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文檔簡(jiǎn)介

1、關(guān)于病原性球菌及檢驗(yàn)第一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月1. 簡(jiǎn)述病原性球菌的概念及種類。 2. 熟悉常見(jiàn)病原性球菌的主要生物學(xué)特性、 臨床意義。 3. 說(shuō)出葡萄球菌、鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)方法。 學(xué)習(xí)目的與要求第二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 對(duì)人有致病性的球菌主要引起化膿性炎癥,又稱化膿性球菌。主要包括有 1、G+球菌:葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌。 2、G-球菌:腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌等。第三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 葡萄球菌屬(Staphylococcus) 第四張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作

2、于2022年6月(一)形態(tài)與染色 G+, 球形,無(wú)鞭毛、無(wú)芽孢,呈葡萄串狀排列。一、生 物 學(xué) 特 性第五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)培養(yǎng)特性 營(yíng)養(yǎng):要求不高,耐鹽。 液體:均勻渾濁生長(zhǎng) 普通瓊脂平板: 血液瓊脂平板:高鹽甘露醇平板:金黃色葡萄球菌為淡橙黃色菌落; 其他葡萄球菌為白色菌落。第六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(三)生化反應(yīng) 活潑分解多種糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸。(如:葡萄糖,麥芽糖,蔗糖,甘露醇) 觸酶()(區(qū)別于鏈球菌屬)第七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(四)抗原構(gòu)造 、蛋白抗原() 、多糖抗原 金黃色葡萄球菌:核糖醇磷壁酸 (檢

3、測(cè)磷壁酸有助于金葡菌感染診斷) 凝固酶():甘油磷壁酸第八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(五)分類:個(gè)種及亞種 、按色素分類:金、白、檸 、按凝固酶分類: 凝固酶陰性、凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌 、按噬菌體分類:金葡菌分為5群26型 4. 據(jù)色素、生化反應(yīng)分: 金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌第九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 三種葡萄球菌的主要性狀第十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(六)抵抗力 無(wú)芽胞菌中最強(qiáng),耐干燥,對(duì)石炭酸、升汞、龍膽紫敏感。 易產(chǎn)生耐藥性變異,如:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)。MRSA常呈多重耐藥,對(duì)青霉素、氧氟沙星及

4、紅霉素的敏感率分別為1.3%、3%及14%。第十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 長(zhǎng)期住院、反復(fù)使用各種廣譜抗菌藥物、燒傷或有傷口的病人及與MRSA定植或感染的病人接觸都是造成院內(nèi)MRSA流行的危險(xiǎn)因素。MRSA定植或感染的人員及院內(nèi)環(huán)境污染是引起院內(nèi)流行的主要來(lái)源。 MRSA定植或感染的人員及院內(nèi)環(huán)境污染是引起院內(nèi)流行的主要來(lái)源。 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)第十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、致病性和免疫性(一)致病物質(zhì) 金黃色葡萄球菌產(chǎn)生多種侵襲性酶與外毒素。 1血漿凝固酶(coagulase): 分:結(jié)合型凝固酶、游離型凝固酶。 鑒別金黃色葡萄球

5、菌的重要指標(biāo)。 2葡萄球菌溶血素(staphylolysin)第十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3殺白細(xì)胞素(leukocidin) 4腸毒素(enterotoxin): (A、B、C1、C2、C3、D、E、G、H 9個(gè)血清型) 5表皮剝脫毒素(exfoliative toxin) 6. 毒性休克綜合征毒素1(toxic shock syndrome toxin 1, TSST1) 第十四張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)所致疾病 1侵襲性疾?。?(1)皮膚軟組織感染特點(diǎn):病灶局限且膿汁粘稠 (2)內(nèi)臟器官感染 (3)全身感染 (4)尿路感染第十五張,PPT共一

6、百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2毒素性疾病 (1)食物中毒 (2)燙傷樣皮膚綜合征 由表皮剝脫毒素引起。 (3)毒性休克綜合征 由TSST1引起 (4)假膜性腸炎 第十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 人類凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)感染中以表皮葡萄球菌的感染最為常見(jiàn)。 CNS主要引起以下幾種感染:泌尿系感染,細(xì)菌性心內(nèi)膜炎,敗血癥等,其中大多為醫(yī)院內(nèi)感染。此外,心臟起搏器安裝、置換人工心臟瓣膜、長(zhǎng)期腹膜透析、靜脈滴注等亦可造成凝固酶陰性葡萄球菌的感染。 3、凝固酶陰性葡萄球菌的致病性第十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、微 生 物 學(xué) 檢 驗(yàn)(一)標(biāo)本采集 (二

