高效液相色譜法測定骨康口服液中補骨脂素和異補骨脂素的含量

1、高效液相色譜法測定骨康口服液中補骨脂素和異補骨脂素的含量鐘鏡金黃曉其龍彥綱曾惠芳蘇子仁【摘要】目的創(chuàng)立骨康口服液中有用身分的含量測定要領。要領接納HPL法測定骨康口服液中有用身分含量。結果補骨脂素和異補骨脂素兩種身分均到達精良分散，在測定范疇內線性精良，接納率均在99%101%之間。結論所創(chuàng)立的定量要領輕便可行、重復性好，可作為骨康口服液的質量監(jiān)控?！娟P鍵詞】骨康口服液補骨脂素異補骨脂素高效液相色譜法Keyrds:GukangralLiquid;Psralen;Ispsralen;HPL骨康口服液由補骨脂、淫羊藿、肉蓯蓉、白芍、黃芪等10味藥材構成，具有補腎壯骨，活血通絡，健脾益氣的成果，臨床

2、上重要用于治療婦女更年期引起的骨質疏松癥。骨康口服液復方共煎，有利于補骨脂素與異補骨脂素的煎出1,2，故接納水提醇沉工藝制備3。鑒于補骨脂素、異補骨脂素可彼此轉化4,2，原尺度接納TLS法測定補骨脂素、異補骨脂素兩者的總量5。但TLS法變異大，應選用HPL法同時測定骨康口服液中補骨脂素與異補骨脂素的含量。現將研究結果報道如下：1儀器與試藥DINEXSUIT高效液相色譜儀PDA-100檢測器、STH585柱溫箱、P680HPL泵、ASI-100主動進樣器,hrelen色譜事情站；補骨脂素供含量測定用，110739-202209、異補骨脂素(供含量測定用，110738-202210)，均由中國藥品

3、生物成品檢定所提供；骨康口服液批號：20221009，20221012，20221015，由廣州中醫(yī)藥大學新藥開拓研究中央提供；乙腈為色譜純erk，1192230其他試劑均為闡發(fā)純。2要領與結果2.1色譜條件色譜柱：Phenenexluna18柱(2504.60，5)；活動相：以乙腈為活動相A，以0.1%冰醋酸為活動相B，按表1中的劃定舉行梯度洗脫；檢測波長：246n；流速：1.0lin-1；柱溫：25；進樣量：10l；理論塔板數均不低于3000。2.2溶液的制備細密稱取補骨脂素、異補骨脂素比較品適量，別離置25l量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，以此作為比較品儲藏液。細密汲取上述各比較品

4、儲藏液適量，加甲醇制成每毫升含補骨脂素35g，異補骨脂素44g的混淆溶液，搖勻即得。取本品10支，混勻，細密汲取藥液10l，加乙醚提取4次，10l/次，分取乙醚層，60揮干乙醚,用甲醇溶解殘渣，并轉移至5l容量瓶中，用甲醇加至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。2.3線性干系觀察細密汲取比較品溶液2，4，6，8，10，14l舉行色譜測定，按上述色譜條件測定峰面積，并以峰面積Y對進樣量X舉行回歸，補骨脂素在70490ng范疇內呈精良線性干系，異補骨脂素在88616ng范疇內呈精良線性干系，回歸方程別離為：補骨脂素：Y=8224.5X-48.1326,r=0.9999；異補骨脂素：Y=7371.7X-

5、52.4752,r=0.9999。2.4細密度實行細密汲取上述補骨脂素和異補骨脂素比較品溶液10l一連進樣5次，測得峰面積積分均勻值補骨脂素為3211.929，RSD為0.07%；異補骨脂素為3676.707，RSD為0.16%，表白闡發(fā)要領細密度精良。2.5重復性實行根據制定的含量測定要領，對同一批樣品批號：20221009制備供試品溶液，平行操縱6份，結果測得補骨脂素均勻含量為0.075gg-1，RSD為2.39%；異補骨脂素均勻含量為0.072gg-1，RSD為2.54%，表白本測定要領具有較好的重復性。2.6不變性實行細密汲取同一供試品溶液10l，在0，2，4，8，12h別離進樣，記載

6、峰面積并盤算RSD，結果：補骨脂素均勻峰面積為1330.393，RSD為0.46%；異補骨脂素均勻峰面積為1056.411，RSD為1.6%，表白樣品中補骨脂素和異補骨脂素在12h內不變。2.7專屬性實行取供試品溶液、比較品溶液、陰性比較溶液,按本色譜條件各進樣10l。結果見圖1。結果表現，在本色譜條件下,陰性比較無滋擾。2.8加樣接納率實行細密汲取含量的同一批樣品2022100910l，別離細密參加必然量的補骨脂素比較品和異補骨脂素比較品，按供試品溶液制備要領制備并測定，按公式接納率P(%)=(測得量-參加量)/樣品量100%盤算接納率。結果見表2。表白本要領具有精良的接納率。表1骨康口服液

7、中補骨脂素、異補骨脂素的HPL測定梯度洗脫條件略表2加樣接納率實行結果略表3樣品中補骨脂素、異補骨脂素含量測定結果略2.9樣品測定取骨康口服液3批,照上述要領處置懲罰后測定,記載峰面積,代入回歸方程盤算樣品中補骨脂素和異補骨脂素的含量。結果見表3。3討論3.1提取溶媒的選擇本品處方由多味中藥構成，且由水煎煮濃縮制得，活性身分多，極性強，影響區(qū)分的滋擾因素較多。筆者曾用水直接稀釋樣品進樣闡發(fā)，結果雜質峰較多，分散結果差。思量到補骨脂素與異補骨脂素為呋喃香豆素類身分，因此接納乙醚提齲實行結果表白，該法可使樣品中的補骨脂素與異補骨脂素提取完全。3.2活動相的選擇如今?中國藥典?2022年版和文獻報道

8、中HPL法測定補骨脂素與異補骨脂素大多接納甲醇-水體系69，但顛末實行創(chuàng)造，這些體系均不實用于該制劑的闡發(fā)，本文選用乙腈-0.1%醋酸溶液梯度洗脫，可以同時測定補骨脂素與異補骨脂素的含量，且得到較好的分散結果，且峰形更佳。本法操縱輕便，細密度高，重現性好，是操縱骨康口服液內涵質量的有用要領。【參考文獻】1蘇子仁,劉慶思,徐必達,等.方藥配伍對溫補腎陽方君藥補骨脂素、異補骨脂素煎出的影響J.中國實行方劑學雜志,1996,2(5):8.2蘇子仁，徐必達，劉慶思，等.磷脂對骨康方補骨脂素、異補骨脂素煎出增溶作用探究J.中國實行方劑學雜志,1997,3(3):5.3吳雪茹，蘇子仁，施佳平，等.骨康口服液工藝優(yōu)化研究J.中成藥,1999,21(5)：218.4蘇子仁，徐必達，劉慶思.補骨脂素、異補骨脂素在骨康提取精制歷程中化學轉化的研究J.中國實行方劑學雜志，1997，3(6)：1.5曾惠芳,蘇子仁,劉慶思.骨康口服液中補骨脂素,異補骨脂素的含量測定J.中藥新藥與臨床藥理，1999,10(4)：237.6國度藥典委員會.中國藥典，部S.北京：化學產業(yè)出書社，2022：129,229,577.7陸蓓,吳韶銘.HPL法測定益腎靈顆粒中補骨脂素和異補骨