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文檔簡(jiǎn)介
1、第一章 組織學(xué)緒論本章內(nèi)容組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)的定義組織學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)普通光學(xué)顯微鏡技術(shù)HE染色 嗜酸性 嗜堿性電子顯微鏡技術(shù)細(xì)胞化學(xué)和組織化學(xué)技術(shù) PAS反應(yīng)組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)是研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的學(xué)科。顯微鏡下的風(fēng)景細(xì)胞組織器官系統(tǒng)組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容細(xì)胞:機(jī)體結(jié)構(gòu)與功能的基本單位。細(xì)胞膜 細(xì)胞質(zhì) 細(xì)胞核組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織:由形態(tài)相似、功能相關(guān)的細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)組成的群體結(jié)構(gòu)。細(xì)胞外基質(zhì)(細(xì)胞間質(zhì)):由細(xì)胞產(chǎn)生,構(gòu)成細(xì)胞生存的微環(huán)境支持、營(yíng)養(yǎng)、保護(hù)、聯(lián)系對(duì)細(xì)胞的增殖、分化、遷移和信息傳遞等行為也有著重要影響。四種基本
2、組織:上皮組織、結(jié)締組織、肌組織、神經(jīng)組織組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容器官:各種組織按一定方式組合構(gòu)成器官。中空性器官:中央有大的空腔心、胃、膀胱、子宮等實(shí)質(zhì)性器官:中央沒有大的空腔肝、脾、肺、腎等組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容系統(tǒng):由一些結(jié)構(gòu)連續(xù)、功能相關(guān)的器官組合而成,完成連續(xù)的生理活動(dòng)。組織學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位組織學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位在醫(yī)學(xué)中的地位:重要的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程為其他的基礎(chǔ)和臨床學(xué)科打下必備的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)微觀宏觀:組織學(xué)解剖學(xué)正常異常:組織學(xué)病理學(xué)組織學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位胃(解剖學(xué))胃(組織學(xué))組織學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位正常肝臟(組織學(xué))肝硬化(病理學(xué))組織學(xué)的研究
3、方法和常用技術(shù)組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)光學(xué)顯微鏡技術(shù)光鏡結(jié)構(gòu)電子顯微鏡技術(shù)電鏡結(jié)構(gòu)(超微結(jié)構(gòu))組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù):PAS反應(yīng)組織培養(yǎng)和組織工程原位雜交術(shù)(略)放射自顯影術(shù)(略)組織細(xì)胞定量術(shù)(略)微細(xì)結(jié)構(gòu)組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)(LM)普通光學(xué)顯微鏡技術(shù) 放大倍數(shù)=目鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù),可達(dá)1500倍左右 分辨率:0.2m組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)普通光鏡組織切片標(biāo)本的制備方法:最常用:石蠟切片取材與固定脫水、透明與包埋切片與染色封固組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)最常用的染色方法:HE染色(HE staining):即蘇木精-伊紅染色法,蘇木精(hematoxylin
4、)染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的核糖體染成藍(lán)紫色;伊紅(eosin)為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)組織結(jié)構(gòu)的嗜色性嗜酸性:與酸性染料親和性強(qiáng),可被伊紅染成粉紅色的組織特性嗜堿性:與堿性染料親和性強(qiáng),可被蘇木素染成藍(lán)紫色的組織特性中性:與酸性、堿性兩種染料親和性都不強(qiáng)的組織特性,在HE染色中著色淡組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)其他染色方法:鍍銀染色:用硝酸銀染色時(shí),有些組織結(jié)構(gòu)可直接使陰離子還原為銀顆粒而呈棕黑色,稱為親銀性;有些組織成分,需加還原劑方能顯色,稱為嗜銀性。組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)嗜鉻性:有的細(xì)胞經(jīng)重鉻酸鹽處理后,呈棕褐色
5、異染性:肥大細(xì)胞中的顆粒經(jīng)甲苯胺藍(lán)等藍(lán)色染料染色后,呈紫紅色組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)切其他切片技術(shù):火棉膠包埋:用于制作較大結(jié)構(gòu)的切片,如眼球冰凍切片:可更好的保存細(xì)胞內(nèi)的酶活性和脂類物質(zhì)涂片:血液、精液鋪片:用于制作薄層組織的切片,如腸系膜磨片:用于制作堅(jiān)硬組織的切片,如骨、牙組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)平滑肌細(xì)胞 HE染色組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)特殊光學(xué)顯微鏡技術(shù):熒光顯微鏡:用于觀察組織、細(xì)胞中有自發(fā)熒光、誘發(fā)熒光或經(jīng)熒光染料染色或標(biāo)記的結(jié)構(gòu)。組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)相差顯微鏡:觀察生活細(xì)胞和未經(jīng)染色細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)暗視野顯微鏡:觀察反差太小或分辨力不足的微小
6、顆粒偏光顯微鏡:鑒定微細(xì)結(jié)構(gòu)的光學(xué)性質(zhì)激光共聚焦掃描顯微鏡:高光敏度、高分辨率,可以更精確的檢測(cè)組織或細(xì)胞內(nèi)的微細(xì)結(jié)構(gòu)及其變化運(yùn)動(dòng)終板(免疫雙標(biāo))組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)二、電子顯微鏡技術(shù)(EM)透射電鏡術(shù)(TEM)內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡術(shù)(SEM)表面立體結(jié)構(gòu)分析電鏡(了解)冷凍蝕刻(了解)電鏡結(jié)構(gòu)常稱為超微結(jié)構(gòu)組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)透射電鏡術(shù)(TEM)分辨率為0.2nm,放大倍數(shù)為幾萬幾十萬倍原理:應(yīng)用電子束穿透標(biāo)本經(jīng)過聚焦與放大后成像,投射到熒光屏上進(jìn)行觀察。電子密度高:電子束投射到密度大的樣品時(shí),電子被散射的多,則透射到熒光屏上的電子少而呈暗像電子密度低:電子束投射到密度小的樣品時(shí),電
7、子被散射的少,則透射到熒光屏上的電子多而呈亮像組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)透射電鏡術(shù)(TEM)電子密度低電子密度高組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)掃描電鏡術(shù)(SEM)組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)三、細(xì)胞化學(xué)和組織化學(xué)技術(shù)一般組織化學(xué):應(yīng)用化學(xué)反應(yīng)原理,在組織切片上加相應(yīng)試劑,使發(fā)生反應(yīng)成為有色沉淀物,用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的糖類、酶類、脂類、核酸等過碘酸-希夫反應(yīng)(PAS反應(yīng)):用于顯示細(xì)胞、組織內(nèi)的多糖和蛋白多糖。免疫組織化學(xué)組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)PAS反應(yīng):原理:糖被過碘酸(HIO4)強(qiáng)氧化劑氧化后,形成二醛基;后者與Schiff試劑中的無色亞硫酸品紅結(jié)合,生成紫紅色沉淀,稱PAS反應(yīng)陽性。PAS反應(yīng)陽性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在。PAS陽性(小腸上皮)組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)免疫組織化學(xué):根據(jù)免疫學(xué)原理,應(yīng)用帶有可見標(biāo)記的特異性抗原-抗體反應(yīng),檢測(cè)組織、細(xì)胞中多肽和蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的一種技術(shù)。常用標(biāo)記物:辣根過氧化物酶、熒光素、膠體金組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)免疫組織化學(xué)(辣根過氧化物酶標(biāo)記) 顯示胰島B細(xì)胞組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)免疫組織化學(xué) 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(熒光素標(biāo)記)免疫熒光:豚鼠胚胎組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù)三、組織培養(yǎng)和組織工程組織工程耳DON
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