第四部分 生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐

1、第四部分 生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐高頻考點(diǎn)突破考點(diǎn)一 血紅蛋白的提取和分離1.蛋白質(zhì)分離的依據(jù) 蛋白質(zhì)各種特性的差異，如分子的形狀和大小、 所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對 其他分子的親和力等，可以用來提取和分離不同 種類的蛋白質(zhì)。2.方法及原理 （1）凝膠色譜法原理 蛋白質(zhì)比較相對分子質(zhì)量大相對分子質(zhì)量小凝膠內(nèi)部不能進(jìn)入能進(jìn)入運(yùn)動(dòng)方式垂直向下垂直向下和無規(guī)則擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)經(jīng)過路程較短較長洗脫次序先流出后流出提醒 凝膠色譜柱的直徑大小不影響分離效果，但直徑過大造成洗脫液體積大，樣品稀釋度大；凝膠色譜柱的高度與分離度有關(guān)。（2）凝膠電泳法原理凝膠電泳法的原理是不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、

2、形狀和大小不同，在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運(yùn)動(dòng)方向和運(yùn)動(dòng)速度不同。如下表：決定運(yùn)動(dòng)方向形成庫侖力形成阻力決定運(yùn)動(dòng)速率電荷性質(zhì)電荷量分子形狀分子大小3.實(shí)驗(yàn)操作流程 紅細(xì)胞洗滌離心去除血清 樣品的處理 釋放血紅蛋白蒸餾水漲破 分離血紅蛋白離心處理 粗分離透析（去除小分子雜質(zhì)） 純化凝膠色譜法進(jìn)行分離和純化 純度鑒定SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定相 對分子量提醒 紅細(xì)胞洗滌過程中，洗滌三次后，上清液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則無法除去血漿蛋白；離心時(shí)轉(zhuǎn)速要低，時(shí)間要短，否則白細(xì)胞等會(huì)一同沉淀，達(dá)不到分離效果。血紅蛋白釋放過程中，蒸餾水的作用是漲破紅細(xì)胞，

3、甲苯的作用主要是溶解細(xì)胞膜。為了加快干凝膠的膨脹，可將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，逐漸升溫至接近沸騰，通常只需12 h。這種方法不但節(jié)約時(shí)間，而且可以除去凝膠中可能帶有的微生物，排除膠粒內(nèi)的空氣。滴加樣品時(shí)，吸管管口要貼著管壁環(huán)繞移動(dòng)，防止破壞凝膠面。對位訓(xùn)練1.為了提取血紅蛋白，從學(xué)校附近的屠宰場索取新 鮮的豬血，對豬血處理的正確操作是 （ ） A.要在采血容器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕c B.取血回來后，馬上進(jìn)行高速長時(shí)間離心 C.將離心后的血細(xì)胞加入清水緩慢攪拌 D.重復(fù)洗滌直到上清液呈紅色為止A2.洗滌紅細(xì)胞時(shí)，離心所用方法為 （ ） A.低速長時(shí)間離心 B.低速短時(shí)間離心 C.高速

4、長時(shí)間離心 D.高速短時(shí)間離心B考點(diǎn)二 植物芳香油的提取1.植物芳香油的基本知識 （1）成分：組成較復(fù)雜，主要包括萜類化合物 及其衍生物。 （2）特點(diǎn)：具有很強(qiáng)的揮發(fā)性，易溶于有機(jī) 溶劑。 （3）應(yīng)用：玫瑰精油是制作高級香水的主要成 分，能使人產(chǎn)生愉悅感；橘皮精油的主要成分是 檸檬烯，具誘人的橘香味，是食品、化妝品和香 水配料的優(yōu)質(zhì)原料。2.玫瑰精油的提取流程 鮮玫瑰花+清水水蒸氣蒸餾油水混合物 分離油層 除水 玫瑰油3.玫瑰精油提取操作的關(guān)鍵 （1）安裝裝置順序：從左到右，自下而上。 （2）溫度計(jì)位置：溫度計(jì)水銀球的上限與蒸餾瓶 側(cè)管的下限處在同一水平線上。 （3）冷凝管中的水流向：從下方進(jìn)

