多囊卵巢綜合征患者顆粒細(xì)胞中抑制素亞基及卵泡抑素mRNA的表達(dá)意

1、多囊卵巢綜合征患者顆粒細(xì)胞中抑制素亞基及卵泡抑素mRNA的表達(dá)意【關(guān)鍵詞】多囊卵巢綜合征；抑制素；卵泡抑素【Keyrds】Plyystivarysyndre;Inhibin;Fllistatin抑制素和卵泡抑素是重要的糖蛋白激素，研究發(fā)現(xiàn)，通過部分的自分泌或旁分泌作用調(diào)節(jié)卵巢功能。它們與多囊卵巢綜合征(PS)關(guān)系的研究也越來越受到人們的重視。本文通過測定PS患者與正常婦女顆粒細(xì)胞中inhibin(INH)、inhibinA(INHA)、inhibinB(INHB)亞基、FS315及FS288的表達(dá)程度，討論它們與PS發(fā)病的關(guān)系。1資料和方法1.1研究對象PS組：選擇2022年10月2022年8

2、月在鹽城市第一人民醫(yī)院就診的PS患者20名，共79個經(jīng)陰道穿刺抽吸的卵泡，平均直徑7.1(5.09.1)；年齡(29.311.8)歲；本組患者在其他方面均安康，實驗前3個月未服藥，每年月經(jīng)少于7次，每位患者都經(jīng)至少2次B超和10次采血證實其缺乏卵泡成熟和月經(jīng)的周期性。對照組：同期就診的無內(nèi)分泌因素體外授精(IVF)不孕患者30名，年齡(28.19.4)歲，共91個經(jīng)陰道穿刺抽吸的自然成熟的卵泡，平均直徑12.9(6.423)。該組受試者月經(jīng)周期2632d，研究前3個月未服藥物，公二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、促黃體激素(LH)、睪酮(T)、促甲狀腺激素(TSH)、泌乳素(PRL)程度及體

3、格檢查正常，在一個完好的月經(jīng)周期內(nèi)抽血，超聲監(jiān)視卵泡生長，汲取任一側(cè)卵巢的優(yōu)勢卵泡。兩組研究對象年齡比擬差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。1.2標(biāo)本采集和檢測1.2.2RNA抽提以TRIzl法抽提顆粒細(xì)胞RNA，RNA在1015l的焦碳酸二乙酯水溶液中，5l的RNA以去氧核糖核酸酶(BRL生物公司)在10l的反響體系中處理15in，然后用100U的Supersript(BRL生物公司)，在21.5l的反響體系中42反轉(zhuǎn)錄50in，參加核糖核酸酶H(1.5U,BRL公司)，樣本在37孵化20in，直至酶滅活，在PR前逆轉(zhuǎn)錄反響以110水稀釋。2統(tǒng)計學(xué)處理所得數(shù)據(jù)以s表示，使用SPSS15.0統(tǒng)計軟

4、件包進(jìn)展t檢驗，Spearan相關(guān)性分析。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.3結(jié)果兩組婦女顆粒細(xì)胞中INH、INHA、INHB亞基、FS315及FS288的相對表達(dá)程度分別見表2，兩組各項指標(biāo)相比均有顯著差異，PS患者上述指標(biāo)均顯著升高。正常婦女體內(nèi)，顆粒細(xì)胞亞基RNA程度和卵泡直徑正相關(guān)(r=0.56;P0.01)。顆粒細(xì)胞INHA亞基和卵泡直徑正相關(guān)(r表1INH的亞基、A、B亞基、FS288、FS315RNA的上下游引物及預(yù)期產(chǎn)物長度=0.45;P=0.05)。且和亞基RNA程度正相關(guān)(r=0.91;P0.001)。而B亞基RNA程度與卵泡直徑無相關(guān)性。B亞基RNA程度較A亞基RNA程度低10倍。在

