實驗動物質(zhì)量監(jiān)測報告(69張幻燈片)課件

1、7/27/20221實驗動物質(zhì)量監(jiān)測的意義生物學(xué)實驗研究的四個基本條件 Animal，Equipment，Information，Reagent ，簡稱AEIR四要素 這4個要素在整個實驗研究中具有同等重要的地位，不能忽略或偏廢。事實上，實驗動物質(zhì)量往往成為制約性要素，影響整個實驗的質(zhì)量和水平 實驗動物質(zhì)量監(jiān)測是實驗動物科學(xué)的重要內(nèi)容，是確保實驗動物質(zhì)量的必要手段。 7/27/202221、實驗工作人員的健康和生命的保證常見的人畜共患?。毫餍行猿鲅獰?、狂犬病、猴B病毒、淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、利什曼原蟲等7/27/202232、動物生產(chǎn)和繁殖的保證動物一旦染上傳染病，則種群難以凈化，一些烈性

2、傳染病如鼠痘、兔病毒性出血癥等可致動物全軍覆沒，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。7/27/202243、實驗結(jié)果準(zhǔn)確性、規(guī)律性、重復(fù)性的保證7/27/20225實驗動物質(zhì)量監(jiān)測主要包括以下幾個方面：遺傳質(zhì)量微生物與寄生蟲質(zhì)量飼料質(zhì)量環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測。7/27/20226第一節(jié) 遺傳質(zhì)量監(jiān)測實驗動物的遺傳背景與反應(yīng)特性，是影響實驗結(jié)果的重要因素。不同遺傳背景與反應(yīng)特性的實驗動物，對同一刺激有時可引起不同質(zhì)和量的反應(yīng)。為了保存實驗動物品種品系特性。使實驗動物使用者在動物實驗中能得到正確的、可重復(fù)的科學(xué)數(shù)據(jù)，實驗動物生產(chǎn)者在嚴(yán)格遵守品系繁育技術(shù)路線的同時，還必須努力做好實驗動物遺傳質(zhì)量的嚴(yán)格監(jiān)測，以防止實驗動物遺傳上

3、的污染和變異。7/27/20227如：BALB/c對放射線比其他品系更為敏感。C57BL/6腫瘤發(fā)生率低，A系高。BALB/c和C3H小鼠對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性存在顯著差異SHR為自發(fā)性高血壓大鼠，心血管疾病發(fā)生率高7/27/20228一、群體管理管理上人為的粗心最易引起遺傳上的混雜，所以對育種群進(jìn)行恰當(dāng)?shù)墓芾硎潜ＷC遺傳質(zhì)量的最有效方法。每一個實驗動物育種機(jī)構(gòu)都應(yīng)當(dāng)認(rèn)真執(zhí)行良好的育種制度，完善地保持育種記錄，基礎(chǔ)群應(yīng)有系譜記錄。要做到以上要求，最重要的因素就是要有訓(xùn)練有素、經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員。7/27/20229二、免疫學(xué)標(biāo)記監(jiān)測（一）皮膚移植法 這是目前最常用和最靈敏的檢測亞系內(nèi)或亞系間組

4、織相容性基因差異的方法。在小鼠和大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮膚移植法。皮膚移植法靈敏度高。易掌握，經(jīng)濟(jì)。不需昂貴設(shè)備，易對植皮成活情況進(jìn)行觀察和判斷。能有效地測出新發(fā)生的、造成亞系變異的遺傳混雜和突變。7/27/202210（二）混合淋巴細(xì)胞反應(yīng) 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的原理為：異源動物或遺傳上有差異個體的淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)一定時間后，這些細(xì)胞會增殖，甚至進(jìn)一步裂解。此反應(yīng)結(jié)果可在79天獲得，定期地從群體中抽取足夠量的動物進(jìn)行監(jiān)測能夠維護(hù)實驗動物的品質(zhì)。7/27/202211（三）淋巴組織移植 用供體的均質(zhì)淋巴器官，如骨髓、脾、淋巴結(jié)、胸腺或胚胎肝臟制備出單細(xì)胞懸液。然后將適量活細(xì)胞通過靜脈或腹腔注

5、射到受體動物體內(nèi)，組織相容性由受體中存活者及脾增大者來確定，也可以用放射學(xué)方法。根據(jù)移植細(xì)胞的存活數(shù)測定。7/27/202212三、生化標(biāo)記監(jiān)測 通過多種形式的電泳和電聚集?？蓹z定生化標(biāo)記即同工酶或蛋白質(zhì)，常用的電泳介質(zhì)有乙酸纖維素膜、淀粉凝膠、聚丙烯酰胺凝膠。每一種標(biāo)記系統(tǒng)做特異性染色，最后將得到的帶型與公布的生化遺傳圖式進(jìn)行比較。如中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB；T14923-2001公布9種常用近交系大鼠生化位點標(biāo)記基因(表5-2)。7/27/202213表5-2 常用近交系大鼠生化位點標(biāo)記基因StrainAkp1Cs2Es1Es3Es4Es6Es8Es9F344/NaaaababaLOU/