5、水，上方出 水，與蒸氣流向相反。加入NaCl加入無水Na2SO4過濾 （4）加熱時(shí)防暴沸：墊石棉網(wǎng)，向液體中加入幾粒沸石或瓷片。 （5）燒瓶內(nèi)液體量：燒瓶容積的1/32/3。 （6）除水：加入無水Na2SO4后，放置時(shí)間可適當(dāng)延長些。 （7）溫度及時(shí)間：為提高產(chǎn)品質(zhì)量，要嚴(yán)格控制蒸餾溫度，可適當(dāng)延長蒸餾時(shí)間。4.橘皮精油的提取流程 石灰水浸泡漂洗壓榨過濾靜置再次過 濾橘皮油5.橘皮精油提取操作的關(guān)鍵 （1）橘皮的處理：干燥后一定要用石灰水浸透， 時(shí)間至少10 h以上。 （2）壓榨液的處理：可以先用普通布袋過濾除去 固體物和殘?jiān)?，然后離心進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的 殘留固體物，再用分液漏斗或吸管將上層

6、的橘皮 油分離出來。對位訓(xùn)練3.植物芳香油易溶于 （ ） A.水 B.鹽酸 C.碳酸 D.酒精D4.橘皮在壓榨前，應(yīng)用下列哪種液體浸泡（ ） A.石灰水 B.水 C.酒精 D.鹽酸A考點(diǎn)三 蒸餾、壓榨和萃取三種方法的比較提取方法水蒸氣蒸餾壓榨法有機(jī)溶劑萃取實(shí)驗(yàn)原理利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油方法步驟（1）水蒸氣蒸餾（2）分離油層（3）除水過濾（1）石灰水浸泡、漂洗（2）壓榨、過濾、靜置（3）再次過濾（1）粉碎、干燥（2）萃取、過濾（3）濃縮適用范圍適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油適用于柑橘、

7、檸檬等易焦糊原料的提取適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中優(yōu)點(diǎn)簡單易行，便于分離生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能出油率高，易分離局限性水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題分離較為困難，出油率相對較低使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響芳香油的質(zhì)量提醒 水蒸氣蒸餾要適當(dāng)延長蒸餾時(shí)間，溫度不能太高。用于萃取的有機(jī)溶劑必須事先精制，除去雜質(zhì)。壓榨時(shí)原料必須要浸透，這樣壓榨時(shí)不會(huì)滑脫，出油率高，不堵塞篩眼；使用石灰水充分浸泡原料，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率。對位訓(xùn)練5.我們選擇提取玫瑰精油的方法是 （ ） A.水氣蒸餾 B.壓榨法 C.水中蒸餾

8、 D.萃取法C6.橘皮精油提取時(shí)一般采用 （ ） A.水中蒸餾 B.壓榨法 C.水上蒸餾 D.萃取法B考點(diǎn)四 PCR擴(kuò)增技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制1.PCR的反應(yīng)過程 （1）變性：當(dāng)溫度上升到90以上時(shí)，雙鏈DNA 解旋為單鏈，如下圖： （2）復(fù)性：溫度下降到50左右，兩種引物通 過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合，如下圖：（3）延伸：溫度上升到72左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的DNA鏈，如下圖：2.PCR擴(kuò)增技術(shù)和DNA復(fù)制的比較DNA復(fù)制PCR擴(kuò)增技術(shù)場所細(xì)胞核內(nèi)生物體外原理堿基互補(bǔ)配對堿基互補(bǔ)配對酶DNA聚合酶、解旋酶耐熱的DNA聚合酶（Taq

9、酶）條件模板、ATP、引物鏈（RNA）、常溫模板、ATP、引物鏈（DNA及RNA片段）、溫度變化（909555607075）原料四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸特點(diǎn)形成的是整個(gè)DNA分子，一個(gè)細(xì)胞周期只復(fù)制一次短時(shí)間內(nèi)形成大量目的基因DNA片段，呈指數(shù)增長2n對位訓(xùn)練7.標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大 步，這三大步需要的溫度依次是 （ ） A.92、50、72 B.72、50、92 C.50、92、72 D.80、50、72A8.引物的作用是 （ ） A.打開DNA雙鏈 B.催化合成DNA子鏈 C.使DNA聚合酶能夠從引物的3端開始復(fù)制 D.提供模板C思維方法探究思維誤區(qū)警示易錯(cuò)分析

