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1、2023屆 一輪復習 浙科版 微生物的培養(yǎng) 作業(yè)基礎達標1下列關于無菌操作的敘述,錯誤的是()A在超凈臺內接種時需打開過濾風,但不能打開紫外燈B對試管進行高壓蒸汽滅菌時,不能用脫脂棉制成的棉塞塞住管口C若要在平板上進行五個區(qū)域的劃線分離接種,則接種環(huán)共需灼燒六次D配制完成的尿素固體培養(yǎng)基,還需用G6玻璃砂漏斗過濾除菌答案:D2(2022寧波適應性考試)下列關于涂布分離法和劃線分離法的操作,錯誤的是()A兩次劃線之間灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種B不同濃度的菌液經涂布后均可在固體培養(yǎng)基表面形成單菌落C在獲取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過火焰D同一濃度的稀釋液應至少涂布三

2、個平板答案:B3(2022沈陽高三模擬)下圖為實驗室培養(yǎng)和純化酵母菌的部分操作步驟,下列說法正確的是()A步驟中打開含菌種的試管后需將試管口通過酒精燈火焰滅菌B步驟中接種環(huán)共需5次灼燒處理C將接種后的圖平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時無需倒置D步驟操作時都不需要在酒精燈火焰旁進行解析:選A。打開含菌種的試管需通過火焰滅菌,取出菌種后需再次通過火焰,塞上棉塞才可以,A正確;每次接種前后都要灼燒接種環(huán),因此完成步驟中的5次劃線操作共需灼燒接種環(huán)6次,B錯誤;劃線接種結束后,將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),這樣可以防止表面的水分過快揮發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染,C錯誤;步驟操作時都需要在酒精燈火焰旁

3、進行,防止被雜菌污染,D錯誤。4(2022衢州一模)實踐是動手和動腦的過程,也是解決實際問題的過程。下列有關生物技術實踐的敘述,錯誤的是()A需滅菌的試管等玻璃器皿可用牛皮紙包好放干熱滅菌箱滅菌B倒平板后需要持續(xù)間歇晃動,以保證固體培養(yǎng)基的表面平整C平板劃線時,每次轉換劃線角度后都需要灼燒接種環(huán)再劃線D微生物實驗材料在丟棄前一定要進行滅菌處理以免污染環(huán)境答案:B。倒平板時培養(yǎng)基仍然是液態(tài)的,不需要通過晃動來保證培養(yǎng)基表面平整,B錯誤。5(2022湖州開學檢測)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。下列關于土壤中分解尿素的細菌的分離和計數的敘述,正確的是()A分解尿素的細菌

4、是以尿素的分解產物CO2為碳源的B倒平板時應將打開的培養(yǎng)皿皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C培養(yǎng)基中K2HPO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定D若實驗組菌落平均數為37個/平板,空白對照平板上有3個菌落,則本組菌落數的平均值為34個/平板解析:選C。分解尿素的細菌是異養(yǎng)型細菌,不能以CO2為碳源,A錯誤;倒平板時,正確的做法是用左手拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,B錯誤;無機鹽可以作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定,所以培養(yǎng)基中K2HPO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定,C正確;在完全正確的操作情況下,空白

5、對照組中不應出現菌落,若空白對照組出現菌落,說明操作過程中存在雜菌污染,屬于實驗失誤,所有實驗數據均不應采用,D錯誤。6.(2022浙江選考模擬)右圖為劃線分離法接種的示意圖,下列說法正確的是()A觀察或比較各種細菌菌落形態(tài)的最佳區(qū)域是B圖中所示的4次劃線后,都應將接種環(huán)放在酒精燈上灼燒C圖中所示的4次劃線前,都應將接種環(huán)放在酒精燈上灼燒D圖中區(qū)域最可能出現單菌落,區(qū)域不可能出現單菌落答案:B7(2022山東德州一模)尿酸氧化酶能分解尿酸(C5H4N4O3),為獲取尿酸氧化酶高產菌株用以研制治療高尿酸血癥的酶類藥物,科研人員從海洋泥土中取樣后富集培養(yǎng),3天后吸取培養(yǎng)液梯度稀釋到106,然后接種

6、到固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)。挑取單菌落檢測尿酸氧化酶的酶活性(用每分鐘轉化1 mol尿酸所需要的酶量表示),結果如下表所示。下列分析錯誤的是()菌株1234酶活性100501420A.從海洋泥土中取的樣品需在無菌條件下富集培養(yǎng)B需要在以尿酸為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)C菌株3的酶活性最高,可作為實驗所需的目的菌D分離培養(yǎng)時利用了平板劃線法進行接種解析:選D。分離培養(yǎng)時利用了稀釋涂布平板法進行接種,D錯誤。8.物質W是一種含氮有機物,物質W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現為不透明。某小組欲從土壤中篩選出能降解物質W的細菌,結果如圖所示。下列說法錯誤的是()A透明圈的形成是因為物質W被分解B所用的

