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文檔簡介
1、2 2 23 第 課時微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù) )某些土 ) 2 NH 供 不 3 (深度解)析僅尿 B.素+C.D.以氮源,( )培養(yǎng), B.培養(yǎng) NHC.D., 色土壤中( )尿素 B. C蛋 D.下列有,(用全 B.用高 NaCl 的培深度解析)C.D. 用 1 mL 倍 0.5 , 1 的 ( ) mL B.5 mLC.10 mL 下列有, ( )首先B.然后C.D. 江蘇蘇) ( )該實 B. C.D. )“” 稱(1),(2),(3) 10 107 倍, pH 調(diào) 12 d 下列有,( )稀釋 B.樣品C.D.10.稀釋涂布,比()易錯比實B.比實C.D.11.列有關(guān)統(tǒng)( )利用,
2、B.當(dāng)樣 C. D., 12.于微生物( )常用B.在顯“”C.:沉鏡刷D.13.、乙兩位 10 :甲同, 230; 3 個平, 212256, :(1),(2), 14.列關(guān)于土 ( )土壤B.先鏟, 38 的土C.D. 廣東東莞翰) , ( )制備B.涂布C.D. 山東萊州一) :(1);(2) (3),; mL 樣液 000 個 稀釋;經(jīng) 后 3942 和 (4)培:不, 。觀:每 24 h 遼寧沈陽高) :(1): 收, (2):2 4 4 2 4 4 2(: HPO 、 MgSO 7H 、Y 2); 為 Y,Y 。為:,( 可): 1.() ) , 6 的, ( )涂布,是 B.涂布
3、 1 2 1 2 45 3C. 響D. 5 M M M M M M )( 壤)中,平 ( )一種B.培養(yǎng)C.D. 菌:)( )該實B.上圖 倍 9 C.“算溶解菌板接 本落”D. 個 個 1 g 土 7 個4.( ) A, A, A 的(), ( )培養(yǎng) A ,B.實驗,C.“”D. ) 池, :(1),(2), mL 稀, , (3):稀釋倍數(shù)101010101010培養(yǎng)結(jié)果計數(shù)難以難以難以159 (平均值)計數(shù)計數(shù)計數(shù) ,般選“ 1 培養(yǎng), 由: , )菌(Aa)( Aa 是 菌Av 是(1) 4 支試 種微( , Av (2) , 68 d。圖 。(3)( 1%CMCS 培養(yǎng)2%CMCS
4、 培養(yǎng)(:和自)( 同) 3 , 液 3 , 37 恒溫 3 種致病,菌落直徑(空白對照組1%CMCS 養(yǎng)基2%CMCS 養(yǎng)基-Av- ?; ),“” “”,“外賣 ?!庇指患玫降?菌在以 PE-WAX 為唯一碳源的基本培養(yǎng)基中的生長曲線圖 富集得到的菌株 11 在淀粉固體平板上的透明圈圖 (-, , -PE 菌,(1), 作,后(2)(PE-WAX, )株 基,() 2 示, 株( 1圖 2 (3), ,(4), (“”“”)(5) : 。 ) ,:用水將( 統(tǒng), :(1),(2) EMB 上,EMB 基(3) 90 mL ,EMB 124, 則 1L (4),(填“”“”)霉 (“”“”
5、) 第 課時微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù) 基礎(chǔ)過關(guān)練1.B10.B2.A11.A3.B12.B4.A5.A 7.D 9.D1.B根據(jù)題意可知 該土壤細菌是異養(yǎng)微生 配制分離這一菌種的選擇培養(yǎng)基需要含碳有機物作為碳 ,尿素作為唯一氮源B 合要求。歸納總結(jié)微生物選擇培養(yǎng)的分類用營養(yǎng)缺陷型選擇培養(yǎng)基進行的選擇培養(yǎng)通過控制培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分營養(yǎng)缺陷型微生物不能正常 生長。用化學(xué)物質(zhì)進行的選擇培養(yǎng):完全培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)用加入的化學(xué)物質(zhì)抑制某些微生物 的生長同時選擇所需的微生物。用培養(yǎng)條件進行的選擇培養(yǎng):變微生物的培養(yǎng)條件(如高溫、pH 等),選特定微生物。2.A 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中能夠生長繁殖