7、)檢驗(yàn)程序 (三)檢驗(yàn)方法第十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、微 生 物 學(xué) 檢 驗(yàn)(一)標(biāo)本采集 根據(jù)病情采集標(biāo)本 種類:膿液、傷口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、腦脊液、糞便等。 注意:無(wú)菌操作,避免污染。第十九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)葡萄球菌檢驗(yàn)程序膿液、咽拭子、穿刺液 尿液、痰液腦脊液血液糞便、嘔吐物直接涂片染色增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng) (血平板)分離培養(yǎng) (高鹽甘露醇平板)取可疑菌落鑒定試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)涂片染色 血漿凝固酶 耐熱核酸酶 其他鑒定試驗(yàn)報(bào)告初 報(bào)第二十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(三)檢驗(yàn)方法 1、直接涂片 適用于:正常情

8、況下無(wú)菌的標(biāo)本(如腦脊液) 伴有炎癥細(xì)胞的其他體液標(biāo)本、膿液等初步報(bào)告: “查見(jiàn)革蘭陽(yáng)性葡萄狀排列球菌,疑為葡萄球菌” 或:“查見(jiàn)類似葡萄球菌的革蘭陽(yáng)性球菌” 第二十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、分離培養(yǎng) 50ml葡萄糖肉湯(增菌) 渾濁無(wú)菌(7天)報(bào)告: 無(wú)菌生長(zhǎng)腦脊液、膿液、 穿刺液、咽拭、尿液血平板血液標(biāo)本5ml糞便、 嘔吐物高鹽甘露醇平板第二十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(三)檢驗(yàn)方法3、鑒定試驗(yàn) (1)血漿凝固酶試驗(yàn):金黃色葡萄球菌(+) (2)甘露醇發(fā)酵試驗(yàn):金黃色葡萄球菌(+) (3)耐熱核酸酶試驗(yàn):金黃色葡萄球菌(+) ()腸毒素測(cè)定: 金

9、黃色葡萄球菌產(chǎn)生 (5)SPA檢測(cè): 金黃色葡萄球菌 (6)凝固酶陽(yáng)性和凝固酶陰性的葡萄球菌鑒定 (7)API葡萄球菌鑒定試劑盒第二十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(四)結(jié)果評(píng)價(jià)和報(bào)告1、金黃色葡萄球菌:無(wú)論任何標(biāo)本中分離到均 應(yīng)鑒定并報(bào)告臨床。 2、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌:從輸液導(dǎo)管、人工植入組織中分離到,應(yīng)視為致病菌。 3、尿培養(yǎng)計(jì)數(shù):103-104為陽(yáng)性菌尿標(biāo)準(zhǔn)。 4、其他凝固酶陰性葡萄球菌:引起感染流行或治療失敗時(shí),應(yīng)鑒定到種。 5、金黃色葡萄球菌(MRSA):頭孢菌素類抗生素體外藥敏試驗(yàn)為敏感時(shí),不應(yīng)報(bào)告,因體內(nèi)試驗(yàn)已證實(shí)MRSA對(duì)該類抗生素耐藥。第二十四張,PP

10、T共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 鏈球菌屬(Streptococcus)第二十五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、 鏈 球 菌第二十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、生 物 學(xué) 特 性(一)形態(tài)與染色 G+,球形或橢圓形,呈鏈狀排列,無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞,有莢膜。第二十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、生 物 學(xué) 特 性(二)培養(yǎng)特性 條件:營(yíng)養(yǎng)要求較高,多數(shù)為兼性厭氧菌,少 數(shù)專性厭氧。 液體:沉淀生長(zhǎng)(絮狀或顆粒狀)。 普通瓊脂平板:不生長(zhǎng)。 血液瓊脂平板:第二十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(三)生化反應(yīng) 活潑分解多種糖類

