微生物教學(xué)課件實(shí)驗(yàn)1本科實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌形態(tài)學(xué)

1、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一 細(xì)菌形態(tài)學(xué)第1頁，共39頁。本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則二、細(xì)菌的基本形態(tài)和特殊 結(jié)構(gòu)的觀察三、革蘭染色法四、油鏡的使用第2頁，共39頁。 （一）實(shí)驗(yàn)前要做好實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)，進(jìn)實(shí)驗(yàn)室只帶必要的文具、講義，并穿工作服。 （二）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)保持清潔、安靜，實(shí)驗(yàn)時(shí)要認(rèn)真嚴(yán)肅，禁止抽煙、飲食和開玩笑。一、實(shí) 驗(yàn) 室 規(guī) 則第3頁，共39頁。 （三）愛護(hù)實(shí)驗(yàn)器材，注意節(jié)約實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何物品不得帶出室外。 （四）注意安全，若帶菌材料污染桌面、地板、書籍和衣物或誤吸入口，應(yīng)立即報(bào)告教師進(jìn)行處理。第4頁，共39頁。 （五）實(shí)驗(yàn)中待培養(yǎng)的材料應(yīng)放在培養(yǎng)區(qū)；實(shí)驗(yàn)用過的帶菌材料如吸管、玻片等應(yīng)放在

2、消毒缸、消毒箱等消毒區(qū)，不得放在桌上或沖洗于水槽內(nèi)。第5頁，共39頁。 （六）實(shí)驗(yàn)完畢，桌面應(yīng)整理清潔 ，洗手后方可離室。值日同學(xué)負(fù)責(zé)濕性打掃實(shí)驗(yàn)室，并關(guān)好水、電、門窗。 第6頁，共39頁。 細(xì)菌的基本形態(tài)可分為球菌、桿菌、螺形菌（包括弧菌）三類。 二、細(xì)菌基本形態(tài)的觀察第7頁，共39頁。1球菌： 如葡萄球菌經(jīng)結(jié)晶紫染色后為球狀，常堆集成葡萄串狀，呈紫色。 第8頁，共39頁。金黃色葡萄球菌血涂片第9頁，共39頁。葡 萄 球 菌第10頁，共39頁。肺炎球菌第11頁，共39頁。肺 炎 球 菌第12頁，共39頁。鏈 球 菌第13頁，共39頁。鏈 球 菌第14頁，共39頁。2桿菌： 如大腸桿菌經(jīng)番紅染

3、色后呈淡紅色桿狀，兩端鈍圓，散在排列。第15頁，共39頁。大 腸 桿 菌第16頁，共39頁。 3螺形菌： 如霍亂弧菌經(jīng)稀釋復(fù)紅液染色后呈紅色弧形，菌體微彎，如逗點(diǎn)狀，或呈眉毛狀，散在排列。幽門螺桿菌呈螺旋狀、U狀、S狀及海鷗展翅狀。第17頁，共39頁。幽門螺桿菌第18頁，共39頁。 三、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)： 1、鞭毛 2、莢膜 3、芽胞 4、菌毛 第19頁，共39頁。鞭 毛Flagellum化學(xué)組成：功能：鞭毛蛋白運(yùn)動(dòng)器官與致病有關(guān)鑒定分類細(xì)菌第20頁，共39頁。變形桿菌（鞭毛）第21頁，共39頁。莢 膜化學(xué)組成：功能：Capsule多糖或多肽抗吞噬作用粘附作用抗有害物質(zhì)損傷作用第22頁，共39頁

4、。芽 胞功能與醫(yī)學(xué)上意義：Spore對(duì)外界的抵抗力增加可發(fā)芽成繁殖體有致病性有鑒別作用應(yīng)以殺死芽胞為滅菌效果的指標(biāo)第23頁，共39頁。 四、革蘭染色（一）細(xì)菌涂片的制作（二）染色： 單染色法 革蘭染色法 抗酸染色法 復(fù)染色法第24頁，共39頁。（一）細(xì)菌涂片標(biāo)本的制作 1涂片： 取清潔無油載玻片一張，將接種環(huán)用火焰燒紅滅菌，待冷后取一環(huán)菌液輕輕涂抹在玻片上，制成直徑約1cm大小薄層，然后將接種環(huán)滅菌。 第25頁，共39頁。2干燥： 涂片置室溫自然干燥，必要時(shí)可將標(biāo)本面朝上，放在離火焰較高處微微烘干，但切勿在火焰上直烤。第26頁，共39頁。3固定： 標(biāo)本面朝上，用鐘擺樣速度來回通過火焰三次。第2

5、7頁，共39頁。（二）革蘭染色法步驟 1初染：在上述已固定的涂片 上，滴加結(jié)晶紫染液，染色1分鐘，水洗。 2媒染：滴加革蘭碘液，作用13分鐘，水洗。 第28頁，共39頁。 3脫色：滴加 95酒精，并頻頻搖動(dòng)玻片，至無紫色脫出為止（約20秒），水洗。 4復(fù)染：加番紅染液，復(fù)染半分鐘，水洗，用吸水紙印干后，油鏡檢查。第29頁，共39頁。1 初染: 結(jié)晶紫染色液, 1分鐘 媒染: 革蘭碘液, 1分鐘 脫色: 95%酒精, 15-20秒 復(fù)染: 番紅染色液, 30秒涂片-干燥-固定第30頁，共39頁。（二）革蘭染色法步驟第31頁，共39頁。（三）革蘭染色法 1、結(jié)果觀察： 革蘭陽性菌-蘭紫色 革蘭陰性

6、菌-紅色 2、原理 3、意義第32頁，共39頁。五、油鏡的使用(一)油鏡頭的識(shí)別 顯微鏡的接物鏡有低倍鏡頭，高倍鏡頭和油鏡頭，其中油鏡頭的放大倍數(shù)最大。 油鏡頭的下緣，標(biāo)有油 100、oel、oil等字樣。 第33頁，共39頁。(二）油鏡的原理： 滴鏡油后可以增加油鏡視野的亮度。 第34頁，共39頁。（三）鏡檢要領(lǐng) 把載玻片固定于載物臺(tái)上，使油鏡頭對(duì)準(zhǔn)鏡筒。于載玻片上滴一小滴液體石蠟，眼睛從鏡筒側(cè)面看，旋轉(zhuǎn)粗調(diào)節(jié)器，使鏡筒下降浸入鏡油并貼近標(biāo)本，但勿觸及玻片。 第35頁，共39頁。 鏡檢完畢后，把鏡筒升高，用擦鏡紙把油鏡頭上的鏡油擦凈。 （四）油鏡的保護(hù)辦法第36頁，共39頁。作業(yè)：畫圖 1、混合細(xì)菌革蘭染色結(jié)果。 （標(biāo)題：實(shí)驗(yàn)一、細(xì)菌形態(tài)學(xué) 標(biāo)注：細(xì)菌名稱、染色法、放大倍數(shù)）第37頁，共39頁。作業(yè)：畫圖 1、混合細(xì)菌革蘭染色結(jié)果。 2、細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)示教片之一。 （標(biāo)題：實(shí)驗(yàn)一、細(xì)菌形態(tài)學(xué) 標(biāo)注：細(xì)菌名稱、染色法、放大倍數(shù)）第38頁，共39頁。