生物制藥工藝學(xué)習(xí)題

1、(完整版生制藥工藝學(xué)習(xí)題生制工學(xué)名解1 藥 Medicine（remedy用于預(yù)防、療或診斷病或調(diào)節(jié)體生理功能、促進(jìn)機(jī)體康復(fù)保健的質(zhì)，有 4 類：預(yù)藥、治療藥診斷藥和復(fù)保 健藥。2 生藥 （biopharmaceutics以生物體、物組織或成份為原 (包括組織細(xì)胞、細(xì)器、細(xì)胞成分、代謝、 排泄物）綜應(yīng)用生物、物理化與現(xiàn)代藥學(xué)的原理與方法加工制成藥物3 基藥 （gene medicine是以基因物（ 或 DNA 及衍生物）作治療的物基礎(chǔ),括基因治療的重組目的 DNA 片、重組疫、反義藥和核酶等。4 反藥 : 是以工合成十至幾十反義寡核苷酸序列，它能與模板 或 mRNA 互形成穩(wěn)的雙鏈結(jié)構(gòu)抑制靶

2、基因的轉(zhuǎn)錄 mRNA 翻譯，從而達(dá)到抗瘤和抗病作用。5 生制 (biologics)： 是用普通的以基因工、細(xì)胞工、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微物、細(xì) 胞及各種動(dòng)和人源的織和液體生物材料制備的 ,用于人類病預(yù)防、治療和診斷的藥品。6 RNA 干 (RNAi,RNA interference 是指在生物細(xì)胞內(nèi)，dsRNA 引起源 mRNA 的特異性降 ,因而抑制相應(yīng)因表達(dá)的程。7 siRNA interfering : 是一種小 RNA 子（21-25 核酸,由 Dicer（RNAase 家族對(duì)雙鏈 RNA 具有特異性的 加工而成 siRNA siRISC （RNA-induced s

3、ilencing complex 由核酸內(nèi)酶、核酸切酶、解旋酶等 構(gòu)成，作用對(duì)靶 mRNA 進(jìn)行識(shí)別切割)的主要成員激發(fā)與之補(bǔ)的目標(biāo) mRNA 的沉默1、酶程（enzyme engineering是從應(yīng)用目出發(fā)，研酶和應(yīng)用的特異催化功能，并通過工程化過將相應(yīng)原轉(zhuǎn)化成所產(chǎn)物的技。2、固化 （immobilized enzyme 是指助于物理和化學(xué)的方法把酶束縛在定空間內(nèi)具有催化性的酶制劑，酶 經(jīng)固定化以穩(wěn)定性有提高，而可以反復(fù)使用，并能實(shí)現(xiàn)反應(yīng)連續(xù)、自動(dòng)化簡化產(chǎn)品純化工藝3、原質(zhì)融 :用脫壁酶處將微生物胞壁去除制成原生質(zhì)，再用聚乙二醇（ PEG）促進(jìn)原生質(zhì)體發(fā)生融合，從而得融合子技 術(shù)。4、雜育

4、 ：雜交育種一指將兩個(gè)因型不同菌株通過接合使遺傳物質(zhì)重新組合 再從中離和篩選具有新性的菌株 雜交后雜種不僅能服原有菌活力衰退趨勢(shì)，而且，雜交育種使得遺傳物重新組合 ,大了異范圍，改了產(chǎn)品的量和 產(chǎn)量。5、誘育 ：誘變育種是有意識(shí)地生物體暴于物理的、化學(xué)的或生物的一種或種誘變因下，促使物體發(fā)生變，進(jìn)而從 突變體中篩具有優(yōu)良狀的突變的過程。1S(完整版生制藥工藝學(xué)習(xí)題S6、感態(tài)胞在分子克隆程中，宿細(xì)胞需經(jīng)人工處理成能吸收重組 分子的感細(xì)胞才用于轉(zhuǎn)化此的細(xì)胞稱為感受態(tài) 細(xì)胞.7、原細(xì) ： 是直接自動(dòng)物組織器官，經(jīng)過散、消化得的細(xì)胞液。8、二體胞 ：原代細(xì)胞經(jīng)傳代、篩、克隆 ,從而由種細(xì)胞成分的組織中