5、PS患者中，顆粒細(xì)胞INH、INHA、INHB亞基RNA程度，F(xiàn)S315及FS288RNA程度與卵泡直徑無相關(guān)性。無論正常婦女還是PS者的卵泡中，這兩種轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物自身都高度相關(guān)(r=0.85;P0.001和r=0.99;P0.001)。另外，正常婦女和PS者FS315/FS288的比率一樣(平均2.981.2和2.901.2)，并不因卵泡直徑而改變，見表2及圖1。表2INH、INHA、INHB、FS315、FS288在卵巢顆粒細(xì)胞中的表達(dá)程度(灰度值比)注：與對照組比擬，*P0.01；與對照組比擬，*P0.054討論4.2顆粒細(xì)胞中INH和FS對卵泡生長的調(diào)節(jié)INH是重要的調(diào)節(jié)蛋白，INH對垂體

6、合成及釋放FSH產(chǎn)生負(fù)反響作用，并能直接刺激卵泡膜細(xì)胞合成雄激素。動物實驗證實，生長卵泡中的INH對垂體分泌FSH產(chǎn)生降調(diào)節(jié)作用2。PS患者往往存在多個竇狀卵泡同時發(fā)育，而INH主要由竇狀卵泡的顆粒細(xì)胞分泌3。垂體細(xì)胞培養(yǎng)液中INHA和對FSHB的合成分泌也有負(fù)調(diào)節(jié)作用，這種負(fù)反響作用在人和靈長類動物體內(nèi)已得到直接證實4。在恒河猴卵泡期和黃體期，抑制素抑制FSH的合成分泌，對E2調(diào)控是獨立的。抑制素通過旁分泌刺激LH產(chǎn)生，間接使卵泡內(nèi)膜細(xì)胞合成雄激素增多。在本研究中，我們觀察到隨著卵泡生長，和A亞基RNA程度逐步升高。相反，B亞基RNA程度與卵泡生長成熟無關(guān)，這支持一種理論，即INH的和A亞基

7、在卵泡的生長發(fā)育中確實起著很關(guān)鍵的作用：在PS患者，卵泡顆粒細(xì)胞分泌的INH增多，通過降調(diào)節(jié)抑制了FSH的分泌，從而又阻礙了卵泡的進(jìn)一步發(fā)育成熟，并且增多的INH刺激卵泡膜細(xì)胞合成了過多的雄激素，直接抑制卵泡生長。所以在PS患者，增高的INH影響卵泡發(fā)育成熟，導(dǎo)致不排卵。而在正常女性，顆粒細(xì)胞分泌的INH還缺乏以產(chǎn)生對FSH的降調(diào)節(jié)作用，所以它的卵泡發(fā)育不受影響。我們還發(fā)現(xiàn)，正常婦女體內(nèi)，顆粒細(xì)胞亞基和A亞基RNA程度均和卵泡直徑及成熟度正相關(guān)，而B亞基RNA程度與卵泡直徑及成熟度均無相關(guān)性，B亞基RNA程度較A亞基RNA程度低10倍，說明INHA不是影響顆粒細(xì)胞功能的主要激素。在PS患者上述的相關(guān)性不存在，也說明在PS患者和A亞基RNA功能有缺陷。FS能直接抑制垂體前葉細(xì)胞分泌FSH，還能作為特異性結(jié)合蛋白與激活素不可逆性結(jié)合并使之失活，間接抑制FSH分泌，降低體內(nèi)雌激素程度5。在卵巢中FS及其RNA存在于顆粒細(xì)胞和黃體細(xì)胞，其他類型細(xì)胞中未見表達(dá)。FSRNA在卵巢中的表達(dá)隨月經(jīng)周期改變。在排卵前2d出現(xiàn)血FS峰值,提示FS可能與排卵時性腺軸調(diào)節(jié)有關(guān)。在大鼠動情周期中FS變化早于孕酮且兩者變化相似，說明FS可能參與動情周期中孕酮的