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1、 緒論陶 義 訓(xùn)臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)2021/9/30全國(guó)高等醫(yī)藥院校教材(供醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)用)臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn) 第3版 2003免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn) 第1版 1989 第2版 19972021/9/30醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)Medical Laboratory檢驗(yàn)醫(yī)學(xué) Laboratory Medicine2021/9/30檢驗(yàn)項(xiàng)目的發(fā)展對(duì)臨床有重要的意義 診斷 治療 預(yù)后 預(yù)防2021/9/30診斷 感染性疾病 HIV感染, HBV, HCV感染 SARS,禽流感 心血管疾病 急性心肌梗死 肌鈣蛋白 肌紅蛋白 CK-MB 心衰 BNP2021/9/30治療 預(yù)后 腫瘤標(biāo)志 C-反應(yīng)蛋白和炎癥2021/9
2、/30 CA 19-9(Cancer Antigen19-9,Carbohydrate Antigen 19-9) 0 2 4 6 8 10 101001,00010,000腫瘤進(jìn)展穩(wěn)定狀態(tài)腫瘤緩解CA 19-9U/mlRx: 5 FU+MTX 5 FU+BCNU Mitomycin C化療中CA 19-9的監(jiān)控月份2021/9/30CRP 炎癥-抗生素治療2021/9/30預(yù)防(風(fēng)險(xiǎn)因子)2021/9/30高敏C-反應(yīng)蛋白hs-CRP 初級(jí)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)(高血脂,高血壓,糖尿病,吸煙史)心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)2021/9/30心梗風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)PM Ridker, N Engl J Med 20002021
3、/9/30免疫檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)技術(shù)免疫檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用2021/9/30免疫檢驗(yàn)技術(shù)細(xì)胞免疫檢驗(yàn)技術(shù) 免疫細(xì)胞的檢測(cè) 細(xì)胞因子的測(cè)定體液免疫檢驗(yàn)技術(shù) 抗原、抗體、補(bǔ)體的測(cè)定 免疫測(cè)定2021/9/30免疫測(cè)定IMMUNOASSAY( IA)抗原抗體 抗原抗體復(fù)合物 Ag Ab Ag-Ab 2021/9/30免疫測(cè)定分類(lèi) 免疫濁度測(cè)定 Ag + Ab AgAb + Ab 標(biāo)記免疫測(cè)定 Ag + Ab* Ag Ab* + Ab* (B) (F)2021/9/30免疫測(cè)定分類(lèi) 均相免疫測(cè)定 HOMOGENOUS IA 在測(cè)定中結(jié)合的反應(yīng)物(B)與游離的反應(yīng)物(F) 不需要分離 異相免疫測(cè)定 HETEROG
4、ENOUS IA 在測(cè)定中需要分離(B)和(F)2021/9/30免疫測(cè)定的敏感度 免疫濁度測(cè)定 gng 標(biāo)記免疫測(cè)定 ngpg2021/9/30 標(biāo)記免疫測(cè)定 放射免疫測(cè)定 1960 酶免疫測(cè)定 1970 熒光免疫測(cè)定 19801990 化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定 1990 膜固相免疫測(cè)定 1990 2021/9/30可測(cè)定項(xiàng)目 均相免疫測(cè)定-1-酸性糖蛋白-1-抗胰蛋白酶白蛋白(投射比濁)載脂蛋白A1載脂蛋白B抗O補(bǔ)體C3c補(bǔ)體C4銅藍(lán)蛋白C反應(yīng)蛋白鐵蛋白觸珠蛋白糖化血紅蛋白免疫球蛋白A免疫球蛋白G免疫球蛋白MKappa輕鏈Lambda輕鏈脂蛋白a肌紅蛋白前白蛋白類(lèi)風(fēng)濕因子可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體轉(zhuǎn)鐵蛋白