11、、蛋白質(zhì)、氨基酸。 菊糖(-) 膽汁溶菌試驗(yàn)(-) optochin敏感試驗(yàn)(-) 觸酶(-)(區(qū)別于葡萄球菌屬)(區(qū)別甲鏈與肺鏈)第二十九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(四)抗原構(gòu)造 、多糖抗原(C抗原): 群特異性。 、蛋白抗原(M、T、R、S) 型特異性,與致病有關(guān)的是M蛋白抗原。 3、核蛋白抗原:無(wú)特異性。 第三十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月多糖抗原蛋白質(zhì)抗原核蛋白抗原鏈球菌抗原構(gòu)造模式圖莢膜第三十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(五)分類 40個(gè)種及亞種 、按溶血情況分類: (1)甲型溶血性鏈球菌:菌落周圍有12mm寬的草綠溶血環(huán),稱甲型溶

12、血或溶血。為條件致病菌。 (2)乙型溶血性鏈球菌:菌落周圍形成一個(gè)24mm寬的透明溶血環(huán),稱乙型溶血或溶血。又稱溶血性鏈球菌。致病力強(qiáng),引起多種疾病。 (3)丙型鏈球菌:無(wú)溶血環(huán),不致病第三十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月、按抗原結(jié)構(gòu)分類: 按C抗原分群:ABCD20群,對(duì)人致病的以A群為主。 按M蛋白分型:如A群:100個(gè)型,B群:4型,C群:13個(gè)型。(五)分類第三十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(六)抵抗力 不強(qiáng),6030min殺死,對(duì)多種消毒劑敏感。 乙鏈:對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素等敏感。第三十四張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、致病性和免

13、疫性(一)致病物質(zhì) 1、鏈球菌溶血素 (1)鏈球菌溶血素O (SLO) SLO抗體 抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn):協(xié)助診斷風(fēng)濕熱(1:400) (2)鏈球菌溶血素S (SLS):無(wú)抗原性。2、致熱外毒素(猩紅熱毒素/紅疹毒素) 3、M蛋白第三十五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 4、透明質(zhì)酸酶 5、鏈激酶 6、鏈道酶 第三十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)所致疾病 主要由A群鏈球菌引起。 1、化膿性感染:由皮膚傷口侵入,經(jīng)呼吸道侵入,其他 途徑(如產(chǎn)褥熱、蜂窩組織炎) 特點(diǎn):病灶界限不清,膿汁稀薄 2中毒性疾?。盒杉t熱 由產(chǎn)生致熱外毒素的A族鏈球菌所致的急性呼吸道傳染病

14、。第三十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3變態(tài)反應(yīng)性疾?。?風(fēng)濕熱 急性腎小球腎炎 二、致病性和免疫性4其他疾?。?甲型(草綠色)鏈球菌:引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。第三十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、微生物學(xué)檢驗(yàn)(一)標(biāo)本采集 (二)檢驗(yàn)程序 (三)檢驗(yàn)方法第三十九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(一)標(biāo)本采集 根據(jù)病情采集標(biāo)本 種類:膿液、鼻咽拭子、血液等 風(fēng)濕熱查血清抗體第四十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)鏈球菌的檢驗(yàn)程序痰、膿、穿刺液咽拭子等腦脊液血 液直接涂片染色測(cè)抗原分離培養(yǎng)增菌培養(yǎng) (5%CO2葡萄糖肉湯)血平板(5

15、%CO2)可疑菌落鑒定試驗(yàn)初步報(bào)告血清學(xué)鑒定 (分群)桿菌肽試驗(yàn) optochin 膽汁溶菌試驗(yàn) 其他鑒定 敏感試驗(yàn) 試驗(yàn)第四十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(三)鏈球菌的檢驗(yàn)方法(1)直接鏡檢: (痰、膿、穿刺液、 咽拭子等) 初報(bào):發(fā)現(xiàn)G+球菌, 呈鏈狀排列第四十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 (2)分離培養(yǎng): 血液、腦脊液 肉湯增菌 膿液、咽拭子等 血平板分離第四十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(3)鑒定鏈球菌的主要試驗(yàn): 根據(jù)形態(tài)、菌落、溶血情況進(jìn)行: 桿菌肽敏感試驗(yàn):A群敏感(d10mm) Optochin敏感試驗(yàn):肺炎鏈球菌d18mm

