纈草油體外抑菌活性研究

1、纈草油體外抑菌活性研究【摘要】目的探究纈草油的抑菌活性。要領(lǐng)以索氏提取法和水蒸氣蒸餾法提取的纈草油為試材，用管碟法和微量稀釋法比力兩種要領(lǐng)提取的纈草油對供試菌的抑菌活性、最低抑菌濃度(I)和最小殺菌濃度(B)。結(jié)果兩種要領(lǐng)提取的纈草油對細(xì)菌和真菌有必然程度的按捺作用。結(jié)論纈草油有抑菌作用，具很大應(yīng)用潛力。實(shí)行結(jié)果為其在食品、化裝操行業(yè)的開拓應(yīng)用提供了根據(jù)。【關(guān)鍵詞】纈草；揮發(fā)油；抑菌活性Keyrds：ValerianaffiinalisL.;Vlatileil;Antiirbialativity纈草ValerianaffiinalisL.是一種敗醬科、纈草屬多年生草本植物1。纈草原產(chǎn)于亞洲，在

2、北美、歐洲、日本和我國的湖南、云南、貴州、四川等省有普及的漫衍。纈草的根和根莖具有很高的經(jīng)濟(jì)代價(jià)和藥用代價(jià)2，我百姓間很早就用于治痢疾、驅(qū)蛔蟲、落血壓、解痙攣等。從纈草根中提取的揮發(fā)油對神經(jīng)衰弱、失眠、癲癇等有顯著療效3。同時纈草油照舊珍貴的天然香料，特別實(shí)用于配制高等煙的加香和食品的定香劑。很多植物揮發(fā)油由于其特別的化學(xué)構(gòu)成，在很多研究中表示出了很好的抗菌活性，成為新的高效低毒防腐劑的緊張泉源4。如今尚未有對纈草油體外抗菌作用的詳細(xì)報(bào)道，本實(shí)行以水蒸氣蒸餾法和索氏提取法提取纈草油為試材，舉行體外抗菌作用研究，旨在拓寬纈草資源的應(yīng)用范疇，以期為進(jìn)一步開拓使用這一富厚的植物資源提供參考數(shù)據(jù)。1質(zhì)

3、料與儀器1.1質(zhì)料纈草，采于湖南省湘西自治州(經(jīng)斷定為寬葉纈草VffiinalisLvarlatifliaiq1.2菌種枯草芽孢桿菌Baillussubtilis，金黃色葡萄球菌Staphylusaureus，大腸桿菌Esherihiali，黑曲霉Aspergillusniger，青霉Peniilliuitrinu，根霉Rhizpusspl.。以上菌種均由中南林業(yè)科技大學(xué)發(fā)酵工程實(shí)行室提供。1.3造就基牛肉膏卵白胨造就基(細(xì)菌用)；馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)造就基(真菌用)121高壓滅菌20in,備用。1.4東西牛津杯，LA-5060S高壓滅菌鍋，PYX-280S-A生化造就箱，HY-100B

4、恒溫造就搖床，RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，SHZ-D循環(huán)水式真空泵，S-J-2FD超凈事情臺。2要領(lǐng)2.1揮發(fā)油的提取水蒸氣蒸餾法5：取纈草50g，置于1000l圓底燒瓶中，參加適量的蒸餾水使其潤濕，水蒸氣蒸餾4h，網(wǎng)絡(luò)水-纈草油餾出液，將餾出液用乙醚萃取，乙醚相加適量無水硫酸鈉脫水后，于40擺布蒸干乙醚，網(wǎng)絡(luò)揮發(fā)油。索氏提取法6：取纈草25g，用濾紙包成小包放入索氏提取器中，提取瓶內(nèi)參加乙醚200l，然后結(jié)實(shí)在鐵架臺上，置于恒溫水浴鍋中(4045)，同時冷凝水回流，提取至提取器中液體無色，取出提取液，加無水硫酸鈉低溫枯燥24h過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去濾液中的乙醚，網(wǎng)絡(luò)揮發(fā)油。2.2體外抗菌試驗(yàn)將保存菌

5、種接種平板，于37造就24h后，選擇典范菌落接種于肉湯中，再經(jīng)37肉湯造就18h后，以平板造就計(jì)數(shù)法測定其生長濁度，然后將菌液稀釋至105106fu/l備用。接納管碟法舉行7。將熔化瓊脂造就基冷卻至50，參加適量的測試菌懸液與瓊脂造就基混勻，汲取15l置平皿內(nèi)，待凝固后，將牛津杯安排平皿菌層上，每杯參加藥液0.25l，5%的山梨酸鉀水溶液，作為抑菌活性測定的陽性比較，以稀釋劑1%吐溫-80水溶液作比較，作為抑菌活性測定的陰性比較。置于恒溫箱中造就細(xì)菌在37下造就24h,真菌在28下造就4872h)，記載形成的抑菌圈直徑。每組實(shí)行重復(fù)3次，實(shí)行結(jié)果取均勻值s。接納微量稀釋法8。微孔板上的各孔中，

6、依次參加用造就基二倍稀釋的藥物溶液，每孔200l，末了一孔不加藥物(僅加造就基和細(xì)菌)為細(xì)菌生長比較孔，然后在每孔中參加稀釋菌液501，別的留一列孔不加細(xì)菌(僅加造就基和藥液)作藥液比較孔，使得各孔中揮發(fā)油濃度別離50.00，25.00，12.50，6.25，3.13，1.56g/l，置于振蕩器上振蕩1in使孔內(nèi)溶液充實(shí)混勻，置于恒溫箱中造就細(xì)菌在37下造就24h，真菌在28下造就4872h)，無細(xì)菌生長孔所含最低藥物濃度即為最小抑菌濃度。取上述提取物最低抑菌濃度以上未見細(xì)菌生長的各管造就物，別離汲取100l，移至不含提取物的平皿瓊脂造就基上，輕輕推開提取液，置37造就留宿，不雅察有無菌生長，

