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1、 “變廢為寶” 的探險家 -分解纖維素的微生物的分離 “變廢為寶” 的探險家 -分解纖維素的微生物的分離北師大燕化附中生物組 彭伶俐我國是一個農(nóng)業(yè)大國,全國秸稈每年的產(chǎn)量達到9億多噸大豆秸稈水稻秸稈玉米秸稈秸稈焚燒露天焚燒秸稈是一種嚴(yán)重違法行為。環(huán)境保護法、大氣污染防治法、治安管理處罰法、消防法等有關(guān)法律規(guī)定,禁止露天焚燒秸稈,違者將依法處以5002000元罰款,情節(jié)嚴(yán)重的,將依法予以行政拘留;對造成他人人身、交通、火災(zāi)等安全事故,由司法機關(guān)依法嚴(yán)懲。秸稈用途“種出來” 的 生物質(zhì)能源飼料肥料能源其它纖維素是葡萄糖首尾相連的高分子化合物,是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)纖維素 纖維二糖 葡萄糖C

2、1酶CX酶葡萄糖苷酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即C1酶,Cx酶和葡萄糖苷酶纖維素酶對照組:卷煙紙 滅菌的土壤實驗組:卷煙紙 未滅菌的土壤2018年11月11日2018年11月21日結(jié)論:土壤中有分解纖維素的微生物。提出課題:從土壤中篩選分解纖維素的微生物實驗設(shè)計:如何取樣地點?方法?如何篩選設(shè)置對照?培養(yǎng)基?如何培養(yǎng)溫度?時間?移液槍錐形瓶酒精燈培養(yǎng)皿試管若干槍頭濾紙鏟子接種環(huán)涂布器如何取樣?(地點?方法?)如何篩選?(培養(yǎng)基?設(shè)置對照)如何培養(yǎng)?(溫度?時間?)如何設(shè)置培養(yǎng)條件?32恒溫培養(yǎng)箱如何設(shè)置實驗組和對照組?實驗組對照組選擇培養(yǎng)基(纖維素為碳源)涂布0.1ml菌液全營

3、養(yǎng)培養(yǎng)基(LB培養(yǎng)基)涂布0.1ml菌液(1)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。(2)纖維素分解菌能產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素,從而使菌落周圍形成透明圈。透明圈剛果紅染色法如何鑒別纖維素分解菌?土壤取樣選擇培養(yǎng)基實驗方案流程圖:該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基?目的是什么?土壤取樣選擇培養(yǎng)基梯度稀釋實驗方案流程圖:土壤取樣選擇培養(yǎng)基梯度稀釋涂布到鑒別培養(yǎng)基上實驗方案流程圖:剛果紅鑒別培養(yǎng)基的配方纖維素 5-10g酵母膏 1gKH2PO4 0.25g瓊脂 15g土豆汁 100ml剛果紅溶液 10mg/ml將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000ml。土壤取樣選擇培養(yǎng)基梯度稀釋涂布到鑒別培養(yǎng)基上挑選菌落實驗方案流程圖:視頻展示:生物興趣小組實驗過程實驗結(jié)果:透明圈剛果紅染色法鑒定纖維素分解菌先在培養(yǎng)基中加剛果紅再篩選鑒定方法一先篩選細菌再加剛果紅鑒定方法二優(yōu)缺點?缺點:有些細菌可以分解色素,也會出現(xiàn)透明圈缺點:出現(xiàn)菌落的混雜,不可分離純化動手操作:平板劃線法分離純化纖維素分解菌課題延伸(一)挑選出有透明圈的菌落一定是纖維素分解菌嗎?如何驗證?(二)土壤中篩選的菌種可以直接發(fā)酵降解秸稈,用于工業(yè)生產(chǎn)嗎?課題延伸工藝應(yīng)用:秸稈纖維素發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇根據(jù)現(xiàn)有年產(chǎn)1萬噸纖維素酶和5000噸秸稈乙醇生產(chǎn)線試運行情況來看,每生產(chǎn)1

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