血小板免疫和血小板輸注無(wú)效GianPaoloVisentin

1、血小板免疫和血小板輸注無(wú)效GianPaoloVisentin人類血小板血小板濃縮液血小板血小板與炎癥出現(xiàn)炎癥反應(yīng)后，儲(chǔ)存的血小板活化，激活免疫和非免疫細(xì)胞，傳遞炎癥信息，進(jìn)步活化血小板。血小板免疫失調(diào)藥物誘發(fā)的血小板減少癥-DITP自身免疫引起的血小板減少癥-ITP,AITP新生兒同種免疫血小板減少癥-NATP HLA 和HPA輸血后紫癜-PTP血小板輸注無(wú)效 HLA和HPA粒細(xì)胞抗體-TRALI HNA血小板免疫失調(diào)藥物誘發(fā)的血小板減少癥-DITP自身免疫引起的血小板減少癥-ITP,AITP新生兒同種免疫血小板減少癥-NATP HLA 和HPA輸血后紫癜-PTP血小板輸注無(wú)效 HLA和HPA

2、DTIP的病原學(xué)機(jī)制免疫復(fù)合體藥物和PF4反應(yīng)，與肝素形成免 疫 復(fù)合體，引發(fā)一系列免疫反應(yīng)， 結(jié)合Fc受體激活血小板。肝素誘發(fā)的血小板減少癥（HIT)HIT伴有或不伴有血栓，發(fā)病率和死亡率都很高抗體相關(guān)的HIT與肝素和PF4復(fù)合體相關(guān)抗體相關(guān)的HIT在肝素存在的情況下可以誘導(dǎo)血小板活化HIT病原學(xué)機(jī)制肝素依賴抗體的檢測(cè)聚合血小板14C-胺釋放試驗(yàn)（SRA)肝素介導(dǎo)血小板凝集反應(yīng)肝素/PF4 ELISA流式細(xì)胞檢測(cè)DITP試驗(yàn)藥物加樣，孵育洗板，除去未結(jié)合和Ig與抗-人Ig，孵育陽(yáng)性= 血小板結(jié)合藥物 Ig 無(wú)結(jié)合血小板血清血小板免疫失調(diào)藥物誘發(fā)的血小板減少癥-DITP自身免疫引起的血小板減少

3、癥-ITP,AITP新生兒同種免疫血小板減少癥-NATP HLA 和HPA輸血后紫癜-PTP血小板輸注無(wú)效 HLA和HPA粒細(xì)胞抗體-TRALI HNA血小板同種抗原（HPA）血小板膜糖蛋白具有多態(tài)性蛋白的構(gòu)象改變，對(duì)功能沒(méi)有影響，但是在血小板輸注和懷孕時(shí)，這些改變可能成為抗體的結(jié)合點(diǎn)同種免疫反應(yīng)有時(shí)很嚴(yán)重血小板表面GP糖蛋白的多態(tài)性HPA相關(guān)的免疫性血小板減少HPA系統(tǒng)HPA系統(tǒng)HPA系統(tǒng)HPA 等位基因頻率人類GP III基因早期變異血小板免疫失調(diào)藥物誘發(fā)的血小板減少癥-DITP自身免疫引起的血小板減少癥-ITP,AITP新生兒同種免疫血小板減少癥-NATP HLA 和HPA輸血后紫癜-P

4、TP血小板輸注無(wú)效 HLA和HPA粒細(xì)胞抗體-TRALI HNA嚴(yán)重的NATPNATP的病因?qū)WHPA基因多態(tài)性頻率表CD36（GPIV)糖蛋白88KD在單核細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞，有核紅細(xì)胞，脂肪細(xì)胞和血小板上有表達(dá)受體: I&IV型膠原，瘧疾感染紅細(xì)胞，血小板反應(yīng)素，氧化LDL，長(zhǎng)鏈脂肪酸同種抗原NaKa-1989CD36缺乏血小板：亞洲人：3-11%美國(guó)-非洲人：2.5%沙哈拉非洲人：7.8%高加索人種：0.06%第一類：血小板和單核細(xì)胞缺失，導(dǎo)致輸血或懷孕產(chǎn)生抗CD36的反應(yīng)第二類：僅僅是血小板缺失CD36基因32kb,15外顯子染色體：日本:CD36缺失出現(xiàn)4個(gè)變異 T478C 在外顯子4

5、上的變異最常見(jiàn) Pro90Ser, 81Kb阻止變異非洲:CD36缺失出現(xiàn)7個(gè)變異 T1264G在外顯子10變異最常見(jiàn) 終止密碼子NATP的診斷常用診斷NATP的方法比較單克隆ACE 28/32免疫熒光 21/32（主要是流式細(xì)胞技術(shù)）GTI 或其它公司ELISA 14/32全部基因型 12部分基因型 5很多實(shí)驗(yàn)室聯(lián)合應(yīng)用多種方法血小板抗體ELISA檢測(cè)流式細(xì)胞儀（免疫熒光）流式細(xì)胞儀的應(yīng)用流體學(xué)原理FC放散光路FC分離細(xì)胞群熒光柱狀圖血小板多態(tài)性Luminex 100/200 磁珠法檢測(cè)Luminex檢測(cè)血清和磁珠孵育洗滌抗-人IgG孵育調(diào)整體積收集數(shù)據(jù)分析數(shù)據(jù)商品化的血小板抗體檢測(cè)試劑GT

