生物選修一實驗知識點

1、資料免費下載就在微信公眾號：高中必備學問點大全資料免費下載就在微信公眾號：高中必備學問點大全1、參與果酒如葡萄酒制作的微生物是酵母菌，屬于真核生物，其代謝類型是異養(yǎng)兼性反響式有/沒有能/不能 18-25，而在 20左右時，是酵母菌的最適生殖溫度。在果酒制作初期，向發(fā)酵裝置通氣的目的是使酵母菌在有氧條件下大量生殖，增大菌種密度。在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，起主要作用的是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。葡萄酒呈紅色的緣由是隨著酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮中的色素進入發(fā)酵液。在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長生殖，而絕大多數(shù)其他微生物都由于無法適應這一環(huán)境而受到抑制，他們與酵母菌之間的種間關系是競爭

2、。酵母菌的生殖方式主要包括條件適宜時的出芽生殖，與條件惡劣的孢子生殖。2、參與果醋如葡萄醋制作的微生物是醋酸菌，屬于原核生物，其代謝類型是異養(yǎng)需氧型，當氧氣、糖源充分時，該菌能夠?qū)⑵咸阎械奶欠纸獬纱姿?，當氧氣充分，糖源缺乏反響式是略?其典型的細胞增殖方式是二分裂，酵母菌與醋酸菌最主要的區(qū)分是有無核膜包被所形成的細胞核。3P4 14b 的作用是排解發(fā)酵時產(chǎn)生的 CO2，以及剩余氣體；出料口的作用是取發(fā)酵液進展檢測，并放動身酵液；其中的排氣口通過一個長而細的膠管連接瓶身的目的是防空氣中的微生物的污染。在果酒制作時，應當適時排氣，緣由是防止發(fā)酵中因氣壓過高而炸瓶，假設用裝置 14a 進展果酒果醋

3、制作，在排氣時不能/不能完全翻開瓶蓋，而是擰松瓶蓋去枝梗/沖洗再 去枝梗去枝梗/沖洗能/不能需要/不需要 進展消毒處理，我們在果酒制作時，不需要/不需要對葡萄汁進展煮沸處理。在10-12 天之后，便可以對果酒進展檢測，可在酸性條件下，用重鉻酸鉀與發(fā)酵液反響，假設發(fā)酵液呈灰綠色，且顏色較深，則說明酒精度數(shù)較高。假設需進一步對發(fā)酵液中的酵母菌數(shù)量進展檢測可以用稀釋涂布平板法 、 顯微鏡直接計數(shù)法方法。到了果酒制作的后期會覺察，酵母菌的數(shù)量會呈現(xiàn)下降趨勢，其緣由主要有養(yǎng)分物質(zhì)消耗殆盡酒精度數(shù)的提高對細胞的毒害作用PH 醋制作，但是應當轉(zhuǎn)變的試驗條件是適當升溫并通氧。4培育基 與 液體培育基，其中的液

4、體培育基主要用于工業(yè)生產(chǎn)與擴大培育，而擴大培育培育基可以用于菌株的 分別 、鑒定、計數(shù)、菌種保存等。從功能上劃分，可分為選擇培育基與 鑒別培育基，其中的選擇 培育基，是在培育基中參加某種化學物質(zhì),抑制 不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長，如以纖維素為唯一碳源的培育基來 NaCl 選酵母菌、霉菌；以尿素為唯一氮源的培育基來篩選尿素分解菌。而鑒別培育基是依據(jù) 伊紅-美藍 ，可鑒別大腸桿菌，使其菌落呈黑 色。選擇培育基 不是 是/不是都是固體培育基。5、不管哪種培育基，一般都含有水 、碳源 、氮源 、 無機鹽 等養(yǎng)分物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對 pH、特別養(yǎng)分物質(zhì),如:生長因子(即細

