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1、關(guān)于高中生物選修人教版動(dòng)物細(xì)胞工程 (2)第一張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用技術(shù)胚胎移植技術(shù)第二張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.過(guò)程:第三張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液細(xì)胞株細(xì)胞系(一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞增值無(wú)限傳代去掉組織間蛋白動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體細(xì)胞貼壁原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶第四張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無(wú)限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系如何界定原
2、代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)?(一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)多數(shù)組織細(xì)胞固定在表面生長(zhǎng)和分裂。隨細(xì)胞增多,細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖遺傳物質(zhì)改變第五張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、有關(guān)概念原代培養(yǎng):從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng):將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出,配制成細(xì)胞懸浮液,分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。第六張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、有關(guān)概念細(xì)胞株:原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞存活到4050代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系:細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)
3、停滯狀態(tài),只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別: 細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變,具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。第七張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件1。無(wú)菌、無(wú)毒2。營(yíng)養(yǎng):葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、微量元素和動(dòng)物血清等。3。溫度:36.5+0.54。PH=7.27.45。氣體環(huán)境:O2和CO2(95%空氣+5%CO2)第八張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月思考:2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料?1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組培
4、培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處?3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞?4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體?主要成分:葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有:1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛,分裂能力強(qiáng)成塊組織不利培養(yǎng),分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體第九張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月獲得細(xì)胞細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體培養(yǎng)結(jié)果或細(xì)胞分泌蛋白快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動(dòng)物血清促生長(zhǎng)因子蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培
5、養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較第十張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月4. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用()大規(guī)模生產(chǎn)有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)生物制品。()解決為大面積燒傷病人移植皮膚問(wèn)題。(利用貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制原理)()檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)毒性。()培養(yǎng)正?;虿∽兗?xì)胞,用于科研。如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體第十一張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1.動(dòng)物核移植(1)概念:將供體體細(xì)胞的_與受體去核卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行_,借助于_的發(fā)育能力,經(jīng)過(guò)培養(yǎng)發(fā)育成胚胎進(jìn)而形成_的技術(shù)。(2)關(guān)鍵技術(shù):_技術(shù)。細(xì)胞核人工
6、組合卵細(xì)胞個(gè)體細(xì)胞核移植第十二張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(3)哺乳動(dòng)物核移植可以分為_(kāi)核移植(比較容易)和_核移植(比較難)。(4)選用去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比較_,容易操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)_,營(yíng)養(yǎng)豐富。胚胎細(xì)胞體細(xì)胞大多第十三張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第十四張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月多莉羊的培育過(guò)程1、誰(shuí)是“多莉”的母親?2、“多莉羊”是雄還是雌?3、是否符合孟德?tīng)栠z傳?問(wèn)題卵細(xì)胞C母綿羊子宮母綿羊母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細(xì)胞細(xì)胞拆合技術(shù)妊娠第十
7、五張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第十六張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第十七張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育;保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)量;生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白;作為異種移植的供體;用于組織器官的移植等。3、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題克隆動(dòng)物存在著健康問(wèn)題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。第十八張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體第十九張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞滅活的病毒物理法化學(xué)法仙臺(tái)病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒 (三)動(dòng)物細(xì)胞融合2、過(guò)程:1、概念
8、:“2個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞”“1”、“雜交單核細(xì)胞”第二十張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程細(xì)胞核病毒顆粒細(xì)胞核思考討論:為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活?病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開(kāi),細(xì)胞發(fā)生融合。滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力,但并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。第二十一張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了_雜交的不親合性,成為研究細(xì)胞_、_、腫瘤和生物_培育的重要手段。4、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交
9、的比較遠(yuǎn)緣遺傳細(xì)胞免疫新品種第二十二張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法(同左)滅活的病毒物理(離心、振蕩、電刺激)化學(xué)(聚乙二醇)誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較第二十三張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(四)單克隆抗體1、什么是抗體?其本質(zhì)是什么? 2、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么?抗體是從何來(lái)的? B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。3、B淋巴細(xì)胞有什么特點(diǎn)? 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、
10、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。第二十四張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月B淋巴細(xì)胞與抗體B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,可以產(chǎn)生抗體。動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體,每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。第二十五張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體 由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖(克?。?,形成基因型相同的細(xì)胞群,這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。 特點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高 第二十六張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月如何大量生產(chǎn)單克隆抗體?利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細(xì)胞無(wú)
11、限增殖的特性利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞第二十七張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 單克隆抗體制備過(guò)程 注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體第二十八張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月思考:1、本過(guò)程利用了哪些原理?免疫原理,細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合?這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞,繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì),不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力,而且還有無(wú)限增殖的本
12、領(lǐng),因而可以獲得大量單克隆抗體第二十九張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(1)為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合?(小鼠骨髓瘤細(xì)胞可以在體外培養(yǎng)條件下大量增殖,B淋巴細(xì)胞能夠產(chǎn)生抗體,細(xì)胞的同源性越近,融合形成的雜種細(xì)胞越易成活。)(2)骨髓瘤細(xì)胞是癌細(xì)胞嗎?(有無(wú)限增殖能力(失去凋亡機(jī)制,失去接觸抑制等)的細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞,而具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細(xì)胞,稱為癌細(xì)胞,所以說(shuō),瘤細(xì)胞不能等于癌細(xì)胞。)第三十張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(3)整個(gè)制備過(guò)程為何要經(jīng)過(guò)兩次篩選?(第一次篩選得到雜交瘤細(xì)胞(多種),第二次需先在多孔培養(yǎng)板上,在每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始培養(yǎng),
13、然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆得來(lái)的,所以產(chǎn)生的抗體必然是化學(xué)性質(zhì)單一的,特異性強(qiáng)的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個(gè)細(xì)胞克隆的含義,只不過(guò)克隆的不是B淋巴細(xì)胞,而是雜交瘤細(xì)胞。) 第三十一張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的應(yīng)用與常規(guī)抗體相比,單克隆抗體產(chǎn)量高,特異性強(qiáng),靈敏度高,優(yōu)越性十分明顯。應(yīng)用主要有:1、臨床診斷2、作為載體,運(yùn)載抗癌藥物,形成“生物導(dǎo)彈”治療腫瘤資料:目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病,用單克隆抗體作為診斷手段,是一個(gè)必然趨勢(shì)。另外,
14、用單克隆抗體做體內(nèi)診斷,借以鑒別和定位體內(nèi)“病灶”也引起人們的注意,目前,主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。生物導(dǎo)彈:?jiǎn)慰寺】贵w作為載體分子,同抗癌藥物相結(jié)合,將他們運(yùn)載到腫瘤部位,殺死癌細(xì)胞,這種抗體藥物結(jié)合物稱之為生物導(dǎo)彈。它能定向殺滅癌細(xì)胞,避免或減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,大大減輕了抗癌藥物的副作用。第三十二張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月小結(jié)一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法-滅活的病毒一種新細(xì)胞-雜交瘤細(xì)胞一種優(yōu)勢(shì)-單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高第三十三張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三十四張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三十五張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三十六張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三十七張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月1.動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是:()A動(dòng)物細(xì)胞融合B胚胎移植C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)D核移植教學(xué)目標(biāo)鞏固第三十八張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中,正確的是()A結(jié)果是相同的B雜種細(xì)胞的形成過(guò)程基本相同C操作過(guò)程中酶的作用相同D誘導(dǎo)融合的手段相同教學(xué)目標(biāo)鞏固第三十九張,PPT共四十三頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月
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