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1、PAGE 23PAGE 第4課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞工程課標(biāo)要求1.闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織,分散成單個(gè)細(xì)胞后,在適宜的培養(yǎng)條件下讓細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的過程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。2.闡明動(dòng)物細(xì)胞核移植一般是將體細(xì)胞核移入一個(gè)去核的卵母細(xì)胞中,并使重組細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的過程。3.闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指通過物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段,使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。4.概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。5.簡(jiǎn)述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值??键c(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程概念辨析細(xì)胞貼壁和接觸抑制細(xì)胞貼壁是指體外
2、培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在瓶壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象;接觸抑制是指當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象。細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)對(duì)培養(yǎng)瓶的要求:培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。打破接觸抑制現(xiàn)象的方法是將貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。歸納總結(jié)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)理論基礎(chǔ)細(xì)胞增殖植物細(xì)胞的全能性培養(yǎng)前處理無菌;用機(jī)械的方法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理,使組織分散成單個(gè)細(xì)胞無菌、離體取材動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織植物幼嫩的部位或花藥等培養(yǎng)基性質(zhì)液體固體培養(yǎng)基成分糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等
3、水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素和瓊脂等結(jié)果細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)胞,不形成新個(gè)體可產(chǎn)生新個(gè)體應(yīng)用人造皮膚的構(gòu)建、動(dòng)物分泌蛋白的規(guī)?;a(chǎn)快速繁殖、作物脫毒、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)和單倍體育種等相同點(diǎn)都需人工條件下的無菌操作;都需要適宜的溫度、pH等條件;都進(jìn)行有絲分裂,都不涉及減數(shù)分裂3.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用種類胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源早期胚胎骨髓、臍帶血等體細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞等)特點(diǎn)能分化成任何一種細(xì)胞、組織或器官,甚至成為個(gè)體分化成特定的細(xì)胞或組織能誘導(dǎo)分化成類似胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞應(yīng)用分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元和造血干細(xì)胞等造血干細(xì)胞用于治療白血病,神經(jīng)干細(xì)胞用于治療帕金森病、阿爾茨
4、海默病等治療鐮狀細(xì)胞貧血、阿爾茨海默病、心血管疾病等(1)胚胎干細(xì)胞為什么可以解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題?其應(yīng)用有什么限制因素?提示通過胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化,可以培育出人造組織器官,從而解決供體器官不足問題,另一方面,由于是自身細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化形成的,所以無免疫排斥反應(yīng)。胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取,這涉及倫理問題,因而限制了應(yīng)用。(2)為什么科學(xué)家認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞?提示iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過程無需破壞胚胎,而且iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。(3)科學(xué)家已嘗試采用多種方法來制備iPS細(xì)胞,嘗試說出幾種獲取
5、iPS細(xì)胞的方法。提示借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的,后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞??枷蛞粍?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1(2021遼寧1月適應(yīng)性測(cè)試,15)為了初步檢測(cè)藥物X和Y的抗癌活性,在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞,使其貼壁生長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物X或Y,培養(yǎng)過程及結(jié)果如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清B可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)C對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無菌蒸餾水D根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
