還原糖和蛋白質(zhì)的鑒定

1、實(shí)驗(yàn): 檢測(cè)生物組織中的糖類和蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)原理：某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。如： 還原糖 + 斐林試劑（班氏試劑）磚紅色沉淀蛋白質(zhì) + 雙縮脲紫色 還原糖 + 斐林試劑 磚紅色沉淀加熱先混合再加入糖中（ NaOH +CuSO4）蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑 紫色先加NaOH 液于樣液中，搖勻再加CuSO4 液于樣液中動(dòng)動(dòng)腦1 未加熱前裝有梨汁試管的顏色 水浴加熱后試管中顏色為2未加熱前裝有西瓜汁試管的顏色 水浴加熱后試管中顏色為3你認(rèn)為西瓜汁和梨汁哪個(gè)是作為還原糖鑒定的最佳材料呢？選材：含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對(duì)顯色的干擾)，蘋果、梨最好 。

2、實(shí)驗(yàn)流程(步驟)1.可溶性還原糖 制備組織樣液：制漿：去皮、切塊、研磨，過(guò)濾：（用單層紗布）取液：（mL）顯色反應(yīng) mL組織樣液剛配制的斐林試劑mL現(xiàn)象： 呈現(xiàn)藍(lán)色變成磚紅色(用前混勻)5065.C水浴加熱2min還原糖的檢測(cè)和觀察：還原糖的檢測(cè)結(jié)果動(dòng)動(dòng)腦1 未加熱前裝有梨汁試管的顏色 水浴加熱后試管中顏色為2未加熱前裝有西瓜汁試管的顏色 水浴加熱后試管中顏色為3你認(rèn)為西瓜汁和梨汁哪個(gè)是作為還原糖鑒定的最佳材料呢？淡黃色磚紅淡紅色紅色斐 林 試 劑 雙 縮 脲 試 劑甲液 A液0.1g/mlNaOH溶液 0.1g/mlNaOH溶液乙液 B液0.05g/mCuSO4溶液 0.01g/mlCuSO

3、4溶液3.蛋白質(zhì)的鑒定 選材與制備組織樣液：牛奶（或雞蛋蛋清稀釋液）牛奶顯色反應(yīng)mL組織樣液雙縮脲試劑mL現(xiàn)象：無(wú)色雙縮脲試劑滴紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供Cu2+)蛋白質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果蛋白質(zhì)的鑒定-雙縮脲試劑牛奶溶液 NaOH 溶液滴加CuSO2 溶液, 每次滴加均需搖勻結(jié)果顯示: 紫色比較項(xiàng)目試劑及成分原理溶液濃度方法加熱與否結(jié)果可溶還原糖的鑒定斐林試劑NaOH和CuSO4磚紅色沉淀蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑NaOH和CuSO4溶液呈紫色4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？新配制的Cu(OH)2溶液與加入的葡萄糖，在加熱條件下生成磚紅色的Cu2O在堿性環(huán)境下的Cu2+,與類似于雙縮脲結(jié)構(gòu)的肽鍵發(fā)生反應(yīng)生成紫色終合物NaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.05g/mLNaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。先加入Na0H1mL，然后再加CuS044滴，搖勻。(不能過(guò)量)水浴加熱不需要問(wèn)題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時(shí)，為什么要留出一部分樣液？作對(duì)照2、使用雙縮脲試劑時(shí)為什么B液只能加34滴而不能過(guò)量？ 過(guò)量的雙縮脲試劑B會(huì)與試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色。3