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文檔簡介

1、動物胚胎發(fā)育的基本過程與胚胎工程的理論基礎(chǔ)胚胎干細(xì)胞的移植胚胎工程的應(yīng)用胚胎工程1第1頁,共54頁。 胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎,還需要移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿足人類的各種需求。2第2頁,共54頁。操作對象:早期胚胎和配子技術(shù)手段:體外受精、胚胎移植、 胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等理論基礎(chǔ):哺乳動物受精和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律3第3頁,共54頁。1、產(chǎn)生的場所睪丸(曲細(xì)精管)2、產(chǎn)生時(shí)期:從 開始,到 。精子的發(fā)生生殖機(jī)能衰退初情期曲細(xì)精管考點(diǎn)一 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育4第4頁,共5

2、4頁。第一階段:位于_進(jìn)行數(shù)次_,產(chǎn)生大量_。_經(jīng)染色體復(fù)制和其他物質(zhì)的合成,進(jìn)一步形成_.第二階段:_連續(xù)進(jìn)行兩次分裂(即_):M產(chǎn)生兩個(gè)_,M共產(chǎn)生_個(gè)含_的_細(xì)胞。第三階段:_經(jīng)過變形,_變?yōu)開的主要部分,_發(fā)育為頭部的_,_演變?yōu)開,_聚集在_的基部形成_ 。同時(shí),其它物質(zhì)濃縮為球狀,叫_。曲細(xì)精管管壁的精原細(xì)胞有絲分裂精原細(xì)胞部分精原細(xì)胞初級精母細(xì)胞初級精母細(xì)胞減數(shù)分裂次級精母細(xì)胞4單倍染色體精子精子細(xì)胞細(xì)胞核精子頭高爾基體頂體中心體精子的尾線粒體尾線粒體鞘原生質(zhì)滴考點(diǎn)一 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育5第5頁,共54頁。次級精母細(xì)胞M 第一階段精子細(xì)胞M初級精母細(xì)胞染色體復(fù)制變形精原細(xì)胞

3、精 子精子發(fā)生的過程 第二階段 兩次分裂 第三階段 細(xì)胞變形有絲分裂大量精原細(xì)胞6第6頁,共54頁??键c(diǎn)一 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育精細(xì)胞變形為精子細(xì)胞核高爾基體中心體線粒體細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)精子頭的主要部分頭部的頂體精子的尾線粒體鞘 (尾的基部)原生質(zhì)滴(球狀,最后脫落)7第7頁,共54頁。卵子的發(fā)生(1)場所:卵子的發(fā)生是在 內(nèi)完成的。(2)時(shí)期:(動物胚胎)在 以后,即 。卵巢性別分化胎兒期考點(diǎn)一 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育8第8頁,共54頁。卵原細(xì)胞有絲分裂多個(gè)卵原細(xì)胞染色體復(fù)制初級卵母細(xì)胞M第一極體次級卵母細(xì)胞第二極體成熟卵子退化消失M排卵前后完成在受精過程中完成胎兒期初情期后卵巢輸卵管初級卵

4、母細(xì)胞被卵泡細(xì)胞包圍,形成卵泡(2N)(2N)(2N)(N)(N)染色體數(shù)目初級卵母細(xì)胞生長、透明帶形成卵巢9第9頁,共54頁。卵原細(xì)胞有絲分裂初級卵母細(xì)胞次級卵母細(xì)胞和第一極體成熟卵子和兩個(gè)第二極體(含單倍染色體)M時(shí)期:場所:M卵子發(fā)生的過程大量卵原細(xì)胞染色體復(fù)制時(shí)期:場所:時(shí)期:場所:胎兒期卵巢排卵前后卵巢精子和卵子結(jié)合的過程輸卵管10第10頁,共54頁。1.一個(gè)卵泡中能形成一個(gè)成熟的卵子( )判斷正常情況下,一個(gè)卵泡只能形成一個(gè)成熟的卵子。2.排卵是指卵子從卵泡中排出( )排卵是指卵子從卵泡中排出。3.剛排出的卵是成熟的卵子( )剛排出的卵子尚未完全成熟,需要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟11第