6、CaaaabbbaSHRababaabaWKYbbadbaacLEW/MaaadbabcACIbababbba7/27/202214四、骨骼形態(tài)特征監(jiān)測常采用“下頜骨分析法”來鑒別和檢測大小鼠的亞系變異。將年齡、性別、體重相當(dāng)?shù)拇笫蠡蛐∈筇幩篮螅直嬗蚁骂M骨，加以標(biāo)記，在直角坐標(biāo)系上測量出多個形態(tài)特征參考點距離。將所有測量的平均數(shù)作統(tǒng)計分析，利用判別函數(shù)確定下頜骨形狀。如果測量值集中，則表明被測亞系間無顯著的遺傳變異。7/27/202215五、染色體帶型監(jiān)測 可以利用染色體分帶技術(shù)，鑒別C帶和Q帶作為染色體標(biāo)記，用來區(qū)分大、小鼠的近交系，在多數(shù)大、小鼠的近交系中，所有中期染色體都存在C帶材料，

7、同源染色體的C帶區(qū)域大小相同；不同的近交系，C帶材料大小不同，是品系特異的，是一種很有價值的檢測亞系變異和混雜來源的方法。7/27/202216六、現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù) 傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法來源于過去研究者對哺乳動物進(jìn)行遺傳分析時采用的研究手段。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，分子生物學(xué)技術(shù)有可能取代傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法，其優(yōu)點是多態(tài)性高，位點豐富，實驗技術(shù)成熟，直接涉及生物的遺傳基礎(chǔ)，DNA樣品容易保存和運輸?shù)鹊取?/27/202217 1限制性片斷長度多態(tài)(RFLP)技術(shù) 當(dāng)動物基因組DNA被限制性內(nèi)切酶消化時，酶能夠識別雙鏈DNA鏈上的特定核苷酸序列，并在每條DNA鏈上切割產(chǎn)生一個切口，使DNA裂解

8、為片斷。這些片斷的長度在動物群體中存在變異，造成多態(tài)現(xiàn)象。通過DNA電泳和DNA探針分子雜交技術(shù)，即可觀察到不同帶型。7/27/202218 例如：位于小鼠第2號染色體補(bǔ)體-5（complement-5）位點(He)的pC5探針，當(dāng)用Hind消化小鼠DNA時，C3H品系將產(chǎn)生一條2.7kb的帶型，而AKP品系將產(chǎn)生6.0kb和4.6kb兩條帶型。從而可以在He位點上區(qū)別這兩個品系。目前所報道的RFLP位點已多達(dá)1098個，給遺傳學(xué)研究帶來許多便利條件。7/27/202219 2簡單序列長度多態(tài)(SSLP)技術(shù) 簡單序列長度多態(tài)位點是動物基因內(nèi)廣泛存在的由l4個核苷酸組成的成串的重復(fù)序列，又稱為

9、微衛(wèi)星(micro satellite)。估計這樣的DNA結(jié)構(gòu)在哺乳動物基因組內(nèi)的數(shù)目多達(dá)5萬10萬個。在每個特定的位點上，重復(fù)序列的長度在不同品系中存在著差異。采用夾在這些序列兩端的引物，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和電泳，就能觀察到這些位點的差異，從而區(qū)分不同的品系。7/27/202220 例如：小鼠第16條染色體的D16Mit4位點，其PCR產(chǎn)物的大小（bp）在常用近交系中分別如下：C57BL/6-132，DBA/2-123，A/J-147，C3H-123，BALB/c-149，AKR-126，CBA-132。SSLP測試技術(shù)比RFLP技術(shù)簡便，多態(tài)性高，需要的DNA樣品較少，引物容易獲

10、得，推廣應(yīng)用前景可觀。7/27/202221 3DNA指紋(finger printing)技術(shù) 上述兩種DNA技術(shù)是針對單個DNA位點進(jìn)行的測試。DNA指紋技術(shù)一次可同時測試多個位點，所以有一定的優(yōu)勢。DNA指紋技術(shù)經(jīng)過電泳后可獲得十幾到幾十條帶，而這些帶型在個體之間或品系之間有差異，如同人類的指紋在每個人都不同一樣，因此而得名。通常有兩種方法獲得DNA指紋圖。一是用限制性內(nèi)切酶和小衛(wèi)星探針技術(shù)獲得的DNA指紋。二是用較短的隨機(jī)擴(kuò)增引物或小衛(wèi)星引物，通過PCR而獲得的DNA指紋。7/27/202222 DNA指紋圖譜有時在亞系或亞群之間有區(qū)別，所以對亞系的監(jiān)測十分有用。但是DNA指紋的結(jié)果因

