長(zhǎng)葉胡頹子對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎作用的研究

1、長(zhǎng)葉胡頹子對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎作用的研究【關(guān)鍵詞】長(zhǎng)葉胡頹子；,抗氧作用；,結(jié)腸炎摘要：目的研究長(zhǎng)葉胡頹子果實(shí)提取物對(duì)大鼠結(jié)腸炎損傷的保護(hù)作用。方法建立大鼠結(jié)腸炎模型，灌腸用藥2周后，評(píng)價(jià)大鼠結(jié)腸黏膜損傷指數(shù)DI，檢測(cè)結(jié)腸髓過氧化物酶P、超氧化物歧化酶SD、谷胱甘肽過氧化物酶GSHPX活性及丙二醛DA的含量。結(jié)果長(zhǎng)葉胡頹子果實(shí)提取物300，500，1000g/kg灌胃用藥均能不同程度降低模型大鼠結(jié)腸損傷指數(shù)和P活性、減少DA含量，進(jìn)步SD，GSHPX活性，且與用藥劑量呈一定量效關(guān)系。結(jié)論長(zhǎng)葉胡頹子通過抗脂質(zhì)過氧化，對(duì)大鼠結(jié)腸炎結(jié)腸損傷進(jìn)展修復(fù)，減輕結(jié)腸損傷，抑制結(jié)腸炎大鼠炎癥反響。關(guān)鍵詞：長(zhǎng)葉胡

2、頹子；抗氧作用；結(jié)腸炎StudyntheEffetsfElaeagnusbkiiDielsntheExperientallnitisinRatsAbstrat:bjetiveTstudytheprteteffetfElaeagnusbkiDielsaterextratnlnitisinrats.ethdsRatlnitisdelasestablished.ElaeagnusbkiDielsasusedbylysterneaday.Afterteeks,thelnussdaageindexDIasevaluated.TheativityfP,GSHPX,SDandthelevelsfDAinth

3、elnereeasured.ResultsElaeagnusbkiiDielsaterextrat(300,500,1000g/kg)dereasedtheativityfDI,PandthelevelsfDA,inreasedtheativityfSD,GSHPXindelrats.nlusinTreatentithElaeagnusbkiiDielsanalleviatethelninjuryinlnitisrats,byeliinatingxygenfreeradialandrepairingund.Keyrds:ElaeagnusbkiiDiels;Antixidatin;lnitis

4、胡頹子屬在全球約有80余種1，長(zhǎng)葉胡頹子ElaeagnusbkiiDiels是其中一種，屬珍貴的藥食兩用植物，根、葉、果皆可入藥2。長(zhǎng)葉胡頹子可健胃，治療腸胃虛弱，消化不良等病癥，其果實(shí)味酸、澀，含鞣質(zhì)3，有澀腸止瀉作用4，民間慣用。為討論長(zhǎng)葉胡頹子對(duì)炎癥性腸炎是否有抗損傷保護(hù)作用，筆者通過建立大鼠腸炎模型，采用長(zhǎng)葉胡頹子果實(shí)提取物灌胃給藥，進(jìn)展了相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究?，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。1材料與方法1.1材料1.1.1長(zhǎng)葉胡頹子果實(shí)水提取物野生長(zhǎng)葉胡頹子果實(shí)于2022-04采自湖北恩施自治州巴東野三關(guān)。長(zhǎng)葉胡頹子果實(shí)水提取物：以下簡(jiǎn)稱提取物生藥含量1g/l，挑選上好果實(shí)水煎煮3次，過濾后濃縮成1g

5、/l的濃度即得。1.1.2試劑和儀器2，4，6-三硝基苯磺酸TNBS為美國Siga公司產(chǎn)品，柳氮磺吡啶SASP原藥由上海三維制藥提供國藥準(zhǔn)字H31020450，P、SD、DA、GSHPX試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。AEPRSET09D0501全自動(dòng)生化分析儀美國，TL16G型高速冷凍離心機(jī)上海實(shí)驗(yàn)儀器廠消費(fèi)。1.1.3動(dòng)物安康istar大鼠，雌雄兼用，體重250270g，由湖北省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。1.2方法1.2.1動(dòng)物模型的建立及處理參考文獻(xiàn)5：大鼠禁食24h后飲水照常，將溶于體積分?jǐn)?shù)為50%乙醇的TNBS按100g/kg的體重、體積0.25l/只，用導(dǎo)管直徑4經(jīng)肛門插入結(jié)腸內(nèi)約8灌

6、腸1次，建立大鼠結(jié)腸炎模型。實(shí)驗(yàn)設(shè)正常組、模型組、陽性藥物對(duì)照組灌服SASP200gkg-1、胡頹子給藥組灌服胡頹子提取液300，500，1000gkg-1，從制備模型7d后開場(chǎng)灌胃給藥，1次/d，共14d。正常組與模型組均給予等量生理鹽水灌胃。1.2.2指標(biāo)檢測(cè)及方法實(shí)驗(yàn)完成后處死動(dòng)物，參考文獻(xiàn)6方法及標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)DI，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：0=無損傷；1=輕度充血、水腫，外表光滑，無腐敗或潰瘍；2=充血水腫，黏膜粗糙呈顆粒狀，有腐敗或腸粘連；3=高度充血水腫，黏膜外表有壞死及潰瘍形成，潰瘍最大縱徑1，腸壁增厚或外表有壞死及炎癥；4=在3分根底上潰瘍最大縱徑1，或全腸壁壞死。結(jié)腸標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋、切片，H