5、11頁,共54頁。 (1).相似點(diǎn):最初階段均進(jìn)行有絲分裂,不斷增加生殖原細(xì)胞的數(shù)量;經(jīng)過減數(shù)分裂(M和M)才能形成精子或卵子。 3.精子和卵子的發(fā)生異同12第12頁,共54頁。 (2).不同點(diǎn):發(fā)生時(shí)間場所子細(xì)胞 數(shù)目變形形狀精子卵子重要區(qū)別兩次分裂連續(xù),在睪丸曲細(xì)精管兩次分裂不連續(xù),在卵巢和輸卵管初情期以后胎兒時(shí)期4個(gè)精子細(xì)胞1個(gè)卵細(xì)胞2個(gè)極體是否蝌蚪形圓形哺乳動物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲備是在出生前完成的;精子是從初情期開始的13第13頁,共54頁。1.以下說法不正確的是A.雄性動物從初情期開始產(chǎn)生精子B.1個(gè)精原細(xì)胞可以形成4個(gè)精子C.對多數(shù)家畜來說,精子在睪丸內(nèi)形成的時(shí)間為兩個(gè)月左右

6、D.動物體型大的產(chǎn)生的精子多且大2.一個(gè)卵泡可以形成的卵子數(shù)目是A.1個(gè) B.2個(gè) C.3個(gè) D.4個(gè)練習(xí):14第14頁,共54頁。3.以下說法正確的是A.哺乳動物卵泡的形成是在初情期B.排卵是指排出成熟的卵泡C.排卵實(shí)際上是排出初級卵母細(xì)胞D.排卵實(shí)際上是排出次級卵母細(xì)胞4.下例不屬于精子和卵子發(fā)生的區(qū)別的是A.初級精母、卵母細(xì)胞的形成時(shí)間B.M和M的時(shí)間連續(xù)性C.成熟生殖細(xì)胞是否發(fā)生變形D.成熟生殖細(xì)胞中染色體的數(shù)量15第15頁,共54頁。三、受精作用1、概念:指 和 結(jié)合形成合子(即 受精卵 )的過程。2、場所:受精是在 內(nèi)完成的3、過程:準(zhǔn)備階段:精子獲能 即精子必須在雌性動物生殖道內(nèi)

7、發(fā)生相應(yīng)生理變化后,才能獲得受精能力的現(xiàn)象。卵子的準(zhǔn)備 即卵子在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟達(dá)到減數(shù)第二分裂中期(M)時(shí),才具備受精能力。考點(diǎn)一 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育精子卵子輸卵管16第16頁,共54頁。精子穿越放射冠和透明帶三個(gè)反應(yīng):頂體反應(yīng)、透明帶反應(yīng)、卵細(xì)胞膜反應(yīng)二個(gè)標(biāo)志:受精作用標(biāo)志、受精作用完成標(biāo)志考點(diǎn)一 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育三、受精作用受精階段:3、過程:進(jìn)入卵黃膜雌雄原核形成和配子結(jié)合。頂體反應(yīng):精子獲能后與卵子相遇時(shí),精子頂體釋放 ,溶解 之間的物質(zhì),形成精子穿越 的通路。頂體酶卵丘細(xì)胞放射冠透明帶反應(yīng):穿過放射冠的精子經(jīng)孔道穿越 ,接觸 ,隨即產(chǎn)生阻止 進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)。透明帶

8、卵黃膜后來精子卵細(xì)胞膜反應(yīng):當(dāng)精子與 接觸后,立即被卵黃膜表面的 抱合,并發(fā)生 ,精子入卵。此時(shí)卵黃膜立即發(fā)生 其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)的生理反應(yīng)。卵黃膜微絨毛膜融合拒絕受精的標(biāo)志是在卵黃膜和透明帶的間隙可觀察到兩個(gè)極體;受精過程完成的標(biāo)志是雌、雄原核融合成合子。17第17頁,共54頁。在卵細(xì)胞膜和透明帶間隙可觀察到兩個(gè)極體思考:1.卵子是否受精的重要標(biāo)志是什么? 減數(shù)第二次分裂過程是在輸卵管中3.排出的卵子是什么時(shí)期的細(xì)胞?排出卵子是不成熟的,且成熟程度不同,有的可能是次級卵母細(xì)胞,例如豬、羊,有的可能是初級卵母細(xì)胞,例如馬、犬。2.產(chǎn)生卵子的過程是否都發(fā)生在卵巢中?18第18頁,共54頁?!居?xùn)練