5、菌生長必需，而自身不能合成的化合物,)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。如在培育乳酸桿菌時需在培育基中添加維生素；培育霉菌時需將PH 調(diào)整至酸性 ；培育細菌時需將 PH 調(diào)整至中性或微堿性 ；培育厭氧微生物時則需供給 無氧條件。牛肉膏蛋 蛋白胨能夠為微生物供給碳源、氮源、維生素，主要供給氮源 。6、獲得純潔培育物的關鍵是 防止外來雜菌入侵 ，主要包括消毒與 滅菌 。對試驗操作空 70%的酒精 進展消毒；接種環(huán)、涂布器應當用火焰灼燒滅菌；培育基一般用 高壓蒸汽滅菌法進展滅菌；培育皿、滴管等玻璃器材一般用干熱滅菌進展滅菌。接種室、超凈工作臺、接種箱在使 用前可以用 紫外線照耀 30min，進展消

6、毒處理。不管是消毒還是滅菌，其主要的原理都是在理化因素的作用下使微生物 蛋白質(zhì) 變性或者 核酸破壞損傷，以殺滅微生物。7PH 、 滅菌 、 倒平板 。在滅菌后，待培育基冷卻到50左右時，便可以進展倒平板操作。在倒平板過程中，拔出棉塞后需使錐形瓶瓶口通過火焰的緣由是防止瓶口微生物污染培育基，平板冷凝后，需倒置的緣由是 防止皿蓋上的水珠滴落到培育基，又可避開培育基中水分過快揮發(fā)。8、微生物的接種最常用的方法是稀釋涂布平板法 、 平板劃線法 ，其中 稀釋涂布平板法環(huán)在瓊脂固體培育基外表連續(xù)的劃線操作，將聚攏的菌種逐步稀釋分散到培育基外表， 在其次次、三次劃線前灼燒接種環(huán)的目的是殺死接種環(huán)上的殘留菌種

7、，使下一次劃線 的菌種來源于上次劃線的末端，以便獲得單個菌落劃線完畢后還需灼燒接種環(huán)的緣由是 殺死接種環(huán)上的殘留菌種稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基外表，在 稀釋度足夠高 的菌液里，聚攏在一起的微生物將被分散成 單個細胞 ，從而在培育基外表形成單個菌落。該方法主要包括兩個步驟，即系列稀釋操作與 涂布平板 操作。在稀釋時，應當將分別盛有9ml 水的各指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸3 次，使充分混勻。移液管事先應當 滅菌處理。涂布平板操作，用到的涂布工具是 涂布器 ，應當事先將其放入盛有酒精的燒杯中，然后在涂布前將其取出在火焰上引燃，并冷卻 ，方可進展涂布。 不是 是/不是用涂布器從試管中取菌液

8、，而是用膠頭滴管，取的菌液一般不超過 0.1 ml 。整個接種操作應當在酒精燈火焰旁完成。9、假設用平板劃線法接種后培育基上的某條線上的菌落分布呈溝槽狀，其緣由是劃線時用力是/不是每次劃線的菌種都來源于上次劃線的末端；假設在平板上有5 個劃線區(qū)域，則接種環(huán)應當6 次。1037恒溫箱 進展同步培育，其目的是 推斷培育基滅菌是否徹底或是否被污染 。在微生物培育時，有時候需要進展振蕩培育，其主要目的是 增大培育液中的溶解氧 使養(yǎng)分物質(zhì)被充分利用 。接種后的培育基在12h 24h 有/沒有明顯差異。11面 培育基上，在適宜的溫度下 培育 ，待 菌落長成 后，將試管放入 4 的冰箱中保-20 的冷凍箱中

9、保存。12、尿素是一種農(nóng)業(yè)氮肥， 不能 能/不能被農(nóng)作物直接吸取，必需被土壤中的細菌分解成 NH3 后，才能被植物吸取，尿素被細菌分解的反響式是 略 。在查找目的菌株時的思路是 依據(jù)它對生存環(huán)境的要求到相應環(huán)境中去查找 。以尿素為唯一氮源的培育基具有選擇作用的緣由是 原則上只允許能夠利用尿素的微生物在其上生長 。假設要推斷，假設，比照培育基上長出的菌落數(shù)明顯 多于 多于/少于該選擇培育基，則說明該培育基起到選擇作用。在選擇培育基上生長的菌， 不肯定 肯定/不肯定就是我后，假設PH 上升 ，指示劑變 紅 ，這樣便可初步鑒定該中細菌能夠分解尿素。在鑒定尿素分解菌時，一個以尿素為唯一氮源的酚紅鑒定培

