腸道致病菌微生物學(xué)檢查簡(jiǎn)述

1、腸道致病菌微生物學(xué)檢查簡(jiǎn)述實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：（抗酸染色）1.腸道致病菌的微生物學(xué)檢查 （1）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖窘蹋撼Ｒ娔c道細(xì)菌（2）常用培養(yǎng)基介紹主要包括：麥康克培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、中國(guó)藍(lán)瓊脂平板、瓊脂平板、雙糖鐵培養(yǎng)基示教：伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基 雙糖鐵培養(yǎng)基 平板分離腸道病原菌的強(qiáng)選擇培養(yǎng)基成分和作用：基礎(chǔ)培養(yǎng)基：提供氮源和碳源膽鹽、枸櫞酸鈉、煌綠：可抑制腸道非致病菌的生長(zhǎng)，而對(duì)腸道致病菌抑制作用弱。乳糖，中性紅（6.8-8.0，紅橙黃） ：致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨產(chǎn)生堿性物質(zhì)菌落淡黃色；大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸，菌落呈紅色病原菌:小,無色非致病菌:大,紅色病原菌:透明,無色，小菌落 非致病菌:紫黑色（ )

2、平板分離腸道病原菌的弱選擇培養(yǎng)基克氏雙糖培養(yǎng)基接種方法如何觀察上層含乳糖部分乳糖發(fā)酵：致病菌紅色，非致病菌黃色H2S然后觀察下層發(fā)酵葡萄糖（產(chǎn)酸產(chǎn)氣）動(dòng)力乳糖硫酸亞鐵固體葡萄糖半固體指示劑:酚紅（3）腸道致病菌的分離鑒定標(biāo)本收集分離培養(yǎng)初步鑒定血清學(xué)鑒定生化反應(yīng)標(biāo)本選擇鑒別培養(yǎng)基 平板生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定雙糖管等已知檢測(cè)未知 (玻片凝集試驗(yàn))3724h？和球菌的不同糞便標(biāo)本腸道致病菌分離鑒別流程 乳糖 葡萄糖 動(dòng)力 硫化氫大腸桿菌 黃色 + -痢疾桿菌 紅色 + - -傷寒桿菌 紅色 + + 鑒別腸道致病菌的生化反應(yīng)糖發(fā)酵試驗(yàn) 甲基紅試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)硫化物（硫化氫）生成試驗(yàn)吲哚生成試驗(yàn)?zāi)?/p>

3、素水解試驗(yàn)示教：生化反應(yīng)舉例 糖發(fā)酵試驗(yàn)( )示教：?jiǎn)翁前l(fā)酵管 甲基紅試驗(yàn)（ ）- + - +（）試驗(yàn) +- 尿素酶試驗(yàn)：H2S 硫化氫試驗(yàn) - +試驗(yàn)( ; () ; () ; ) 大腸埃希菌 產(chǎn)氣桿菌 發(fā)病趨勢(shì)和臨床意義：結(jié)核分枝桿菌形態(tài)：細(xì)長(zhǎng)，略彎曲的桿菌，多聚集成團(tuán)。無鞭毛,芽胞。染色性：不易著色，齊尼抗酸染色陽(yáng)性。菌體呈紅色，背景中其他物質(zhì)藍(lán)色。培養(yǎng)特性：專性需氧，最適37 ，營(yíng)養(yǎng)要求高，生長(zhǎng)緩慢，18h分裂一代。羅氏()培養(yǎng)基含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機(jī)鹽、孔雀綠，26周可見菌落生長(zhǎng)，菜花、顆?；蚪Y(jié)節(jié)狀菌落，乳白色或黃色，不透明。在液體培養(yǎng)基，生長(zhǎng)于表面，有皺褶。結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)方

4、法1痰標(biāo)本培養(yǎng)前處理（1）酸處理法：痰標(biāo)本加入4硫酸稀釋24倍，置室溫下30，期間振蕩23次，使痰液化后即可接種。（2）堿處理法：痰標(biāo)本加入2氫氧化鈉溶液稀釋24倍，置37溫箱內(nèi)30，期間振蕩23次，痰液化后即可接種。2接種培養(yǎng)法 取上述處理過的痰液0.1均勻接種于改良羅氏培養(yǎng)基斜面，37孵育34周后觀察菌落特點(diǎn)。菌落為乳白色或米黃色，表面粗糙呈顆粒狀或菜花狀抗酸染色 結(jié)核桿菌對(duì)苯胺染料一般不易著色，但經(jīng)加溫或延長(zhǎng)染色時(shí)間后能抵抗3鹽酸乙醇的脫色作用。經(jīng)此法染色后，結(jié)核桿菌及其他分枝桿菌呈紅色，非抗酸菌呈藍(lán)色。示教：結(jié)核分枝桿菌抗酸染色 實(shí)驗(yàn)步驟：1用竹簽挑取開放性肺結(jié)核病人晨痰標(biāo)本中干酪樣小?；蚰撔圆糠郑蛴萌【h(huán)挑取經(jīng)酸、堿處理后的痰標(biāo)本，置載玻片中央，均勻涂布成1.52.0卵圓形痰膜，干燥，固定。2滴加石炭酸復(fù)紅液于涂片上，玻片置于酒精燈火焰緩緩加熱，至有蒸汽冒出，約維持5（切勿沸騰或使染液干涸于玻片上）。如有染液干涸趨勢(shì)，應(yīng)補(bǔ)加染液。然后自然冷卻，用流水漂去多于染液。3滴加3鹽酸乙醇脫色，至涂片較厚處無顏色脫出為止，約30s，水洗。4滴加堿性亞甲藍(lán)液復(fù)染1，水洗。5濾紙吸干后鏡檢。實(shí)驗(yàn)材料痰液1管/小組，抗酸染色