紫芝發(fā)酵菌體中三萜類化合物的抑菌活性研究

1、紫芝發(fā)酵菌體中三萜類化合物的抑菌活性研究王曉玲劉高強(qiáng)周國(guó)英【摘要】目的檢測(cè)紫芝發(fā)酵菌體中三萜類化合物對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌的體外抑菌作用。要領(lǐng)杯碟法。效果紫芝三萜組分對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)有較顯著的按捺作用，而對(duì)枯草芽孢桿菌的按捺作用相對(duì)較弱；該三萜對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度為30g/l；而對(duì)枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度為60g/l。別的，該三萜的抑菌身分在40和60下處置懲罰2h較不變，但在80和100溫度下，熱不變性較差。結(jié)論紫芝三萜類化合物對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌有顯著的按捺作用?！娟P(guān)鍵詞】紫芝菌絲體三萜抑菌作用最小抑菌濃度靈芝是非常珍貴的藥用

2、真菌，在古代被稱為“仙草1。根據(jù)當(dāng)代生物學(xué)分類，我國(guó)有靈芝屬69種1。此中具有顯著藥理活性、應(yīng)用最普及的重要有：赤芝GandeaIuidu別號(hào)紅芝、松杉靈芝Ganderatsugae別號(hào)松杉樹芝、鐵杉靈芝、狹長(zhǎng)孢靈芝Gandealuidu、樹舌靈芝Gandeaapplanatu別號(hào)樹舌、平蓋靈芝等、紫芝Ganderasinense別名中國(guó)靈芝，是中國(guó)靈芝的特有種類1。?中國(guó)藥典?劃定，赤芝Gandea1uidu和紫芝Ganderasinense為靈芝正品2。比年來，大多有關(guān)靈芝的研究重要會(huì)合在赤芝的研究方面，包羅赤芝多糖、赤芝三萜的分散、藥理作用、發(fā)酵技能等3。但有關(guān)紫芝液體發(fā)酵技能和當(dāng)代藥理

3、作用的研究較少。已有研究表白，赤芝中三萜具有按捺腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、抗艾滋病病毒HIV-1、按捺真核DNA聚合酶、按捺U46619誘導(dǎo)的血小板凝集、止痛、平靜、解毒保肝和抗菌等成效1,47。但紫芝中子實(shí)體和發(fā)酵菌體中三萜的報(bào)道不多，本實(shí)行接納液體發(fā)酵技能得到紫芝菌絲體，從中制備了三萜類物質(zhì)，研究了其對(duì)幾種典范細(xì)菌生長(zhǎng)的按捺作用。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1菌種紫芝Ganderasinense由本研究室保存。1.2液體菌種制備歪面造就：菌種于28，在PDA歪面上造就6d。搖瓶造就：造就基(g/L)：蔗糖25，卵白胨3，酵母膏2，磷酸二氫鉀0.5，硫酸鎂0.2，維生素B10.01。接種后在26,140r/in下造

4、就6d。1.3發(fā)酵菌體中三萜物質(zhì)的制備菌體冷凍枯燥后，研成40目擺布的粉末，用50%(V/V)乙醇回流提取4h，離心后得到上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上完全去除溶劑，補(bǔ)適量水后，再參加適量氯仿于分液漏斗中萃取，重復(fù)萃取3次后，歸并氯仿層，揮去氯仿后，用正丁醇溶解萃取物，揮去正丁醇，再用無水乙醇振蕩提取后作為樣品8，9。1.4抑菌試驗(yàn)要領(lǐng)1.5最小抑菌濃度簡(jiǎn)直定接納一連稀釋法10,11。1.6溫度對(duì)三萜抑菌活性的影響菌絲體中三萜別離經(jīng)40，60，80，100處置懲罰2h后，檢測(cè)其抑菌活性。2效果3結(jié)論靈芝具有普及的藥理作用，赤芝子實(shí)體中的化學(xué)身分和藥理作用已有報(bào)道，但對(duì)赤芝菌體中活性物質(zhì)的藥理作用研究較少

5、，而紫芝液體造就菌絲體的藥理活性研究就更少。在靈芝抑菌方面，李平作等13報(bào)道了赤芝菌體中靈芝酸三萜化合物、三萜酸對(duì)大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、腸炎桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的抑菌作用，效果表白靈芝酸在50g/l時(shí)，對(duì)試驗(yàn)的4種細(xì)菌都較好的按捺作用，但沒有測(cè)定對(duì)種種細(xì)菌的最小抑菌濃度。本文通過深層發(fā)酵法制備了紫芝菌絲體中的三萜，檢測(cè)了其對(duì)革蘭氏陰性菌大腸桿菌、革蘭氏陽(yáng)性菌金黃色葡萄球菌以及芽孢桿菌枯草芽孢桿菌的體外抑菌作用。效果表白，紫芝菌體中三萜類化合物對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)均具有顯著的按捺作用，但對(duì)枯草芽孢桿菌的按捺作用相對(duì)較弱；該三萜對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度均為3

6、0g/l，對(duì)枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度為60g/l。別的，該三萜的抑菌身分在40和60下處置懲罰2h較不變，但在80和100溫度下，熱不變性較差?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1林志彬.靈芝的當(dāng)代研究，第2版.北京：北京醫(yī)科大學(xué)出書社，2001：1.2國(guó)度藥典委員會(huì).中國(guó)藥典S.北京：化學(xué)產(chǎn)業(yè)出書社，2000.3ShiaS.NaturalprdutsftheediinalfungusGanderaluidu:urrene,bilgialativities,andpharalgialfuntinsJ.heialRerd,2022,3：172.4劉高強(qiáng)，丁重陽(yáng)，王曉玲.靈芝三萜類化合物抗癌作用機(jī)制的研究希望J.菌物

7、學(xué)報(bào)，2022,26(3)：470.5EL-ekkayS,eselhyR,NakauraN,etal.Anti-HIV-1andanti-HIV-1-prteasesubstanesfrGanderaluiduJ.Phytheistry1998,49：1651.6izushinaY,TakahashiN,HanashiaL,etal.Luideniaidandlatne,neterpeneinhibitrsfeukarytiDNAplyerasesfrabasidiyete,GanderaluiduJ.Birgedhe,1999,7：2047.7angG,ZhaJ,LiuJ,etal.Enha

8、neentfIL-2andIFN-gaaexpressinandNKellsativityinvlvedintheanti-tureffetfganderiaideinvivJ.InternatinalIunpharalgy,2022,7(6)：864.8王玉紅，丁重陽(yáng)，章克昌.苦蕎對(duì)靈芝發(fā)酵消費(fèi)靈芝酸的影響J.食品與發(fā)酵產(chǎn)業(yè),2022,29(9)：95.9TangYJ,ZhngJJ.Fed-bathferentatinfGanderaluidufrhyperprdutinfplysaharideandganderiaidJ.EnzyeandirbialTehnlgy,2002,31：20.10黃鈺鈴,王斌.山茱萸果肉抑菌物質(zhì)的提取及抑菌作用研究J.食品科技,2022,3：67.11梁盛年,段志芳,付莉,等.幾種肉桂酸衍生物與