16、, d400為+ 第四十五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、肺炎鏈球菌(S.pneumoniae) 屬鏈球菌科,鏈球菌屬。 廣泛分布于自然界,主要寄生于人類上呼吸道,多數(shù)不致病。第四十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、生 物 學(xué) 特 性(一)形態(tài)與染色 G+, 矛頭狀,成雙(或短鏈)排列,無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞,有莢膜。第四十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)培養(yǎng)特性 條件:營(yíng)養(yǎng)要求較高,兼性厭氧菌, 5-10% C02生長(zhǎng)最好。 產(chǎn)生自溶酶。 液體:培養(yǎng)24h呈均勻混濁,后期因產(chǎn)生自溶而變得澄清。 普通瓊脂平板:不生長(zhǎng)。 血液瓊脂平板:灰白色,圓形,扁

17、平,較小,周圍有草綠色溶血環(huán)(溶血) 第四十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(三)生化反應(yīng) 活潑分解多種糖類。 菊糖(多數(shù) + ) 膽汁溶菌試驗(yàn)(+) Optochin試驗(yàn)(+)區(qū)別甲鏈與肺鏈第四十九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(四)抗原構(gòu)造 、莢膜多糖抗原: 據(jù)此將肺炎鏈球菌分85型,對(duì)人致病的有20多型。 -型引起大葉性肺炎。 、菌體多糖抗原: 可與CRP反應(yīng),產(chǎn)生沉淀。 3、M蛋白抗原: 型特異性。第五十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 (五)抵抗力 較弱,加熱56 ,20min即死亡。 對(duì)一般消毒劑敏感,對(duì)干燥抵抗力較強(qiáng)。莢膜變異:有莢膜的光滑

18、(S)型菌有毒力,失去莢膜的粗糙(R)型毒力減低或消失。 (六)變異性第五十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、致病性和免疫性(一)致病物質(zhì) 1、莢膜: 肺炎球菌的致病力,主要是莢膜的抗吞噬作用。 2、蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎鏈球菌溶素O等 溶血毒素“O”:自溶后釋放,能溶解人和動(dòng)物的紅細(xì)胞,高濃度對(duì)動(dòng)物有壞死及致死作用。第五十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)所致疾病 存在于正常人上呼吸道,為條件致病菌,僅在人體抵抗力下降時(shí)才引起疾病。 可引起:大葉性肺炎,胸膜炎,膿胸,慢性支氣管炎,中耳炎,腦膜炎,敗血癥等。第五十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年

19、6月三、微生物學(xué)檢驗(yàn)(一)標(biāo)本采集 痰液,膿液,血液,腦脊液等。 (二)檢驗(yàn)程序 (三)檢驗(yàn)方法第五十四張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月檢驗(yàn)程序痰、膿腦脊液血液直接涂片 分離培養(yǎng)革蘭染色、美蘭染色 莢膜腫脹試驗(yàn)增菌培養(yǎng)(葡萄糖肉湯、硫酸鎂肉湯)(血平板)挑選可疑菌落純培養(yǎng)初報(bào)兔血清肉湯小白鼠毒力試驗(yàn)涂片 莢膜腫脹試驗(yàn)?zāi)懼芫囼?yàn) 菊糖發(fā)酵 Optochin試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)報(bào) 告第五十五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月檢驗(yàn)方法1、直接鏡檢 適用于:痰、膿、腦脊液標(biāo)本。 報(bào)告:“找到肺炎鏈球菌” 2、分離培養(yǎng) 硫酸鎂肉湯:均勻混濁生長(zhǎng),有綠色熒光。 血平板:灰白色,圓形,扁平,

20、較小,周圍有草綠色溶血環(huán)(溶血) 第五十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、鑒定試驗(yàn) (1)莢膜腫脹試驗(yàn) (2)膽汁溶菌試驗(yàn):+ (3)Optochin試驗(yàn):+ (4)菊糖發(fā)酵試驗(yàn):+ (5)小鼠毒力試驗(yàn): 有毒力的菌株,接種后12-36h,死亡。 第五十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月膽汁溶菌試驗(yàn)陽(yáng)性: 加入膽汁或10%去氧膽酸鈉,37,5-10min,激活本菌的自溶酶,出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象。第五十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月Optochin敏感試驗(yàn)陽(yáng)性: 取肉湯培養(yǎng)液均勻涂于血平板上用optochin紙片貼于接種區(qū)中央(或分區(qū)劃線法,紙片貼于1-2區(qū))