5、挑選強(qiáng)化具有定特性的胞株 ,其特點(diǎn)是：1染色體組 仍然是 2n 的模型；）具有顯貼壁依賴和接觸抑制特性；3具有有限增殖能力 4）無致性。1。 析 ：是利用種生物分在濃鹽溶液中溶解度的差異通過向溶中引入一數(shù)量的中鹽使目的或雜蛋白以 沉淀析出，到純化目的方法。2。 Ks 鹽 ：在一定 pH 和溫度下改變離子強(qiáng)度(鹽濃度）進(jìn)鹽析，稱 鹽析法Ks 鹽析法多于提取的前期分離 工作。3析在一定離強(qiáng)度下僅變 pH 和度進(jìn)行析，稱作鹽析法。分離的后期階段，為了求得較好的辨率，或者為了達(dá)到晶的目的,時(shí)應(yīng)用鹽法。鹽法由于溶溶解度變緩慢且變化幅度小，沉淀分辨率比 K 析法好。4親沉 : 用親和應(yīng)原理將配基與溶性的載

6、偶聯(lián)后形載體配基復(fù)合物（親和沉淀劑該復(fù)物可選擇 地與蛋白質(zhì)合,在一定件下沉淀來。1、附法 (adsorption 指利用附作用，將樣品中的生活性物質(zhì)雜質(zhì)吸附適當(dāng)?shù)奈絼┥?，利用吸附劑?duì) 活性物質(zhì)和質(zhì)間吸附力的差異使目的物和其它物質(zhì)分離，達(dá)到濃和提純目的方法。2大格聚吸劑(macroreticular adsorbent 合成脂時(shí)，加一種惰性組分，它不參與聚合反應(yīng)，但能和單體互溶，稱致孔劑。網(wǎng)絡(luò)骨架化和鏈結(jié)構(gòu)單元形成后，用溶劑萃或水洗蒸的方法將孔劑去掉就留下了不受外界條件影響永久孔隙,孔徑遠(yuǎn)大于 24nm,可達(dá)到 100nm 甚至 1000nm 以上，故稱“孔” .與孔網(wǎng)狀子交換樹脂相比，它不含

7、子交換樹的功能團(tuán)僅保留了多孔的骨架，其性質(zhì)與活炭、硅膠吸附劑相，稱為大網(wǎng)狀聚合物吸附 劑。1、親反團(tuán)取Affinity-based resersed micellar extraction 是指在反膠相中除通的表面活劑 (如 AOT以外，加另一種水頭部為目標(biāo)分子的親和配基的助面活性劑通過親和配與目標(biāo)分的親和結(jié)作用促進(jìn)目標(biāo)產(chǎn)物在反膠團(tuán)相的分配提目標(biāo)產(chǎn)物分配系數(shù)反膠團(tuán)萃取分離的 選擇性。2、親膜：利用親和配修飾微濾為親和吸介質(zhì)親和純化目標(biāo)蛋白質(zhì)固定床和層析的型張微濾比喻為一個(gè)固定床，則膜厚即為層高度 .優(yōu)點(diǎn)是傳質(zhì)阻力小，達(dá)吸附平衡時(shí)間短，基利用率高 ;壓降小，流速 ,設(shè)備體小，配基用量2(完整版生