6、I:PAK-PlusTM, PAK-AutoTM, PAK-LX, MACE-1TM, PF4-enhancedIMMUCOR: Capture -PTM, MCPTM, Capture-P Ready Screen TMSTAGO: HITTMDiaMed: ID-HATBiotest: Thrombomatch HPA-1a Typing HPA-1a Typing血小板抗原基因型檢測(cè)PCR-SSPReal-time PCR檢測(cè)基因型血小板免疫失調(diào)藥物誘發(fā)的血小板減少癥-DITP自身免疫引起的血小板減少癥-ITP,AITP新生兒同種免疫血小板減少癥-NATP HLA 和HPA輸血后紫癜-P

7、TP血小板輸注無(wú)效 HLA和HPA粒細(xì)胞抗體-TRALI HNA血小板輸注無(wú)效診斷血小板配型HLA-AB相合提供無(wú)相關(guān)HLA-抗體的血小板如果無(wú)相合的血小板，可以提供血清學(xué)配型陰性的血小板輸注HLA-C是否相合，影響不大一些HLA-B抗云不相合（HLA-B45,44)在血小板上表達(dá)弱，可以不予考慮如果血清學(xué)配型的血小板輸注無(wú)效，應(yīng)尋找HLA相合的供者ABO血型在血小板上表達(dá)，ABO同型輸注十分重要血小板形態(tài)血小板同種抗體HLA的分子結(jié)構(gòu)導(dǎo)致抗體產(chǎn)生不同同種免疫反應(yīng)有不可預(yù)知性由于HLA抗原的多態(tài)性（CREGs),同一種HLA分子可以產(chǎn)生多種抗體，HLA抗體檢測(cè)方法補(bǔ)體依賴 固相檢測(cè) CDC -

8、ELISA -流式PRA AHG-CDC -Luminex 檢測(cè) - 敏感度低 -敏感度高-補(bǔ)體依賴的抗體 -補(bǔ)體依賴、不依賴抗體均可HLA抗體檢測(cè)方法比較敏感度通量自動(dòng)化費(fèi)用/樣本配置設(shè)備AHG-CDC低低不低顯微鏡ELISA中-低高是12美金讀板機(jī)Flow-PRA高中-高是？30美金細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（3色）Luminex高高是10美金Luminex相對(duì)敏感度的比較Flow ELISA AHG-Augmented CDC CDCFlow ELISA AHG-Augmented CDC CDC流式細(xì)胞儀檢測(cè)敏感不需要補(bǔ)體IgG特異性HLA抗原特異性流式-PRA32種不同的磁珠包被HLA-I和II類抗

9、原判斷主觀HLA特異性需進(jìn)一步檢測(cè)什么是PRA？群體反應(yīng)性抗體檢測(cè)抗體檢測(cè)是通過(guò)HLA特異性細(xì)胞完成器官移植，用來(lái)判斷抗HLA的程度抗原的范圍不確定，一般是常見(jiàn)的抗原流式方法檢測(cè)PRA流式方法檢測(cè)PRA輸血后HLA-I抗體的表達(dá)Luminex方法檢測(cè)HLA抗體高通量多元化檢測(cè)敏感、準(zhǔn)確，可以判定HLA抗體的特異性反應(yīng)易觀察雙色，100個(gè)磁珠判定準(zhǔn)確結(jié)果Luminex方法的抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)13種不同的Luminex磁珠分別代表HLA-I,II抗原每個(gè)磁珠包被6種HLA-I細(xì)胞和8種HLA-II細(xì)胞Luminex檢測(cè)系統(tǒng)Luminex抗體檢測(cè)REAL血小板免疫失調(diào)藥物誘發(fā)的血小板減少癥-DITP自身免

10、疫引起的血小板減少癥-ITP,AITP新生兒同種免疫血小板減少癥-NATP HLA 和HPA輸血后紫癜-PTP血小板輸注無(wú)效 HLA和HPA粒細(xì)胞抗體-TRALI HNA輸血相關(guān)急性肺損傷TRALI定義：急性肺損傷（ALI)發(fā)生在輸血后6h以內(nèi)，并且以前無(wú)急性肺損傷病史，無(wú)其它相關(guān)的急性肺損傷的危險(xiǎn)因素?？赡躎RALI：ALI發(fā)生在輸血后6h以內(nèi)，以前無(wú)急性肺損傷病史，存在一個(gè)以上相關(guān)的急性肺損傷的危險(xiǎn)因素ALI定義：SpO2 90% or Pa02/Fi02 300 mm Hg血氧偏低X線有滲出性病變輸血相關(guān)急性肺損傷急性肺損傷的危險(xiǎn)因素直接肺損傷 間接肺損傷呼吸 膿毒癥肺 休克吸入性中毒 外傷肺挫傷 燒傷溺水 急性胰腺炎 心肺搭橋 藥物中毒不同血液制品TRALI的發(fā)生率TRALI反應(yīng)模式圖人粒細(xì)胞抗原系統(tǒng)（HNA）人粒細(xì)胞抗原系統(tǒng)（HNA）粒細(xì)胞特異性抗體的臨床應(yīng)用非溶血性發(fā)熱反應(yīng)TRALI新生兒粒細(xì)胞減少癥自身免疫性粒細(xì)胞減少癥骨髓移植后持續(xù)性粒細(xì)胞減少下一步HLAHPA供者庫(kù)的建立人有了