細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)四 細(xì)胞增殖 染色體（質(zhì)）

1、實(shí)驗(yàn)四 細(xì)胞增殖 染色體（質(zhì)）目的要求1、熟悉細(xì)胞增殖的主要方式；2、掌握細(xì)胞增殖周期各期的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)；3、熟悉人染色體的基本形態(tài)特征；4、掌握X染色質(zhì)標(biāo)本的制備方法及原理；山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所1細(xì)胞增殖是生命的重要特征。它是指細(xì)胞通過生長(zhǎng)和分裂獲得和母細(xì)胞相同遺傳特征的子細(xì)胞而使細(xì)胞數(shù)目增加的過程真核生物的增殖主要有三種方式 無絲分裂 有絲分裂 減數(shù)分裂山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所2山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所3 /G1期 /間期 S期細(xì)胞周期 G2期 / 前期 有絲分裂期 中期 后期 末期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所4有絲分裂各期形態(tài)學(xué)特點(diǎn)G1期，合成細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種蛋白

2、質(zhì)、糖類、脂質(zhì)S期，又稱DNA合成期G2期，由G1期的2n變?yōu)镚2期的4n山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所5有絲分裂期 M期前期 核仁核膜崩解，染色質(zhì)螺旋折疊形成光鏡下可見的早期染色體結(jié)構(gòu)。中期 染色體排列到赤道板上，放垂體呈典型紡錘樣后期 染色單體分離形成子代染色體，向兩極移動(dòng)末期 染色單體到達(dá)兩極，去濃縮，核膜核仁重建山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所61、動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂 （馬蛔蟲受精卵切片）山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所7有絲分裂前期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所8有絲分裂中期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所9有絲分裂后期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所10有絲分裂末期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研

3、究所112、植物細(xì)胞有絲分裂 （洋蔥根尖縱切片）山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所12 1根冠 2生長(zhǎng)區(qū) 3延長(zhǎng)區(qū) 4根毛區(qū)有絲分裂中期后期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所13有絲分裂前期、末期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所14動(dòng)植物細(xì)胞有絲分裂的不同點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞有中心體，從中心體形成紡錘體，植物細(xì)胞從兩極形成紡錘體 動(dòng)物細(xì)胞最后通過縊裂形成兩個(gè)細(xì)胞，植物細(xì)胞是細(xì)胞板形成細(xì)胞壁，分隔成兩個(gè)細(xì)胞 山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所15動(dòng)物細(xì)胞 胞質(zhì)分裂開始于細(xì)胞分裂后期，完成于細(xì)胞分裂末期。胞質(zhì)分裂開始時(shí)，在赤道板周圍細(xì)胞表面下陷，形成環(huán)形縊縮，稱為分裂溝。隨細(xì)胞由后期向末期轉(zhuǎn)化，分裂溝逐漸加深，直至兩個(gè)子

4、代細(xì)胞完全分開。在分裂溝的下方，除肌動(dòng)蛋白之外，還有微管、小膜泡等物質(zhì)聚集，共同構(gòu)成一個(gè)環(huán)形致密層，稱為中間體。隨胞質(zhì)分裂，中間體將一直持續(xù)到兩個(gè)子細(xì)胞完全分離。胞質(zhì)分裂開始時(shí)，大量的肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白在中間體處裝配成微絲并相互組成微絲束，環(huán)繞細(xì)胞，稱為收縮環(huán)。收縮環(huán)收縮，分裂溝逐漸加深，細(xì)胞形狀也出原來的圓形逐漸變?yōu)闄E圓形、啞鈴形，直到兩個(gè)子細(xì)胞相互分離。山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所163、收縮環(huán) （肝癌細(xì)胞飛片）山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所174、無絲分裂 （草履蟲裝片）示教山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所18山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所195、人染色體的基本形態(tài) （人血涂片）山東大學(xué)

5、醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所20山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所21山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所22正常男性核型山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所23山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所24（二）操作 1、制作有絲分裂壓片 （洋蔥根尖）山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所25步驟取材（取根尖，carnoy固定2h ）軟化 1mol/L HCl 5min刀片切下尖端，苯酚品紅染色切碎，壓片觀察山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所26結(jié)果 前期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所27中期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所28后期、末期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所29末期山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所302、制作X染色質(zhì)標(biāo)本片 （人口腔粘膜上皮細(xì)胞）原理一個(gè)個(gè)體無論其細(xì)胞中有幾條X染色體，在間期時(shí)均只有一條具有轉(zhuǎn)錄活性，其余的X染色體均失活形成異固縮的X染色質(zhì)。因此，一個(gè)細(xì)胞中所含X染色質(zhì)的數(shù)目等于X染色體數(shù)目減1。山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所31步驟刮取口腔粘膜細(xì)胞 制片95%乙醇固定10分鐘5mol/L HCl 水解10分鐘Giemsa染液染色8分鐘沖洗觀察山東大