壯爾顆粒對小鼠免疫功能的影響

1、壯爾顆粒對小鼠免疫功能的影響【關(guān)鍵詞】壯爾顆粒；,免疫；,吞噬功能；,溶血素；,T淋巴細胞摘要：目的觀察壯爾顆粒對小鼠免疫功能的影響。方法采用氫化可的松造模法制作免疫抑制小鼠模型，進而觀察壯爾顆粒對其腹腔巨噬細胞吞噬功能、溶血素形成、淋巴細胞轉(zhuǎn)化的影響。結(jié)果壯爾顆粒能明顯進步正常小鼠和免疫抑制小鼠巨噬細胞吞噬百分率、吞噬指數(shù)、血清溶血素含量和淋巴細胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)論壯爾顆粒對機體免疫功能有顯著增強作用。關(guān)鍵詞：壯爾顆粒；免疫；吞噬功能；溶血素；T淋巴細胞IunpharalgialStudiesfZhuangerGranulesinieAbstratbjetiveTinvestigatetheiun

2、lgialeffetsfZhuangerGranulesinie.ethdsTheiundepressiniedelsereinduedbyinjetinfhydrrtisne.TheinfluenesfZhuangerGranulesnphagytifuntinfarphage,fratinfseruhelysin,andryphytetransfratinbthinnralanddelieerebserved.ResultsZhuangerGranulesuldbvislyineasetheratefsall,sallindex,ntentfhelysinandtransitinratef

3、lyphyte.nlusinZhuangerGranulesanarkedlyiprvetheiunity.KeyrdsZhuangerGranules;Iunity;Phagytsis;Seruhelysin;T-lyphyte壯兒顆粒由黃芪、生地、太子參等制成的中藥制劑，具有益氣養(yǎng)陰、扶正補虛之成效，臨床應(yīng)用對小兒氣陰兩虛型反復(fù)呼吸道感染RRT有很好的療效。本實驗旨在從免疫學(xué)角度對壯爾顆粒治療RRT的機制進展討論。1器材壯爾顆粒由黃芪、生地、太子參等中藥組成，3.665g生藥/g顆粒，遼寧中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院制劑中心消費，批號：040402；益氣養(yǎng)血口服液，吉林修正藥業(yè)集團通化市制藥消費，國藥

4、準字Z22023392，消費批號：20221025；氫化可的松：黑衛(wèi)藥準字1982第100267號，0.1g/20l，齊齊哈爾第二制藥廠消費，消費批號03040801。植物血凝素PHA：上海伊華醫(yī)學(xué)科技，批號：20220216。LYPUS顯效微鏡：日本產(chǎn)。恒溫枯燥箱：DH64型，上海醫(yī)療器械產(chǎn)消費。分光光度計：UV-765日本島津。游標卡尺：北京儀器廠消費。昆明種小鼠，雌雄各半，體重2026g，普通級，由遼寧中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。2方法與結(jié)果2.1分組按性別、體重隨機分成6組：正常生理鹽水對照組，正常2.0g/kg壯爾顆粒組，免疫抑制生理鹽水對照組，免疫抑制壯爾顆粒2.0g/kg低劑量組，

5、免疫抑制壯爾顆粒4.0g/kg中劑量組，免疫抑制壯爾顆粒8.0g/kg高劑量組，免疫抑制益氣養(yǎng)血口服液2.0l/kg陽性對照組，每組10只。2.2造模及給藥藥物分別配成10%，20%，40%濃度，益氣養(yǎng)血口服液使用原濃工，灌胃給藥2.0l/kg。正常生理鹽水對照組，正常給藥組連續(xù)灌胃給予生理鹽水或藥物7d，2次/d，然后各鼠均皮下注射氫化可的松2.0l/kg，1次/d，連續(xù)5d，注射氫化可的松的同時，各給藥組均繼續(xù)灌胃給予生理鹽水或藥物。2.3對小鼠腹腔巨噬功能的影響1，2正常生理鹽水對照組，正常給藥組給藥后的第5天，每鼠腹腔注射5%滅菌淀粉溶液1.0l，末次給藥后1h，每鼠腹腔注射生理鹽水1

6、.0l，1in后剪開腹壁，抽取腹腔洗液涂片；各免疫抑制組于給藥后的第6天注射滅菌淀粉溶液和RB懸液，方法和劑量均同前，2h后處死，涂片。經(jīng)孵育、染色、晾干后在油鏡下每片計數(shù)100個巨噬細胞，計數(shù)已吞噬RB的總數(shù)。按以下公式計算每鼠巨噬細胞的吞噬百分充和吞噬指數(shù)并進展組間t檢驗。結(jié)果見表1。結(jié)果顯示，壯樂顆粒對正常小鼠具有顯著增強巨噬細胞吞噬功能的作用，與正常生理鹽水對照組相比，使吞噬百分率和吞噬指數(shù)均有顯著進步，而且比擬有顯著性差異P0.05。氫化可的松可顯著抑制巨噬細胞的吞噬功能。各免疫抑制組經(jīng)壯爾顆粒防治后，被抑制的免疫功能得到顯著恢復(fù)，其吞噬百分率、吞噬指數(shù)與免疫抑制對照組相比均顯著進步