11、為電泳帶太多而不好辨認(rèn)和比較。因此，也影響其在遺傳監(jiān)測和其他研究中的應(yīng)用。目前所做的DNA指紋比上述兩種DNA技術(shù)少，但隨著研究的深入和方法的改進(jìn)，將來一定會有所突破。7/27/202223 4隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)（RAPD）技術(shù) RAPD技術(shù)是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來的一種簡便、快捷的檢測基因組DNA多態(tài)性的遺傳標(biāo)記技術(shù)。該項技術(shù)首先將動物目的基因組DNA提純、酶切，用含10個堿基的隨機(jī)引物，對DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，經(jīng)電泳，便可在多個位點上得到擴(kuò)增產(chǎn)物。各種DNA多態(tài)分析方法，7/27/202224 如：DNA指紋、限制性片段長度多態(tài)(RFLP)等，雖然可直接檢測基因組的遺傳變異，但都不同程度地存在

12、操作復(fù)雜、需要特異性操作、需要事先知道動物基因組DNA序列等不足。而RAPD技術(shù)，由于引物可任意改變，有可能找到任何一個個體特異的RAPD標(biāo)記，從而為實驗動物的遺傳檢測和分析提供一個十分有效的工具。7/27/202225七、遺傳性狀監(jiān)測結(jié)果的分析 當(dāng)被檢查的遺傳性狀與每個品系的遺傳概貌圖一致時，同時遺傳管理資料清晰、可信，可以認(rèn)為有關(guān)品系的繁育生產(chǎn)正在正確地進(jìn)行，該品系的動物遺傳質(zhì)量合格；若與遺傳概貌圖不一致時，可以考慮以下原因：7/27/202226 1遺傳污染(genetic contamination) 這是最常見的遺傳變異，往往是由于遺傳學(xué)管理不善所致。這種情況如發(fā)現(xiàn)得早，在被檢查的性

13、狀中至少可以觀察到一個以上基因標(biāo)記發(fā)生改變，出現(xiàn)雜合型，或與遺傳概貌不符的其他表型；如果發(fā)現(xiàn)得較遲，一些雜合基因可隨機(jī)地固定為單一的純合型，但與原品系的遺傳概貌不一致。出現(xiàn)上述情況均應(yīng)淘汰原品系，更換來源清楚、質(zhì)量合格的動物作為新種，重新進(jìn)行品系的繁育。7/27/202227 2. 遺傳漂變(genetic drift) 遺傳漂變是指一個品種或品系動物基因型在飼養(yǎng)的過程中可能發(fā)生隨機(jī)的改變。這種改變多由于近交系動物部分雜合基因尚未純合時即進(jìn)行了分系，造成了亞系和支系的形成。監(jiān)測時可以看到一個品系所有的動物在12個基因標(biāo)記上與原品系的遺傳概貌不符，但表型一致又均為純合型。這種情況在經(jīng)同系異體移植

14、試驗排除了遺傳污染后需按照亞系和支系重新命名。7/27/202228 3遺傳突變(mutation) 遺傳突變在哺乳類動物中的頻率為10-5。在分析監(jiān)測結(jié)果時，如果僅看到一只動物單個基因標(biāo)記出現(xiàn)雜合型，應(yīng)考慮有否發(fā)生遺傳突變。為了證實此點，往往需要根據(jù)動物編號查詢該只動物同窩兄妹或雙親的基因標(biāo)記表型。如遺傳突變發(fā)生在親代，則同窩兄妹均應(yīng)為雜合型或分離產(chǎn)生不同的表型。7/27/202229 如果在同窩兄妹或雙親中該基因標(biāo)記的表型與遺傳概貌圖一致，應(yīng)考慮被測個體發(fā)生了遺傳突變。在檢查時如同時發(fā)現(xiàn)其他基因標(biāo)記的表型與遺傳概貌圖不符，無論是雜合型還是純合型均應(yīng)考慮發(fā)生了遺傳污染，應(yīng)立即淘汰換種。遺傳突

