實驗 1光學顯微鏡與洋蔥表皮細胞的觀察

1、實驗1光學顯微鏡的使用方法與植物細胞的觀察一、實驗目的1、了解光學顯微鏡的一般構造和性能；2、學會正確地使用光學顯微鏡，熟練地掌握對光，低高倍物鏡的使用技術，以及顯微 鏡的維護；3、學會臨時裝片的制作；4、掌握植物細胞的結構，并了解每一結構的特征及功能二、實驗內容1、光學顯微鏡的構造、使用方法及維護；2、臨時裝片的制作及徒手切片的練習；三、實驗材料洋蔥（Allium ceph鱗片葉四、實驗用品普通光學顯微鏡；鑷子、載玻片、蓋玻片、滴管、培養(yǎng)皿、紗布、吸水紙、擦鏡紙； 碘液、水。五、實驗方法（一）普通光學顯微鏡的構造、使用方法及維護1、顯微鏡的構造顯微鏡的基本結構可以分兩部分，即光學部分與機械部

2、分。（1）光學部分物鏡、目鏡、聚光器、光圈、反光鏡、鏡筒（2）機械部分鏡座、鏡柱、鏡臂、載物臺、物鏡轉換器、調焦螺旋2、顯微鏡的使用方法（1）把顯微鏡放在桌上，稍偏向身體的左方，離桌子邊緣約5厘米的位置，右側放記錄 本或繪圖紙等。（2）在使用顯微鏡觀察切片前，首先要調節(jié)好光源。在實驗室中可利用燈光或自然光， 但不能利用直射的太陽光，以免損傷眼睛及制片。為了迅速而正確地對光，先用低倍鏡（這里指的是10X物鏡），開大光圈，在目鏡上觀察 和轉動反光鏡，尋找最光亮的部分，同時必須使整個視野（就是在顯微鏡中所能看到的 范圍）的光線均勻。如果靠近燈光，可取凹面的反光鏡，如果離光源較遠，可用平面的 反光鏡。

3、（3）把制片（切片）放在顯微鏡的鏡臺上，把需要觀察的部分移到物鏡下面，然后用壓 片夾壓緊。（4）通過目鏡進行觀察，觀察時應睜開雙眼，用左眼看目鏡。（5）在開始觀察時，為避免物鏡壓壞制片，可以先從側面注視物鏡與制片間的距離，同 時逐漸降落鏡筒，使之靠近蓋玻片，然后通過目鏡觀察，慢慢轉動粗調節(jié)器，使鏡筒逐 漸上升，直到看清制片中的影像為止。（6）需要觀察制片中某一部分的細微結構時，可先在低倍鏡下找到最合適的地方，并將 其移到視野的中央，然后轉動鏡頭轉換器，轉用高倍鏡(40X)觀察。當換到高倍鏡后， 應該就可以看到制片中的影像，如果不太清楚，可以轉動細準焦螺旋使影像清晰可見。 7)用畢擦洗載物臺、復

4、原3、顯微鏡的放大倍數目鏡的放大倍數X物鏡的放大倍數4、顯微鏡的維護使用顯微鏡過程中要注意以下幾個問題：(1)自顯微鏡柜中取出顯微鏡時，要用右手握住執(zhí)手，左手托住鏡座，小心地放到桌面 上，不可單手拎著移動。任何旋鈕轉動有困難時，絕不能用力過大，而應查明原因，排除障礙。如果自己不 能解決時，要向指導教師說明，幫助解決。保持顯微鏡的清潔，盡量避免灰塵落到鏡頭上，否則容易磨損鏡頭。同時要盡量避 免試劑或溶液滴到顯微鏡上，特別是用高倍物鏡觀察時，鏡頭很容易被染料或試劑沾污， 一旦被沾污，應立即用擦鏡紙擦拭干凈。由于光學玻璃比一般玻璃的硬度小，易于損傷。因此擦拭光學透鏡只能用專用的擦鏡 紙，不能用棉花、

5、棉布或其它物品擦拭。擦時要先將擦鏡紙折疊為幾折，從一個方向輕 輕擦拭鏡頭，每擦一次，擦鏡紙就要折疊一次，以免沾在擦鏡紙上的灰塵損傷透鏡，使 鏡面出現一條條的劃痕。每次實驗結束時，應將物鏡轉成“八”字形垂于鏡筒下，然后降下鏡筒，避免物鏡 鏡頭下落時與聚光器相碰撞。顯微鏡應存放于陰涼干燥的地方，若放在潮濕處，一旦鏡 片上著生霉菌，就會腐蝕鏡片，且很難除去。顯微鏡的存放要做到四防：防潮、防腐、防熱、防撞擊。臨時裝片的制作(1)準備、(2)取材、(3)蓋上蓋玻片、(4)染色、(5)觀察(1)準備用潔凈的紗布把載玻片和蓋玻片擦拭干凈擦拭玻片時要注意用左手的拇指和食指 夾住玻片的兩端，右手的拇指和食指襯墊

6、上潔凈的紗布后，夾在玻片兩面，同時擦拭，以 防將玻片損壞。然后，在載玻片中央滴一滴清水。取材用刀子將洋蔥每隔5mm縱切成條形狀，然后用解剖刀將條形狀的鱗片葉內表皮切為5 X5mm左右的方塊狀，再用鑷子撕下正方形內表皮。把表皮平鋪在載玻片的水滴中。蓋上蓋玻片蓋玻片與載玻片成45度角，將蓋玻片的一邊先接觸液滴，另一邊緩慢的蓋下去染色在蓋玻片的一側滴一滴碘液，用吸水紙在蓋玻片的另一側用吸水紙吸水，使材料染色， 染色時間可以稍微長一點，染色效果更好。5）觀察用吸水紙把臨時裝片底部的水擦干，放到顯微鏡的載物臺上，用壓片夾壓好，開始觀察。（三）植物細胞結構的觀察1、植物細胞基本結構的觀察用鑷子撕取一小塊洋蔥鱗片葉內表皮，制作成臨時裝片，置顯微鏡下觀察。先用低 倍物鏡觀察細胞的形狀和排列方式，再在高倍物鏡下觀察細胞的結構。（1）細胞壁、（2）細胞質、（3）細胞核為什么在顯微鏡下看不到細胞膜？要想觀察細胞膜應對細胞做如何