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1、實(shí)驗(yàn)五 植物染色體組型分析一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握染色體組型分析的各種數(shù)據(jù)指標(biāo) 掌握植物染色體核型分析的標(biāo)準(zhǔn)和方法。1二、實(shí)驗(yàn)原理核型或染色體組型分析 (karyotype analysis) 是染色體研究中對(duì)染色體的各種特征進(jìn)行定量和定性表述的一種基本方法, 表述的內(nèi)容主要有: 染色體數(shù)目和染色體形態(tài) , 包括染色基數(shù)、B-染色體,性染色體,染色體絕對(duì)長(zhǎng)度, 相對(duì)長(zhǎng)度值, 著絲粒, 次縊痕以及隨體數(shù)目和著絲粒位置等特征。 這些對(duì)研究植物系統(tǒng)演化, 物種之間的親緣關(guān)系、起源、進(jìn)化與分類(lèi), 遠(yuǎn)緣雜交及遺傳工程中的染色體鑒別都有重要意義。核型模式圖是指將一個(gè)染色體組的全部染色體逐個(gè)按其特征繪制下來(lái),再按
2、長(zhǎng)短、形態(tài)等特征排列起來(lái)的圖像。2三、實(shí)驗(yàn)材料1.供核型分析的細(xì)胞必須具備下列標(biāo)準(zhǔn) : 染色體處于細(xì)胞分裂中期 染色體數(shù)目齊全 , 而且分散良好 , 沒(méi)有重疊 各染色體鋪展平整, 染色體各組成部分顯示清楚, 著色均勻。2.實(shí)驗(yàn)用品 毫米尺、剪刀、膠水、計(jì)算器 染色體放大照片3四 .實(shí)驗(yàn)方法染色體數(shù)目確定染色體形態(tài)特征: 長(zhǎng)度:絕對(duì)、相對(duì) 相對(duì)長(zhǎng)度=每條染色體的長(zhǎng)度/全套染色體長(zhǎng)度 臂比=長(zhǎng)臂/短臂 著絲點(diǎn)指數(shù)=短臂/(長(zhǎng)+短臂) 隨體的有無(wú)4分組排隊(duì)原則著絲粒類(lèi)型相同,相對(duì)長(zhǎng)度相近的分一組同一組的按染色體長(zhǎng)短順序配對(duì)排列各指數(shù)相同的染色體配為一對(duì)可根據(jù)隨體的有無(wú)進(jìn)行配對(duì)將染色體按長(zhǎng) 短排隊(duì),短
3、臂向上5五.實(shí)驗(yàn)步驟 1 計(jì)數(shù): 沿邊緣剪下染色體,編號(hào) 2 測(cè)量:(有隨體的染色體在表內(nèi)以星號(hào)“*”標(biāo)記) 表1 核型分析參數(shù)表(草表)63. 配對(duì):根據(jù)所測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)合目測(cè),按次縊痕的有無(wú)和位置、隨體的形態(tài)和大小、臂比值、染色體長(zhǎng)度和形態(tài)相似將同源染色體配對(duì);4 .排列: 染色體長(zhǎng)的在前,等長(zhǎng)的染色體以短臂長(zhǎng)的在前;5 .剪貼 : 著絲粒處于同一水平線(xiàn)上,短臂在上,長(zhǎng)臂在下;6 .計(jì)算 每對(duì)同源染色體絕對(duì)長(zhǎng)度每對(duì)同源染色體相對(duì)長(zhǎng)度= 100% 染色體總長(zhǎng)度 e 染色體長(zhǎng)臂臂比 = 染色體短臂 最長(zhǎng)染色體長(zhǎng)度染色體長(zhǎng)度比= 最短染色體長(zhǎng)度7翠菊的核型分析染色體長(zhǎng)度:大小89著絲粒位置 : 以上述
4、臂比值確定。 臂比值 著絲粒位置 簡(jiǎn)寫(xiě) 1.00 正中部著絲粒 (median point) M 1.01-1.70 中部著絲粒 (median point) m 1.71-3.00 近中部著絲粒 (submedian region ) sm 3.01-7.00 近端部著絲粒 (subterIIlialregion ) st 7.01 以上 端部著絲粒 (terminal point) t 頂端著絲粒 (terminal point) T 107. 表格 : 核型分析中各項(xiàng)測(cè)量的平均數(shù)值應(yīng)列表 , 列表內(nèi)容力求簡(jiǎn)明和實(shí)用 , 其格式項(xiàng)目如下 : 表 2 染色體相對(duì)長(zhǎng)度、臂比和類(lèi)型 序號(hào) 相對(duì)長(zhǎng)
5、度 % 著絲粒指數(shù) 臂比 類(lèi)型 (短臂+長(zhǎng)臂=總長(zhǎng)度) 1 2 3 4 5 6 ( 注 ) 列表時(shí)在具隨體染色體的順序號(hào)上標(biāo)上“*”號(hào)。118. 繪制核型模式圖 (idiogram): 以表2中所列各染色體的相對(duì)長(zhǎng)度平均值繪制。9. 核型公式 : 即綜合核型分析的結(jié)果 , 將一種生物核型書(shū)寫(xiě)成一公式, 它簡(jiǎn)明扼要 , 便于記憶和比較 , 如玉米核型為 :2n = 20=12m+6sm + 2m(SAT) 。 SAT 代表具隨體染色體。1210. 核型分類(lèi) : 表 4.2 按對(duì)稱(chēng)到不對(duì)稱(chēng)的核型分類(lèi) 臂比大于2:1的染色體的百分比最長(zhǎng)/最短 0-0 0.01-0.50 0.51-0.99 1.0 4
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