10、 蛋白質(zhì)提取與分離的原理不清楚方法原理凝膠色譜法根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)電泳法根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同進(jìn)行分離糾正訓(xùn)練 使用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中，相對分子質(zhì) 量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進(jìn)過程，可表示為 圖中 （ ）B知識綜合應(yīng)用重點(diǎn)提示 通過“胡蘿卜素的提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的考查，提升“用文字、圖表以及數(shù)學(xué)的方式等多種形式準(zhǔn)確地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容”的能力。典例分析 如圖為提取胡蘿卜素的裝置圖，請 據(jù)圖回答下列問題： （1） 的作用是 。 （2） 內(nèi)加入的萃取液一般是 ， 原料在加入前，一般要進(jìn)行 、 處理。 （3）該萃取過程采用的是水浴加熱，其目的是

11、。 （4）為了取得最佳萃取效果，萃取的時(shí)間應(yīng)該 。解析 圖示裝置為萃取裝置，其中為冷凝管，其作用在于降溫，以防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)，是燒瓶，其內(nèi)裝有萃取劑，胡蘿卜素的適宜萃取劑是石油醚，為防止有機(jī)溶劑明火加熱時(shí)引起燃燒、爆炸，萃取時(shí)有必要采用水浴加熱，而不用明火加熱。答案 （1）冷凝管 降溫，防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā) （2）燒瓶 石油醚 粉碎 干燥 （3）避免使用明火加熱引起燃燒、爆炸 （4）長拓展提升 比較萃取裝置與水中蒸餾裝置（1）兩種裝置中均具冷凝裝置，但放置的方式和作用不同。蒸餾裝置比萃取裝置多了接收瓶及牛角管，且設(shè)有溫度計(jì)以檢測蒸氣溫度。（2）蒸餾裝置中，燒瓶中裝的蒸餾水可直接加熱，而

12、萃取裝置中裝的是有機(jī)溶劑（萃取劑），故不可直接加熱（需水浴加熱）。變式訓(xùn)練 右圖為胡蘿卜素的紙層析結(jié)果示意圖，請據(jù)圖回答問題：（1）該圖所示的鑒定方法稱為 。（2）基線一般距底邊 cm。（3）A、B、C、D四點(diǎn)中，屬于標(biāo)準(zhǔn)樣品的樣點(diǎn)是 ，屬于提取樣品的樣點(diǎn)是 。點(diǎn)樣的要求是 。（4）在圖中的層析譜中，代表的物質(zhì)是 ，代表的物質(zhì)是 。（5）該層析的目的是 ，而在“綠葉中色素的提取和分離”的實(shí)驗(yàn)中層析的目的是 。解析 該圖為胡蘿卜素的紙層析結(jié)果示意圖，所示的鑒定方法為紙層析鑒定法?；€一般在濾紙下端距底邊2 cm處，在基線上取A、B、C、D四點(diǎn)，用最細(xì)的注射器針頭分別吸取標(biāo)準(zhǔn)樣品和提取樣品，在A、

13、D和B、C點(diǎn)上點(diǎn)樣，點(diǎn)樣應(yīng)快速細(xì)致，在基線上形成直徑為2 mm左右的圓點(diǎn)，每次點(diǎn)完后可以用吹風(fēng)機(jī)吹干，注意保持濾紙干燥。圖中和分別是標(biāo)準(zhǔn)樣品-胡蘿卜素和分離出的其他色素及雜質(zhì)。答案 （1）紙層析鑒定法 （2）2 （3）A和D B和C 點(diǎn)樣應(yīng)該快速細(xì)致，圓點(diǎn)細(xì)小，每次點(diǎn)樣時(shí)濾紙都要干燥 （4）-胡蘿卜素 其他色素和雜質(zhì)（5）胡蘿卜素粗品的鑒定 提取并分離葉綠體中的色素，探究色素的種類和顏色定時(shí)檢測1.2008年5月20日民政部等制訂汶川大地震遇難人 員遺體處理意見指出，無法確認(rèn)遇難者身份的， 由公安部門提取可供DNA檢驗(yàn)的檢材以便事后身 份辨認(rèn)。事后的遺體辨認(rèn)可借助于DNA雜交技 術(shù)，即從遺體細(xì)