6、,可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好答案C解析實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物X或Y,故對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞砜(溶劑),C錯(cuò)誤;分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,添加藥物X的實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目最少,可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好,D正確。2實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()eq x(實(shí)驗(yàn)小鼠)eq o(,sup7(甲)eq x(皮膚組織)eq o(,sup7(乙)eq x(皮膚細(xì)胞)eq o(,sup7(丙)eq x(細(xì)胞培養(yǎng)1)eq o(,sup7(丁)eq x(細(xì)胞培養(yǎng)2)A甲過程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B乙過程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶處
7、理C丙過程是原代培養(yǎng)D丁過程直接將丙過程得到的細(xì)胞分瓶培養(yǎng)答案D解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無毒無菌的環(huán)境,甲過程是指從實(shí)驗(yàn)小鼠身上取下皮膚組織,該過程需要對(duì)小鼠進(jìn)行消毒處理,A項(xiàng)正確;乙過程表示將皮膚組織分散成單個(gè)細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理,B項(xiàng)正確;丁過程表示傳代培養(yǎng),需要再次用胰蛋白酶處理并離心收集,然后分瓶培養(yǎng),D項(xiàng)錯(cuò)誤??枷蚨杉?xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用3(2021遼寧1月適應(yīng)性測(cè)試,14)下列有關(guān)干細(xì)胞的敘述,錯(cuò)誤的是()A干細(xì)胞是具有分裂和分化能力的細(xì)胞B造血干細(xì)胞可定向誘導(dǎo)分化成機(jī)體所有種類的細(xì)胞C胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)能夠維持不分化的狀態(tài)D移植胚胎干細(xì)胞可使退化
8、的組織得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能答案B解析造血干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,其具有組織特異性,只能分化形成特定類型的細(xì)胞或組織,B錯(cuò)誤;胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上,或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中培養(yǎng),能夠維持不分化的狀態(tài),C正確;當(dāng)身體某一類細(xì)胞功能退化時(shí),可以通過誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞定向分化來及時(shí)修補(bǔ),并恢復(fù)正常功能,D正確。4胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取,但這涉及倫理問題,因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞,獲得了類似于胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱iPS細(xì)胞)。因?yàn)檎T導(dǎo)過程無須破壞胚胎,而且iPS細(xì)胞可來源于病人自身的體細(xì)胞,因此iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。如圖為iP
9、S細(xì)胞的獲得及用其培育不同種細(xì)胞的示意圖(cMyc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因與細(xì)胞的脫分化有關(guān))。回答下列問題:(1)在對(duì)成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),常用胰蛋白酶處理使之分散成單個(gè)細(xì)胞,這說明細(xì)胞間的物質(zhì)為_,_(填“能”或“不能”)用胃蛋白酶處理成纖維細(xì)胞,原因是_。(2)在培養(yǎng)iPS細(xì)胞的過程中,培養(yǎng)基中應(yīng)含有細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并定期更換培養(yǎng)液。定期更換培養(yǎng)液的目的是_。(3)過程為iPS細(xì)胞提供的條件不同,分化得到的細(xì)胞不同,可知細(xì)胞分化是_的結(jié)果。若iPS細(xì)胞來源于病人自身體細(xì)胞的誘導(dǎo),再將其分化出的細(xì)胞移入患者體內(nèi)的優(yōu)勢(shì)是_。(4)如果誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為原始生殖細(xì)
10、胞,該技術(shù)可能的應(yīng)用是_。答案(1)蛋白質(zhì)不能多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.27.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中失活變性(2)清除代謝物防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害(3)基因選擇性表達(dá)避免了免疫排斥問題(4)解決不育問題考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和單克隆抗體1動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)2單克隆抗體的制備(1)制備原理B淋巴細(xì)胞特點(diǎn):一種B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn):能在體外大量增殖。雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量增殖,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。(2)制備過程圖中給小鼠注射特定的抗原蛋白,其目的是什么?提示刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答,從而產(chǎn)生特定的B淋巴細(xì)胞。若僅考慮細(xì)胞的兩兩融合,在獲取雜交瘤細(xì)