21、,35需氧培養(yǎng)過(guò)夜,抑菌圈 18mm。第五十九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月Optochin test 第六十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月肺炎鏈球菌的主要鑒定依據(jù) 1、鏡下形態(tài):革蘭陽(yáng)性球菌,矛頭狀成雙排列,平端相對(duì),尖端向外; 2、血平板菌落特點(diǎn):直徑0.5-1.5mm,灰白色,半透明,光滑(有些菌株為粘液狀),扁平,周圍有草綠色溶血環(huán)。 培養(yǎng)或放置24h以上,菌落中央可塌陷,呈臍窩狀。 3、生化鑒定: Optochin試驗(yàn)+,膽汁溶菌試驗(yàn)+。第六十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月肺炎鏈球菌與甲型溶血性鏈球菌的鑒別 形態(tài) 菌落 血清 膽汁 菊糖 O

22、pto- 小鼠 肉湯 溶菌 chin 毒力試驗(yàn)肺鏈 甲鏈矛頭狀, 稍大,濕潤(rùn) 渾濁 + + + + 成雙, 扁平, 有莢膜 臍窩狀 圓形, 較小,稍干, 沉淀 無(wú)莢膜 圓,凸起第六十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(四)結(jié)果評(píng)價(jià)和報(bào)告 乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌為毒力強(qiáng)的致病菌,無(wú)論從任何臨床標(biāo)本中分離出均應(yīng)報(bào)告臨床。 及時(shí)鑒定和報(bào)告咽部標(biāo)本中分離出的化膿性鏈球菌,有利于早期治療,以減少并發(fā)癥(如風(fēng)濕熱,腎小球腎炎)的產(chǎn)生。 草綠色鏈球菌在重癥感染時(shí),應(yīng)鑒定到種。第六十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 腸球菌屬 是腸道中的正常菌群 導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染:如尿路感染

23、、腹部和 盆腔感染、敗血癥、腦膜炎。第六十四張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、生物學(xué)特性(一)形態(tài)染色 G+球菌,單個(gè)、成雙或短鏈狀排列。無(wú)莢膜、芽胞,部分菌株有鞭毛。第六十五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 營(yíng)養(yǎng)要求較高。能在高鹽(6.5%NaCl)、高堿(PH9.6)、高膽汁(40%)、1045生長(zhǎng)。 菌落:圓形、中等大小、灰白色、不透明、S型,有或溶血。(二)培養(yǎng)特性第六十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月能分解多種糖類 觸酶(-) PYR(吡咯烷酮-萘基酰胺)試驗(yàn)(+)(三)生化反應(yīng)第六十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 目前分18種

24、。引起醫(yī)院內(nèi)感染常見(jiàn)的是糞腸球菌和屎腸球菌。 常用的分型方法:rRNA基因探針?lè)中头?。(四)分型(五)抵抗?對(duì)理化因素抵抗力弱。 但對(duì)大多數(shù)抗生素天然耐藥。第六十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、微生物學(xué)檢驗(yàn) (一)標(biāo)本采集 尿液、血液、腦脊液、膿汁分泌物等。第六十九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)檢驗(yàn)程序尿液、膿汁、穿刺液血 液涂片染色 分離培養(yǎng)(血平板、5%CO2)初 報(bào)挑選可疑菌落增菌培養(yǎng)(葡萄糖肉湯、5%CO2)PYR試驗(yàn)?zāi)懼呷~苷試驗(yàn)6.5%NaCl生長(zhǎng)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)其他鑒定試驗(yàn)報(bào) 告第七十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(三)檢驗(yàn)方法

25、1、直接鏡檢 適用于:痰、膿、腦脊液、穿刺液標(biāo)本。 2、分離培養(yǎng) 血平板:灰白色,圓形,中等大小,不透明,S型菌落,周圍有溶血或溶血。 選擇培養(yǎng)基:疊氮膽汁七葉苷瓊脂平板。第七十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、鑒定試驗(yàn) (1)菌屬鑒定試驗(yàn): PYR試驗(yàn):腸球菌、A群鏈球菌、某些凝固酶陰性葡萄球菌為(+) 膽汁七葉苷試驗(yàn):+ 鹽耐受試驗(yàn):+ (4)種間鑒定試驗(yàn):P175表17-3第七十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 奈瑟菌屬(Neisseria) 特點(diǎn):為一群G-雙球菌,無(wú)鞭毛,無(wú)芽胞,有菌毛,需氧,氧化酶及觸酶 +。 種類:共九種,主要致病菌是 腦膜炎奈