7、，而且比擬有顯著性差異P0.05或P0.01，作用呈量效關(guān)系。吞噬百分率=吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)200個巨噬細胞吞噬百分率=吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)200個巨噬細胞表1壯爾顆粒增強巨噬細胞吞噬功能作用略與正常對照組比擬，P0.05，P0.01，*與免疫抑制對照組比擬，*P0.05，*P0.01，n=102.4對小鼠血清溶血素生成的影響3正常對照組，正常給藥組連續(xù)灌胃給予生理鹽水或藥物3d后，每只小鼠腹腔內(nèi)注射0.2l綿羊紅細胞SRB，注射SRB后，再繼續(xù)給藥4d，于末次給藥后1h，眼眶采血，進展溶血素的測定；各免疫抑制組在注射氫化可的松后的第2天，注射SRB，再繼續(xù)給藥4d，末次給藥后1h，

8、眼眶采血測定血清溶血素。對給藥組動物的H50值與對照組H50組進展組間t檢驗。結(jié)果見表2。結(jié)果顯示，壯爾顆粒對正常小鼠具有顯著進步血清溶血素含量的作用，H50與正常生理鹽水對照組相比顯著進步P0.05。氫化可的松顯著抑制小鼠血清血素的生成，H50顯著降低。各免疫抑制組經(jīng)壯爾顆粒防治后H50進步，并且與免疫抑制對照組比擬有顯著性差異P0.05或P0.01，作用呈量效關(guān)系。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.表2壯爾顆粒進步血清溶血素的含量略與正常對照組比：P0.05，P0.01，*與免疫抑制對照組比：*P0.05，*P0.01，n=102.5對小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率的影響4正常生理鹽水對照組，正常給藥組第3天末次

9、給藥后1h，肌肉注射PHA6g/kg，1次/d，連續(xù)3d，注射PHA的同時繼續(xù)胃給藥，停用PHA后再灌胃給藥1d，眼眶采血推片，姬母薩瑞特氏染色。各免疫抑制組于注射氫化可的松的第2天末次給藥后，開場注射PHA，劑量和方法同前。染色后每片油鏡下計數(shù)100個淋巴細胞，計算淋巴細胞及過渡型淋巴細胞所占的百分率并進展組間t檢驗。結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，壯爾顆粒對PHA誘導(dǎo)的正常小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化具有協(xié)同促進作用，可顯著進步淋巴細胞轉(zhuǎn)化的百分率，與正常對照組比擬有顯著性差異P0.05。氫化可的松可顯著抑制PHA所誘導(dǎo)的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化，使免疫抑制對照組的淋巴細胞轉(zhuǎn)化的抑制作用，對PHA所誘導(dǎo)的淋巴細胞轉(zhuǎn)化具

10、有顯著的協(xié)同進步作用，而且與免疫抑制作用，對PHA所誘導(dǎo)的淋巴細胞轉(zhuǎn)化具有顯著的協(xié)同進步作用，而且與免疫抑制對照組比擬有顯著性差異P0.05或P0.01，作用呈量效關(guān)系。表3壯爾顆粒促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化作用略與正常對照組比擬，P0.05，P0.01，*與免疫抑制對照組比擬，*P0.05，*P0.01，n=103討論現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為免疫功能低下是RRT的主要原因。目前，有眾多臨床研究顯示：體液免疫和細胞免疫功能低下，患兒血清免疫球蛋白IgA，Ig，IgE及補體3程度低于正常；紅細胞免疫功能低下可引起RRTI5。因此，治療和預(yù)防RRT就應(yīng)該進步患兒機體的免疫功能。巨噬細胞屬機體的非特異性免疫細胞，在有異物

11、侵入的時候，從血液中釋放出巨噬細胞吞噬異物，紅細胞相對小鼠是異體抗原性物質(zhì)，當(dāng)被注入小鼠腹腔后，可引起腹腔巨噬細胞聚集并吞噬，這是一項衡量機體非特異性免疫功能的主要指標，因此可用其檢測藥物對機體防御才能的影響6。實驗中壯爾顆粒進步小鼠巨噬指數(shù)，說明壯爾顆粒具有增強機體非特異性免疫功能的作用，這種增強免疫的作用可增強機體抵抗病原微生物的功能。血清溶血素的含量是反映機體的體液免疫程度的一個可靠指標7，壯爾顆粒各組均可以顯著增高小鼠的H50含量P0.01，且呈劑量相關(guān)性，隨劑的增加H50的含量亦相應(yīng)增加，說明壯爾顆粒劑可以進步抗原誘導(dǎo)循環(huán)抗體程度，從而實現(xiàn)進步機體的體液免疫力的作用。通過淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗測定外周血中T細胞轉(zhuǎn)化率，可判斷機體的細胞免疫力功能程度，壯爾顆粒對PHA誘導(dǎo)的正常小鼠和免疫抑制小鼠的淋巴細胞轉(zhuǎn)化，均具有顯著差異性P0.05，作用呈量效關(guān)系，說明壯爾顆粒具有進步機本細胞免疫的功能。綜上所述，可以推斷壯爾顆粒對氣陰兩虛型RRT小兒的治療作用，可能是通過進步機體的非特異性和特異性免疫功能實現(xiàn)的。參考文獻：1陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：315，982，750，275，78，780，305.2呂昌龍，謝光臨.烏賊墨對小鼠免疫功能的影響J.中國海洋藥物雜志，1994，452：23