6、的微生物不一定全是分解尿素的微生物,為自生固氮菌也可以在這種培養(yǎng)基上生存A 誤;培養(yǎng)基中以 為唯一氮源可以分離硝化細菌硝化細菌可利用 NH生成硝酸的過程中釋放的能量將 CO 和 H O 合成糖類B ;用缺乏氮源的培養(yǎng)基能夠分離固氮微生物,C正確;以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,養(yǎng)細菌后,果 pH 升高指示劑變可斷該細菌能 分解尿素D 確。3.B土壤中的尿素分解菌體內(nèi)能夠合成脲,脲酶催化土壤中的尿素分解產(chǎn)生 ,NH 可作為細菌生長的氮源。4.A 全營養(yǎng)馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基常用于大腸桿菌的培養(yǎng),培養(yǎng)基對酵母菌無選擇作用,選酵母菌應(yīng)在選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)A 錯誤;抗鹽突變菌具有耐高鹽的能力 ,此可
7、以利用高 NaCl 的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng),B 正確;分解尿素的細菌能將尿素分解產(chǎn)生氨使培養(yǎng)基 pH 升高,此可以利用含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解 尿素的細菌 確;利用高溫條件可以篩選水生棲熱, 確。歸納總結(jié)混淆常見的選擇培養(yǎng)基入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。入高濃度的 NaCl 可得到金黃色葡萄球菌。氮源培養(yǎng)基可分離出固氮微生物。石油為唯一碳源的培養(yǎng)基可分離出能消除石油污染的微生物。培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可分離出耐高溫的微生物。5.A 根據(jù)題干信息可知需要將土壤稀釋液由 倍稀釋為 倍,在原來的基礎(chǔ)上再稀釋 ,來的 土壤稀釋液的量菌水=則得到 000 倍稀釋液需添加無菌水的量為 0.59=
8、4.5(mL)微生物選擇培養(yǎng)首先將菌懸液進行一系列的濃度梯度稀,后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面在適宜條件下培養(yǎng)釋度足夠高的菌懸液,集在一起的微生物才可能被分散成單 個細胞從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。圖示為從土壤中分離能降解對羥基苯甲酸的微生物的實 ,要進行無菌操作 所以該實驗所用的器具、培養(yǎng)基均需滅菌處理A 確;將土壤提取液置于含對羥基苯甲酸的培養(yǎng)液中培重復(fù)多次可以增大能降解對羥基苯甲酸的微生物濃度提高目的菌的比例,B 正確;培養(yǎng)過程采用稀釋涂布平板法因此可純化并計數(shù)目的菌, 確; 驗說明通過選擇培養(yǎng)可以得到欲分離的目的因此,中有一 組應(yīng)作為對照不含有對羥基苯甲酸, 誤。
9、 答案 (1)釋涂布平板梯度稀釋 涂布平板個活菌 菌中性或弱堿性 解析圖分 圖示為稀釋涂布平板法進行活菌計數(shù) ,這一方法主要包括梯度稀釋操作和涂布平板操作。樣品稀釋度足夠高時培養(yǎng)基表面生長的單菌落來源于樣品稀釋液中的一個活一般選擇菌落數(shù)在 的平板進行計數(shù)。(3)定土壤中細菌的數(shù)量一般選用 、10、10 倍稀釋的稀釋液進行平板培, 還需要將 pH 至中性或弱堿性、在 3037 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) d稀釋涂布平板法除用于分離微生物,常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目,A 確;利用稀釋涂布平板法計數(shù)時樣品稀釋度直接影響平板的菌落數(shù)目B 確;細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板都是通過顯微鏡直接計數(shù) 的, 確;細菌計數(shù)板或
10、血細胞計數(shù)板的計數(shù)原理相, 誤。10.B用稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目往往比實際值這是因為當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時平板上觀察到的只是一個菌落。易錯警示不知道菌落計數(shù)比實際值“偏高”是“偏低”稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中的菌落數(shù)往往比實際數(shù)目“偏低”,是因為當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時,板上觀察到的只是一個菌落。而顯微鏡直接計數(shù)法中由于不能區(qū)分死菌與活菌所得數(shù)值可能比實際值“高”。11.A利用血細胞計數(shù)板,顯微鏡下可以快速直觀的測定微生物的數(shù)量顯微鏡直接計數(shù)法無法區(qū)分死菌和活菌A 錯誤;當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時 ,個活菌會形成一個菌落,B 正確;菌計數(shù)法是通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)推測出樣品中大約含