8、制藥工藝學(xué)習(xí)題低。3、二作親沉 （secondaryeffect affinity precipitation) ：利用在物理（如 pH、離子強(qiáng)度、溫度和加金屬離等）改變?nèi)芙舛认陆?、發(fā)生可逆性沉淀的水溶性聚合物載體固定親和基，制備和沉淀介 .和介質(zhì)結(jié)目標(biāo)分子，通過改物理場(chǎng)使介質(zhì)與目標(biāo)分子共同沉淀方法成為 次作用親和淀。4、親萃 ：用聚乙二醇PEG）/聚糖(Dx）或聚乙二醇無機(jī)鹽雙水相系統(tǒng)取分離蛋質(zhì)等大生分子 ,特是胞 內(nèi)酶的雙水萃取法利用偶聯(lián)和配基的 PEG 成相聚物進(jìn)行目標(biāo)物的雙水萃取可在親配基的親和結(jié)合作 用下促進(jìn)目產(chǎn)物在 PEG 相上相）的分，提高目產(chǎn)物的分系數(shù)和選擇性。5、親吸劑由載體

9、及配偶聯(lián)構(gòu)成 , 在親和層析起可逆結(jié)合的特異性物質(zhì)稱為配基 Ligand 與配基結(jié)合的析介質(zhì)稱載體 (Matrix ）.6、負(fù)脫：雙底物反中，與配互補(bǔ)的酶的親和吸附 如果附取決于 A 物的在與否則洗脫液除去 A 物時(shí)，附 在配基上的補(bǔ)分子也洗脫下來,這種洗脫方法也稱負(fù)洗脫 生制工學(xué) 答第一章生藥概1 基重組藥物基因藥物什么區(qū)別？答：基因重藥物是指用重組 DNA 技術(shù)包括基因程技術(shù)和白質(zhì)工程技術(shù)）制造的重組多肽、蛋白質(zhì)類藥和疫苗、單克隆體與細(xì)胞子等，藥的化學(xué)成分屬于多肽或蛋白質(zhì)；基藥物是以因物質(zhì)（ 或 DNA 及其衍生）作為治療的質(zhì)基礎(chǔ) ,包括基因療用的重組目的 DNA 片段、重疫苗、反義藥物和

10、核酶等,藥物的化學(xué)成分為核或其 衍生物。2 生藥物有那作用特點(diǎn)答1）藥理學(xué)特性：藥理活高；治療針對(duì)性強(qiáng)；毒副作用較少，營養(yǎng)價(jià)值；生理副用常有發(fā)等2理化特性有：生物料中的有物質(zhì)含量，雜質(zhì)種類多且含量相對(duì)較高；生活性物質(zhì)成結(jié)構(gòu)復(fù)，穩(wěn)定性；生物材料 易染菌，腐；生物藥制劑有特要求 .3、基因工程藥主要有哪類 ?舉例說 .答：基因工藥物是指用基因工或蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造的重組活性肽、蛋白及其修飾，包括 :1)組細(xì)因子類：如干素（IFN介（IL)和腫瘤死因子 TNF)；2）重組生因子類：如表皮生長因子（ EGF)、經(jīng)生長因子（NGF及促進(jìn)造血系統(tǒng)的生長子：如促細(xì)胞生成（落刺激子等（CSF）;3)重多肽與白

11、質(zhì)類激素如重組人胰素（rhInsulin組人長激素等rhGH）;4)心管病療劑及酶制劑：如水蛭、tPA(組纖溶酶原激物冬酰胺、超氧化物歧化酶等5）重組疫苗單抗制:如重組乙肝表抗原疫苗（酵、 腫瘤疫苗等3(完整版生制藥工藝學(xué)習(xí)題第二章生物制藥工技術(shù)基礎(chǔ)1、生物藥物分制備的基特點(diǎn)有哪？答：）生物材料組成非常復(fù)雜； 2)些化合物生物材料含量極微 3生物活性成分離開生物體后 易變性破，因而須注意保護(hù)生理活性生物藥中的分離方法常帶有很大的經(jīng)驗(yàn)分5生制藥中的離方法多用溫和多 階式方進(jìn)行；6）生物產(chǎn)最后均一性的證明與化學(xué)上純度的概念不完全同。2 簡單克隆抗 (monoclonal antibody）的備原理