15、變?nèi)鐭o特殊保留價值，在剔除突變的個體后，整個品系可以繼續(xù)保存；如有保存價值，可將突變個體單獨培育成同源突變近交系。7/27/202230第二節(jié) 微生物學(xué)與寄生蟲學(xué)監(jiān)測如何控制微生物和寄生蟲，是實驗動物標(biāo)準(zhǔn)化的主要內(nèi)容之一。一般而言，科研中使用的實驗動物，其微生物和寄生蟲的控制級別越高，其結(jié)果就越精確、越可靠。7/27/202231一、監(jiān)測意義1對實驗動物進(jìn)行微生物、病毒與寄生蟲的監(jiān)控，對保證實驗研究的順利進(jìn)行和工作人員的身體健康具有十分重要的意義。實驗動物被集中飼養(yǎng)，極易導(dǎo)致疾病的爆發(fā)與流行。實驗動物疾病的爆發(fā)，除造成動物死亡外，還會干擾實驗的順利進(jìn)行，引起生物制品的污染，對人類健康產(chǎn)生危害。

16、7/27/2022322對實驗動物飼養(yǎng)設(shè)施的監(jiān)測，為確保這些設(shè)施能否控制微生物污染提供依據(jù)。3對引進(jìn)的實驗動物進(jìn)行檢疫，避免病原體入侵原有的動物群。4如動物群發(fā)生疾病，為了確證病原，對患病動物進(jìn)行病原學(xué)診斷，積累對疾病的認(rèn)識，收集菌株和毒株，進(jìn)一步研究病原，為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株。7/27/202233二、監(jiān)測方法（一）實驗動物病毒學(xué)檢測方法1血清學(xué)檢測 適用于各級各類實驗動物的經(jīng)常性檢測和疫情普查。常用方法有：酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、免疫熒光試驗(IFA)、免疫酶染色試驗(IEA)、血凝試驗(HA)、血凝抑制試驗(HI)、病毒中和試驗、補(bǔ)體結(jié)合試驗、瓊脂擴(kuò)散試驗。7/2

17、7/2022342病原學(xué)檢測適用于動物群中有疾病流行，需要檢出病毒或確認(rèn)病毒存在的情況。檢測方法有：病毒分離與鑒定，病毒顆粒、抗原或核酸的檢出，潛在病毒的激活，抗體產(chǎn)生試驗等。例如：采用HA或HI方法檢查患病動物排泄物或組織懸液中的血凝素抗原；采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)檢查病毒基因組；采用核酸分子雜交技術(shù)或聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢出組織或排泄物中的病毒核酸。7/27/202235（二）實驗動物細(xì)菌學(xué)檢測方法最常用的方法是病原菌的分離與培養(yǎng)或進(jìn)行動物接種。部分病原菌，如：鼠傷寒沙門菌、鼠棒狀桿菌、布氏桿菌、沙門菌、氣管敗血波氏桿菌等，可采取血清學(xué)方法，但仍需結(jié)合分離培養(yǎng)結(jié)果最后做出診斷。

18、對于泰澤菌，由于不能在人工培養(yǎng)基上生長，因此宜采用組織壓片、鏡檢的方法進(jìn)行檢查，并結(jié)合病理檢查結(jié)果最后做出診斷。7/27/202236（三）實驗動物真菌學(xué)檢測方法目前主要采用沙氏培養(yǎng)基分離培養(yǎng)。皮膚真菌一般在25培養(yǎng)，深部真菌在37培養(yǎng)。不同的真菌具有一定的菌落特點，鏡下染色檢查可進(jìn)行種屬鑒定，有時，還需借助于生物化學(xué)反應(yīng)結(jié)果和免疫學(xué)方法進(jìn)行最后診斷。7/27/202237（四）實驗動物寄生蟲學(xué)檢測方法 1體外寄生蟲 肉眼觀察法、透明膠紙粘取法、拔毛取樣法、皮屑刮取法、黑背景檢查法、解剖鏡下通體檢查法等，主要檢查蚤、虱、螨等節(jié)肢動物。 7/27/202238 2體內(nèi)寄生蟲 主要檢查蠕蟲和原蟲，

19、可用直接涂片法(糞便、血液、臟器、腸內(nèi)容物)、飽和鹽水漂浮法或沉淀法、透明膠紙肛門周圍粘取法、組織或器官剖面壓印法、病變組織切片或壓片法、尿液的離心法(如查鼠膀胱線蟲)等。實驗動物的微生物、寄生蟲檢測具體操作方法詳見國家標(biāo)準(zhǔn)實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)的檢測方法（嚙齒類和兔類）（GB/T14926.1-14926.41-200 1）。7/27/202239三、監(jiān)測要求1選定監(jiān)測項目 任何一種實驗動物都有許多致病性微生物、寄生蟲，結(jié)合具體情況選擇合適的檢測項目，既達(dá)到保證動物質(zhì)量的目的，又可節(jié)省人力物力。我國經(jīng)過十多年來對各地實驗動物感染病原微生物、寄生蟲情況的調(diào)查，結(jié)合其他國家的規(guī)定和經(jīng)驗，制定

