)驗(yàn)日期和處理因素等。相應(yīng)組織切片存放位置、編號(hào)和名照片背后應(yīng)寫明實(shí)驗(yàn)日期和處理因素等。相應(yīng)組織切片存放位置、編號(hào)和名稱等須記錄于實(shí)驗(yàn)記錄本相應(yīng)位置，以便后續(xù)查找并重新分析。稱等須記錄于實(shí)驗(yàn)記錄本相應(yīng)位置，以便后續(xù)查找并重新分析。自成體系的表格記錄：可單獨(dú)裝訂成冊(cè)，但須在實(shí)驗(yàn)記錄本相應(yīng)位置記錄相自成體系的表格記錄：可單獨(dú)裝訂成冊(cè)，但須在實(shí)驗(yàn)記錄本相應(yīng)位置記錄相關(guān)信息和存放位置及編號(hào)。關(guān)信息和存放位置及編號(hào)。 電子板原始數(shù)據(jù)的記錄：電子板原始數(shù)據(jù)的記錄：要有幾處拷貝；要有幾處拷貝；可整理分析后打印粘貼，但實(shí)驗(yàn)記可整理分析后打印粘貼，但實(shí)驗(yàn)記錄本上須明確記錄原始數(shù)據(jù)和圖表的存放位

5、置、標(biāo)號(hào)含義等基本信息。錄本上須明確記錄原始數(shù)據(jù)和圖表的存放位置、標(biāo)號(hào)含義等基本信息。掃描圖片：各種掃描圖片應(yīng)粘貼于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)下方，其測(cè)定數(shù)據(jù)置于掃描圖片掃描圖片：各種掃描圖片應(yīng)粘貼于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)下方，其測(cè)定數(shù)據(jù)置于掃描圖片下方，從而有助于參考圖片分析數(shù)據(jù)。下方，從而有助于參考圖片分析數(shù)據(jù)。 S-TNF(%)TM-TNF(%)necrosisapoptosis necrosisapoptosisL92934.5620.022.653.89MCF-769.7302.6265.61HepG21.33.423.040.85Raji2.821.71.7535.28HL-602.04.53.6445.32K5

6、622.341.232.6547.45EH22H22/neoH22/TM-TNFH22/S-TNFH22/Wt-TNFE/T=5:1 2 43 40 38E/T=1:1 1.8 17 22 15E/T=1:5 1.6 8 9 61:5/5:1 18.6% 22.5% 15.79%* 欄內(nèi)數(shù)字均為細(xì)胞殺傷率(%) EH22H22/neo H22/TM-TNFH22/S-TNFH22/W t-TNFE/T=1:0 1.5 97 97 73E/T=5:1 2 92 96 77E/T=1:1 1.8 80 75 58E/T=1:5 1.6 26 75 451:5/5:1 26.8% 77.3% 61.

7、6%* 欄 內(nèi) 數(shù) 字 均 為 抑 瘤 率 (%)兩型兩型TNFTNF體外殺瘤率體外殺瘤率兩型兩型TNFTNF體內(nèi)抑瘤率體內(nèi)抑瘤率 預(yù)先激活TM-TNF-反向信號(hào)對(duì) NK92細(xì)胞殺傷的影響0 01010202030304040505060607070808090901001000 01 12 23 34 45 5殺傷時(shí)間(h)殺傷時(shí)間(h)殺傷率(%)殺傷率(%)sTNFRI+rhIL-2rhIL-2 * * * *讀出結(jié)果的全部信息讀出結(jié)果的全部信息封閉肽封閉肽 正常正常 關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)炎I-kBI-kB1 2 3 4 5 61：對(duì)照；2：sTNFR1；3：轉(zhuǎn)染空載PCDNA3.0sTNFR1；