12、。答B(yǎng) 細(xì)胞群抗原刺激能產(chǎn)生針抗原決定簇的特異性抗體 ,一個(gè)集體可生多達(dá) 100 種特異性不的抗體但一 細(xì)胞卻只能泌一種特性抗體 B 細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合后有限稀釋把產(chǎn)生不抗體的雜瘤細(xì)胞分開，挑選出單個(gè)交瘤細(xì)胞每個(gè)雜交瘤細(xì)胞只分泌一種特異性抗體養(yǎng)單個(gè)雜交細(xì)胞使無性繁殖成細(xì)胞集落 (稱 之為克隆，同一個(gè)隆的雜交基因相同，合成并分泌的特異性抗體質(zhì)地均一這種抗體為單克隆體。3 簡生物大分物質(zhì)分離化的主要原理。答： 生物分子分離化的主要理是 :）根據(jù)分子狀和大小同進(jìn)行分離，如差速離心與超離心、膜分離、膠過濾等2）根據(jù)分子離性質(zhì)（電性）差異進(jìn)行分離如離交換法、電法、等電焦法；3）根分子極性大及溶解度不

13、同進(jìn)行離，如溶提取法、流分配法、分配層析法、鹽析法、電點(diǎn)沉淀有機(jī)溶劑級(jí)沉淀等 4）根據(jù)物 質(zhì)吸附性質(zhì)不同進(jìn)行離，如選性吸附與吸附層析等； 5）根據(jù)配體特性進(jìn)行分，如親和析法等。第五章 沉淀法答）1.什么鹽析作用鹽析的原是什么?答：鹽析作：向蛋白溶液中逐加入中性鹽，在高鹽濃度時(shí)，蛋白溶解度隨減小，發(fā)了鹽析作。產(chǎn)生鹽析作用的一個(gè)原因由于鹽離與蛋白質(zhì)面具相反電性的離子基團(tuán)結(jié)合形成離子因此離子部分和了蛋白質(zhì)的電性使蛋白質(zhì)分子間電排斥用減弱而相互靠攏 ,聚集起來鹽析作用的另個(gè)原因是于中性鹽親水性比白質(zhì)大 ,離子 在水中發(fā)生化而使蛋質(zhì)脫去了化膜，暴露出疏水區(qū)域 ,由于疏水區(qū)的相互作 ,使其沉。2.如何擇鹽

14、析所中性鹽？(1）鹽作用要強(qiáng)一般來說價(jià)陰離子的鹽析作用強(qiáng)，有時(shí)多價(jià)陽離子反而鹽析作用低。（2)鹽析用鹽要有夠大的溶度且溶解受溫度響應(yīng)盡可能小 .樣便于獲得高濃度鹽溶液利于操作,尤是在較 低溫度下的作，不致成鹽結(jié)晶出，影響鹽析效果。（3）鹽析用鹽生物學(xué)上惰性的，致影響蛋白質(zhì)等生物分子的活性 ,最好不入給分離測(cè)定帶來煩的雜質(zhì)。（4）來源豐富經(jīng)濟(jì)。3。有機(jī)溶劑沉的原理是么？答：親水性機(jī)溶劑加溶液后降了介質(zhì)的介電常數(shù) ,使溶質(zhì)子之間的靜電引力增加，聚集形成沉淀；水溶有機(jī)溶劑本身的水合用降低了由水的濃，壓縮了親水溶質(zhì)分子表面原有水層的厚度降低了它親水性，致脫水凝集。 4.有機(jī)劑沉淀影沉淀效果因素有那些？

15、4答 （1）有機(jī)溶劑類及用量(）pH 的影響(3）度無鹽的含量(完整版生制藥工藝學(xué)習(xí)題（4)某些金屬子的助沉淀作用5)樣品濃度第章 吸分離 (案四問題1、簡述吸附法定義和特 .吸附(adsorption ） 指利吸附作用 ,將樣品中的生物活性物質(zhì)或雜質(zhì)吸于適當(dāng)?shù)母絼┥侠酶絼?duì)活性 物質(zhì)和雜質(zhì)吸附能力差異,目的物和其物質(zhì)分離達(dá)到濃縮提純目的的方法。吸附法具有下列點(diǎn)：(1）設(shè)簡單、操簡便、價(jià)、安全。（2）少用或用有機(jī)溶，吸附與脫過程中 pH 變小，較少引起生物活性質(zhì)的變性活。(3)天吸附劑特別無機(jī)吸附劑的吸性能和吸條件較難制，吸附選擇性差,收率高，難以連操作.2、影響吸附的素有哪些吸附劑的特：吸