20、了我國嚙齒類和兔類微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)等級標(biāo)準(zhǔn)，貓、犬、猴等中型實驗動物，衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)實驗動物管理委員會亦有初步規(guī)定。7/27/2022402采樣數(shù)量和頻度檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，要采取合適的動物數(shù)量。采樣動物數(shù)可根據(jù)動物群體的污染程度而有所不同。按照國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，動物數(shù)量超過100只的生產(chǎn)繁殖單元取樣如下：普通級動物不能少于10只；清潔級動物檢測510只；飼養(yǎng)于小隔離罩內(nèi)的無菌動物和無特定病原體動物隨機(jī)抽檢2只；飼養(yǎng)于生產(chǎn)繁殖單元的抽檢510只。7/27/202241除了采樣的數(shù)量，還必須考慮到檢測的間隔時間。一般來說，一旦病原體侵入動物群體引起感染，初期分離病原體較容易，抗體的檢出率上升。23個月后

21、可因某些個體抗體水平的降低以及新出生的非感染個體的增加等原因，抗體檢出率下降，據(jù)此，檢測間隔時間以3個月一次為宜。至少每年檢查2次，選在春、秋季疾病多發(fā)季節(jié)為宜。7/27/202242采樣時，宜在動物群中不同方位隨機(jī)采取育成動物，選擇至少4個不同的位置采集樣品或采用前哨動物放人群內(nèi)，不時調(diào)換位置，飼養(yǎng)一定時間后解剖檢查抗體或病原。運輸途中保證動物的安全和避免污染。引種的動物則需有檢疫隔離期，小鼠、大鼠和豚鼠l7天，兔21天，犬、貓2128天，猴l9周。7/27/202243第三節(jié) 飼料質(zhì)量監(jiān)控實驗動物作為生物體離不開營養(yǎng)，飼料是實驗動物攝人營養(yǎng)素的主要來源。只有良好的營養(yǎng)才能使實驗動物保持良好

22、的健康狀態(tài)，而健康的實驗動物才能確保實驗結(jié)果的可靠。因此，加強(qiáng)飼料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化管理，是實現(xiàn)實驗動物標(biāo)準(zhǔn)化的重要環(huán)節(jié)。7/27/202244一、實驗動物飼料 生產(chǎn)加工、儲存與管理 實驗動物飼料是以實驗動物飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)，經(jīng)過嚴(yán)密設(shè)計、科學(xué)配方、精心加工、生產(chǎn)制造而形成的標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品。因此，進(jìn)行實驗動物飼料生產(chǎn)必須了解有關(guān)實驗動物飼養(yǎng)管理法規(guī)條例，全面掌握飼料的生產(chǎn)過程。7/27/2022451實驗動物配合飼料的生產(chǎn)加工應(yīng)根據(jù)各種實驗動物的特性和不同的實驗?zāi)康模捎貌煌娘暳霞庸し椒?。常用實驗動物如大鼠、小鼠、豚鼠及兔等實驗動物的飼料?yīng)制成具有一定硬度的顆粒飼料較為適合其攝食習(xí)性；狗、貓則以膨化飼料為

23、好；而有的實驗動物根據(jù)實驗?zāi)康牟煌?，常要求制作糊狀、粉狀或液體飼料以滿足研究需要。但是無論其形狀如何，在實驗動物飼料加工生產(chǎn)過程中都應(yīng)注意生產(chǎn)規(guī)格及其產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)。7/27/2022462實驗動物飼料的儲存 包括原料儲存和成品儲存兩部分內(nèi)容。 原料儲存：應(yīng)按原料種類、生產(chǎn)廠家、進(jìn)貨日期等分開保管。保管中要注意溫度、濕度變化，防止鳥類、鼠類和昆蟲的污染。盡量做到先進(jìn)先出。 成品儲存：要定期清掃存儲罐，產(chǎn)品變更時徹底清掃存儲罐，成品庫內(nèi)嚴(yán)格執(zhí)行先進(jìn)先出原則。注意存儲罐的溫、濕度，防止成品飼料霉變，防止野鼠、昆蟲及有毒物質(zhì)自引污染。分類堆放，標(biāo)志清楚，嚴(yán)防與原料混貯，保證標(biāo)準(zhǔn)貨物出庫登記。7/27/20