7、選擇培養(yǎng)基應該以物質W為唯一氮源C甲菌落中的細菌可能是利用空氣中的氮氣作為氮源D乙菌落中的細菌都能降解物質W,不需要進一步純化解析:選D。乙菌落中的細菌不一定都能降解物質W,因此仍需要進一步純化,D項錯誤。9下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基配方,請根據表格和所學知識回答下列相關問題。成分蛋白胨乳糖焦糖K2HPO4指示劑瓊脂含量(g)10.05.05.02.00.212.0將上述物質溶解后,用蒸餾水定容到1 000 mL(1)若根據用途劃分,該培養(yǎng)基屬于_(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。若要用上述培養(yǎng)基來篩選出土壤中的尿素分解菌,培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分必須怎樣更改?_,并用_作為指示劑。(2

8、)圖1和圖2是培養(yǎng)大腸桿菌的結果圖,則獲得圖2效果的接種方法是_。運用圖1所示接種方法統(tǒng)計的菌落數常常比活菌的實際數目少,其原因是_。(3)在微生物培養(yǎng)的過程中,為防止雜菌污染,需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行_;操作者的雙手需要進行清洗和_。答案:(1)鑒別將蛋白胨改成尿素酚紅(2)平板劃線法當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落(3)滅菌消毒10將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。回答下列問題:(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制_的生長,加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)

9、基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質,營養(yǎng)物質類型除氮源外還有_(答出兩點即可)。氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有_(答出兩點即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是_,該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是_。(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數量,在同一稀釋倍數下得到以下結果:甲同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數分別是110、140和149,取平均值133;乙同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數分別是27、169和176,取平均值124。有

10、人認為這兩位同學的結果中,乙同學的結果可信度低,其原因是_。解析:(1)在培養(yǎng)基中添加(或減去)某種化學成分,使得只有某些特定的微生物能夠生長,其他微生物均不能生長,這樣的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。若M培養(yǎng)基是用于真菌的篩選,則應加入鏈霉素以抑制細菌的生長,其屬于選擇培養(yǎng)基。(2)馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質、脂質、無機鹽、水等多種物質,因此,除氮源外其中還有微生物生長所需要的碳源、無機鹽等營養(yǎng)要素。進入細胞的氮源可參與合成蛋白質、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(3)加入顯色劑碘碘化鉀溶液后,淀粉遇碘變藍,而淀粉的水解產物則不發(fā)生這種反應。若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并

11、培養(yǎng),土壤中能產生淀粉酶的微生物可將淀粉分解,菌落周圍就會出現透明圈,這樣,我們就可以通過是否產生透明圈來篩選能產淀粉酶的微生物了。(4)乙同學的結果中,1個平板的計數結果與另2個相差太遠,說明在操作過程中可能出現了錯誤,結果的重復性太差,不能簡單地將3個平板的計數值用來求平均值。答案:(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質、核酸(3)碘碘化鉀溶液淀粉遇碘碘化鉀溶液顯藍色,產淀粉酶的菌落周圍的淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同學的結果中,1個平板的計數結果與另2個相差懸殊,結果的重復性差素養(yǎng)提升11下表為某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的是()成分NaNO3K2HPO4MgSO47H2O(CH2O)

12、蒸餾水青霉素含量3 g1 g0.5 g30 g定容至1 000 mL0.1萬單位A.根據物理特性劃分,該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基B微生物無法在該培養(yǎng)基表面形成肉眼可見的菌落C根據培養(yǎng)基的配方可知,該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是自養(yǎng)型D向固體培養(yǎng)基中加入少量水即可形成液體培養(yǎng)基解析:選B。液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如瓊脂)可形成固體培養(yǎng)基,題表所示的培養(yǎng)基配方中沒有加凝固劑,因此該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,A錯誤;微生物可在固體培養(yǎng)基表面形成肉眼可見的菌落,B正確;該培養(yǎng)基中的(CH2O)可作為有機碳源,因此其培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型,C錯誤;向固體培養(yǎng)基中加入少量水不能形成液體培養(yǎng)基,D

