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1、食品中蠟樣芽胞桿菌檢驗(yàn)原始記錄樣品編號: 檢驗(yàn)開始時(shí)間: 年 月 日樣品名稱: 檢驗(yàn)完成時(shí)間: 年 月 日檢測項(xiàng)目:蠟樣芽胞桿菌 檢測依據(jù):GB4789.14-2014第一法第二法 一、平板計(jì)數(shù)法:無菌操作稱(量)取樣品25g加入225ml的無菌生理鹽水中,用螺旋刀片式均質(zhì)器以8000r/min10000r/min均質(zhì)2分鐘,做成110樣品液;若樣品為液態(tài),吸取25ml樣品至盛有225ml無菌生理鹽水的錐形瓶(預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中,震蕩混勻,作為1:10的樣品勻液。取110樣品勻液1ml加入到盛有9ml生理鹽水稀釋管中,混勻,做成1100樣品均液。根據(jù)對樣品污染狀況的估計(jì),按上述操作,

2、依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增一次,換用1支1ml無菌吸頭。根據(jù)對樣品污染狀況的估計(jì),選擇23個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液),以0.3ml、0.3ml、0.4ml接種量分別移入三塊MYP瓊脂平板,然后用無菌L棒涂布整個(gè)平板。倒置于培養(yǎng)箱,301培養(yǎng)242h,如果菌落不典型,可繼續(xù)培養(yǎng)242h。從每個(gè)平板中挑取至少5個(gè)典型菌落(小于5個(gè)全選),分別劃線接種于營養(yǎng)瓊脂平板做純培養(yǎng),301培養(yǎng)242h,進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。編號空白培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)溫度稀釋度/接種量/MYP瓊脂菌落數(shù)典型菌落總數(shù)(A)/鏡檢/革蘭氏染色/用于鑒定的菌落數(shù)(C)/鑒定結(jié)果為陽性的菌落數(shù)(B)/結(jié)果CFU/g

3、(ml)/電子天平編號: 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:培養(yǎng)箱編號: 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:檢測人: 校核人: 審核人:樣品編號: 二、MPN計(jì)數(shù)法 : 取3個(gè)連續(xù)稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液),接種于10ml胰酪胨大豆多粘菌素肉湯中,每一稀釋度接種3管,每管接種1ml(如果接種量超過1ml,則用雙料胰酪胨大豆多粘菌素肉湯)。于301培養(yǎng)482h。用接種環(huán)從各管中分別移取1環(huán),劃線接種到MYP瓊脂平板上,于301培養(yǎng)242h,如果菌落不典型,可繼續(xù)培養(yǎng)242h再觀察。確定鑒定同平板計(jì)數(shù)法。接種量g,ml培養(yǎng)時(shí)間(h)培養(yǎng)溫度()空白胰酪胨大豆多粘菌素肉湯MYP瓊脂平板確定鑒定/注:+典型菌落或可疑菌落;-無可疑菌落;結(jié)果:根據(jù)證實(shí)為蠟樣芽胞桿菌陽性的管數(shù),查MPN檢索表,得 MPN/g(ml)。電子天平編號:

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