結(jié)核分枝桿菌課件

1、病原生物學(xué)教研室Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University醫(yī)學(xué)微生物學(xué)Medical Microbiology第十三章 呼吸道感染細(xì)菌傳播途徑：呼吸道傳播 包括：結(jié)核分枝菌、白喉?xiàng)U菌、嗜肺軍團(tuán)菌、百日咳鮑特菌、流感嗜血桿菌及肺炎克雷伯菌等第一節(jié) 結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)一類細(xì)長彎曲的桿菌，因有分枝生長的趨勢而命名主要特點(diǎn)細(xì)長彎曲，分枝狀生長細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì)（分枝菌酸）常用抗酸染色鑒定，呈抗酸染色陽性引起疾病都呈慢性，并伴肉芽腫分類結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群非結(jié)核分枝桿菌麻風(fēng)分枝

2、桿菌分枝桿菌屬概述分類生長特性主要對(duì)人致病的分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群生長緩慢結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌組生長緩慢、光產(chǎn)色堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌組生長緩慢、暗產(chǎn)色瘰癘分枝桿菌組生長緩慢、不產(chǎn)色鳥-胞內(nèi)分枝桿菌組生長快速、偶發(fā)分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌人工培養(yǎng)基上不生長分枝桿菌的分類抗酸染色由于細(xì)菌細(xì)胞壁中含大量脂質(zhì)，一般不易著色，若經(jīng)加溫或延長染色時(shí)間而著色后又能抵抗強(qiáng)脫色劑鹽酸酒精的脫色，故又稱抗酸桿菌(acid-fast bacilli)抗酸染色法(acid-fast stain) ：以5石炭酸復(fù)紅加溫染色，再用3鹽酸酒精脫色，然后用美藍(lán)復(fù)染，則分枝桿菌呈紅色(+)，其他細(xì)菌和背

3、景物質(zhì)為藍(lán)色(-)。結(jié)核分枝桿菌俗稱結(jié)核桿菌，引起人類結(jié)核病致病菌主要為結(jié)核分枝桿菌（M. tuberculosis)、牛分枝桿菌(M. bovis)世界上1/3人感染，70%在亞洲世界防治結(jié)核病日：3月24日流行病學(xué)全球總疫情20億人口感染了結(jié)核菌，現(xiàn)癥結(jié)核病人2000萬，每年新發(fā)病人數(shù)8001000萬，每年300萬人死于結(jié)核病。我國疫情現(xiàn)有活動(dòng)性肺結(jié)核病人500萬人，傳染性肺結(jié)核病人200萬人，每年因結(jié)核病死亡25萬人。形態(tài)與染色細(xì)長略帶彎曲，分枝狀，無芽胞、鞭毛、和莢膜，抗酸染色陽性L型Much顆粒培養(yǎng)特點(diǎn)專性需氧生長緩慢營養(yǎng)要求高，常用羅氏培養(yǎng)基生長現(xiàn)象液體：表面生長（菌膜）固體：顆粒

4、、結(jié)節(jié)、花菜狀菌落，乳白或米黃，不透明生化反應(yīng)不發(fā)酵糖類觸酶試驗(yàn)陽性，而熱觸酶試驗(yàn)陰性抵抗力四不怕干燥酸（3% HCl或6% H2SO4) 或堿（4% NaOH) 有抵抗力堿性染料青霉素等抗生素四怕乙醇濕熱紫外線抗癆藥物（鏈霉素、異煙肼、利福平等）變異性形態(tài)結(jié)構(gòu)變異：結(jié)核桿菌的L型：顆粒狀、絲狀、Much顆粒毒力變異：卡介苗BCG：Calmette和Gurin將牛分枝桿菌經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒活疫苗株耐藥性變異：耐異煙肼及其他抗結(jié)核藥物的結(jié)核菌株日益增多致病物質(zhì)二、致病性脂質(zhì)索狀因子（破壞細(xì)胞，引起肉芽腫）磷脂（形成結(jié)核結(jié)節(jié)）硫酸腦苷脂（抑制吞噬體與溶酶體結(jié)合）蠟質(zhì)D（引起遲發(fā)性過敏

5、反應(yīng)）蛋白質(zhì)引起遲發(fā)性過敏反應(yīng)多糖所致疾病感染方式呼吸道、消化道或皮膚損傷侵入機(jī)體所致疾病結(jié)核病，以肺結(jié)核常見肺部感染原發(fā)感染：外源性感染多發(fā)生于兒童（無免疫力）原發(fā)綜合征 (原發(fā)病灶、淋巴管炎、肺門淋巴腫大等)形成結(jié)核結(jié)節(jié)（即結(jié)核肉芽腫），少數(shù)病灶擴(kuò)散，引起全身TB轉(zhuǎn)歸原發(fā)后感染：外或內(nèi)源性感染多見成人病灶局限 引起局部TB、開放性TB（反應(yīng)劇烈，干酪性壞死、空洞）吞噬細(xì)胞內(nèi)繁殖（滲出性炎癥）原發(fā)性感染原發(fā)性感染見于學(xué)齡兒童及未受過感染的成人。結(jié)核分枝桿菌 肺泡全身性粟粒性結(jié)核結(jié)核結(jié)節(jié) 淋巴結(jié)病灶逐漸纖維化和鈣化原發(fā)性綜合癥吞噬細(xì)胞肺外感染進(jìn)入血液循環(huán)引起肺內(nèi)、外播散，如腦、腎、腸、腹腔大多