9、】關(guān)于受精過程的敘述錯誤的是()。A獲能后的精子與卵子相遇后,釋放頂體酶穿過透明帶進(jìn)入放射冠B透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障C精子與卵黃膜相互融合,精子入卵D雄原核形成的同時(shí),卵子完成減數(shù)第二次分裂解析受精時(shí)精子依次穿越放射冠和透明帶;阻止多精入卵的屏障依次是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng);卵子完成減數(shù)第二次分裂是在雄原核形成時(shí)進(jìn)行的。A19第19頁,共54頁。四、早期胚胎發(fā)育輸卵管(卵裂期)、子宮2、胚胎發(fā)育的過程:考點(diǎn)一 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育1、場所:根據(jù)胚胎形態(tài)的變化,分幾個(gè)階段:受精卵 卵裂期(包括2細(xì)胞期、4細(xì)胞期、8細(xì)胞、16細(xì)胞期、32細(xì)胞期) 桑椹胚 囊胚期 原腸胚期(包括內(nèi)

10、、中、外三胚層和原腸腔) 幼體20第20頁,共54頁。卵裂期的特點(diǎn):場所:細(xì)胞分裂方式為_細(xì)胞數(shù)目_胚胎總體積_或略有_每個(gè)細(xì)胞體積_DNA數(shù)目_有機(jī)物總量_物質(zhì)種類_2、胚胎發(fā)育的過程:有絲分裂透明帶內(nèi)增加不增加縮小縮小減少增加增多三維P23121第21頁,共54頁。當(dāng)胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí),胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán),形似桑椹,叫做桑椹胚。桑椹胚中的每個(gè)細(xì)胞都屬于全能細(xì)胞。2、胚胎發(fā)育的過程:卵裂期受精卵桑椹胚桑椹胚的特點(diǎn):P6622第22頁,共54頁。2、胚胎發(fā)育的過程:受精卵卵裂期桑椹胚囊胚囊胚的特點(diǎn):P67細(xì)胞開始分化沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展排列的個(gè)體較小的細(xì)胞稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞,將來發(fā)育成 。

11、聚集在胚胎一端,個(gè)體較大的細(xì)胞稱為 ,將來發(fā)育成 。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)胎兒的各種組織胎膜和胎盤孵化:囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,導(dǎo)致透明帶破裂,胚胎從其中伸展出來。什么叫孵化?23第23頁,共54頁。外胚層:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層的細(xì)胞內(nèi)胚層:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)下方的細(xì)胞中胚層:原腸腔:內(nèi)胚層包圍的囊腔2、胚胎發(fā)育的過程:受精卵卵裂期桑椹胚囊胚原腸胚原腸胚的特點(diǎn):P67原腸胚具有 胚層, 腔。三原腸24第24頁,共54頁。(2012杭州模擬)關(guān)于原腸胚和囊胚的比較,以下說法不正確的是( )A原腸胚時(shí)期細(xì)胞分化是由于遺傳物質(zhì)突變引起的B原腸胚時(shí)期的細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化,但遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變C囊胚期內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的各細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能基本相同D囊胚期內(nèi)

12、細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞的差異是轉(zhuǎn)錄水平上的差異引起的【解析】原腸胚時(shí)期細(xì)胞分化是由于基因的選擇性表達(dá)引起的。A25第25頁,共54頁。(09海南卷)26(選修3)請回答下列與哺乳動物精子和卵子發(fā)生有關(guān)的問題:(1)精細(xì)胞經(jīng)變形后,高爾基體發(fā)育形成精子的頂體,頂體內(nèi)含有的 能協(xié)助精子穿過卵母細(xì)胞的放射冠和透明帶。(2)某動物排卵時(shí),減數(shù)第一次分裂尚未完成,此時(shí)卵子處于 卵母細(xì)胞階段,當(dāng)該細(xì)胞發(fā)育至減數(shù)第二次分裂 期時(shí),才具備受精能力。若在卵黃膜和透明帶之間看到兩個(gè)極體,則表明 過程已完成。頂體酶 初級 中受精 26第26頁,共54頁。(3)動物的早期胚胎移植到同種且 與供體相同的動物體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)