11、胞的過程中,篩選淘汰的細(xì)胞有幾種類型?為什么?提示有未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞)兩種類型。出現(xiàn)不同類型是因?yàn)榧?xì)胞融合不是100%的,且是隨機(jī)的。單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導(dǎo)融合后會(huì)得到多種雜交細(xì)胞,另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激,所以經(jīng)選擇培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選:未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng),在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況
12、下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞延伸應(yīng)用第一次篩選獲得雜交瘤細(xì)胞的方法:細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑,但不能分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑,沒有S途徑,但能不斷分裂增殖。在培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤,B淋巴細(xì)胞及同型融合細(xì)胞不能增殖,骨髓瘤細(xì)胞及同型融合細(xì)胞氨基嘌呤阻斷不能增殖,只有雜交瘤細(xì)胞能無限增殖。2單克隆抗體的應(yīng)用(1)作為診斷試劑:在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用。(2)運(yùn)載藥物:抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能
13、特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成。ADC的抗體和藥物各具有什么作用?提示ADC的抗體和藥物具有的作用分別是導(dǎo)向和治療。除了細(xì)胞毒素,還有哪些物質(zhì)理論上可以作為ADC偶聯(lián)的藥物?提示放射性同位素和化學(xué)藥物等。ADC在臨床應(yīng)用上的作用機(jī)理是什么?提示其作用機(jī)理是通過單克隆抗體的靶向作用特異性地識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面抗原,然后利用細(xì)胞本身具備的內(nèi)吞作用使化學(xué)藥物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞體內(nèi)發(fā)生藥力,從而達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的。(3)治療疾病。歸納比較比較植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)
14、胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖融合前處理除去細(xì)胞壁使細(xì)胞分散開相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶誘導(dǎo)方法物理法:電融合法、離心法;化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2高pH融合法物理法:電融合法;化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)融合法;生物法:滅活病毒誘導(dǎo)法結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體意義突破遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,打破了生殖隔離,擴(kuò)展了雜交的親本組合相同點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法相似考向單克隆抗體5(2022黑龍江黑河市高三一模)人乳頭瘤病毒(HPV)是一種DNA病毒,可誘發(fā)細(xì)胞癌變
15、??笻PV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)出HPV,從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生。以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A在HAT培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖又可以分泌抗體B單克隆抗體的特點(diǎn)是靈敏度高、特異性強(qiáng),可以大量制備C可用HPV衣殼蛋白檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞D單克隆抗體制備過程涉及的生物學(xué)原理有細(xì)胞增殖和細(xì)胞膜的選擇透過性答案D解析單克隆抗體的制備過程主要運(yùn)用的細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合,原理依次是細(xì)胞的增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性,D項(xiàng)錯(cuò)誤。6下圖為單克隆抗體制備過程的示意圖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()AX細(xì)胞是從脾臟中提取的已
16、免疫的B淋巴細(xì)胞BY細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞,必須取用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞C圖中的過程至少需要篩選兩次且方法不同,最終保留抗體檢測(cè)呈陽性的細(xì)胞D圖中能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象答案B解析Y細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞,B錯(cuò)誤;圖中篩選過程至少兩次且方法不同,第一次篩選是選擇雜交瘤細(xì)胞,需要抑制同種細(xì)胞的融合體、以及未融合的細(xì)胞的增殖;第二次篩選是用抗體檢測(cè)的方法選擇能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,最終保留抗體檢測(cè)呈陽性的細(xì)胞,C正確;由于雜交瘤細(xì)胞即保留了骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的特點(diǎn),又有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的作用,所以圖中能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象,D正確???/p>