26、瑟菌(merningococcus) 淋病奈瑟菌(gonorrhoeae)第七十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、腦膜炎奈瑟菌 (N.meningitidis)即腦膜炎球菌, 是流行性腦脊髓膜炎的病原體第七十四張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(一)生物學(xué)性狀1形態(tài)結(jié)構(gòu) 2培養(yǎng)特性 3生化反應(yīng) 4. 抗原結(jié)構(gòu) 5. 抵抗力特點(diǎn) 第七十五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 (一)形態(tài)結(jié)構(gòu)G-,腎形成雙排列 在患者腦脊液標(biāo)本中位于中性粒細(xì)胞內(nèi) 無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛,具有莢膜、菌毛。 第七十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求高,必須在含有血

27、清或多種氨基酸、無(wú)機(jī)鹽的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。 血平板:半透明,灰褐色,圓形,濕潤(rùn)光滑露滴樣菌落。 易自溶。第七十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月巧克力平板:圓形,扁平,藍(lán)灰色,半透明,光滑濕潤(rùn)的菌落。 卵黃雙抗(EPV)平板:較大,無(wú)色,光滑濕潤(rùn),扁平,邊緣整齊的菌落。 血清肉湯:呈微混濁。第七十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3.生化反應(yīng)分解葡萄糖、麥芽糖:+ 硝酸鹽還原試驗(yàn)陰性,不分解尿素 氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性第七十九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月4.抗原結(jié)構(gòu)可分9個(gè)血清群,對(duì)人致病的主要是A群5抵抗力特點(diǎn) 對(duì)寒冷、光、熱力,干燥等十分敏感。室溫3h,60

28、 5min死亡。 采集標(biāo)本:注意保溫迅速送檢。 對(duì)磺胺類、青霉素、鏈霉素均敏感。 第八十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)致病性與免疫性1致病物質(zhì):菌毛、莢膜、內(nèi)毒素 2所致疾?。簜魅驹础鞑ネ緩?寄生在正常人鼻咽部,存在易患人群,與患者補(bǔ)體介導(dǎo)的殺菌活性缺陷有關(guān)。約2%-3%的人表現(xiàn)為流腦癥狀。 3. 免疫性 病原可產(chǎn)生群特異性抗體,但不持久。第八十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(三) 微生物學(xué)檢驗(yàn) 1標(biāo)本采集 菌血癥期病人采集血液 有出血點(diǎn)或瘀斑者,可取瘀斑滲出液 有腦膜刺激癥狀,抽取腦脊液 帶菌者:咽拭子 第八十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6

29、月注意事項(xiàng): 立即送檢 注意保溫(勿放冰箱) 防干燥 防紫外線 第八十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月、腦膜炎球菌的檢驗(yàn)程序 血 液增菌培養(yǎng)(葡糖肉湯)分離培養(yǎng) (巧克力、血平板)鑒定試驗(yàn)涂染檢 氧化酶 葡、麥糖 多價(jià)血清 藥敏試驗(yàn) 結(jié)果報(bào)告 鼻咽拭子 卵黃雙抗平板510%co237 1824h37 1824h37 1824h腦脊液 瘀血點(diǎn)離心上沉 清淀 液物510%2涂片 染色初步 報(bào)告直接凝集第八十四張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月腦膜炎球菌的鑒定依據(jù)菌落特征符合 形態(tài)染色符合 分解葡、麥糖產(chǎn)酸 氧化酶、觸酶陽(yáng)性 血清凝集試驗(yàn)陽(yáng)性第八十五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)

30、作于2022年6月二、淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae) 即淋球菌 為淋病的病原體,人是唯一天然宿主和傳染源第八十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(一)生物學(xué)性狀1形態(tài)結(jié)構(gòu) 2培養(yǎng)特性 3. 生化反應(yīng) 4抵抗力特點(diǎn) 第八十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月1形態(tài)結(jié)構(gòu)G-,球形或腎形,成對(duì)排列 有莢膜,無(wú)芽胞和鞭毛第八十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求高,30-37 生長(zhǎng),須在含有血液或血清的培養(yǎng)基上培養(yǎng),常用血液、巧克力等培養(yǎng)基 初次分離,須5-10%CO2才能生長(zhǎng)發(fā)育 菌落:凸起,光滑、圓形,灰褐色,半透明 第八十九張,PPT共