6、與結(jié)核分枝桿菌L型有關(guān)三、免疫性機(jī)體抗結(jié)核免疫特點(diǎn)：傳染、免疫、超敏反應(yīng)共存免疫機(jī)制主要是以T細(xì)胞為主的細(xì)胞免疫屬于感染免疫(infection immunity)，又稱有菌免疫免疫與超敏反應(yīng)細(xì)胞免疫為主,遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時(shí)存在郭霍現(xiàn)象注射結(jié)核桿菌于豚鼠皮下初次注射 局部反應(yīng)小 全身擴(kuò)散 無免疫無超敏反應(yīng)再次注射 局部反應(yīng)大 不擴(kuò)散 有免疫有超敏反應(yīng)以前感染過或免疫豚鼠正常豚鼠24-48小時(shí)10-14天局部紅腫、淺潰瘍局部紅腫、潰瘍 不擴(kuò)散，脫落后自行愈合壞死，經(jīng)久不愈有毒TB菌全身擴(kuò)散皮下郭霍現(xiàn)象結(jié)核菌素試驗(yàn)（OT試驗(yàn)）是應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)來測定機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌是否能引起遲發(fā)型超敏反

7、應(yīng)（型變態(tài)反應(yīng)）的一種試驗(yàn)方法前臂皮內(nèi)注射PPD5單位意義4872h紅腫硬結(jié)超過5mm,陽性，有免疫力陰性，無免疫力（四種情況除外：1，2，3，4）應(yīng)用選擇卡介苗接種對(duì)象和測定卡介苗接種后的免疫效果。結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性者應(yīng)接種或補(bǔ)種卡介苗在未接種卡介苗的人群中作結(jié)核桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查,了解人群自然感染率作為嬰幼兒(尚未接種過卡介苗者)結(jié)核病的輔助診斷測定腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能四、微生物學(xué)檢查法 標(biāo)本處理：濃縮集菌(氫氧化鈉處理） 直接鏡檢：抗酸染色 分離培養(yǎng)：培養(yǎng)基、時(shí)間（24周后見結(jié)果） 動(dòng)物試驗(yàn)：豚鼠等 快速診斷：PCR等痰液等四、防治原則預(yù)防一般性預(yù)防：衛(wèi)生宣傳、提高機(jī)體抵抗力特異性預(yù)

8、防：發(fā)現(xiàn)和治療痰菌陽性者新生兒接種卡介苗治療一般治療：合理營養(yǎng)，注意休息抗結(jié)核藥物鏈霉素、異煙肼、利福平等治療原則：早期、聯(lián)合、適量、規(guī)律、分階段治療和堅(jiān)持全程第二節(jié) 非結(jié)核分枝桿菌(nontuberculosis mycobacteria)概念結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌對(duì)酸、堿比較敏感對(duì)常用的抗結(jié)核菌藥物較耐受生長溫度不如結(jié)核分枝桿菌嚴(yán)格多存在于環(huán)境中、為條件致病菌可引起結(jié)核樣病變而受到關(guān)注抗原與結(jié)核分枝桿菌有交叉特性分類第組：光產(chǎn)色菌堪薩斯分枝桿菌，引起人類肺結(jié)核樣病變第組：暗產(chǎn)色菌瘰癘分枝桿菌，引起兒童淋巴結(jié)炎第組：不產(chǎn)色菌鳥-胞內(nèi)分枝桿菌，可引起結(jié)核樣病變第組

9、：迅速生長菌恥垢分枝桿菌鑒別有否致病性可用抗煮沸試驗(yàn)加以區(qū)別L型第三節(jié) 麻風(fēng)分枝桿菌 (Mycobacterium.leprae) 俗稱麻風(fēng)桿菌，引起麻風(fēng)，是一種慢性傳染病流行廣泛，主要分布在亞、非和拉丁美洲生物學(xué)性狀形態(tài)、染色與結(jié)核分枝桿菌相似麻風(fēng)分枝桿菌是一種典型胞內(nèi)菌麻風(fēng)細(xì)胞體外人工培養(yǎng)至今仍未成功犰狳致病性與免疫性傳播方式呼吸道也可通過接觸傳染發(fā)病慢, 病程長麻風(fēng)的免疫主要是靠細(xì)胞免疫細(xì)菌主要侵犯神經(jīng)、皮膚微生物學(xué)檢查法顯微鏡檢查可從患者鼻粘膜或皮損處取材，用抗酸性染色后檢查一般瘤型和界線類患者標(biāo)本中可找到細(xì)菌在細(xì)胞內(nèi)存在，有診斷意義防治原則無特異性預(yù)防方法，隔離早發(fā)現(xiàn)，早治療目前多采