16、附現(xiàn)在界面發(fā)，因此吸附劑比表面積愈大，吸附愈多。通活化的方也可增加吸附劑的吸附容 量。另外還求吸附劑機(jī)械強(qiáng)度，吸附速度快吸附物的性：能使表張力降低物質(zhì) ,易為表面吸附；一極性吸附劑易吸附極性物質(zhì)，非極性吸附劑易附非極 性物質(zhì)溶質(zhì)從較易解的溶劑被吸附時(shí)，吸附量較少；對(duì)于同系列物質(zhì)，吸量的變化有規(guī)則的;吸物若能溶劑形 成氫鍵，則附物極易于溶劑之 .吸附條件：溫度：吸附越大,溫度吸附的影響大; 值溶液的 pH 值溶液 pH 值可控吸附劑或附物解離況，進(jìn)而影響吸附 量,對(duì)蛋白質(zhì)或類等兩性質(zhì)，一般等電點(diǎn)附近吸附量最大；鹽濃度 ;溶劑的響。吸附物濃度吸附劑用：一般情下吸附物濃度大時(shí)，吸附量也大。第九章親和

17、純化技（答案）1、親和層析的理是什么?要特點(diǎn)是什 ?答:親和層析的計(jì)和過程致分為以三步：）配基固定化：選擇合適配基與不性的支撐體偶鏈，或共價(jià)結(jié)合成具有特異親和的分離介 ;2附樣品和層介質(zhì)選擇吸附酶或他生物活性物質(zhì)質(zhì)與析介質(zhì)間沒親和作用故不能被吸而被洗滌除；3樣品解析：擇適宜的件使被吸的親和介質(zhì)上的酶或其他生物活性質(zhì)解析下。親和層析技的最大優(yōu)在于利它從提取液中經(jīng)過一次簡單的處理可得到所的高純度性物質(zhì)此外親和層還有對(duì)設(shè)備求不高、作簡便、用范圍廣、特異性強(qiáng)、分離速度快分離效果、分離條溫和等優(yōu)：其主要缺點(diǎn)是親和吸附劑用性較差要分一種物質(zhì)差不多都得重新制備專用的吸附劑 .外由于洗條件較苛 ,須很好地控制

18、洗脫 條件，以避生物活性質(zhì)的變性活 .2、對(duì)親和層析公式 L V K0 L進(jìn)行說明。 K =10求 (6 分L 0Ve 為洗脫體 (1 分 V 固定相（床）體積（1 ) L 固定化配基度（1 分 K 為親對(duì)解離常數(shù)親0 0 L和勢(shì) 分)； 只有當(dāng)留值10 時(shí)親層析才是效（分離)的.1+L / K 10，將 K =10 代入得 /109，所，L 910（2 分0 L L 0 05(完整版生制藥工藝學(xué)習(xí)題3、何謂“手臂？其長短親和層析果有何聯(lián)系？為什么？答：有時(shí)候小分子物（如酶的因子）作為配基直接偶聯(lián)至瓊脂糖膠珠粒上備親和層介質(zhì)時(shí)，管配基和酶間的親和力在合的范圍內(nèi)但其吸附容往往是低的這是由酶的活性中常是埋藏其結(jié)構(gòu)的部它們與介質(zhì)的空間障礙影響其與和配基的合作用 為了改這種情況在載體和基間插入一個(gè)物質(zhì)稱為“手臂 ，消除空間障礙。手臂的長度有限的 ,不