化學(xué)性方法肝硬化動物模型建立 讀書報(bào)告PPT

1、化學(xué)性肝硬化動物模型造模方法主要內(nèi)容肝硬化造模方法種類簡介機(jī)理分析、給藥途徑、劑量、優(yōu)缺點(diǎn)展望與思考肝硬化造模的主要方法化學(xué)性肝硬化模型結(jié)扎膽總管肝硬化模型實(shí)驗(yàn)性免疫肝硬化模型血吸蟲蟲卵所致肝硬化模型轉(zhuǎn)基因肝硬化模型復(fù)合法化學(xué)性肝硬化模型四氯化碳法二甲基亞硝胺二乙基亞硝胺硫代乙酰胺化學(xué)性單純CCL4法機(jī)理分析CCl4通過肝微粒體細(xì)胞色素P450氧化酶激活后,產(chǎn)生自由基CCl3-及ClCCl3-與肝細(xì)胞內(nèi)大分子發(fā)生共價(jià)結(jié)合,破壞肝細(xì)胞功能肝纖維化、肝硬化化學(xué)性單純CCL4法給藥途徑 腹腔注射法 高死亡率皮下注射法 灌胃 四氯化碳致肝纖維化動物模型實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化國外腹膜炎給藥劑量吳孟超經(jīng)典模式 4

2、0%60% CCl4橄欖油溶液皮下注射,0.3 mL/100 g體重,首劑加倍,每周2次,共812周不同劑量四氯化碳實(shí)驗(yàn)中， 0.1mL/100 g劑量最佳模型特點(diǎn)：簡便,費(fèi)用低，易操作動物個(gè)體差異較大,CCl4劑量不易掌握停藥后易逆轉(zhuǎn)化學(xué)性CCL4復(fù)合法CCL4苯巴比妥聯(lián)合誘導(dǎo)CCL4食用乙醇聯(lián)合誘導(dǎo)CCL4苯巴比妥聯(lián)合誘導(dǎo)機(jī)制 四氯化碳誘導(dǎo)慢性肝損傷的機(jī)理是直接損害肝細(xì)胞,破壞細(xì)胞的各種成分,造成肝細(xì)胞的脂肪變性與壞死苯巴比妥鈉通過提高細(xì)胞色素P450活性,從而增加肝細(xì)胞對四氯化碳的敏感性CCL4苯巴比妥聯(lián)合誘導(dǎo)給藥途徑 苯巴比妥：飲水中給藥 四氯化碳：背部皮下注射CCL4苯巴比妥聯(lián)合誘導(dǎo)

3、給藥劑量 第一周每升蒸餾水中含0.35g苯巴比妥鈉的溶液作為大鼠的惟一飲用水 第二周起按0.4mL/100g體重注射，每周2次，共10周CCL4食用乙醇聯(lián)合誘導(dǎo)-機(jī)制四氯化碳:直接損害肝細(xì)胞破壞細(xì)胞的各種成分乙醇:酶誘導(dǎo)劑增加肝氧耗量增強(qiáng)四氯化碳對肝的毒性作用促進(jìn)肝硬化的形成CCL4食用乙醇聯(lián)合誘導(dǎo)給藥途徑乙醇：灌胃或飲水中給藥四氯化碳：皮下注射CCL4食用乙醇聯(lián)合誘導(dǎo)給藥劑量改良的誘導(dǎo)方法 60%四氯化碳，30%乙醇溶液誘導(dǎo),共9周目前標(biāo)準(zhǔn)的誘導(dǎo)方法1981年Chatamra采用50%四氯化碳、10%乙醇為主的方式建立肝硬化模型,誘導(dǎo)時(shí)間約12周縮短時(shí)間成型率高死亡率低CCL4復(fù)合法模型特點(diǎn)

4、動物模型周期縮短形成率低拒飲苯巴比妥或乙醇導(dǎo)致脫水、死亡胃大出血而死亡二甲基亞硝胺(DMN) 二甲基亞硝胺(DMN)機(jī)理肝微粒體DMN中間產(chǎn)物甲醛、甲烷亞硝胺核酸、蛋白質(zhì)肝細(xì)胞損傷二甲基亞硝胺(DMN)給藥途徑 腹腔注射二甲基亞硝胺(DMN)給藥劑量王獻(xiàn)波等人,以DMN10 g/kg劑量做腹腔內(nèi)注射,每天1次,每周連續(xù)3天、共4周，成功形成肝硬化模型1 %DMN 按 1m l/kg 腹腔注射，每周前 3 天給藥，每天 1 次，持續(xù) 3 周，第 4 周僅在周一給藥 1 次，成功形成肝硬化模型二乙基亞硝胺(DEN)機(jī)理 DEN DNA雙鏈 DNA編碼錯(cuò)譯 肝臟損傷二乙基亞硝胺(DEN)給藥途徑：

5、飲水中給藥二乙基亞硝胺(DEN)給藥劑量給藥劑量： 0.1g/L 0.05g/L、2周后為0.1 g/L誘導(dǎo)8周兩者的肝硬化嚴(yán)重程度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異1華赟鵬,李紹強(qiáng),賴佳明,彭寶崗,梁惠珍,梁力建. 體重監(jiān)測下漸進(jìn)性口服二乙基亞硝胺誘導(dǎo)肝硬變大鼠模型的研究J. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2009,(8). TA A（硫代乙酰胺）機(jī)制肝TAA硫氫化合物 肝大分 子物質(zhì)引起肝細(xì)胞膜損害肝細(xì)胞壞死TA A（硫代乙酰胺）給藥途徑劑量給藥途徑：飲水中給藥給藥劑量： 生理鹽水配制成 30溶液，作為實(shí)驗(yàn)動物的飲用水，8 周形成肝硬化致癌藥物造模（除CCL4）模型特點(diǎn)共性：周期短，死亡率相對較低毒性大，易揮發(fā)，排泄物在 24 小時(shí)內(nèi)含有毒性，易污染環(huán)境需做好隔離，造模過程不方便慎用個(gè)性：硫代乙酰胺（TAA）在組織學(xué)上所誘導(dǎo)的肝硬化與病毒性誘發(fā)的肝硬化很相似感悟與思考因素探討：多因素誘導(dǎo)法是否優(yōu)于單因素誘導(dǎo)法？鼠較成熟，但是在兔、狗等中型動物身上是否相同？藥物的劑量：文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)無論是鼠還是兔，都存在四氯化碳給藥劑量相差10倍的問題，是小劑量還是大劑量應(yīng)該在造模過程中采用？前期預(yù)實(shí)驗(yàn)動 物：新西蘭兔造模藥物：四氯化碳、乙醇造模方法：四氯化碳復(fù)合法（四氯化碳2.5ml/kg 乙醇5ml） 單純四氯化碳法