17、點(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)(1)概念分析供體:動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核。受體:去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞。結(jié)果:重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。原理:動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。(2)哺乳動(dòng)物核移植類型:胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。2體細(xì)胞核移植的過程(1)動(dòng)物核移植技術(shù)的理論基礎(chǔ)(原理)是什么?克隆動(dòng)物屬于有性生殖還是無性繁殖?提示動(dòng)物細(xì)胞核的全能性??寺?dòng)物屬于無性繁殖。(2)為什么體細(xì)胞核移植較胚胎細(xì)胞核移植更困難?提示由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,表現(xiàn)全能性相對(duì)容易;而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,表現(xiàn)全能性十分困難。因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度就明顯高于胚胎細(xì)胞核
18、移植。(3)受體細(xì)胞為什么選用卵母細(xì)胞?提示體積大,易操作;去核時(shí)易于同時(shí)吸走第一極體;含有激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì)。(4)為什么不是取供體細(xì)胞核進(jìn)行核移植操作,而是將供體細(xì)胞整個(gè)注入去核卵母細(xì)胞中?提示保證供核不被破壞,使克隆動(dòng)物更像供體動(dòng)物,操作也方便。(5)在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?提示為使核移植的胚胎或動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)全部來自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞,在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前,必須將受體細(xì)胞的核遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹?6)從多莉的產(chǎn)生過程可以看出多莉有三個(gè)親本,探究多莉的性狀表現(xiàn)與三個(gè)親本的關(guān)系并分析原因。提示大多數(shù)性狀
19、與母羊A(體細(xì)胞核供體)相同,因基因型與母羊A完全一樣。少數(shù)性狀與母羊B(卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體)相同,因細(xì)胞質(zhì)中的基因來自母羊B,受質(zhì)基因控制的性狀與母羊B相同。性狀與母羊C(代孕母體)無關(guān),因母羊C沒有為新個(gè)體提供遺傳物質(zhì)。源于選擇性必修3P54“相關(guān)信息”:目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性。2體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景和存在的問題前景畜牧業(yè)加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育醫(yī)藥衛(wèi)生作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白;轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織和器官可
20、以用于異種移植;人核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織、器官,可用于器官移植保護(hù)瀕危物種增加瀕危物種的存活數(shù)量問題成功率非常低;絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問題,表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷歸納總結(jié)細(xì)胞工程的各種技術(shù)手段及其原理總結(jié)考向動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物7(2022雞西模擬)2018年1月國(guó)際頂尖學(xué)術(shù)期刊Cell雜志報(bào)道,我國(guó)科學(xué)家以一只雌性獼猴胎兒成纖維細(xì)胞為核供體成功克隆兩只獼猴,成為全球首例體細(xì)胞克隆靈長(zhǎng)類動(dòng)物。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A這項(xiàng)技術(shù)證明高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞具有全能性B研究中需要使用成熟卵母細(xì)胞作為核移植的受體C培育出的兩只雌性獼猴的基因組成幾乎完全相同D克隆獼猴
21、的成功為大量培育靈長(zhǎng)類遺傳病模型動(dòng)物提供了可能答案A解析因?yàn)榭寺〉膬芍猾J猴是以一只雌性獼猴胎兒成纖維細(xì)胞為核供體發(fā)育而來的,該過程經(jīng)過了細(xì)胞核移植,只能說明分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性,A項(xiàng)錯(cuò)誤。8“中中”和“華華”是兩只在我國(guó)出生的克隆獼猴,它們也是國(guó)際上首例利用體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物。如圖表示培育“中中”和“華華”的流程。下列相關(guān)敘述正確的是()A圖示過程中利用的技術(shù)有核移植和干細(xì)胞移植技術(shù)等B這兩只克隆獼猴是由同一受精卵發(fā)育而成的雙胞胎C融合細(xì)胞的培養(yǎng)過程需要無菌、無毒的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)等條件D利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度更大些答案C解析圖示過程包括核移植和動(dòng)