7、E染色，光鏡觀察。另取新穎結(jié)腸組織，用預(yù)冷的生理鹽水沖洗除去血液，濾紙吸干稱重，加9倍生理鹽水，在低溫冰水中用玻璃研磨器研磨制成10%的組織勻漿，高速離心取上清液低溫3保存待測(cè)。P，SD，GSHPX檢測(cè)操作按試劑盒說明書進(jìn)展。1.2.3數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件進(jìn)展t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)處理。2結(jié)果2.1結(jié)腸標(biāo)本病理組織學(xué)觀察模型組大鼠結(jié)腸黏膜充血水腫，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腸壁增厚，黏膜外表有明顯壞死及潰瘍形成，腺體中杯狀細(xì)胞減少。而不同劑量的長(zhǎng)葉胡頹子用藥組以上病理組織表現(xiàn)明顯緩解。2.2對(duì)結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸損傷及炎癥反響的影響DI，P活性分別是反映結(jié)腸損傷與炎癥程度的主要指標(biāo)，兩者在模型組大鼠

8、升高，而長(zhǎng)葉胡頹子300，500，1000gkg-1與SASP200gkg-1灌胃用藥均不同程度降低了DI及P活性P0.05，P0.01，且長(zhǎng)葉胡頹子用藥呈現(xiàn)一定量效關(guān)系。結(jié)果見表1。2.3對(duì)結(jié)腸炎大鼠氧自由基的影響與模型組比擬，長(zhǎng)葉胡頹子提取物300，500，1000gkg-1與SASP200gkg-1灌胃用藥均降低結(jié)腸組織中DA含量，升高SD，GSHPX活性，且長(zhǎng)葉胡頹子中、大劑量作用顯著P0.01。結(jié)果見表2。表1長(zhǎng)葉胡頹子對(duì)結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸損傷及炎癥反響的影響(略)與對(duì)照組比擬，a：P0.01；與模型組比擬，b：P0.01；：P0.05，n=10表2長(zhǎng)葉胡頹子對(duì)結(jié)腸炎大鼠氧自由基的影響(

9、略)與對(duì)照組比擬，a：P0.01；與模型組比擬，b：P0.01；：P0.05，n=103討論TNBS與乙醇誘發(fā)大鼠結(jié)腸炎的主要機(jī)理為乙醇破壞結(jié)腸粘膜屏障，TNBS滲入結(jié)腸與大分子物質(zhì)結(jié)合，形成全抗原引起腸壁一系列免疫應(yīng)答與炎癥反響，其發(fā)病機(jī)理及病理表現(xiàn)與人類炎癥腸炎非常相似。免疫異常、氧自由基作用在炎癥性腸病的發(fā)病機(jī)理中占有重要地位。SD能有效地去除氧自由基從而抑制結(jié)腸組織中的脂質(zhì)氧化反響，并能保護(hù)細(xì)胞。目前許多實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)SD活性及DA濃度的變化來反響其脂過氧化反響。本實(shí)驗(yàn)采用TNBS與乙醇誘發(fā)大鼠結(jié)腸炎模型后，發(fā)現(xiàn)大鼠結(jié)腸組織中SD活性顯著降低，DA濃度明顯升高，證明了氧自由基在炎病癥性腸

10、病的發(fā)病機(jī)理中起重要作用。在本研究中通過病理組織學(xué)觀察到，長(zhǎng)葉胡頹子組病理組織損傷程度明顯緩解，且呈一定劑量效應(yīng)，顯示采用長(zhǎng)葉胡頹子提取物灌胃用藥可明顯減輕模型組大鼠結(jié)腸損傷，緩解炎癥反響，表現(xiàn)出抗炎、抗損傷的保護(hù)作用；實(shí)驗(yàn)中，長(zhǎng)葉胡頹子提取物灌胃用藥能降低結(jié)腸炎模型組大鼠代謝產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化物DA含量，升高重要抗氧化酶SD，GSHPX活性，表現(xiàn)出抗氧化特性，從而抑制結(jié)腸組織中的脂質(zhì)過氧化反響，保護(hù)細(xì)胞膜，緩解氧自由基的損傷致炎作用。以上結(jié)果說明，長(zhǎng)葉胡頹子果實(shí)提取物對(duì)大鼠結(jié)腸炎損傷具有保護(hù)作用。參考文獻(xiàn)：1林來官.福建植物志,4卷.福州:福建科學(xué)技術(shù)出版社,1989:45.2胡豐林.中國胡頹子屬植物利用價(jià)值的初步分析J.生物學(xué)雜志,1996,(4):30.3張貴君.現(xiàn)代中藥材商品通鑒.北京:中國中醫(yī)藥出版社，2001：1611.4黃泰康，丁志遵，趙守訓(xùn)，等.現(xiàn)代本草綱目.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2001：1843.5梅俏,于皆平,許建明,等.褪黑素對(duì)結(jié)腸炎大鼠免疫功