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文檔簡介

1、冠科生物技術起草/修訂者：起草/修訂日期：部門：批 準日 期：審 閱（QA）：審 閱日 期：實驗機構:批 準日 期：目的規(guī)范細胞凍存建庫的操作與流程職責協(xié)商編寫實驗流程，部門員工遵守使用范圍適用于本公司各種細胞的凍存和復蘇內(nèi)容/流程1)凍存標準及原則新入庫細胞：每株細胞建庫凍存總支數(shù)為 2-40 支，P2-3，20-30 支。庫：P0-1，2-10 支；工作庫再擴大凍存細胞：當項目所需細胞工作庫庫存量小于等于 10 支時，需選擇質(zhì)控確定的批次重新回凍建庫，以確保庫存總支數(shù)。子細胞庫：根據(jù)特殊需要構建子細胞庫用以特殊目的使用?！久抗芗毎唧w凍存信息：細胞名稱，細胞凍存液：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO

2、+FBS（ 30%）】凍存批次定義，細胞批次，凍存日期，凍存人。：GIBCO20%；太倉：國產(chǎn)2)第一次凍存標記為 P0，每凍存一次相繼標記為 P1,2,3；實際傳代次數(shù)以備注的形式標記。（貼壁細胞：每胰酶消化一次記為一代；懸浮細胞：每擴大培養(yǎng)體積一次記為一代）。例：P0(3)代表第一次凍存?zhèn)鞔?。質(zhì)控每批凍存細胞都要進行如下檢測：細菌檢測，肉眼鏡下檢測即可凍存復蘇活率檢測，使用培養(yǎng)瓶復蘇后第二天觀察復蘇狀態(tài)（可選：臺盼蘭計數(shù)及計算活率，給出具體數(shù)值。）3)支原體檢測特殊檢測MycoAlert 試劑盒法 SOP （可選：DNA 染色法 SOP）種屬交叉污染檢測（COI）SOP ；種間交叉污染檢測（STR）SOP4)凍存細胞使用程序降溫盒放置-80 度冰箱過夜（-80 度繼續(xù)保存時間范圍 1-3 周），再放入液氮罐保存。液氮罐原則（表）。使用紙質(zhì)版凍存信息，并在 CBIS 系統(tǒng)中錄入（Cell-Deit Record EV）。參考文獻無附件6.16.2細胞凍存表細胞復蘇表： SOP-CB-005-F001： SOP-CB-005-F002版本更改

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