24、22473實驗動物的飼料管理 實驗動物飼料管理是指從飼料原料選擇、生產(chǎn)加工到成品以及生產(chǎn)過程中的蟲害、安全及衛(wèi)生管理的全過程。7/27/202248 二、實驗動物飼料的消毒 實驗動物的飼料在收獲、加工、儲存及運輸過程中都有污染病菌的可能，為確保實驗動物質(zhì)量和動物實驗的準(zhǔn)確性，我們要通過適當(dāng)?shù)南痉椒ㄊ蛊溥_(dá)到滅菌的目的。常用飼料消毒方法有干熱、濕熱、輻照及藥物熏蒸等多種，應(yīng)按飼養(yǎng)動物的不同要求和飼料種類以及所具備的條件來選擇。7/27/2022491干熱滅菌法 將飼料在80100的條件下烘烤。此法設(shè)備比較簡單，但溫度不好掌握，滅菌不夠徹底，而且營養(yǎng)損失較大。7/27/2022502高溫高壓滅菌法

25、 高溫高壓滅菌法是指將飼料在121，1.0kg/cm3的高溫高壓蒸鍋內(nèi)加熱15min以上，將細(xì)菌全部殺死。一般11530min、12l20min、12515min。絕大多數(shù)維生素。尤其是維生素C、維生素B1、維生素B6和維生素A等，過熱會受到破壞，而純化學(xué)性飼料比天然飼料更不穩(wěn)定。7/27/2022513藥物熏蒸滅菌法 熏蒸是利用化學(xué)藥品的氣霧劑對飼料進(jìn)行消毒。如用環(huán)氧乙烷進(jìn)行滅菌，熏蒸后必須在不低于20的自然空氣中將殘余氣體揮發(fā)。實驗證明，即使這樣處理，在飼料中仍然殘存一些對動物代謝有損害的化合物。7/27/2022524. 放射線照射滅菌法 通常在對谷物類飼料消毒時，采用5Mrad劑量的6

26、0Co照射對營養(yǎng)成分損失甚小。射線對維生素B1和維生素B6僅有微小破壞，通常采用的劑量為35Mrad。此法在滅菌效果和對營養(yǎng)素的破壞程度方面都優(yōu)于其他方法。但受條件所限，不便推廣。7/27/202253三、實驗動物飼料的檢測 飼料檢測是實驗動物飼料質(zhì)量管理必不可少的重要手段。飼料質(zhì)量變化不僅直接影響著實驗動物質(zhì)量，而且也間接影響實驗結(jié)果的可靠性。我國實驗動物飼料質(zhì)量應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)GBl4924-2001規(guī)定的根據(jù)實驗動物的不同種類、性別、年齡、體重和生理階段制定的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。7/27/2022541感觀性狀的檢驗 用手、眼、鼻等器官直接通過色澤、氣味、手感、雜質(zhì)情況等項指標(biāo)對飼料的新鮮程度、均勻

27、度、含水量等進(jìn)行直觀判斷。2營養(yǎng)成分的測定 按照國家實驗動物飼料營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的養(yǎng)分含量及分析方法，對產(chǎn)品的營養(yǎng)成分和混合均勻度等進(jìn)行檢測。527/27/202255第四節(jié) 環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測 嚴(yán)格監(jiān)控實驗動物生產(chǎn)環(huán)境和動物實驗環(huán)境，可保證實驗動物健康和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化，可保障實驗研究獲得正確的結(jié)果。合乎標(biāo)準(zhǔn)的環(huán)境，不僅為實驗動物及動物實驗工作者提供適宜的條件，維持實驗動物等級標(biāo)準(zhǔn)，而且是保障工作人員身體健康，使他們不受危害因素傷害的需要。7/27/202256一、噪聲測定1儀器 普通噪聲計、積分型噪聲計。2測定方法 分靜態(tài)和動態(tài)：靜態(tài)為在動物飼養(yǎng)前，所有系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)時檢測；動態(tài)為飼養(yǎng)動物后，在正常飼養(yǎng)條

28、件下檢測。 通常在潔凈室無人、無動物，空調(diào)凈化系統(tǒng)正常運行的情況下測定潔凈室的噪聲，測定點選擇在被測環(huán)境的中央，如房間大于15m2，可選擇兩個或兩個以上的測定點，距地面1m。7/27/202257二、照度測定1儀器 便攜式照度計。2測定方法 測定者需穿著黑色衣服，避免反射光影響測定結(jié)果。測定前開啟所有的照明設(shè)備，測定時以距墻壁1m以上、離地面85cm處的平面照明度為準(zhǔn)。每隔1.02.0m選擇一個測量點，每點測3次，取平均值，單位為lx。7/27/202258三、空氣落下細(xì)菌測定 空氣落下菌數(shù)測定應(yīng)在實驗動物設(shè)施經(jīng)消毒滅菌，空調(diào)凈化系統(tǒng)正常運行48h后進(jìn)行。1試劑 直徑9cm的血液瓊脂培養(yǎng)基。2