14、胞與死者家屬提供的死者生前生 活用品中分別提取DNA，然后借助DNA雜交技術(shù)對 遺體進(jìn)行確認(rèn)。據(jù)此回答： （1）為了確保辨認(rèn)的準(zhǔn)確性，需要克隆出較多的 DNA樣品。這需借助PCR技術(shù)。使用PCR技術(shù)的具體實(shí)驗(yàn)操作順序是：按配方準(zhǔn)備好各組分 離心使反應(yīng)液集中在離心管底部設(shè)計(jì)好PCR儀的循環(huán)程序進(jìn)行PCR反應(yīng)。請寫出圖中方框的步驟： ，該步操作應(yīng)特別注意的問題是 。A組B組C組遺體中的DNA堿基序列ACTGACGGTTGGCTTATCGAGCAATCGTGC家屬提供的DNA堿基序列TGACTGCCAACCGAATAGCACGGTAAGACG（2）上表所示為分別從死者遺體和死者生前的生活用品中提取的

15、三條相同染色體上的同一區(qū)段DNA單鏈的堿基序列，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對情況進(jìn)行判斷，A、B、C三組DNA中不是同一人的是 。（3）為什么從死者體細(xì)胞與死者家屬提供的其生前生活用品中分別提取的DNA可以完全互補(bǔ)配對？ 。解析 PCR技術(shù)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)，它能以極少量的DNA為模板，在幾小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬份的DNA拷貝。這項(xiàng)技術(shù)有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對樣品進(jìn)行分析研究的問題，被廣泛地應(yīng)用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測定等領(lǐng)域。DNA雜交技術(shù)方法是從遺體細(xì)胞和死者家屬提供的死者生前的生活用品中分別提取DNA，在一定溫度下，水浴共熱，使DN

16、A氫鍵斷裂，雙鏈打開。若兩份DNA樣本來自同一個(gè)體，在溫度降低時(shí)，兩份樣本中的DNA單鏈通過氫鍵連接在一起，若不是來自同一個(gè)體，則兩份樣本中的DNA單鏈在一定程度上不能互補(bǔ)，DNA雜交技術(shù)就是通過這一過程對面目全非的死者進(jìn)行辨認(rèn)的。答案 （1）用微量移液器在微量離心管中依次加入各組分PCR實(shí)驗(yàn)使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌（2）B、C （3）人體所有體細(xì)胞均由一個(gè)受精卵有絲分裂產(chǎn)生，其細(xì)胞核中均含有相同的遺傳物質(zhì)2.對血紅蛋白（Hb）的研究結(jié)果表明，血紅蛋白實(shí)際 上是由珠蛋白、原卟琳和二價(jià)鐵離子（Fe2+）所組 成的結(jié)合蛋白質(zhì)，由4條肽鏈各結(jié)合一個(gè)輔基即血

17、紅素，O2結(jié)合于Fe2+上，血紅蛋白與氧疏松結(jié)合形 成氧合血紅蛋白（HbO2），這種氧合作用在氧分壓 高時(shí)容易進(jìn)行，在氧分壓低時(shí)易于解離。紅細(xì)胞結(jié) 合和攜帶O2的過程并不影響Fe2+，也就是說不會(huì)使 之氧化為Fe3+。Fe3+無攜帶O2的能力。CO與Hb的親和 力大于O2，結(jié)合成HbCO后不能分離，致使Hb喪失運(yùn) 輸O2和CO2的機(jī)能，這稱為一氧化碳中毒即煤氣 中毒。（1）用凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)，待 接近色譜柱底端時(shí)，才用試管收集。血紅蛋白因含 而呈現(xiàn)紅色。（2）要使血紅蛋白從紅細(xì)胞中釋放出來，可選用的方法是 。（3）紅細(xì)胞具有運(yùn)輸氧的功能，是因?yàn)?。（4）亞硝酸鹽為強(qiáng)氧化劑，進(jìn)入人體后，