13、育為新個(gè)體的技術(shù)叫做胚胎移植。為了獲得更多的早期胚胎,常用 激素對供體進(jìn)行處理,其目的是獲得更多的 ,經(jīng)人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鑒定胚胎細(xì)胞是否為活細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)活胚胎細(xì)胞不能被染色,其原因是活細(xì)胞膜 。27第27頁,共54頁。(4)若要通過胚胎移植獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個(gè)新個(gè)體,可對發(fā)育到桑葚期或囊胚期階段的早期胚胎進(jìn)行 處理,再植入到受體內(nèi)。若要對早期胚胎進(jìn)行長春保存,應(yīng)將其置于 條件下。28第28頁,共54頁。1.概括什么是試管動物技術(shù),并完成下表項(xiàng)目試管動物技術(shù)概念目的技術(shù)手段是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技

14、術(shù)??焖俜敝硠游飪?yōu)良品種體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植考點(diǎn)二 體外受精和早期胚胎培養(yǎng)P69試管動物技術(shù)首先要做的是 和成 。體外受精早期胚胎的培養(yǎng)29第29頁,共54頁??键c(diǎn)二 體外受精和早期胚胎培養(yǎng)P69(一)體外受精哺乳動物的體外受精主要包括 , 精子的獲取和 等幾個(gè)主要步驟。卵母細(xì)胞的采集受精30第30頁,共54頁。方法:用 處理,使其 排卵,從 中沖取卵子。1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)(1)對實(shí)驗(yàn)動物(2)對大家畜或大型動物促性腺激素超數(shù)輸卵管從屠宰場 的卵巢中采集已屠宰母畜直接從 的卵巢中吸取卵母細(xì)胞活體動物(超數(shù)排卵法)(從卵巢中取卵)處理:可直接與 的精子在體外受精。獲能方法:處理

15、:在體外 后才能與獲能的精子受精培養(yǎng)成熟P6931第31頁,共54頁。有 法、 法和 等方法。2.精子的收集和獲能假陰道 手握 電刺激(1)收集的方法: (2)獲能處理: 法:把精子放入 液中。 法:把精子放入一定濃度 溶液或 溶液中。培養(yǎng)化學(xué)適用對象:(嚙齒動物、家兔和豬)適用對象:(牛、羊等家畜)獲能肝素鈣離子載體A23187另:嚙齒類實(shí)驗(yàn)動物處死附睪尾收集32第32頁,共54頁。3.受精獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子,一般情況下都可以在 或?qū)S玫?完成受精過程。獲能溶液受精溶液(中期)33第33頁,共54頁。二、胚胎的早期培養(yǎng) 目的:哺乳動物胚胎的發(fā)育培養(yǎng)液:動物胚胎的移植:不同動物有不同的

16、適宜階段檢查受精狀況和受精卵發(fā)育能力成分:無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動物血清等. 胚胎培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時(shí),可將其取出向受體移植或冷凍保存。牛、羊:桑椹胚或囊胚階段小鼠、家兔:卵裂期或囊胚階段試管嬰兒:8個(gè)或16個(gè)細(xì)胞階段P7234第34頁,共54頁。動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物胚胎培養(yǎng)液成分的比較比較項(xiàng)不同相同其他條件胚胎的培養(yǎng)液培養(yǎng)液成分動物細(xì)胞培養(yǎng)液有機(jī)鹽激素糖微量元素血漿無機(jī)鹽、核苷酸、維生素、氨基酸、血清適宜的酸堿度、滲透壓、溫度、二氧化碳以及嚴(yán)格無菌條件35第35頁,共54頁。據(jù)圖可知,次級卵母細(xì)胞的形成過程需要促性腺激素的調(diào)節(jié) 次級卵母細(xì)胞要在精子的刺激下才能經(jīng)過減數(shù)

17、第二次分裂形成成熟的卵子 細(xì)胞的分裂后期為減數(shù)第一次分裂后期,細(xì)胞分裂后期為減數(shù)第二次分裂后期,二者的染色體數(shù)均為2N,細(xì)胞的分裂后期為有絲分裂后期,染色體數(shù)為4N 轉(zhuǎn)基因動物的培育需要將受體細(xì)胞培育為完整的生物體,細(xì)胞為受精卵,具有全能性,可作為受體細(xì)胞。 36第36頁,共54頁。37第37頁,共54頁??键c(diǎn)三 胚胎工程的應(yīng)用及前景胚胎工程技術(shù)包含 , 胚胎分割和 等內(nèi)容。P74胚胎移植體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)38第38頁,共54頁。1.胚胎移植概念 將雌性動物體內(nèi)的早期胚胎,或者通過其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。體內(nèi)受精(配種或人工授精