31、一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3.生化反應(yīng) 氧化酶試驗(yàn):(+) 觸酶: (+) 葡萄糖(+) ,麥芽糖(-) 易自溶第九十張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月4抵抗力特點(diǎn) 抵抗力弱, 在干燥環(huán)境中僅能存活1-2h,濕熱55 5min,100 立即死亡。室溫下存活1-2d。 對(duì)消毒劑極敏感 第九十一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月、致病物質(zhì):菌毛、外膜蛋白、等 、所致疾?。?侵犯人類泌尿生殖系統(tǒng)引起淋病(首位性病) 新生兒眼炎(二)致病性與免疫性 第九十二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月1標(biāo)本采集 標(biāo)本:男性:尿道分泌物 女性:陰道分泌物 全身性淋?。貉骸⒚谀?/p>

32、、生殖道的各種分泌物、尿液 立即送檢 檢驗(yàn)程序 (三) 微生物學(xué)檢驗(yàn)第九十三張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月膿汁、分泌物直接涂片染色 分 離 培 養(yǎng) 血、巧克力、TM平板510%co2351824h鑒定試驗(yàn)涂染檢 氧化酶 糖發(fā)酵 藥敏試驗(yàn)報(bào) 告 初步報(bào)告35 1824h第九十四張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月()直接涂片鏡檢急性淋病: 嗜中性粒細(xì)胞內(nèi)大量G-,腎形雙球菌具有診斷意義 慢性淋?。虹R檢較困難 檢驗(yàn)方法第九十五張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月()分離培養(yǎng) 即采集即培養(yǎng),常用含有兩種以上抗生素(萬(wàn)古霉素、粘菌素、磺胺類等)的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)(如ML、

33、TM) 5-10%CO2 培養(yǎng)基先預(yù)溫。第九十六張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月氧化酶試驗(yàn): (+) 觸酶: (+)(多數(shù)奈瑟菌為陰性) 葡萄糖(+),麥芽糖(-) PCR:靈敏,特異,標(biāo)本不受限制(不需活菌) ()鑒定第九十七張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 1.名詞解釋: 血漿凝固酶、SPA、抗鏈“o”試驗(yàn)、Optochin試驗(yàn)。 2.根據(jù)色素和生化反應(yīng)將葡萄球菌分成哪幾種? 3.金黃色葡萄球菌的鑒定依據(jù)有哪些? 4.根據(jù)鏈球菌在血平板上的溶血現(xiàn)象,將其分成哪些類型?甲鏈和乙鏈有何區(qū)別? 5. 簡(jiǎn)述鏈球菌的檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)方法。 6. 腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有哪些異

34、同點(diǎn)? 7.采集腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌檢驗(yàn)應(yīng)該注意哪些問(wèn)題?為什么? 復(fù)習(xí)思考題第九十八張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月中等大,突起, 有色素,S型菌落。葡萄球菌菌落形態(tài) (普通瓊脂平板)第九十九張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌第一百?gòu)?,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月金黃色葡萄球菌有透明溶血環(huán)。 表皮葡萄球菌無(wú)溶血環(huán)。 第一百零一張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月葡萄球菌A蛋白(SPA)的意義: (1)降低抗體的調(diào)理作用,抗吞噬 (2)協(xié)同凝集試驗(yàn):輔助診斷疾病。第一百零二張,PPT共一百二十頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月血漿凝固酶試驗(yàn)原理致病性葡萄球菌能產(chǎn)生種血漿凝固酶: 一種為結(jié)合型凝固酶(凝聚因子):細(xì)菌表面的纖維蛋白原受體與血漿中的纖維蛋白原結(jié)合,導(dǎo)致細(xì)菌凝集。 另一種為游離型凝固酶,可被人或兔血漿中的協(xié)同因子激活,成為凝血酶樣物質(zhì),使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白,從而使血漿凝固。 檢測(cè)方法結(jié)合型凝固酶:玻片法 游離型凝固酶:試管法第一百零三張,PPT共一百二十

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