超聲波輔助提取木棉花多糖

1、超聲波輔助提取木棉花多糖超聲波輔助提取木棉花多糖木棉論文聯(lián)盟GssapinusalabariaD.err.為木棉科木棉屬植物，是華南地區(qū)特有的植物資源，主要分布于廣西、廣東、四川、貴州和云南等剩其花性味甘、淡、涼，有清熱利濕以及解暑的功能，可治腸炎、痢疾。民間多在初春時拾其落花，曬干煎水服用。用來祛風(fēng)除濕，活血消腫，散結(jié)止痛，治療胃癌、食管癌等消化道腫瘤。近年來，植物、海洋生物及菌類等來源的多糖已作為有生物活性的天然產(chǎn)物中的一個重要類型出現(xiàn)。而在菌多糖得到廣泛研究的背景下，越來越多的工作人員將目光投向植物多糖，據(jù)文獻(xiàn)報道，已有種植物多糖被別離提取出來。但對于木棉花的文獻(xiàn)報道多是研究其藥理作用，

2、而對其多糖提取工藝的研究卻鮮見報道。因此木棉花多糖的提取方法也日益成為人們關(guān)注的焦點。為了促進(jìn)中國對木棉花的開發(fā)利用，有人對木棉花化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)展了一些研究。多糖的提取方法有堿提法、水提法、微波法、酶提法和超聲波輔助提取法等。本試驗采用的是超聲波輔助提取法，它是應(yīng)用超聲波強(qiáng)化提取植物多糖的方法，是一種物理破碎過程。與常規(guī)提取法相比，超聲波輔助提取可縮短提取時間，進(jìn)步提取效率，所以超聲波輔助提取法在植物多糖的提取中得到廣泛應(yīng)用。采用苯酚硫酸法測定多糖的含量，苯酚硫酸法簡單、快速、靈敏、重現(xiàn)性好，且生成的顏色持久。用苯酚硫酸法測定多糖含量時需注意苯酚濃度不宜太高，過高濃度的苯酚會使反響的穩(wěn)定

3、性不好且易產(chǎn)生操作誤差。本試驗采用50g/L的苯酚，同時保持較高的硫酸濃度，因此該呈色反響是以對多糖的水解和糠醛反響為根底的，硫酸濃度降低會影響兩種反響的進(jìn)展。測定吸光度時所用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液與木棉花多糖都需現(xiàn)配現(xiàn)用才能保證結(jié)果的穩(wěn)定性及準(zhǔn)確性，每組需平行測定次。用紫外分光光度法測定木棉花中多糖的濃度，此方法簡單、準(zhǔn)確率高。材料與方法材料原料將木棉Gssapinusalabaria(D.)err.花去除花蕊，在左右烘干，粉碎，用石油醚回流脫脂次，次。再用體積分?jǐn)?shù)為的乙醇溶液回流提取次，次，除去單糖和低聚糖，將其烘干備用。儀器與試劑超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)上海新芝生物技術(shù)研究所寧波新芝科器研究所；精科電子

4、分析天平鄭州南北儀器設(shè)備；紫外分光光度計上海精細(xì)科學(xué)儀器；型離心機(jī)廣州廣一科學(xué)儀器；型調(diào)溫電熱套山東省鄄城永興儀器廠；循環(huán)水式真空泵鞏義市英峪予華儀器廠；傾倒式粉碎機(jī)上海定久中藥機(jī)械制造；型數(shù)顯電熱鼓風(fēng)枯燥箱上海協(xié)達(dá)計控設(shè)備公司通州醫(yī)科儀器廠；玻璃儀器氣流烘干器鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司；型氣浴恒溫振蕩器常州榮冠實驗分析儀器廠。離心管、試管、容量瓶、碘量瓶假設(shè)干；葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、鋁片、碳酸氫鈉、氯仿、正丁醇、苯酚、濃硫酸、無水乙醇、體積分?jǐn)?shù)為的乙醇溶液、石油醚均為分析純。方法多糖含量測定方法的建立葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。準(zhǔn)確稱取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品，置于容量瓶中，加去離子水溶解后稀釋至刻度，配成濃度為.1