29、測定方法 在無動物的狀態(tài)下，每510m2放置一個直徑9cm的血液瓊脂培養(yǎng)基，敞開皿蓋暴露30min，蓋上皿蓋，置于37培養(yǎng)4872h后，計算培養(yǎng)皿內(nèi)菌落數(shù)。7/27/202259四、空氣潔凈度測定在動物飼養(yǎng)前，空調(diào)凈化系統(tǒng)運行48h后進(jìn)行。1、檢測儀器 塵埃粒子計數(shù)器。2、方法 亂流潔凈室面積不大于50m2的布置5個測點，每增加2050m2應(yīng)增加35個測點。每個測定點連續(xù)測定3次。測定時100級凈化室的采樣量每分鐘不少于1L，1000級以上的凈化室的采樣量每分鐘不小于0.3L。層流潔凈室取各測定點最大值；亂流潔凈室取潔凈室各測點的平均值作為實測結(jié)果。7/27/202260五、相鄰潔凈區(qū)靜壓差測

30、定1儀器 微壓計，最小刻度為1.0Pa。2測定方法 測定順序一般由低壓到高壓，測定前將需要測定壓差的兩個區(qū)域封閉，關(guān)閉所有的門。測定時將測定用的膠管穿過墻上或門上預(yù)留的孔洞進(jìn)入室內(nèi)(穿膠管的孔洞必須密封，設(shè)置在離墻面不遠(yuǎn)處垂直氣流的方向，且周圍無阻擋物、氣流干擾小的區(qū)域)。s17/27/202261六、氣流方向和速度測定1儀器 發(fā)煙管、熱球式電風(fēng)速儀或數(shù)字顯示式風(fēng)速儀。2測定方法 測定氣流方向一般用煙霧法，也可用紙條測定法。測定氣流速度，將風(fēng)速儀放置在有代表性的飼養(yǎng)實驗動物籠具的位置進(jìn)行測定。測量點設(shè)置可參照溫度測試點設(shè)置。測量時風(fēng)速計傳感器與風(fēng)向垂直，指針做周期性運動，要取其平均值。7/27

31、/202262七、換氣次數(shù)測定1儀器 熱球式電風(fēng)速儀或數(shù)字顯示式風(fēng)速儀。2測定方法 測量換氣次數(shù)，首先必須計算出換氣量。換氣量由送風(fēng)管道風(fēng)速求得。在一個以上進(jìn)氣口的房間，要將各進(jìn)氣口合并計算。7/27/202263八、溫度、濕度測定溫、濕度是日常管理中最基本也是最重要的環(huán)境檢測指標(biāo)之一，溫、濕度的檢測除了可觀察連接到空調(diào)設(shè)備上的自動溫、濕度控制儀，還應(yīng)在每個房間設(shè)置溫度、濕度計。常用的溫度計有棒狀溫度計、最高最低溫度計、熱敏電阻溫度計、數(shù)字型溫度計等。常用濕度計有干濕球溫度計、通風(fēng)干濕機(jī)溫度計、氯化鋰露點計及自動記錄溫、濕度計等。7/27/2022641儀器 棒狀溫度計、熱敏溫度計、簡易干濕球

32、溫度計和自動記錄溫度計等。2測定方法 實驗動物設(shè)施建成使用之前，應(yīng)對動物室內(nèi)環(huán)境進(jìn)行檢測。在測定溫度、濕度時，空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)連續(xù)運轉(zhuǎn)，并做多點檢測，如在外界空氣最冷和最熱時檢測最佳。測量點應(yīng)具有代表性，在距地面10，50，150，200cm高度水平設(shè)定間隔0.5，1m的很多格狀測點，依次測量，并將結(jié)果制成不同等高的溫度度數(shù)分布圖。7/27/202265 一般動物室常采用“田”字形、9點模式，即在入口、中央、內(nèi)側(cè)相當(dāng)于動物飼養(yǎng)高度的上、中、下三層設(shè)置三個格測定(50，100，150cm)。以潔凈室面積小于50m2為例，測定前空調(diào)系統(tǒng)連續(xù)運轉(zhuǎn)24h以上，測定時空調(diào)系統(tǒng)處于運轉(zhuǎn)狀態(tài)。7/27/202