10、育基平板只能鑒定此前在選擇培育基上生長的一種菌落。13、測定微生物數(shù)量的常用方法有 稀釋涂布平板法 或稱 活菌計數(shù)法 與 顯微鏡直接 計數(shù)法 其中的稀釋涂布平板法能夠統(tǒng)計是 菌落 的數(shù)目因此統(tǒng)計結果一般不用活菌數(shù)在統(tǒng)計時一般選擇菌落數(shù)在 30300的平板進展計數(shù)其目的是 保證結果準確 。選擇 30-300 的緣由主要包括以下幾點：稀釋度過低，簡潔計數(shù)不準確，造成試驗誤 差稀釋度過低，可能導致兩個或者兩個以上的菌體連在一起形成一個菌落，造成試驗 誤差稀釋度過低，會造成培育基中的微生物的種內(nèi)斗爭、種間競爭劇烈，使得一些個 體無法形成菌落，而造成試驗誤差稀釋度過高，形成的菌落數(shù)過少，不具有代表性。

11、該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目 低，緣由是 當兩個或多個細胞連在一起時平板上觀看到的只是一個菌落。在用該方法進展菌落計數(shù)時每個稀釋度下至 少涂布 3 個平板當幾個平板上的菌落數(shù)都在30-300 時且數(shù)據(jù)相差不是很大的狀況下，應當用幾個數(shù)據(jù)的 平均值 作為該稀釋度下的菌落值做計算。計算公式為：每克土壤m(xù)l樣品菌株數(shù)=(C/V)M其中，C 代表某一稀釋度下的平均菌落數(shù)，V 代表涂布時用的稀釋液體積，M 代表稀釋倍數(shù)。顯微鏡直接計數(shù)的計算公式可描述為：1ml 原液中的菌體數(shù)=每中格平均菌落數(shù)25或16 稀釋倍數(shù) 10000 =每小格平均菌體數(shù)400 稀釋倍數(shù) 10000 。該方法得到的數(shù)據(jù)比

12、實際的活菌數(shù)目 多 。 14、土壤取樣時，不能 能/不能直接選擇表層土，用于取樣的小鐵鏟和盛土樣的信封數(shù)量時，一般選用 104、105、106 倍的稀釋液進展涂布平板并培育，溫度一般把握在30-37 ，培育時間一般 1-2 天；測定土壤中放線菌數(shù)量時，一般選用 103、104、105 25-28 ，培育時間一般 5-7 天；測定土壤中真菌數(shù)量時，一般選用 102、103、104 倍的稀釋液進展涂布平板并培育，溫度一般把握在 25-28 ，培育時間一般 3-4 天。假設要初步推斷培育基上的兩個細菌是否為同種，可以依據(jù) 菌落 的特征，這些特征主要包括其 外形 、 大15、在植物或動物等的個體發(fā)育過

13、程中，細胞在形態(tài) 、 構造 、 生理功能 上都會消滅 穩(wěn)定性差異，形成這種差異的過程叫做細胞分化。細胞分化的根本緣由是遺傳信息在不同細胞中的執(zhí)行狀況不同 。一般而言，分裂力量強的細胞，分化程度較低低，反之亦然；高度分化的細胞無 有/無分裂力量。已經(jīng)分化的細胞，任然具有發(fā)育成 完整個體 的潛能，稱為細胞的全能性。全能性是否表達，根本上有/沒有表達細胞的全能性。細胞具有全能性的緣由是 細胞中含有本物種的全套遺傳信息 ，而植物細胞要表現(xiàn)出全能性的一個必要條件是 離體 。全能性的，如植物細胞比動物細胞更 簡潔 難/簡潔；體細胞比生殖細胞，生殖細胞比受精卵都更 難 難/簡潔；幼嫩細胞比年輕細胞 簡潔 難

14、/簡潔胞比分化程度高的細胞更 簡潔難/簡潔 難/簡潔。16或者說表達了 植物細胞的全能性 ；離體的植物組織、細胞被稱為 外植體 ，由它到愈傷組織的過程稱為 脫分化 或 去分化 ；由愈傷列疏松無規(guī)章、高度液泡化、呈無定型狀態(tài)的薄壁細胞 ，而根尖分生區(qū)的細胞特點是排列嚴密呈正方形 。組織培育技術的應用包括能夠?qū)崿F(xiàn)一些植物的 快速生殖 ，并人工種子用于基因工程中轉(zhuǎn)基因植物的獲得。17、影響植物組織培育的因素較多，主要包括以下幾個方面：組織培育的材料，不同的植物組織培育的難易程度差異很大同種植物材料的 年齡 、 保存時間的長短 也會影響組織培育結果。一般而言，簡潔進展 無性生殖 的植物，也就簡潔進展組