22、物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù),沒有干細(xì)胞移植技術(shù),A錯(cuò)誤;這兩只克隆獼猴是通過核移植、胚胎移植產(chǎn)生的,沒有用到受精卵,B錯(cuò)誤。重溫高考真題演練1(2021山東,15)一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇,一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi),可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗,也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是()A注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大B單抗制備過程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗Dp72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失
23、效而多抗仍有效的情況答案D解析單抗的制作需要篩選,而多抗不需要篩選,抗原純度越高,產(chǎn)生的多抗純度越高,因此抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響小,A錯(cuò)誤;單抗制備過程中通常是免疫后將脾臟破碎,然后用離心法將脾臟細(xì)胞(包含各種產(chǎn)生或不產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞)和紅細(xì)胞分開,然后用脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,而不能直接分離出漿細(xì)胞,B錯(cuò)誤;非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多種抗原決定簇,一個(gè)抗決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,所以向小鼠體內(nèi)注入p72后,可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗p72的單抗,C錯(cuò)誤;p72部分結(jié)構(gòu)改變只改變了部分抗原決定簇,因此由這部分抗原決定簇產(chǎn)生的抗體失效,但由于還存在由其他抗原決定簇刺激
24、機(jī)體產(chǎn)生的抗體,所以多抗仍有效,D正確。2(2021湖南,22)M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)。現(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示。回答下列問題:(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中,切割質(zhì)粒DNA的工具酶是_,這類酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的_斷開。(2)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí),需要定期更換培養(yǎng)液,目的是_。(3)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比,體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低,原因是_。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞,在形態(tài)上表現(xiàn)為_(
25、答出兩點(diǎn)即可),功能上具有_。(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物:以免疫小鼠的_淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,篩選融合雜種細(xì)胞,制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路:_。答案(1)限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)磷酸二酯鍵(2)清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害,同時(shí)給細(xì)胞提供足夠的營(yíng)養(yǎng)(3)動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對(duì)容易,動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性十分困難細(xì)胞體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯發(fā)育的全能性(4)B取動(dòng)物A和克隆動(dòng)物A的肝組織細(xì)胞,分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原抗體雜交解析(4)先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng),之后從小鼠脾臟中
26、獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,制備M蛋白的單克隆抗體;若要利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活,如果M基因已經(jīng)失活,則克隆動(dòng)物A中無法產(chǎn)生M蛋白,則可利用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。故實(shí)驗(yàn)思路見答案。3(2020全國(guó),38)為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程?;卮鹣铝袉栴}:(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是_。(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟:_。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于_,使用該
27、培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是_。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是_。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采用的方法有_(答出2點(diǎn)即可)。答案(1)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞(2)取小鼠甲脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液(3)選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性(4)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖;將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)解析(1)利用小鼠甲制備單克隆抗體時(shí),先要給小鼠甲注射相應(yīng)的抗原,目的是獲得經(jīng)免疫的、能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)利用小鼠甲的脾臟制備單細(xì)胞懸液的主要步驟是取