33、266九、氨氣的測定 在設(shè)施正常運行，狀態(tài)，動物飼養(yǎng)密度符合設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)，墊料更換時符合時限要求下進(jìn)行。1便攜式氨氣檢測儀 7/27/20226735、功與失每個人都有一不的理想，這種理想決定著他的努力判斷的方向。就在這個意義上，我從來不把安逸和享樂看做是生活目的的本身這種基礎(chǔ)，我叫它豬欄的理想。照亮我的道路，并且不斷地給我新的勇氣去愉快地正視生活的理想，是善、美、真。愛因斯坦（美國）無論何時，不管怎樣，我也絕不允許自己有一點灰心喪氣。愛迪生（美國）對我來說，信念意味著不擔(dān)心。杜威（美國）希望貫穿一切，臨死也不會拋棄我們。波普（美國）希望永遠(yuǎn)在人的胸膛洶涌。人要經(jīng)常感覺不是現(xiàn)在幸福，而是就要幸福了

34、。波普（美國）毫無理想而又優(yōu)柔寡斷是一種可悲的心理。培根（英國敗的嶺，可以用這五個字來表達(dá)我沒有時間。富蘭克林（美國）馬云語：今天很殘酷，明天更殘酷，后天會很美好，但絕大多數(shù)人都死在明天晚上。 馬云語：今天很殘酷，明天更殘酷，后天會很美好，但絕大多數(shù)人都死在明天晚上。 想要有空余時間，就不要浪費時間。富蘭克林（美國）忽視當(dāng)前一剎那的人，等于虛擲了他所有的一切。富蘭克林（美國）時間不可空過，惟用之于有益的工作；一切無益的行動，應(yīng)該完全制止。富蘭克林（美國）如果說時間是最寶貴的東西，那么浪費時間就是最大的揮霍你熱愛生命嗎？那么別浪費時間，也別和不值得交往的人來往.陳帥佛語懶鬼起來吧！別再浪費時間，

35、將來在墳?zāi)箖?nèi)有足夠的時間讓你睡的。富蘭克林（美國）人生太短暫了，事情是這樣的多，能不兼程而進(jìn)嗎？愛迪生（美國）真正的敏捷是一件很有價值的事。因為時間是衡量事業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)，一如金錢是衡量貨物的標(biāo)準(zhǔn)；所在在做事我有兩個忠實的助手，企業(yè)在市場競爭中輸贏的關(guān)鍵在于其核心競爭力的強(qiáng)弱，而實現(xiàn)核心競爭力更新的惟一途徑就是創(chuàng)新。一項權(quán)威的調(diào)查顯示：與缺乏創(chuàng)新的企業(yè)相比，成功創(chuàng)新的企業(yè)能獲得20甚至更高的成長率；如果企業(yè)80的收入來自新產(chǎn)品開發(fā)并堅持下去，五年內(nèi)市值就能增加一倍；全球83的高級經(jīng)理人深信，自己企業(yè)今后的發(fā)展將更依賴創(chuàng)新。23、不創(chuàng)新，就滅亡福特公司創(chuàng)始人亨利?福特24、可持續(xù)競爭的惟一優(yōu)勢來自于超

36、過競爭對手的創(chuàng)新能力著名管理顧問詹姆斯?莫爾斯25、創(chuàng)新是做大公司的惟一之路管理大師杰弗里26、顧客是重要的創(chuàng)新來源管理學(xué)家湯姆?彼得斯27、創(chuàng)新是惟一的出路，淘汰自己，否則競爭將淘汰我們英特爾公司總裁安迪?格羅夫28、創(chuàng)造性模仿不是人云亦云，而是超越和再創(chuàng)造哈佛大學(xué)教授西奧多?萊維特29、創(chuàng)新就是創(chuàng)造一種資源管理大師彼得?杜拉克第五章管理就是溝通、溝通再溝通P69松下幸之助關(guān)于管理有句名言：“企業(yè)管理過去是溝通，現(xiàn)在是溝通，未來還是溝通?！惫芾黼x不開溝通，溝通已滲透于管理的各個方面。正如人體內(nèi)的血液循環(huán)一樣，如果沒有溝通的話，企業(yè)就會趨于死亡。30、管理就是溝通、溝通再溝通通用電器公司總裁杰克?韋爾奇31、溝通是管理的濃縮沃爾瑪公司總裁薩姆?沃爾頓32、管理者的最基本能力：有效溝通英國管理學(xué)家L?威爾德33、不善于傾聽不同的聲音，是管理者最大的疏忽美國女企業(yè)家瑪麗?凱34、企業(yè)管理過去是溝通，現(xiàn)在是溝通，未來還是溝通日本經(jīng)營之神松下幸之助第六章管理就是決策P81美國著名