15、織培育；菊花組織培育一般選擇未開化植株的莖上部萌生的側枝 ，其緣由是這里的細胞分化程度低分裂力量強組織培育有特別的養(yǎng)分需求植物組織培育常用的培育 基是 MS 培育基 ，該培育基主要成分包括：大量元素 、 微量元素 、有機物 。其中有機物里的甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素的作用是 滿足離體的植物細胞在正常代謝受到影響時所產(chǎn)生的特別養(yǎng)分需求 蔗糖的作用包括供給 碳源 以及 維持細胞滲透壓 。植物激素包括細胞分裂素生長素 ， 不是是/不是植物細胞的養(yǎng)分物質(zhì)，他們是啟動 細胞分裂 、 脫分化 、 再分化 的關鍵性激素。在植物組織培育過程中，往往使用植物激素，來人為把握細胞的 脫分化 與 再分化 。激素的使

16、用挨次與 用量的比例 都會影響組織培育的結果如先用 生長素 再用 細胞分裂素 ，有利于細胞的分裂，但細胞不分化；假設先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞 既分裂又分化 ；假設二者同時使用可以 提高分化頻率 ，故在植物組織培育時一般都是 同時使用 ，以提高分化的可能性。在二者同時使用的前提下，二者的使用比例，也會影響組織培育結果，如生長素/細胞分裂素的比值 高 時，有利于根的分化，而抑制芽的形成；比值 低 時，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值適中時，促進愈傷組織 的形成MS 培育基與微生物培育基的主要差異是MS 培育基中需 供給大量無機鹽和添加植物激素。光照、PH、溫度也將影響組織培育，菊花組

17、織培育時，PH 一般把握在5.8 左右 ，溫度把握在 18-22 ，并且每日光照 12 h高/低。18MS 培育基的成分較多，而用量一般較小，全部需要配制 母液 ，無機鹽中的大量元素濃縮 10 100 倍，激素、維生素一般可依據(jù) 1mg/ml 的質(zhì)量濃度單獨配制母液。菊花組織培育 不必 必需/不必添加植物激素。MS 培育基配制PH ，再進展分裝滅菌，且為了削減污染，應領先 分裝滅菌S培育基的滅菌用到的方法是高壓蒸汽滅菌。在外植體的消毒時，既要考慮 消毒效果 常用 污染率 反映，又要考慮植物的 耐受力量常用 存活率、死亡率 反映70%的酒精 、 質(zhì)量分數(shù) 0.1%的氯化汞 兩種藥劑。接種操作都必

18、需在 酒精燈火焰旁 進展，且每次使用器械后，都需要 火焰灼燒 滅菌，在再次接種前必需待其 冷卻 。接種的菊花等莖段插入培育基時，應當留意插入的方向，不能 倒插 。假設接種后的外植體，在培育過19接種后的錐形瓶應當放到 無菌箱 中培育期間定期消毒培育其實是一個比較漫長的過程首先應當是 愈傷組織 的培育階段當其長到肯定大小時才能夠進展 生芽 培育進而進展 生根 培育這三個重要階段的培育基組成上不一樣 一樣不一樣，即在生芽后欲生根，必需 轉(zhuǎn)瓶 ，且培育基應當提高生長素 生長素/細胞分裂素的含量。在移栽試管苗之前，應領先翻開培育瓶的 封口膜 ，讓試管苗在 培育間 生長幾日。然后才將幼苗移植到消過毒的