28、小鼠甲的脾臟并剪碎;用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞;利用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。(3)為了得到所需要的雜交瘤細(xì)胞,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中要進(jìn)行篩選。第一次篩選(篩選1)是利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在選擇培養(yǎng)基上只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng),未融合的、同種細(xì)胞融合的細(xì)胞都不能存活。后續(xù)過程還需要利用抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性的原理進(jìn)行多次篩選(篩選2),目的是得到能產(chǎn)生所需要的抗體并能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞。(4)若要將得到的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng),可以在體外條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)或?qū)⑵渥⑸涞叫∈蟾骨粌?nèi)增殖。一、易錯(cuò)辨析1制備肝細(xì)胞懸液時(shí)先用剪刀剪碎肝組織,再用胃蛋白酶處理()2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),O2
29、是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH()3制備單克隆抗體時(shí),要選用已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞()4滅活的病毒能促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合,但不能促進(jìn)植物細(xì)胞融合()5克隆動(dòng)物都只具備一個(gè)親本的遺傳特性()6克隆動(dòng)物的制備屬于有性繁殖()二、填空默寫1(選擇性必修3 P44)細(xì)胞貼壁:細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上的現(xiàn)象。2(選擇性必修3 P44)接觸抑制:當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象。3(選擇性必修3 P44)細(xì)胞在培養(yǎng)過程中分裂受阻的原因:懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻;對(duì)于貼壁
30、細(xì)胞來說,除上述因素外,還會(huì)因?yàn)榻佑|抑制而停止分裂增殖。4(選擇性必修3 P49)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量繁殖,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。5(選擇性必修3 P50)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備。6(選擇性必修3 P54)核移植技術(shù)中必須先去掉受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的原因是保證核移植動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)全部來自供體細(xì)胞。7(選擇性必修3 P54)通過體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的克隆動(dòng)物,不是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制,原因是克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自供體細(xì)胞核,其核外還有少量的DNA,即線粒體中的DNA來自受體卵母細(xì)胞。此外,動(dòng)物的一
31、些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系。課時(shí)精練一、選擇題1(2022通州市高三一模)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是()A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與植物細(xì)胞培養(yǎng)不同B傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞C癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要添加抗生素以防止雜菌污染答案C解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要血清、血漿等,植物細(xì)胞培養(yǎng)需要蔗糖等,A項(xiàng)正確;傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶等處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,不然會(huì)因?yàn)榻佑|抑制而無法繼續(xù)分裂,B項(xiàng)正確;癌細(xì)胞膜表面的糖蛋白減少,細(xì)胞間信息交流受到限制,在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,C項(xiàng)錯(cuò)誤。2如圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞
32、由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長(zhǎng)。下列敘述不正確的是()A可用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)答案B解析動(dòng)物細(xì)胞融合可以用滅活的病毒、聚乙二醇(PEG)、電激等進(jìn)行誘導(dǎo),A正確;兩兩融合的細(xì)胞包括:免疫B細(xì)胞的融合細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞,由題干信息可知,骨髓瘤細(xì)胞在HAT篩選培養(yǎng)液中無法生長(zhǎng),因此骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中無法生長(zhǎng),B錯(cuò)誤;融合后產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞并不是都能表達(dá)產(chǎn)生所需的單克隆抗體,還需要進(jìn)一步篩