5、23標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液備用，在使用前稀釋至葡萄糖濃度為123。苯酚溶液的制備。取苯酚，加鋁片，碳酸氫鈉，蒸餾搜集餾分，稱取此餾分，加去離子水定容至混勻，置棕色瓶中放冰箱備用。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備，。汲取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液、，分別置于具塞試管中，各加去離子水使體積為，再加5%苯酚溶液搖勻，迅速滴加濃硫酸，搖勻后放置，置沸水浴加熱，取出冷卻至室溫；以去離子水為空白，于處測吸光度表。根據(jù)所得吸光度和相應(yīng)葡萄糖濃度得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液系列濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo)作圖，結(jié)果如圖。所得回歸方程為，相關(guān)系數(shù)。式中為葡萄糖溶液的濃度，為吸光度。木棉花多糖提取工藝流程采用超聲波輔助提取木棉花多糖，根據(jù)

6、試驗設(shè)計，準(zhǔn)確稱取木棉把戲品進(jìn)展預(yù)處理平行份，放入碘量瓶中，按一定比例參加去離子水，在適宜的提取溫度和超聲波功率下超聲波輔助提取數(shù)小時，提取完畢后趁熱減壓抽濾，搜集濾液。一樣條件下，再將濾渣洗入三角瓶中二次提取，提取數(shù)次后，合并濾液，濃縮至原溶液的，參加溶液體積的高嶺土進(jìn)展脫色，論文聯(lián)盟抽濾。向濾液中參加倍體積的體積分?jǐn)?shù)為的乙醇溶液，放置過濾，離心，去除上清液，搜集沉淀。沉淀用體積分?jǐn)?shù)為的乙醇溶液洗滌，如此重復(fù)數(shù)次，直到乙醇溶液接近無色，得到的沉淀即為粗多糖。得到的粗多糖加的去離子水使其重新溶解，參加試劑正丁醇氯仿，振蕩，靜置，脫去蛋白質(zhì)，過濾，取其濾液，用去離子水溶解后定容于容量瓶中，利用苯

7、酚硫酸法測其吸光度，根據(jù)回歸方程可算出多糖得率。多糖得率，式中，為標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的葡萄糖濃度，為木棉花多糖溶液的體積，為木棉花質(zhì)量。1.2.3單因素試驗料液比對木棉花多糖得率的影響。稱取份粉碎的枯燥的木棉把戲品各，選擇超聲波功率為，提取溫度為，提取時間為，在料水質(zhì)量比分別為、下各提取次，比擬不同料液比對木棉花多糖得率的影響。提取溫度對木棉花多糖得率的影響。稱取份粉碎的枯燥的木棉把戲品各，選擇料水質(zhì)量比為，提取時間為、超聲波功率為，在提取溫度分別為、下各提取一次，比擬不同提取溫度對木棉花多糖得率的影響。超聲波功率對木棉花多糖得率的影響。稱取份粉碎的枯燥的木棉把戲品各，選擇料水質(zhì)量比為，提取溫度為

8、，提取時間為，在超聲波功率分別為、下各提取次，比擬不同超聲波功率對木棉花多糖得率的影響。提取時間對木棉花多糖得率的影響。稱取份粉碎的枯燥的木棉把戲品各，按照料水質(zhì)量比為，超聲波功率為，提取溫度為，在提取時間分別為、下提取各次，比擬不同提取時間對木棉花多糖得率的影響。提取次數(shù)對木棉花多糖得率的影響。稱取份粉碎的枯燥的木棉把戲品各，選擇料水質(zhì)量比為、提取溫度為、提取時間為、超聲波功率為，分別提取次，研究多糖提取次數(shù)對木棉花多糖得率的影響。正交試驗影響超聲波輔助提取法的主要因素有超聲波功率、提取時間、提取溫度、提取次數(shù)、料水質(zhì)量比等因素，通過單因素試驗結(jié)果分析得出，提取次數(shù)雖然會對多糖得率有所影響，

9、隨著提取次數(shù)的增加多糖得率自然而然會增大，但考慮到回收轉(zhuǎn)移較困難，加上濃縮的本錢較高、操作時間過久，所以在單因素試驗的根底上，選擇超聲波功率、料水質(zhì)量比、提取溫度、提取時間這個因素作為考察對象，并結(jié)合消費實際，每因素選取個程度表，以多糖得率為指標(biāo)進(jìn)展正交試驗，優(yōu)選最正確工藝。結(jié)果與分析單因素試驗結(jié)果分析料水質(zhì)量比對木棉花多糖得率的影響從圖可以看出，在料水質(zhì)量比從變到時，木棉花的多糖得率增加比擬快，在料水質(zhì)量比為時木棉花的多糖得率到達(dá)最大。提取多糖時料水質(zhì)量比太大，提取不完全；料水質(zhì)量比太小，回收、過濾、轉(zhuǎn)移困難，造成浪費，并且后期濃縮本錢高。本試驗結(jié)果顯示，料水質(zhì)量比為時提取多糖較為充分，效果