18、)、體外受精、胚胎分割、細(xì)胞核移植得到的胚胎。胚胎的來源:供體:受體:受體的條件:提供胚胎的具有優(yōu)良遺傳性狀的個(gè)體。 接受胚胎的個(gè)體。同一物種、生理狀態(tài)相同。P75胚胎移植是胚胎工程其他技術(shù)的最后一道工序。39第39頁,共54頁。胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)同種動物的供體和受體排卵后,生殖器官的 是相同的。生理變化早期胚胎形成后,在一定時(shí)間內(nèi)不會與母體子宮建立組織上的聯(lián)系,而是處于 狀態(tài)。游離受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生 。免疫排斥反應(yīng)供體胚胎可與受體子宮建立正常的 和 聯(lián)系,但其 不受影響。生理組織遺傳特性P7640第40頁,共54頁。選擇及同期發(fā)情處理超數(shù)排卵處理配種或人工授精胚胎收集胚胎

19、檢查胚胎保存胚胎移植妊娠檢查分娩3、胚胎移植的基本程序41第41頁,共54頁。用什么激素?不同動物胚胎移植的時(shí)間不同如何進(jìn)行胚胎分割?沖卵是沖卵子嗎?點(diǎn) 撥該過程中兩次使用激素,第一次對供體、受體進(jìn)行同期發(fā)情處理;第二次用促性腺激素處理供體使其超數(shù)排卵。該過程中的兩次檢查:第一次對收集的胚胎進(jìn)行檢查;第二次對受體母牛是否妊娠進(jìn)行檢查。產(chǎn)下的犢牛性狀取決于供體胚胎。42第42頁,共54頁。囊胚腔透明帶滋養(yǎng)層內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分割針分割針胚胎分割的用途取樣滋養(yǎng)層做DNA分析性別鑒定二分胚胚胎移植內(nèi)細(xì)胞團(tuán)43第43頁,共54頁?!镜淅扛叩炔溉閯游锸芫蟛痪茫芫验_始進(jìn)行細(xì)胞分裂,經(jīng)32細(xì)胞期、囊胚、原腸胚

20、和組織器官的分化,最后發(fā)育成一個(gè)完整的幼體。如圖是胚胎發(fā)育過程中某階段示意圖,有關(guān)敘述不正確的是A.依次為滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B.高等哺乳動物胚胎發(fā)育經(jīng)歷的時(shí)期是受精卵卵裂期32細(xì)胞期囊胚期原腸胚期幼體,其中最關(guān)鍵的時(shí)期是原腸胚期C.高等哺乳動物細(xì)胞分化開始于囊胚期,終止于生命結(jié)束D.進(jìn)行胚胎分割時(shí),應(yīng)選擇原腸胚期的胚胎進(jìn)行D44第44頁,共54頁。(2003年上海高考題)“試管嬰兒”技術(shù)屬于( )A胚胎移植 B組織培養(yǎng)C克隆技術(shù) D基因工程45第45頁,共54頁。表現(xiàn)型不同的母牛生育出基因型完全相同的小牛。產(chǎn)生這一結(jié)果最可能的原因是( )A試管動物培養(yǎng) B胚胎移植C胚胎分割移植 D受精卵移植46

21、第46頁,共54頁。(福建卷)33.生物-現(xiàn)代生物科技專題必答題Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞。科研人員利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖:47第47頁,共54頁。(1)步驟中,在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的 。(2)步驟中,重組胚胎培養(yǎng)到 期時(shí),可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞。(3)步驟中,需要構(gòu)建含有基因Rag2的表達(dá)載體。可以根據(jù)Rag2基因的 設(shè)計(jì)引物,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。用HindIII和PstI限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達(dá)載體,所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有 酶的酶切位點(diǎn)。(4)為檢測Rag2基因的表達(dá)情況,可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的 ,用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞核囊胚核苷酸序列Hind和Pst蛋白質(zhì)48第48頁,共54頁。【解析】(1)步驟是核移植過程。體細(xì)胞核移植前要除去受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核,原因是若不去掉卵母細(xì)胞的細(xì)胞核,就會造成細(xì)胞里面就有兩個(gè)細(xì)胞核,使得遺傳物質(zhì)是不穩(wěn)定的。(2)ES細(xì)胞是由早期胚胎(囊胚)的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出來的一類細(xì)胞。(3)步驟過程是導(dǎo)入目的基因Rag2基因于ES細(xì)胞中的基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程。在生物體外可通過PCR技術(shù)

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