11、有多少個活菌 確;為保證活菌計數(shù)法的結(jié)果準(zhǔn)確在實際操作中,常選用 一定稀釋范圍的樣品進行培養(yǎng)D 確。12.B常用的微生物計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)顯微鏡直接計數(shù)法可利用血細胞計數(shù)板平板劃線法是分離純化細菌的方法,A 錯誤;由于只有死細胞才能被染色 ,以在顯微鏡直接計數(shù)過程中可借助“染色排除法”統(tǒng)計活菌數(shù)目B 正確;血細胞計數(shù)板的使用步驟為蓋蓋玻片培養(yǎng)液 待沉降檢計數(shù)刷洗, 誤;血細胞計數(shù)板只能對較大的細胞計數(shù),能對較小的細胞計數(shù),較小的細胞計數(shù)用細菌 計數(shù)板D 誤。13.案(1)不合理沒有設(shè)置重復(fù),果不具有說服力(2)不合理1 平板的計數(shù)結(jié)果與另外 個相差太遠(或在操作過程中可能
12、出現(xiàn)了錯誤,只簡單地計算了平均值)解析 實驗時在同一稀釋度下應(yīng)至少涂布 3 平板作為重復(fù),應(yīng)對菌落數(shù)在 平板進行計,然后求出平均值才能增強實驗的說服力和準(zhǔn)確性同學(xué)雖然涂布了 3 個平板,其中一個平板的菌落數(shù)與 另外 個相差太遠因此不能對這 平板的計數(shù)值求平均值。土壤取樣用的小鐵鏟和取樣紙袋在使用前需滅 誤。取樣一般取距離地表 土壤層,土壤的表層中微生物數(shù)量也很多 也可存在分解尿素的細菌因此該操作對獲得純化的尿素分解菌的單菌落影響不大,A 不符合題意 ;涂布前涂布器未在酒精燈外焰上灼燒滅菌可能會導(dǎo)致雜菌污染,而影響微生物計數(shù)但對獲得純化的尿素分解菌的單菌落影響不大 ,B 不符合題意;該培養(yǎng)基必須
13、以尿素作為唯一的氮源,能使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或在該培養(yǎng)基中添加尿素作為氮源,操作對實驗影響最大, 合題意;接種操作者的雙手未用酒精棉進行消毒可能會導(dǎo)致雜菌污染但對獲 得純化的尿素分解菌的單菌落影響不大D 符合題意。16.案(1)脲尿素 壓蒸汽滅菌 (3)測平板滅菌是否合格6(4)度 時間菌穩(wěn)定解析 (1)解尿素的微生物能產(chǎn)生脲酶;制培養(yǎng)基時應(yīng)以尿素作為唯一氮源 尿素溶液進行滅菌的最適方法是高壓蒸汽滅菌。(3)接種前,機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間,目的是檢測平板滅菌是否合格。每毫升樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)某一稀釋度下培養(yǎng)基上生長的平均菌落數(shù)涂布平板時所用的稀釋液的體積釋倍數(shù)=(3
14、9+42+45)30.110 (個)。(4)不同種類的微生在培養(yǎng)時往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間在培養(yǎng)過程中以每隔 24 統(tǒng)計一次菌落數(shù)目最后選取菌落數(shù)目穩(wěn) 定時的記錄作為結(jié)果。17.案(1)脲酶白對照 酚紅指示劑稀釋涂布平板可能存在固氮微生物,們能利用空氣中的氮氣作為氮源而不利用培養(yǎng)基中的尿素分解成氨以看到有些菌落產(chǎn)生而菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化解析 (1)素分解菌能產(chǎn)生脲酶將尿素分解成氨土壤中的尿素只有被分解成氨后才能被植物吸收利用 ,此可用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基來分離尿素分解菌。(2).檢驗培養(yǎng)基是否受到雜菌污染,要設(shè)置空白對照組.菌合成的脲酶將尿素分解成了,會使培養(yǎng)基的堿性增強,pH
15、 升高,此可以通過檢測培養(yǎng)基的 pH 化來鑒別尿素分解菌的存在培養(yǎng)基配方中加入的 Y 可以是酚紅指示劑。稀釋涂布平板法除了可以用于分離微生物外也常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目,了對實驗的結(jié)果進行進一步統(tǒng)計需要用稀釋涂布平板法進行接種.有些菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變明這些細菌不能產(chǎn)生脲酶進而不能利用尿素作為氮源而氮源為微生物生長所必需的,此推測可能存在固氮微生物它們能利用空氣中的氮作為氮源,不 利用培養(yǎng)基中的尿素分解成氨所以看到有些菌落產(chǎn)生而菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化。能力提升練1.BD 3.C 4.D1.BD用稀釋涂布平板法測定同一樣品中的細菌數(shù)時了保證結(jié)果準(zhǔn)確,同一稀釋度下,至少涂布 個平板確定對照組