33、選才能用于生產(chǎn),C正確;動(dòng)物細(xì)胞融合依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,D正確。3干細(xì)胞具有能夠分裂、分化成為人體任何一種組織的潛能,被醫(yī)學(xué)界稱為“萬用細(xì)胞”。下列有關(guān)干細(xì)胞的敘述,錯(cuò)誤的是()A干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等B成體干細(xì)胞具有組織特異性C胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞均具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力D用正常人(異體)的造血干細(xì)胞治療白血病,白血病患者體內(nèi)會(huì)發(fā)生排斥反應(yīng)答案C解析胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能,成體干細(xì)胞只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力,C錯(cuò)誤。4(2022江蘇南通模擬)在利用細(xì)胞融合技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體的過程中,不需要考慮()AB淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞之間的
34、免疫排斥B注射特定抗原蛋白,對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行免疫C向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類和處理時(shí)間D選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞答案A解析制備單克隆抗體過程中,要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠注射特定的抗原,抗原進(jìn)入機(jī)體后刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)從而產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞,B項(xiàng)不符合題意;向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類和處理時(shí)間會(huì)影響細(xì)胞的融合,C項(xiàng)不符合題意;選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞需要考慮,否則會(huì)影響單克隆抗體的產(chǎn)量或得到單克隆抗體的特異性差,D項(xiàng)不符合題意。5科研人員在雜交瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)上,將兩種雜交瘤細(xì)胞融合獲得了雙雜交瘤細(xì)胞,能夠產(chǎn)生雙特異性抗體,該抗體可同時(shí)結(jié)合、兩種抗原。下列說法
35、錯(cuò)誤的是()A制備雙特異性抗體時(shí)需將抗原、分別注射到小鼠體內(nèi),獲得免疫小鼠的脾臟細(xì)胞B用解離液處理免疫小鼠的脾臟細(xì)胞獲得單細(xì)胞,再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合后可獲得兩種雜交瘤細(xì)胞C可用PEG試劑促進(jìn)兩種雜交瘤細(xì)胞的融合,成功融合后經(jīng)過篩選可獲得雙雜交瘤細(xì)胞D在腫瘤治療方面研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體,能特異性殺死腫瘤細(xì)胞答案B解析解離液能固定并殺死細(xì)胞,故不能用解離液處理;應(yīng)該用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,才能達(dá)到分散成單個(gè)細(xì)胞的目的,B錯(cuò)誤。6(2022太原模擬)腫瘤細(xì)胞表面抗原不能誘導(dǎo)強(qiáng)的免疫應(yīng)答,樹突狀細(xì)胞(DCs)與腫瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞保持了DCs和腫瘤細(xì)胞的特性,能高效地將腫
36、瘤抗原呈遞給免疫系統(tǒng),激發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答,同時(shí)還可以維持較長(zhǎng)時(shí)期的抗腫瘤免疫。這種方法在臨床應(yīng)用中有著非常誘人的前景。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同B融合細(xì)胞主要激活B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答C樹突狀細(xì)胞可在體內(nèi)起呈遞腫瘤抗原的作用D體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞需要在培養(yǎng)液中添加適量抗生素答案B解析動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合的基本原理都是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,A項(xiàng)正確;融合細(xì)胞主要激活T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答,B項(xiàng)錯(cuò)誤。7將細(xì)胞毒素類藥物與單克隆抗體結(jié)合形成抗體藥物偶聯(lián)物(ADC),可實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷,過程如下圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A體外培養(yǎng)單個(gè)已免疫B淋巴
37、細(xì)胞可持續(xù)大量獲得單克隆抗體BADC通過胞吞作用進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)CADC在溶酶體中被裂解后釋放出藥物D選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞利用了單克隆抗體特異性強(qiáng)的特點(diǎn)答案A解析體外培養(yǎng)單個(gè)已免疫B淋巴細(xì)胞不能持續(xù)大量獲得單克隆抗體,因?yàn)锽淋巴細(xì)胞沒有分裂能力,A項(xiàng)錯(cuò)誤;根據(jù)抗體能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特點(diǎn)可推測(cè),抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞是利用了單克隆抗體特異性強(qiáng)的特點(diǎn),D項(xiàng)正確。8中科院動(dòng)物所和福州大熊貓研究中心合作,通過將大熊貓的細(xì)胞核植入去核后的兔子卵母細(xì)胞中,在世界上最早克隆出一批大熊貓?jiān)缙谂咛ィ@表明我國(guó)的大熊貓人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有關(guān)敘述中錯(cuò)誤的是()A卵母細(xì)胞去核的方