10、用二三種藥聯(lián)合治療第一節(jié) 白喉棒狀桿菌(Corynebacterium diphtheriae)概述革蘭陽性一端或兩端膨大呈棒狀，無莢膜、無鞭毛，不產(chǎn)生芽胞多為條件致病菌致病菌：白喉棒狀桿菌形態(tài)與染色菌體細(xì)長微彎，一端或兩端膨大呈棒狀,常排列呈V、L形Albert染色，可出現(xiàn)異染顆粒metachromatic granule，在鑒定時(shí)有重要意義一、 生物學(xué)性狀培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高呂氏血清斜面（含有凝固血清）上生長迅速，異染顆粒明顯選擇鑒別培養(yǎng)基亞碲酸鉀血平板(黑色菌落)抵抗力對(duì)濕熱抵抗力弱抗寒冷和干燥對(duì)青霉素、氯霉素、紅霉素敏感二、致病性致病物質(zhì)白喉外毒素：棒狀桿菌噬菌體帶有編碼外毒素的tox

11、基因,在溶原階段基因整合到染色體上即可產(chǎn)生A亞單位和B亞單位B亞單位有結(jié)合和轉(zhuǎn)位功能A亞單位上有1個(gè)催化區(qū)作用靶：心肌和神經(jīng)細(xì)胞作用機(jī)制A亞單位可使細(xì)胞延伸因子-2（EF-2）滅活，影響蛋白質(zhì)的合成。作用特點(diǎn)毒性作用大，1分子能殺一個(gè)細(xì)胞多種細(xì)胞，特別心肌、神經(jīng)細(xì)胞均有毒素受體腫瘤細(xì)胞對(duì)此毒素特別敏感所致疾病 白喉-急性呼吸道傳染病傳染源：患者及帶菌者傳播途徑：飛沫或污染臨床表現(xiàn)細(xì)菌-上呼吸道粘膜， 生長繁殖，產(chǎn)生毒素, 細(xì)菌與毒素共同作用引起局部癥狀：炎癥，壞死，纖維蛋白滲出 假膜窒息毒素入血引起全身中毒癥狀外周N-N炎：膈肌麻痹-呼吸困難 聲帶麻痹-聲音嘶啞 軟頜麻痹-吞咽困難心肌-心肌炎

12、 所致疾病-白喉白喉棒狀桿菌（鼻咽腔）飛沫 污染物品鼻 咽喉氣管局部細(xì)菌和毒素的作用灰白色假膜（滲出的纖維素和白細(xì)胞及壞死組織凝固在一起）粘膜水腫及假膜脫落，引起呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。外毒素入血毒血癥心肌肝腎上腺外周神經(jīng)內(nèi)臟出血心肌炎軟腭麻痹 聲嘶 腎上腺功能障礙（27d潛伏期）白喉假膜抗毒素免疫感染后機(jī)體可獲得牢固的免疫力機(jī)體還可通過其它方式獲得免疫力：六月以下嬰兒-母親成人-隱性感染、疫苗易感者15歲兒童成人-也有可能三、免疫性錫克試驗(yàn)(Schick test)原理：毒素抗毒素中和反應(yīng)方法：注射毒素（毒性、蛋白質(zhì)） 試驗(yàn) 加熱破壞的毒素（無毒、蛋白質(zhì)） 對(duì)照 結(jié)果：48小時(shí)觀察結(jié)果， 有紅腫 陽性反應(yīng) 無免疫力 無紅腫 陰性反應(yīng) 有免疫力應(yīng)用：檢查機(jī)體對(duì)白喉的免疫力 預(yù)防接種前的篩選與接種后效果觀察 流行病學(xué)調(diào)查Schick test結(jié)果分析 試驗(yàn)側(cè) 對(duì)照側(cè) 本質(zhì)陰性反應(yīng) 有免疫力陽性反應(yīng) 2448h 無免疫力 47d達(dá)峰假陽性反應(yīng) 618h紅腫 同前 有免疫力，超敏反應(yīng) 12d消退混合反應(yīng) 618h紅腫 618h紅腫 無免疫力，超敏反應(yīng) 47d達(dá)峰 34d反應(yīng)消退微生物學(xué)檢查法標(biāo)本直接涂片鏡檢形態(tài)，異染顆粒，分離培養(yǎng)-