16、無菌后,擇菌落數(shù)在 30300 平板進行計然后求其平均值,通過計算得出土壤中的細菌總數(shù)A 正確,B 誤設(shè)置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響提高實 驗結(jié)果的可信度 確。由于一種培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件不能符合全部微生物的生長需所以顯微鏡直接計數(shù)得到的菌體數(shù)大于平板計數(shù)得到的菌體數(shù)A 符合題意 ;利用平板計數(shù)法,于培養(yǎng)時間較短,板上的菌落數(shù)目沒有達到最大值,能造成顯微鏡直接計數(shù)得到的菌體數(shù)大于平板計數(shù)得到的菌體數(shù),B 不符合題意;板上兩個或多個細胞連在一起形成一個菌落造成顯微鏡直接計數(shù)得到的菌體數(shù)大于平板計數(shù)得到的菌體數(shù), 符合題意;顯 微鏡直接計數(shù)不能區(qū)分死菌和活菌所以其精確度
17、不比平板計數(shù)高D 合題意。本實驗的目的是從土壤中分離分解尿素的微生蛋白胨主要提供氮源和維生素等,以蛋白胨不能作為配制本培養(yǎng)基的原料A 確 ;題圖中菌液稀釋 時需要加入 1 菌液和 mL 無菌水 , 確;實驗設(shè)計時需要在滅菌之前,解之后調(diào)節(jié) 錯誤;根據(jù)圖解可對菌液進行稀釋時共稀釋了 分別接種了 個培養(yǎng)皿一段時間后,個培養(yǎng)皿中分別形成了 54 個 菌落則該 1 土壤樣本中約有分解尿素的細菌(=510(個),D 確。本實驗的目的是“篩選到能高效降解化合物 A 的細菌”因此培養(yǎng)基中加入化合物 A 作為唯一碳源 目的是篩選目的菌A 正確;實驗培養(yǎng)過程中進行振蕩培養(yǎng) ,使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸,B 正確;
18、實驗操作過程中獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是防止雜菌污染 確;將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次題述實驗的目的是對菌種“純化”,D 誤。 答案 (1)一碳源選擇(2)有的菌落是由兩個或多個細菌連在一起形成的涂布器上還殘留少量細菌(3)10不合理,做梯度稀釋之前不能確定這個稀釋倍數(shù)的每個平板的菌落是否在 30300 間解析 (1)分離篩選出能分泌脂肪酶的細菌應(yīng)配制以脂肪為唯一碳源的培養(yǎng)基;由于只有能分解脂肪的微生物能在這種培養(yǎng)基上生存因此從功能上看培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)用稀釋涂布平板法得到的結(jié)果一般比實際值偏小原因可能有有的菌落是由兩個或多個細菌連在一起形成的上還殘留少量細菌。據(jù)表中培養(yǎng)結(jié)果可知
19、稀釋倍數(shù)為 10培養(yǎng)基中菌落彼此分,通過肉眼進行計數(shù),數(shù)目在 30300之間因此為保證結(jié)果準(zhǔn)確,般選擇 稀釋倍數(shù)的平板進行統(tǒng)計。由于在做梯度稀釋之前不能確定這個稀 釋倍數(shù)的每個平板的菌落是否在 30300 ,此這種方法不合理。 答案 (1)乙(2)D 三種致病菌的菌落直徑均比空白對照的小 抑菌能力隨濃度增大而增強解析 (1)據(jù)題意可知 是專性厭氧,會集中在試管底部,代表 Pg 長狀態(tài)的試管為丙Av 是兼性厭氧菌會在試管中均勻分布,此代表 Av 生長狀態(tài)的試管是乙。 (2)析圖中培養(yǎng)皿 AB、C 菌落均勻分布,利用稀釋涂布平板法接種, 用平板劃線法接種,選 D。(3)合實驗現(xiàn)象和表中信息可知三種
20、致病菌的菌落直徑均比空白對照的小且 CMCS 的抑菌能力隨濃度增大而增,些數(shù)據(jù)和現(xiàn)象都可以證明 抑制牙周致病菌的生長。 答案 (1)粉填充聚乙烯類塑(淀粉-稀釋涂布平板法被致病的微生物感染 淀粉11既能利用聚乙烯作為碳源生長又能利用淀粉生長此能夠更高效降解淀粉填充聚乙烯類塑料淀粉-當(dāng)兩個或多個細胞連在一,板上觀察到的只是一個菌落顯微鏡水中微生物總數(shù)的檢測;水中細菌總數(shù)的檢測;水中細菌的分離與計數(shù);中真菌(或放線菌)的分離與計數(shù)解析 (1)題干信息可知本實驗是為了篩選到能夠更高效降解淀-PE 的菌株,培養(yǎng)基中的唯一碳源是淀粉-PE種分離純化微生物的接種方法稱為稀釋涂布平板法究未知的微生物一定要注意進行規(guī)范的無菌操作以防被致病的微生物感染。(2)察透明圈淀粉固體平板上出現(xiàn)透明明該菌株能分泌胞外淀粉酶圖 1 可知菌株 和菌
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