18、可使血紅蛋白失去運(yùn)輸氧的功能，導(dǎo)致人體組織缺氧，其可能的原因是 。解析 用凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)，血紅蛋白因含血紅素而呈現(xiàn)紅色，待紅色區(qū)帶接近色譜柱底端時(shí)，才用試管收集。將紅細(xì)胞置于蒸餾水中，加40%體積的甲苯，攪拌使紅細(xì)胞破裂并釋放出血紅蛋白。紅細(xì)胞中的血紅蛋白與氧在氧分壓高時(shí)容易結(jié)合，在氧分壓低時(shí)又容易分離。亞硝酸鹽可將血細(xì)胞中低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白，從而使其失去與氧結(jié)合的能力。答案 （1）紅色區(qū)帶 血紅素 （2）將紅細(xì)胞置于蒸餾水中，加40%體積的甲苯，攪拌使之破裂并釋放血紅蛋白（3）紅細(xì)胞中的血紅蛋白與氧在氧分壓高時(shí)容易結(jié)合，在氧分壓低時(shí)又容易分離 （4）亞硝酸鹽可使血細(xì)胞中

19、低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白3.PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外 復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示 合成過程，請據(jù)圖分析回答： （1）A過程高溫使DNA變性解旋，對該過程的原理 敘述，正確的是 。 A.該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵 B.該過程用到限制性核酸內(nèi)切酶破壞磷酸二酯鍵 C.該過程不需要解旋酶的作用 D.該過程與人體細(xì)胞的過程完全相同（2）C過程要用到的酶是 。這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以 加入， （需要/不需要）再添加。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基本條件有： 。（3）如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記

20、，控制“94-55-72”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占 。 （4）如果模板DNA分子共有a個(gè)堿基對，其中含有胞嘧啶m個(gè)，則該DNA復(fù)制10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸 個(gè)。（5）PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于 。假設(shè)對一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，則擴(kuò)增若干次后檢測所用DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占 。解析 （1）高溫所起的作用類似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂?。?）C過程為PCR技術(shù)的延伸階段，當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。Taq DNA聚合酶是耐熱的，

21、高溫下不變性，所以一次性加入即可。（3）PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過三次循環(huán)，共產(chǎn)生23個(gè)DNA分子，其中有2個(gè)DNA分子含有15N標(biāo)記。（4）在一個(gè)雙鏈DNA分子中，C+T占堿基總數(shù)的一半，故T的數(shù)目為a-m，復(fù)制10次，相當(dāng)于新增加了210-1個(gè)DNA分子。故需補(bǔ)充T的數(shù)目為（210-1）（a-m）。（5）基因中的堿基對改變屬于基因突變。對一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，以后按正常配對方式進(jìn)行擴(kuò)增，錯(cuò)配鏈作模板擴(kuò)增的都是錯(cuò)誤的DNA分子，原正常鏈擴(kuò)增得到的DNA分子都是正常的DNA分子，故若干次后檢測所用DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占3/4

22、。答案 （1）C （2）Taq DNA聚合酶 一次 不需要 DNA模板，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，同時(shí)通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行 （3）25% （4）（210-1）（a-m） （5）基因突變 75%4.紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是 由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶 O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng) 物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白，請 回答下列有關(guān)問題： （1）血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步： 、 、 和 。 （2）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器 中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白

23、溶液。 加入檸檬酸鈉的目的是 。 以上所述的過程即是樣品處理，它包括 、 、收集血紅蛋白溶液。（3）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離。透析的目的是 。透析的原理是 。（4）然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是 。血紅蛋白有什么特點(diǎn)？ 。這一特點(diǎn)對進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？ 。解析 本題主要考查蛋白質(zhì)分離與鑒定的基本原理及實(shí)驗(yàn)流程。分離、提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)流程大致是樣品處理粗分離純化純度鑒定四個(gè)步驟。檸檬酸鈉屬于抗凝劑。血紅蛋白是紅色含鐵的蛋白質(zhì)。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)是依據(jù)蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量大小來進(jìn)行的