10、較好。提取溫度對木棉花多糖得率的影響由圖可以看出，當(dāng)提取溫度為時，多糖得率最高。當(dāng)提取溫度小于時，因為其提取溫度不夠，導(dǎo)致多糖未能完全被提取出來，所以多糖得率隨提取溫度的升高而增加，當(dāng)提取溫度大于時，由于提取溫度較高，局部多糖被降解或破壞，因此多糖得率開場下降。超聲波功率對木棉花多糖得率的影響從圖可以看出，木棉花多糖得率先是隨著超聲波功率的增加而增大，超聲波功率為時多糖得率最大。隨著超聲波功率的加大，超聲波的熱效應(yīng)可以快速地提升提取液的溫度，有利于待提物質(zhì)擴(kuò)散到溶劑中，而且超聲波具有穿透特性，使木棉花細(xì)胞破壁，讓水易浸入，多糖有效成分容易浸出。但當(dāng)超聲波功率大于時，多糖得率開場降低。一方面可能

11、由于超聲波功率過高，提取液較長時間處于高溫條件下，對多糖會產(chǎn)生一定的降解作用。另一方面，無限制的增加超聲波功率，導(dǎo)致空化泡在聲波中壓縮相內(nèi)來不及發(fā)生破裂，破壞細(xì)胞壁構(gòu)造這一過程不夠完全，從而不利于提取，導(dǎo)致多糖得率減少。由于超聲波功率為的多糖得率增幅不大，因此，本試驗認(rèn)為超聲波功率為效果較好。從經(jīng)濟(jì)學(xué)角度選擇超聲波功率為。論文聯(lián)盟提取時間對木棉花多糖得率的影響根據(jù)圖可知，超聲波輔助提取時多糖得率是最高的，提取時間小于，多糖提取不充分，提取時間大于，隨著提取時間的延長，多糖得率逐漸降低，可能與較高溫度下提取時間過長導(dǎo)致多糖降解有關(guān)。提取次數(shù)對木棉花多糖得率的影響由圖可以看出，木棉花的多糖得率隨提

12、取次數(shù)的增加而增大，但是增幅不大。因此，本試驗認(rèn)為提取次已經(jīng)較充分，效果較好。正交試驗結(jié)果分析從表的極差值分析可知，多糖提取條件因素的主次順序為，即提取溫度超聲波功率料水質(zhì)量比提取時間。根據(jù)最優(yōu)程度確定最正確的超聲波輔助提取木棉花多糖工藝條件為，即料水質(zhì)量比、提取溫度、超聲波功率、提取時間。由于該組合未出如今試驗中，需要測定該條件下木棉花的多糖得率，經(jīng)測定，木棉花在該條件下的多糖得率到達(dá)，高于正交試驗中出現(xiàn)的最高得率，說明正交試驗確定的最正確超聲波輔助提取工藝條件是合理的。結(jié)論以水作為提取劑，采用超聲波輔助提取木棉花中可溶性多糖具有平安快速的特點。本試驗從木棉花中提取木棉花多糖，并確定了木棉花多糖的最優(yōu)提取工藝條件。研究結(jié)果說明，影響木棉花多糖提取的主要因素分別是提取溫度、提取時間、超聲波功率和料液比，其次序為提取溫度超聲波功率料液比提取時間。超聲波輔助提取木棉花多糖的最正確工藝條件為料水質(zhì)量比、提取溫度、超聲波功率、提取時間、提取2次。在此工藝條件下，木棉花的多糖得率高達(dá)。參考文獻(xiàn)：1王輝，唐慧娟木棉花多糖含量的初步測定廣州化工，：2許燕燕植物多糖的提取方法和工藝福建水產(chǎn)，：李小平紅棗多糖提取工藝研究及其生物功能初探西安：陜西師范大學(xué)，董群改進(jìn)的苯酚