動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體講課

1、關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體講課第一張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合雜合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂分化發(fā)育愈傷組織雜種植株溫故知新:植物體細(xì)胞雜交過(guò)程第二張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月材料1: 1970年，有兩位科學(xué)家做了一個(gè)人鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜的流動(dòng)性。那么，如何實(shí)現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合，動(dòng)物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？人-鼠(想像圖)第三張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念： 動(dòng)物細(xì)胞融合（cell fusion）也成細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)

2、合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。 融合和形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳物質(zhì)的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。2、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性第四張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3.融合過(guò)程：誘導(dǎo)融合的方法？第五張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月誘導(dǎo)方法：物理方法：化學(xué)法：生物法：滅活的病毒電激等聚乙二醇（PEG)第六張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 為什么滅活的 病毒能作誘導(dǎo)劑？3.融合過(guò)程：第七張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理： 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打

3、開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。 滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。P52生物技術(shù)資料卡第八張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月植物細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理融合前處理使用的酶誘導(dǎo)方法主要用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性纖維素酶、果膠酶胰蛋白酶 物理方法（離心、振蕩、電激） 化學(xué)方法（PEG）物理、化學(xué)方法滅活的病毒獲得雜種植株制備單克隆抗體去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合第九張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4.意義： 突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間

4、、動(dòng)植物之間）成為可能。5.應(yīng)用：最重要的用途是制備單克隆抗體第十張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物細(xì)胞融合 物理法：化學(xué)法：生物法：誘導(dǎo)融合的方法原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性過(guò)程：離心、震動(dòng)、電激聚乙二醇（PEG)滅活的病毒動(dòng)、植物細(xì)胞融合的主要區(qū)別用途：最重要的用途是制備單克隆抗體第十一張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月思考？1. 抗體由何種細(xì)胞產(chǎn)生？如何產(chǎn)生？2. 抗體的化學(xué)本質(zhì)是什么？ 與抗原作用的特點(diǎn)？ 主要分布在哪里？3. 用傳統(tǒng)的方法如何獲得抗體？(三)單克隆抗體第十二張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十三張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月思考？1.

5、 抗體由何種細(xì)胞產(chǎn)生？如何產(chǎn)生？2. 抗體的化學(xué)本質(zhì)是什么？ 與抗原作用的特點(diǎn)？ 主要分布在哪里？3. 用傳統(tǒng)的方法如何獲得抗體？(三)單克隆抗體第十四張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從血清中分離抗體該法制備抗體的特點(diǎn)： 產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。多種效應(yīng)B細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原 第十五張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的制備單克隆抗體:單個(gè)細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué) 性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體利用效應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞設(shè)計(jì)方案：

6、第十六張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 1、過(guò)程 注射抗原已免疫的B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體第十七張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的制備第十八張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月骨髓瘤細(xì)胞免疫小鼠單克隆抗體篩選克隆、篩選體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞（選擇培養(yǎng)基）（抗體檢測(cè)）細(xì)胞融合雜交細(xì)胞第十九張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、（只考慮兩兩融合）融合細(xì)胞幾種類型？2、本過(guò)程中進(jìn)行了兩次篩選，目的分別是什 么？第1次篩選要淘汰哪些細(xì)胞？3、雜交瘤

7、細(xì)胞有何特點(diǎn)？4、本過(guò)程利用的哪些技術(shù)？思考以下問(wèn)題：第二十張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)特異性強(qiáng)、靈敏度高第二十一張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、單克隆抗體的應(yīng)用（1）作為診斷試劑最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速（如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）第二十二張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（2）運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物，治療腫瘤）(“生物導(dǎo)彈” 單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)第二十三張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 看書(shū)上53頁(yè)圖，分組討論，單抗制備過(guò)程分哪幾步？請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟的圖解的

8、字母按正確順序連接起來(lái)。順序是？ 第二十四張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月有夢(mèng)想，才會(huì)有創(chuàng)造！ 已成功的動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)例有很多，如人小鼠、人兔、人雞、鼠兔、雞鼠等上百種融合細(xì)胞。甚至已成功完成了酵母菌雞 、人胡蘿卜 等細(xì)胞的融合。 想了解更多信息，可通過(guò)網(wǎng)絡(luò)、電視、雜志等途徑關(guān)注細(xì)胞融合和單克隆抗體的最新信息。生物種間雜交想像圖第二十五張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ） A.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 B.沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 D.沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的淋

9、巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B.所用的技術(shù)手段基本相同 C. 操作步驟基本相同 D. 都能形成雜種細(xì)胞 D第二十六張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3. 單克隆抗體制備過(guò)程中培育的雜交細(xì)胞是（ ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合 B.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 C.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D4.只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是（ ）APEG B滅活的病毒 C電刺激 D離心B第二十七張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5. 單

10、克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 （ ）淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞A. B.C. D. C6.“生物導(dǎo)彈”是指 （ ）A.單克隆抗體 B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物 D第二十八張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月A 、 B細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:A細(xì)胞B細(xì)胞C細(xì)胞D細(xì)胞(1)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞B細(xì)胞為淋巴細(xì)胞,那么D細(xì)胞稱為 細(xì)胞,D細(xì)胞具有兩個(gè)親本細(xì)胞的特征,一方面因具有骨髓瘤細(xì)胞的 性質(zhì),通過(guò) 方式產(chǎn)生大量細(xì)胞,我們稱之為 過(guò)程;另一方面能分泌大量的抗體,我們把該過(guò)程分泌的抗體稱 .雜交瘤連續(xù)分裂有絲分裂單克隆單克隆抗體練一練第二十九張，PPT共三十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(2)D細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體其化學(xué)