8、4：轉(zhuǎn)染C-28F突變型TM-TNF-+sTNFR1；5：轉(zhuǎn)染野生型TM-TNF-+sTNFR1；6：轉(zhuǎn)染缺失胞漿段TM-TNF-+sTNFR1。該結(jié)果提示什么？該結(jié)果提示什么？1 對(duì)照；2 COS-7；3 轉(zhuǎn)染空載PCDNA3.0；4 轉(zhuǎn)染C-28F 突變TM-TNF- ；5 轉(zhuǎn)染野生型TM-TNF- C-28F TM-TNF-突變體喪失誘導(dǎo)U937細(xì)胞轉(zhuǎn)錄iNOSmRNA的效應(yīng)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果肯定的條件是什么？該實(shí)驗(yàn)結(jié)果肯定的條件是什么？Cleaved caspase-3- cleaved PARP (89kDa)- -actin - 19kDa- 17kDaWild-memTNF- contr

9、ol(MCF-7)Y87F memTNF- s-TNF pcDNA3.0- full length PARP (116kDa)C樣品排列不一致！樣品排列不一致！NF-kB activation of Raji cell decreased after lipid rafts disruption After treatment of MCD, Raji cell were lysed and its lysis supernatant were used to NF-kB detection. NF-kB were detected by ELISA.如何下結(jié)論？如何下結(jié)論？mTNF expr

10、ession vector were transfected to Hela cell, and then use this cell as effect cell to kill human EVC-304 cell. Hela+TNFwt was transfected with wild type mTNF, Hela+TNF(-47) was transfected with mTNF mutated on -47 which deleted the palmitoylated site.Deletion of palmitoylated site has no effect on m

11、TNF cytotoxity 該結(jié)果能否說明該結(jié)果能否說明TNF不在脂筏里？為什么？不在脂筏里？為什么？前后結(jié)果內(nèi)在聯(lián)系提示什么？前后結(jié)果內(nèi)在聯(lián)系提示什么？mTNF expression increased after MCD treatment. Raji Raji+MCD必須排除何種因素？如何排除？TNFR1TNFR2免疫共沉淀免疫共沉淀TNFR1TNFR2TNFR1TNFR2為何兩種受體共沉淀的信號(hào)分子一樣？為何兩種受體共沉淀的信號(hào)分子一樣？1879使大家吃驚的是：幾乎所有這使大家吃驚的是：幾乎所有這些家禽都經(jīng)受住了這次接種，些家禽都經(jīng)受住了這次接種，而先前未接種的家禽，經(jīng)過了而先前未接

12、種的家禽，經(jīng)過了通常的潛伏期后則全部死掉了。通常的潛伏期后則全部死掉了。這一點(diǎn)甚至連巴斯德自己或許這一點(diǎn)甚至連巴斯德自己或許也大吃一驚，他沒有預(yù)料到這也大吃一驚，他沒有預(yù)料到這樣的成功。樣的成功。機(jī)遇只垂青那些懂得怎樣追求她機(jī)遇只垂青那些懂得怎樣追求她的人。查理的人。查理 . 尼科爾尼科爾1921年復(fù)活節(jié)星期天之前的那個(gè)夜晚，奧地利生物學(xué)家洛伊（Otto Loewi）從夢(mèng)中醒來，想到一個(gè)極好的設(shè)想。他打開燈，抓過一張紙迷迷糊糊地寫了些東西，倒下去又睡著了。早上6點(diǎn)鐘，他突然想到，自己昨夜記下了一些極其重要的東西，趕緊把那張紙拿來看，卻怎么也看不明白自己寫的是些什么鬼畫符。他在實(shí)驗(yàn)室里整整坐了一天，面對(duì)著熟悉的儀器，就是想不起那個(gè)設(shè)想。幸運(yùn)的是，第二天凌晨3點(diǎn)，他又一次醒了過來，還是同樣的頓悟，他高興極了。這回他仔細(xì)地記錄下來，這才回去睡覺。不想好不做，不準(zhǔn)備好不做！不標(biāo)準(zhǔn)化不做！不想好不做