19、蛭石 或 珍寶巖 等環(huán)境下生活一段時間，等幼苗長壯后再移栽到土壤。20、果汁制作要解決兩個主要問題：一是果肉的 出汁率低、耗時長 ；二是榨取的果汁 渾濁、黏度高、易沉淀。果膠是植物細胞壁以及 胞間層 的主要組成成分之一，它是由半乳糖醛酸 聚合而成的大分子化合物，不溶于水。果膠可被 果膠酶 催化分解成 可溶 可溶/不行溶的半乳糖醛酸，從而使果汁出汁率提高，變得澄清。果膠酶不特指一種酶，主要包括 多聚半乳糖醛酸酶 、 果膠分解酶 、 果膠酯酶 ，可來源于植21反響的 反響速度 來表示，而酶反響速度用 單位時間 內(nèi)，單位體積 中反響物的 削減22蛋白質(zhì)的提取和分別一般分為四步：樣品處理 、 粗分別

20、、純化 和 純度鑒定 。血紅蛋白提取第一步“樣品處理”主要包括 紅細胞 的洗滌、血紅蛋白的 釋放 、分別血紅蛋白溶液其中洗滌紅細胞的目的是 去除雜蛋白 采集的血樣分別紅細胞應當承受 地低速短時 離心，然后去除上層透亮的 黃色血漿 ，然后用五倍體積的 生理鹽水洗滌下層的紅細胞至少 3 次，直到 上清不再呈黃色，說明紅細胞已洗滌干凈。假設洗 滌次數(shù)過少無法 除去血漿蛋白 離心速度過高和時間過長會使 白細胞等一同沉淀 ，達不到分別的效果血紅蛋白的釋放是在 蒸餾水 、甲苯的作用下使紅細胞破 裂，血紅蛋白釋放。血紅蛋白釋放后形成的混合液，經(jīng)過2022r/min 的速度離心 10 min 后將在離心管中分

21、 4 層。至上而下，第1 層為 無色透亮甲苯層 ，第2 層為 白 色薄層固體 ，第3 層為 紅色透亮液體 ，第4 層是其他雜質(zhì)的 暗紅色沉淀層 。然后將上面3 層經(jīng)過 過濾 ，去除脂溶性沉淀層，于 分液漏斗 中靜置片刻，便可得到血紅蛋白水溶液。血紅蛋白提取其次步“粗分別”指的是 透析 ，馬上分液后得到血紅蛋白PH 為 7.0 的 20mmol/L 的磷酸緩沖液 進展透析 12 h。透析的目的是去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)以及用于更換樣品的緩沖液 ，其原理是 透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保存在袋內(nèi) 。血紅蛋白提取第三步“純化”指的是凝膠色譜 操作。凝膠色譜法又叫 安排色譜法 ，是依據(jù)蛋白質(zhì)

22、相對分子量大小 分別蛋白質(zhì)。相對分子質(zhì)量小 的蛋白質(zhì)簡潔進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長 ，移動速度 較慢 相對分子質(zhì)量 大 的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部通道路程 較短 移動速度 較慢 。在凝膠色譜柱的制作時用尼龍網(wǎng)和100 目的尼龍紗模擬色譜柱的 多孔板 ；凝膠色譜柱的裝填時應當將凝膠用 蒸餾水 /洗脫液充分溶脹后， 一次性緩慢 倒入色譜柱內(nèi)，整個裝填過程必需避開 氣泡 的形成。由于它將攪亂 洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序 ，降低蛋白質(zhì)分別效果。裝填完后，需用 20mmol/L 的磷酸緩沖液PH 為 7.0充分 洗滌平衡凝膠 12h，使裝填嚴密。當凝膠色譜柱洗滌平衡后，便可以進展 加樣 與 洗脫 。加樣前，應當翻開色譜柱下端的流出口，使凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊 關閉出口加樣時應當用吸管管頭沿管壁 圍繞移動 ，貼著管壁加樣留意不要破壞凝膠面，加樣后，應當使樣品 滲入 凝膠床內(nèi)，而后補充肯定體積的緩沖液于凝膠面上方。然后便可進展用 20mmol/L 的磷酸緩沖液進展洗脫。待 紅色蛋白質(zhì)接近色譜柱底端 時，便可收集流出液，每 5ml 收集一管。在洗滌平衡凝膠、加樣與洗脫過程中，不能發(fā)生洗脫液 流干，露出 凝膠顆粒 的現(xiàn)象。在色譜操作過程中假設紅色區(qū)帶均勻全都的移動 說明色譜柱的制作成功血紅蛋白提取第四“純度