實驗十一 鄰二氮菲吸光光度法測鐵的條件實驗

1、實驗十一 鄰二氮菲分光光度法測鐵的條件實驗一、目的要求1、掌握鄰二氮菲吸光光度法測定鐵的條件實驗的方法與原理。2、熟悉分光光度法的條件試驗及測定方案的擬定。3、進一步了解分光光度計的構造、性能及使用方法。二、實驗意義可見分光光度法測定無機離子，要經(jīng)過兩個過程：一是顯色過程；二是測量過程；為了使測定結果有較高的靈敏度和準確度，必須選擇合適的顯色條件和測量條件。這些條件：顯色劑用量、酸度、溫度、時間及干擾的消除確定顯色反應的最佳實驗條件，也就可以在一定程度上保證了實驗的準確度和精密度。三、實驗原理鄰二氮菲是測定微量鐵的一種較好的顯色劑。它是測定二價鐵的一種高靈敏度的高選擇性試劑。二價鐵和水溶液中的

2、鄰二氮菲反應，生成一種很穩(wěn)定的橙紅色螯合物，其在510nm波長下有最大吸收，且遵守朗伯比耳定律，摩爾吸光系數(shù)1.1104。在pH39的范圍內(nèi)（一般將酸度控制在pH=56的范圍內(nèi)），顏色的深度不受影響，且可穩(wěn)定半年之久。最小檢出濃度是50gL-1(用1cm吸收池)通常從以下幾個方面考慮顯色反應的實驗條件：顯色劑用量、酸度、溫度、時間及干擾的消除。我們的條件實驗通常采用單因素實驗法。其原理是在幾個實驗條件中，改變其中一個條件的值，固定其它的條件，然后測定相應的吸光度值，再從中找出符合實驗要求的條件。四、儀器和試劑1、醋酸鈉：1molL-1；2、鹽酸羥胺：100 gL-1；(用時配置)3、鄰二氮菲(

3、1.5 gL-1)： 4、鐵標準溶液分光光度計的使用 1、使用儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理。以及各個操作旋鈕之功能。在未接通電源前，應該對儀器的安全性進行檢查，電源線接線應牢固。通地要良好，各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應該正確，然后再接通電源開關。 2、開啟電源，指示燈亮，選擇開關置于“T”，波長調(diào)至測試用波長。儀器預熱30分鐘。 3、打開試樣室蓋（光門自動關閉），按“0”按鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”，蓋上試樣室蓋，將空白（參比）放在光路上，使光電管受光，調(diào)節(jié)透過率“100%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0”。 4、預熱后，按(4)連續(xù)幾次調(diào)整“0”和“100%”，儀器即可進行

4、測定工作。 5、選擇開關置于“A”，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為“.000”，然后將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度值。 6、如果大幅度改變測試波長時，在調(diào)整“0”和“100%”后稍等片刻，（因光能量變化急劇，光電管受光后響應緩慢，需一段光響應平衡時間），當穩(wěn)定后，重新調(diào)整“0”和“100%”即可工作。 7、每臺儀器所配套的比色皿，不能與其它儀器上的比色皿單個調(diào)換。 五、實驗步驟1、鄰二氮菲與鐵的配合物的穩(wěn)定性用吸量管準確吸取10 ugmL-1鐵標準溶液5 mL，置于50mL容量瓶中。加入100 gL-1鹽酸羥胺溶液1mL，搖勻后加入1.5 gL-1鄰二氮菲溶液2mL和1mo

5、lL-1醋酸鈉溶液5mL ，以水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度計上，用1cm比色皿，以水為參比溶液，在最大吸收波長510 nm處，從加入顯色劑后立即測定一次吸光度，經(jīng)15min，30 min，45min，60min后，各測一次吸光度。以時間(t)為橫坐標，吸光度(A)為縱坐標，繪制At曲線，從曲線上判斷配合物穩(wěn)定的情況。2、顯色劑用量的影響取50mL容量6個，各加入10 ugmL-1鐵標準溶液5ml，1ml 100 gL-1鹽酸羥胺溶液，搖勻.再分別加入鄰二氮菲溶液0，0.5，1.0，2.0，3.0和4.0mL ,再各加入醋酸鈉5mL. 以水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度汁上，用適宜波長(510nm)，1cm比色皿，以水為參比測定不同用量顯色劑溶液的吸光度。然后以鄰二氮菲試劑加人毫升數(shù)為橫坐標，吸光度為縱坐標、繪制Av曲線，由曲線上確定顯色劑最佳加入量。注意:1干擾用鄰二氮菲測定時，有很多元素干擾測定，須預先進行掩蔽或分離，如鈷、鎳、銅、鉻與試劑形成有色配合物；鎢、相、銅、汞與試劑生成沉淀，還有些金屬離子如錫、鉛、鉍則在鄰二氮菲鐵配合物形成的pH范圍內(nèi)發(fā)生水解；因此當這些離子共存時，應注意消除它們的干擾作用。2試劑本次實驗中，所用的試劑有鐵標液、鹽酸羥胺、鄰二氮菲。其中鹽酸羥胺是還原劑，用來還原三價鐵離子；鄰二氮菲是顯色劑。六、操作要點1、溶液的配制用移液管準確移取試劑溶液；注