13、錯誤。12(2022寧波一模)養(yǎng)殖池中存在的有毒物質主要是氨及亞硝酸,這兩種物質可由硝化細菌吸收利用。在“養(yǎng)殖池底泥中硝化細菌的分離和計數”實驗中,下列說法正確的是()A需要配制添加一定濃度銨鹽的LB固體培養(yǎng)基,以篩選硝化細菌B應對采集底泥使用的工具進行滅菌,全部接種過程均需在酒精燈火焰旁進行C采用平板劃線法進行分離和計數時,還需與未接種的空白培養(yǎng)基同時培養(yǎng)D若空白對照組上長出了菌落,需要在實驗組數據的基礎上減去空白對照組的菌落數答案:B13(2022山東濟寧一模)下圖表示研究人員在實驗室中使用的分批培養(yǎng)細菌的方法,下列敘述不正確的是()A尿素分解菌可利用培養(yǎng)基中的尿素是因為能合成脲酶B在酒精

14、燈火焰附近打開皿蓋,用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃35條平行線,灼燒接種環(huán)后再劃線C液體選擇培養(yǎng)基通??捎糜谶x擇培養(yǎng),增加目標菌種的濃度D將錐形瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)能提高溶氧量和養(yǎng)料的利用率解析:選B。在酒精燈火焰附近將皿蓋打開一條縫隙,用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃35條平行線,蓋上皿蓋,灼燒接種環(huán)待其冷卻后再劃線,B錯誤。14某研究小組嘗試利用“濾膜法”對受污染的河流水體進行大腸桿菌活菌數目的測定,將90 mL無菌水和10 mL的河流水進行混合后添加至濾杯中,并進行下圖所示的實驗操作。下列相關敘述錯誤的是()A濾膜法可用于抗生素、尿素、動物血清等不耐高溫材料的除菌B培養(yǎng)基中必須添加指示劑用于鑒別大

15、腸桿菌C上述實驗操作過程可檢測濾膜的過濾效果D實驗操作過程中需要在酒精燈火焰附近操作,且鑷子使用前需進行灼燒滅菌解析:選C。題述實驗操作過程是通過檢測濾膜上的菌落來判斷水樣中的大腸桿菌及其數量,但該過程并不能檢測濾膜的過濾效果,若想檢測濾膜的過濾效果,應將過濾后的水樣通過稀釋涂布平板法接種于基本培養(yǎng)基上,培養(yǎng)后可檢測通過濾膜的水樣中是否存在微生物或微生物數量的多少,C錯誤。15已知一種有機物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌(目標菌)。號培養(yǎng)基:在LB固體培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。號培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g

16、/L),其他無機鹽(適量),X(15 g/L)。號培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機鹽(適量),X(45 g/L)?;卮鹣铝袉栴}:(1)在號培養(yǎng)基中,為微生物提供氮源的是_。、號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機物是_。(2)若將土壤懸浮液接種在號液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時間后,不能降解X的細菌比例會_,其原因是_。(3)號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基,若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數,接種時,應采用的方法是_。解析:(1)在號培養(yǎng)基中,酵母浸膏、蛋白胨可以為微生物提供氮源,、號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的是有機物X。(2)號培養(yǎng)基中,碳源只有X,不能降解X

17、的細菌會因缺乏碳源而不能增殖,使該類細菌比例降低。(3)利用固體培養(yǎng)基對菌落進行計數時,需采用稀釋涂布平板法進行接種。答案:(1)酵母浸膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法16(2020高考江蘇卷)產脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產脂肪酶酵母菌株,科研人員開展了相關研究。請回答下列問題:(1)常規(guī)微生物實驗中,下列物品及其滅菌方法錯誤的是_(填編號)。編號物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0 g某土壤樣品,轉入99 mL無菌水中,制備成菌懸液,經_后,獲得細胞密度不同的菌懸液。分別取

18、0.1 mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上,其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落,則該樣本中每克土壤約含酵母菌_個。(3)為了進一步提高酵母菌產酶能力,對分離所得的菌株,采用射線輻照進行_育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,按照菌落直徑大小進行初篩,選擇直徑_的菌落,純化后獲得A、B兩突變菌株。(4)在處理含油廢水的同時,可獲得單細胞蛋白,實現污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關性能,進行了培養(yǎng)研究,結果如下圖所示。據圖分析,應選擇菌株_進行后續(xù)相關研究,理由是_。解析:(1)涂布器一般用干熱滅菌法或灼燒滅菌法進行滅菌。(2)99 mL無菌水中加入1.0 g土壤制成的菌懸液為100 mL,取稀釋10倍后的菌懸液0.1 mL涂布平板,平板上的平均菌落數為46,則每克土壤約含酵母菌460.110100 4.6105(個)。(3)輻射可以提高基因突變的頻率

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