乙型肝炎病毒表面抗原試劑盒性能驗證方案

1、乙型肝炎病毒表面抗原試劑盒性能驗證方案報告人：時間：批準人：時間：宿遷市中醫(yī)院檢驗科目錄一、系統(tǒng)信息二、驗證目的三、檢測原理四、驗證過程五、驗證結果六、驗證結論七、參考文獻八、附件一、系統(tǒng)信息項目名稱：乙型肝炎病毒表面抗原（酶聯(lián)免疫法）設備名稱及型號：AutoBio phomo酶標儀/Anthos fluido洗扳機試劑名稱：乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）批號：201610402 有效期：20171024 廠商：上?？迫A生物工程股份有 限公司質控品名稱：康徹思坦HBsAg質控品0.2IU/ml批號：201611007有效期：20181121廠商：北京康徹思坦生物技術有限公司 二、驗證目的驗

2、證HBsAg檢測性能是否滿足臨床要求。三、檢測原理采用抗一HBs包被反應板，加入待測樣本，經孵育后，加入抗一HBs-HRP,當 樣本中存在HBsAg時，該HBsAg與包被抗一HBs結合并與抗一HBs-HRP結合形成抗 一HBs-HBsAg-抗一HBs-HRP復合物，加入TMB底物產生顯色反應，反之則無顯色反 應。四、驗證過程批內精密度選擇康徹思坦HBsAg 0.2IU/ml濃度質控品，在一批檢測內，重復檢測10次 （孔），計算所得S/CO值的均值和SD,計算批內CV%。判斷結論：批內精密度變異CV%應W15%。檢測結果符合率按要求選擇樣品進行驗證選取至少40例樣本，結果為陰性和陽性的樣品各20

3、例，按常規(guī)樣本檢測程序 進行檢測，結果按下列公式進行計算，得到陰/陽結果符合率： 敏感性：被測試劑盒測定真陽性數/（真陽性數+假陰性數）*100%特異性：被測試劑盒測定真陰性數/ （真陰性數+假陽性數）*100%符合率：被測試劑盒測定（真陽性數+真陰性數）/ （真陽性數+假陰性數+真陰性數 +假陽性數）*100%結果判斷：敏感性=100%；特異性=100%；符合率=100%檢出限驗證選取一個已知濃度的定值質控，按原倍、1:1、1:2、1:3、1： 4、1：5等稀釋倍數進行稀釋，將稀釋后的系列樣本按常規(guī)樣本的檢測程序進行檢測，尋求S/CO最接近1但大于1的稀釋度。如果稀釋樣本S/CO結果大于1，

4、則繼 續(xù)增加稀釋倍數做檢測。將S/CO結果接近1的稀釋度的樣本作20次重復測試，如 果95%以上的結果都大于1，則可將該稀釋度對應樣本的濃度當做檢出限濃度。、根據上述系列樣本中結果為陽性時最大稀釋倍數計算其檢出限，具體公式 如下：檢出限二原始樣本濃度/結果為陽性時的最大稀釋倍數五、驗證結果驗證指標驗證結果判斷標準/ 廠商聲明判定結果 （Y/N）精密度（CV）11.13%15%Y敏感性100%100%Y特異性100%100%Y符合率100%100%Y檢出限0.1IU/ml0.1IU/mlY六、驗證結論本室HBsAg檢測項目精密度、敏感性、特異性、符合率、檢出限均可接受，符 合臨床需求。七、參考文

5、獻CNAS-CL39：醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則在臨床免疫學定性檢驗領域的 應用說明。八、附件1、HBsAg定性項目性能驗證記錄2、實驗原始數據HBsAg定性項目性能驗證記錄檢驗科免疫組-感染檢測依據CNAS-CL39：醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則 在臨床免疫學定性檢驗領域的應用說明對醫(yī)學實驗室檢測系統(tǒng)性能評價的相關要 求，對HBsAg定性項目的性能評價主要從以下幾個方面進行：精密度、敏感性、特 異性、符合率、檢出限等。具體結果如下：1精密度精密度，以康徹思坦0.2IU/ml質控品進行評價，在一個批次內連續(xù)檢測10 次。計算其均值、標準差及變異系數，以不超過15%為判斷依據。精密度驗證試驗數

6、據記錄表項目名稱HBsAg檢測設備/編號AutoBio phomo 酶標儀/Anthos fluido 洗扳機檢測試劑/批號科華試劑/201610402樣品/批號康徹思坦0.2IU/ml質控品/201611007檢測方法酶聯(lián)免疫吸附法樣品：康徹思坦0.2IU/ml質控品測定次數測定結果（S/CO 值）測定次數測定結果（S/CO 值）12.14062.32022.05072.01032.04082.04042.02091.98052.040101.940均值：2.058SD ：0.105CV： 5.10%判斷標準：CVW15%重復性精密度驗證結果：滿足要求口不滿足要求結論：本室所檢測項目出5人8

7、重復性精密度均在允許范圍內，可接 受。2敏感性敏感性以用雅培化學發(fā)光確認的20份陽性樣品進行評價，記錄其結果，以陽 性結果的百分比作為評價標準。樣品編號雅培化學發(fā)光 測定結果 （IU/ml）科華測定結 果 （S/CO 值）樣品編號雅培化學發(fā)光測 定結果 （IU/ml）科華測定結果（S/CO 值）160.9325.066117567.6225.5542173.0925.44612637.5124.826328579.420.6781311.4620.81842902.2523.628149396414.48858611.1524.033153537.8828.2406412.6625.99216

8、11011.5925.14978403.3423.1071749.1125.61282399.8526.074182370.7526.917919148.7422.893193180.9426.868102466.625.843202262.1128.760敏感性：被測試劑盒測定真陽性數/（真陽性數+假陰性數）*100%=100%敏感性驗證結果：滿足要求口不滿足要求3特異性特異性以用雅培化學發(fā)光確認的20份陰性樣品進行評價，記錄其結果，以陰 性結果的百分比作為評價標準。樣品編號雅培化學發(fā)光測 定結果 （IU/ml）科華測定結果（S/CO 值）樣品編號雅培化學發(fā)光測 定結果 （IU/ml）科華測

9、定結果（S/CO 值）10.0000.091110.0000.10720.0000.124120.0000.25630.0000.116130.0000.05840.0000.107140.0000.05850.0000.017150.0000.28960.0000.008160.0000.10770.0000.066170.0000.00080.0000.025180.0000.14990.0000.165190.010.000100.0000.157200.010.017特異性：被測試劑盒測定真陰性數/ （真陰性數+假陽性數）*100%=100%特異性驗證結果：滿足要求口不滿足要求4符合率符合率：被測試劑盒測定（真陽性數+真陰性數）/ （真陽性數+假陰性數+真 陰性數+假陽性數）*100%=100%符合率驗證結果：滿足要求口不滿足要求5檢出限材料：康徹思坦0.2IU/ml HBsAg質控品。結果：擬以1:1作為目標稀釋度，以此稀釋度樣本做20次重復性檢測，所得 S/CO值均大于1。根據稀釋度計算其濃度為0.1IU/ml，故將此濃度作為檢出 限濃度。數據：稀釋比例S/CO平均結果判斷原倍2.1402.0502.0402.08Y1:11.2401.1601.0501.15Y1:20.710.690.640.68Y1:1稀釋度重復20次S/C