38、法是顯微注射法,還可以用紫外光短時(shí)間照射等方法B兔子卵母細(xì)胞質(zhì)中有使大熊貓細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)C重構(gòu)胚需要用物理或化學(xué)方法激活,使之完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程D在大熊貓?jiān)缙谂咛サ男纬蛇^程中,囊胚期開始出現(xiàn)細(xì)胞的分化答案A解析卵母細(xì)胞去核的方法有顯微操作直接去除、紫外光短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等方法,A項(xiàng)錯(cuò)誤。9研究人員將猴胚胎細(xì)胞(a)中的細(xì)胞核取出,移植入一雌猴的去核卵母細(xì)胞(b)中,得到重構(gòu)胚(c),經(jīng)培養(yǎng)獲得胚胎并移植到另一雌猴(d)體內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育,獲得克隆猴(e)。下列敘述正確的是()Ae的細(xì)胞內(nèi)的全部基因都來自a,b不提供基因Bc經(jīng)一系列增殖和分化形成e的過程中,細(xì)胞核起控制作用Cd為
39、胚胎發(fā)育提供遺傳物質(zhì)和其他適宜條件De的形成過程中沒經(jīng)過受精作用,其體細(xì)胞中無同源染色體答案B解析根據(jù)題意可知,e的細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞核基因來自a,細(xì)胞質(zhì)基因來自b;遺傳物質(zhì)主要存在于細(xì)胞核中,c經(jīng)一系列增殖和分化形成e的過程中,細(xì)胞核起控制作用;d為胚胎發(fā)育提供適宜條件,但不提供遺傳物質(zhì);e的細(xì)胞核來源于a猴胚胎細(xì)胞,胚胎細(xì)胞含有同源染色體。10下圖是生產(chǎn)抗新冠病毒的單克隆抗體的過程,下列相關(guān)敘述正確的是()A過程融合的雜交瘤細(xì)胞只有一種B過程若進(jìn)行抗體檢測(cè)結(jié)果為陰性,應(yīng)重新實(shí)驗(yàn)C過程經(jīng)過選擇培養(yǎng)后只有自身融合的細(xì)胞死亡D為保證獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞,過程給小鼠注射大量的新冠病毒答案B解析生物體內(nèi)含
40、有多種抗原刺激產(chǎn)生形成的B淋巴細(xì)胞,故過程融合形成的雜交瘤細(xì)胞有多種,A項(xiàng)錯(cuò)誤;過程若進(jìn)行專一抗體檢測(cè)結(jié)果為陰性,說明沒有提取到相應(yīng)抗原刺激產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞,應(yīng)重新實(shí)驗(yàn),B項(xiàng)正確;過程經(jīng)過選擇培養(yǎng)后自身融合細(xì)胞和未融合的細(xì)胞都死亡,C項(xiàng)錯(cuò)誤;為保證獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞,過程應(yīng)給小鼠注射適量的新冠病毒的相應(yīng)抗原,D項(xiàng)錯(cuò)誤。11近年來,單倍體胚胎干細(xì)胞的研究發(fā)展迅速,下圖為建立孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞(AGhaESCs)的流程。獲得小鼠的AGhaESCs后,科研團(tuán)隊(duì)又將其細(xì)胞核移植到正常未受精的卵母細(xì)胞中,獲得半克隆小鼠,發(fā)現(xiàn)這些半克隆小鼠都是雌性。以下敘述正確的是()A與二倍體胚胎干細(xì)胞相比,對(duì)AG
41、haESCs進(jìn)行基因改造,更容易獲得理想表型B若囊胚細(xì)胞中某些基因表達(dá)錯(cuò)誤影響滋養(yǎng)層的功能,則會(huì)影響AGhaESCs的獲取C根據(jù)結(jié)果推測(cè)僅攜帶X染色體的AGhaESCs很可能發(fā)育異常,難以穩(wěn)定培養(yǎng)和擴(kuò)增D哺乳動(dòng)物的單倍體胚胎干細(xì)胞技術(shù)成熟后,在半克隆人的研究中有廣闊的前景答案A解析與二倍體胚胎干細(xì)胞相比,對(duì)AGhaESCs進(jìn)行基因改造,更容易獲得理想表型,因?yàn)锳GhaESCs只具有一套染色體,有利于研究一些未知的隱性表型基因突變,A項(xiàng)正確;滋養(yǎng)層將來發(fā)育成胎膜和胎盤,若囊胚細(xì)胞中某些基因表達(dá)錯(cuò)誤影響滋養(yǎng)層的功能,不會(huì)影響AGhaESCs的獲取,B項(xiàng)錯(cuò)誤;根據(jù)結(jié)果推測(cè)僅攜帶X染色體的AGhaES
42、Cs很可能發(fā)育正常,可以穩(wěn)定培養(yǎng)和擴(kuò)增,C項(xiàng)錯(cuò)誤;哺乳動(dòng)物的單倍體胚胎干細(xì)胞技術(shù)成熟后,在疾病的治療等方面有廣闊的前景,但法律規(guī)定禁止克隆人或半克隆人,D項(xiàng)錯(cuò)誤。12如圖表示我國(guó)體細(xì)胞克隆猴的培育過程,下列說法正確的是()A克隆小猴的遺傳物質(zhì)全部來自提供體細(xì)胞的胎猴B滅活的仙臺(tái)病毒短暫處理是為了誘導(dǎo)細(xì)胞融合C代孕母猴應(yīng)使用一定的激素進(jìn)行同期發(fā)情和超數(shù)排卵處理D克隆猴培育應(yīng)用了體外受精胚胎移植和胚胎分割技術(shù)答案B解析克隆小猴的細(xì)胞核由胎猴提供,細(xì)胞質(zhì)基因由提供卵母細(xì)胞的母猴提供,因此遺傳物質(zhì)大部分來自于提供體細(xì)胞的胎猴,A錯(cuò)誤;在實(shí)際操作中將胎猴的體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞時(shí)需要滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)兩
43、類細(xì)胞融合,B正確;代孕母猴作為胚胎的“受體”僅需使用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理,不需要超數(shù)排卵,C錯(cuò)誤;克隆猴培育過程屬于無性繁殖,沒有應(yīng)用體外受精技術(shù),D錯(cuò)誤。二、非選擇題13Graves病(GD)可導(dǎo)致甲狀腺功能亢進(jìn)。研究發(fā)現(xiàn),GD患者甲狀腺細(xì)胞表面表達(dá)大量細(xì)胞間黏附分子1(ICAM1),導(dǎo)致甲狀腺腫大??蒲腥藛T通過制備單克隆抗體,對(duì)治療GD進(jìn)行了嘗試。(1)用ICAM1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠,幾周后取這些免疫小鼠的血清,分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中,多孔培養(yǎng)板中需加入_以檢測(cè)這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果,選出抗原抗體反應(yīng)最_(填“強(qiáng)”或“弱”)的培養(yǎng)孔所對(duì)應(yīng)的小鼠M。(2)取小鼠M的
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