24、。答案 （1）樣品處理 粗分離 純化 純度鑒定（2）防止血液凝固 紅細(xì)胞的洗滌 血紅蛋白的釋放（3）去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)（4）通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去 血紅蛋白呈現(xiàn)紅色 在用凝膠色譜法分離時(shí)可以通過觀察顏色來判斷什么時(shí)期應(yīng)該收集洗脫液；這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實(shí)驗(yàn)操作5.血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成 成分，負(fù)責(zé)血液中O2和部分CO2的運(yùn)輸。請根據(jù)血 紅蛋白的提取和分離流程圖回答問題。 （1）將實(shí)驗(yàn)流程補(bǔ)充完整：A為 ，B為 。 凝膠色譜法的基本原理是根據(jù) 而達(dá)到 蛋白質(zhì)分離的有效方法。（2

25、）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除 ，洗滌次數(shù)過少，無法除去 ；離心速度過高和時(shí)間過長會(huì)使 一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是 。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是 。（3）在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液（pH為7.0）的目的是 。如果紅色區(qū)帶 ，說明色譜柱制作成功。答案 （1）血紅蛋白的釋放 樣品的加入和洗脫相對分子質(zhì)量的大小 （2）雜蛋白（血漿蛋白）血漿蛋白 白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞 離心后的上清液中沒有黃色 蒸餾水和甲苯 （3）準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)的一致 均勻一致的移動(dòng)6.請回答下列與實(shí)驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)的問題： （1）植物芳香油的提取可采用

26、的方法有壓榨法、 和 。 （2）芳香油溶解性的特點(diǎn)是不溶于 ， 易溶于 ，因此可用 作為提取劑來 提取芳香油。 （3）橘子果實(shí)含有芳香油，通常可用 作為 材料提取芳香油，而且提取時(shí)往往選用新鮮的材 料，理由是 。 （4）對材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的 固體物獲得乳狀液可采用的方法是 。（5）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時(shí)間后，芳香油將分布于液體的 層，原因是 。加入氯化鈉的作用是 。（6）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉，此劑的作用是 。答案 （1）蒸餾法 萃取法 （2）水 有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑（3）橘子皮 芳香油含量較高 （4）過濾（5）上 油層的密度比水層小 增加水層

27、密度，使油和水分層（6）吸收芳香油中殘留的水分7.閱讀以下材料，回答相關(guān)問題： 從玫瑰花中提取出的玫瑰精油被稱為“液體黃 金”，是世界香料工業(yè)不可取代的原料，多用于 制造高級香水、化妝品等。提取出的玫瑰精油不 含有任何添加劑或化學(xué)原料，是純天然的護(hù)膚 品，具有極好的抗衰老和止癢作用，能夠促進(jìn)細(xì) 胞的再生、防止肌膚老化、撫平肌膚細(xì)紋，還具 有使人放松、愉悅心情的功效。玫瑰精油的化學(xué) 性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，揮發(fā)性 較強(qiáng)。（1）根據(jù)材料中介紹的玫瑰精油的性質(zhì)，要提取玫瑰精油可以用水中蒸餾和 法提取，但一般采用水中蒸餾的方法，其原因是該法具有 的優(yōu)點(diǎn)。（2）某同學(xué)在實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)了如圖所示的裝置提取玫瑰精油，指出該裝置中的兩個(gè)錯(cuò)誤，并予以改正。錯(cuò)誤1： ；改正： 。錯(cuò)誤2： ；改正： 。（3）對用上述裝置接收到的乳濁液進(jìn)行如下處理：玫瑰油與水的混合物 分層 油層 無水玫瑰精油 較純凈的玫瑰精油。試劑A是 ，試劑C是 ，裝置B是 ，試劑C的作用是 。（4）要在短期內(nèi)獲得大量的優(yōu)良玫瑰苗可采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，請回答下列問題：要培養(yǎng)脫毒苗，應(yīng)選用 部分作為培養(yǎng)材料。利用無性繁殖技術(shù)繁殖植物的優(yōu)點(diǎn)是 。試劑A裝置B試劑C過濾解析 （1）應(yīng)根據(jù)原料特點(diǎn)來選擇提取方法