同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科ISO15189體系文件06乙型肝炎表面抗原（HBsAg）定性測定

1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫組項(xiàng)目操作指導(dǎo)書TJYYJYKMY/XMZ206第2版標(biāo)題：乙型肝炎表面抗原測定（定性）第2章 第06號第 PAGE 4 頁 共 NUMPAGES 4 頁 目的：檢測血清或其它體液中的乙型肝炎表面抗原（HBSAG）。 適用范圍：同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室。 項(xiàng)目名稱：乙型肝炎表面抗原（HBSAG）（定性）測定。4. 檢測方法：酶免疫分析法。5. 檢測原理：采用單克隆抗-HBs包被反應(yīng)板，加入待測標(biāo)本，同時加入多克隆抗-HBs-HRP，當(dāng)標(biāo)本中存在HBsAg時，該HBsAg與包被抗-HBs結(jié)合并與抗-HBs-HRP結(jié)合形成抗-HBs-HBsAg-抗-HBs-HRP復(fù)合物，

2、加入TMB底物產(chǎn)生顯色反應(yīng)，反之則無顯色反應(yīng)。6. 試劑:6.1 品牌:上海實(shí)業(yè)科華生物技術(shù)有限公司。6.2 包裝規(guī)格:96人份。6.3 內(nèi)含物:每盒試劑含以下成分：6.3.1 微孔反應(yīng)條: 8孔X12 6.3.2 酶結(jié)合物：6.2mlXl瓶；6.3.3 陽性對照：1mlXl瓶；6.3.4 陰性對照：1mlXl瓶；6.3.5 洗滌液 (使用前以蒸餾水作25倍稀釋)：40mlXl瓶；6.3.6 顯色劑A：8mlXl瓶；6.3.7 顯色劑B：8mlXl瓶；6.3.8 終止液：7mlXl瓶；6.3.9 封片：2片；6.3.10說明書：1份。7 儀器品牌、型號：意大利Alisei全自動酶免分析儀。8

3、操作步驟：8.1 打印工作單:8.1.1 打開LIS電腦及打印機(jī)電源，8.1.2 雙擊齊效檢驗(yàn)系統(tǒng)，登陸工號與密碼。8.1.3 雙擊報告處理，單擊標(biāo)本申請信息，打開標(biāo)本申請明細(xì)信息查詢，打開左上角的所有信息，選擇未生成報告信息。8.1.4 在檢驗(yàn)項(xiàng)目處選擇HBSAG執(zhí)行查詢，點(diǎn)擊打印申請單，打印出工作單。8.2 排列待測標(biāo)本:根據(jù)工作單上的庫位號從標(biāo)本架中找出相應(yīng)標(biāo)本，并按工作單上的順序排列在Alisei全自動酶免分析儀的樣本架上。8.3 裝載試劑：開啟Alisei分析儀，根據(jù)待測標(biāo)本數(shù)量，點(diǎn)擊編輯工作列表，出現(xiàn)試劑及酶標(biāo)板界面。按照屏幕所示放好洗板液，洗針液，標(biāo)本試管，預(yù)稀釋管和試劑。8.4

4、 裝載酶標(biāo)板：點(diǎn)擊Alisei全自動酶免分析儀界面的裝卸反應(yīng)板按鈕進(jìn)行裝載反應(yīng)板。等所有項(xiàng)目酶標(biāo)板裝載完成后，點(diǎn)擊開始按鈕，機(jī)器開始檢測。8.5 Alisei分析儀檢測參數(shù)：試劑空 白陽性對照陰性對照標(biāo) 本質(zhì)控品單 孔雙 孔雙 孔單 孔單 孔50ul/孔酶結(jié)合物50ul/孔混勻，37，30分鐘洗滌，洗滌液350ul/孔 5次A液50ul/孔B液50ul/孔混勻，37，15分鐘終止液50ul/孔450/630nm讀取OD值8.6 儀器自動記錄OD值并可打印測定結(jié)果，同時傳入LIS中，發(fā)送報告詳見LIS中免疫報告發(fā)送程序。8.7 結(jié)果判斷：（樣品OD值）（陰性對照平均OD值）2.1判斷為陽性，否則陰性。陰性對照OD值低于0.05作0.05計(jì)算，高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。9. 參考范圍：正常人陰性。10. 臨床意義：HBsAg在HBV感染早期出現(xiàn)于患者血中，可持續(xù)數(shù)月數(shù)年，乃至終生，是診斷HBV感染最常用的指標(biāo)。11. 病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求：標(biāo)本為血清時最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。12 注意事項(xiàng)：12.1 試劑盒應(yīng)置28中保存，使用前試劑應(yīng)搖勻。12.2 試劑盒內(nèi)容物及標(biāo)本從冷藏環(huán)境中取出，在37平衡30分鐘后方可使用。12.3 待測標(biāo)本不可用NaN3防腐。12.4 結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。12.5 不同批號的試劑不可混用。12.6 手工操作時，封片