7、計(jì)數(shù)少于5個菌落者即為該藥的最低殺菌濃度(B)9。3結(jié)果3.1纈草油的抑菌結(jié)果抑菌結(jié)果斷定尺度為D為抑菌圈直徑：D8為不敏感，819為高度敏感。如表1所示，纈草油對大腸桿菌、枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、青霉均有按捺作用。兩種要領(lǐng)得到纈草油對細(xì)菌有抑菌結(jié)果，抑菌圈直徑14.00，而對根霉和黑曲霉的抑菌圈直徑8.00。纈草油對供試菌株的按捺結(jié)果挨次為：金黃色葡萄球菌枯草桿菌大腸桿菌青霉。表1兩種要領(lǐng)提取的揮發(fā)油對供試菌作用的抑菌圈直徑略3.2纈草油對供試細(xì)菌的I按照抑菌圈測定結(jié)果,對各受試菌種有作用的樣品進(jìn)一步實(shí)行測定I和B，纈草油對供試菌株的按捺結(jié)果挨次為：金黃色葡萄球菌枯草桿菌大腸桿菌青霉。這一

8、結(jié)果與管碟法檢測抑菌結(jié)果的作用挨次同等。表2水蒸氣蒸餾法提取纈草油的I略表3索氏提取法提取纈草油的I略由表23可以看出，纈草油對供試菌株均有必然的按捺作用，纈草油對供試菌株的I為3.1325.00g/l。兩種提取要領(lǐng)得到的纈草油對大腸桿菌、枯草桿菌和青霉的I雷同；而對金黃色葡萄球菌的I略有變革，這大概是由于提取的要領(lǐng)差異，所得到的精油含有多種身分且各身分的活性強(qiáng)度各不雷同所致。同時，纈草油對霉菌的按捺結(jié)果弱于對細(xì)菌的按捺結(jié)果，大概由于含有利于霉菌生長的化學(xué)身分，減弱了抑菌活性身分對霉菌的按捺作用。3.3纈草油對供試細(xì)菌的B從表23中未產(chǎn)生菌體生長的受試組中挑一環(huán)造就液，接種于固體造就基上，劃線

9、造就，不雅察，以產(chǎn)生菌落少于5個的受試組為試樣對某供試菌株的最小殺菌濃度B。表4兩種要領(lǐng)提取纈草油的Bgl-1供試菌株索氏提取法提取略表4中表白，纈草油對供試菌株均表示必然程度的殺滅作用，此中，對金黃色葡萄球菌結(jié)果較好B為3.136.25g/l；對青霉的結(jié)果相對較弱B為25.0050.00g/l。兩種提取要領(lǐng)得到的纈草油對各受試菌的B與I根本雷同，說明纈草油對各受試菌有不變的按捺作用。隨著纈草油濃度的增長,抑菌的結(jié)果更好。4結(jié)論纈草油對金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌及毛霉有必然的按捺作用，對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑均在16以上最為敏感，對枯草桿菌和大腸桿菌的抑菌圈直徑均在14以上較為敏感

10、。結(jié)果挨次為：金黃色葡萄球菌枯草桿菌大腸桿菌青霉。纈草油對供試菌株的I為3.1325.00g/l，B為3.1350.00g/l。兩種要領(lǐng)提取的揮發(fā)油其抑菌作用根本同等，都對細(xì)菌作用按捺較強(qiáng)，對真菌的抑菌活性相對較差。試驗(yàn)中所用受試物為纈草油，其抑菌作用并非單一化合物的活性，大概是多種身分的協(xié)同作用，為了進(jìn)一步相識纈草活性物質(zhì)的抑菌機(jī)理，可對提取物舉行分散純化，深化探究其活性物質(zhì)的抑菌機(jī)理及其構(gòu)效干系。影響抑菌活性的因素較多，如受試菌株的生長速率、受試液的擴(kuò)散結(jié)果有關(guān)，水溶性越大，擴(kuò)散性越大。在食品和化裝品體系中，微生物僅僅出如今水相，進(jìn)入酯相中的防腐劑被以為是無用的喪失。但是通過接納有用方法，

11、進(jìn)步纈草油的水溶性，便可使其更好地發(fā)揮抑菌作用。別的，纈草油具有特別的芳香，亦可作為化裝品香料，這是其他防腐劑無法相比的。纈草具有很多藥理成效，開拓其在抑菌方面的應(yīng)用，可謂一舉多得。本實(shí)行表白，纈草油有抑菌作用，具有很大的應(yīng)用潛力，可以作食品、化裝品等行業(yè)的抑菌劑舉行開拓?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1郄建坤，屈會化，欒新慧.纈草屬植物化學(xué)身分及藥理研究外表J.中國藥學(xué)雜志，2002，3710:729.2PiinelliAL,AranaS.NelignansfrthertsfValerianaprinphyllaithantixidativeandvasrelaxantativitiesJ.JNatPrd,2022,67(7):1135.3周琳，郭寶英，張靜，等.纈草研究希望J.領(lǐng)土與天然資源研究，2022，303：392.4TangYF,ZhangL,HuangBH.TheextratinandantiirbialativityfinnanilJ.NaturePrdutResearhandDevelpent,2022,18:432.5陳屹，章銀珠，孫石磊，等.槐花精油的化學(xué)身分及其抑菌活性的研究J.當(dāng)代食品科技，2022，24(4)：318.6楊云裳，張應(yīng)鵬，馬興銘，等.藏藥短穗兔耳草有用部位