5、對(duì)乙酰氨基酚氨甲酰氮卓地高辛洋地黃毒苷慶大霉素苯巴比妥苯妥因普魯卡因水楊酸鹽茶堿妥布拉霉素丙戊酸特定蛋白治療藥物監(jiān)控濫用藥物乏碳水化合物轉(zhuǎn)鐵蛋白苯丙胺巴比妥酸鹽苯二氮大麻可卡因乙醇美沙酮鴉片苯環(huán)利啶右丙氧芬2021/9/30可測(cè)定項(xiàng)目 異相免疫測(cè)定(一)乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗體乙型肝炎e抗原乙型肝炎核心抗體乙型肝炎核心抗體IgM甲型肝炎抗體甲型肝炎抗體IgM丙型肝炎抗體HIVcombi甲胎蛋白癌胚抗原總前列腺特異性抗原游離前列腺特異性抗原糖類(lèi)抗原125糖類(lèi)抗原15-3糖類(lèi)抗原19-9糖類(lèi)抗原72-4神經(jīng)元特異烯醇化酶細(xì)胞角蛋白片斷21-1傳染病腫瘤標(biāo)志物貧血鐵蛋白維生素B12血清葉酸紅
6、細(xì)胞葉酸骨質(zhì)疏松甲狀旁腺激素骨鈣素-膠原特殊序列25-(OH)2VitD2021/9/30可測(cè)定項(xiàng)目 異相免疫測(cè)定(二)促甲狀腺激素三碘甲腺原氨酸甲狀腺素游離甲狀腺素游離三碘甲腺原氨酸甲狀腺球蛋白抗甲狀腺球蛋白抗甲狀腺微粒體抗體甲狀腺吸收率肌鈣蛋白T肌酸激酶同工酶肌紅蛋白腦鈉素前體地高辛洋地黃毒苷甲狀腺心梗標(biāo)志糖尿病及其他胰島素免疫球蛋白E2021/9/30檢驗(yàn)技術(shù)的進(jìn)展 自動(dòng)化 簡(jiǎn)便化2021/9/30自動(dòng)化分析 提高工作效率 提高精密度(CV%) 手工操作誤差 分析儀系統(tǒng)誤差2021/9/30自動(dòng)分析系統(tǒng) 自動(dòng)分析儀 配套的測(cè)定試劑 配套的校準(zhǔn)品2021/9/30檢測(cè)系統(tǒng)校準(zhǔn)品試劑儀器檢測(cè)
7、方法2021/9/30自動(dòng)分析系統(tǒng)( 儀 器 + 試 劑 )校準(zhǔn)品2021/9/30生化自動(dòng)分析系統(tǒng)生化測(cè)定分析物 試劑產(chǎn)物吸光度(化合物)(化合物)化學(xué)反應(yīng)溫度、時(shí)間(化合物)分光光度計(jì)波長(zhǎng)(nm)(A)2021/9/30免疫自動(dòng)分析系統(tǒng)免疫測(cè)定分析物 試劑產(chǎn)物(抗原)(抗體)化學(xué)反應(yīng)溫度、時(shí)間(抗原抗體復(fù)合物)均相免疫測(cè)定異相免疫測(cè)定2021/9/30免疫自動(dòng)分析系統(tǒng)均相免疫測(cè)定(B,F(xiàn)不需分離)直接在生化自動(dòng)分析儀中測(cè)定異相免疫測(cè)定(B,F(xiàn)需分離)Ag + Ab* AgAb* + Ab* (B) (F)分析儀中需加入B,F分離裝置免疫濁度測(cè)定均相酶免疫測(cè)定2021/9/30血清標(biāo)本可測(cè)定
8、的項(xiàng)目生化測(cè)定 標(biāo)記免疫測(cè)定 均相免疫測(cè)定肝功能甲狀腺功能 特定蛋白 藥物腎功能激素 免疫功能 鎮(zhèn)靜劑心血管疾病腫瘤標(biāo)志 心血管疾病 抗生素糖尿病心肌標(biāo)志 炎癥 心血管病藥電解質(zhì) 感染性疾病 營(yíng)養(yǎng)監(jiān)測(cè) 毒品50項(xiàng) 50項(xiàng) 50項(xiàng)2021/9/30 模塊式自動(dòng)分析儀 Modular 同類(lèi)型的模塊可以整合在一起測(cè)定 生化模塊 P800 D2400 電解質(zhì)模塊 ISE900/1800 標(biāo)記免疫模塊 E170 2021/9/302 Core Unit 核心模塊 1 Control Unit 操作單位血清工作區(qū)Serum Work Area (SWA)生化,免疫聯(lián)合自動(dòng)分析系統(tǒng)3ISE 900/1800
9、 module:電解質(zhì)測(cè)定模塊4D 2400 module: 生化測(cè)定模塊5P 800 module: 生化測(cè)定模塊6E170 module: 免疫測(cè)定模塊45232612021/9/30簡(jiǎn) 便 化 簡(jiǎn)便快速 單份測(cè)定 儀器小巧 試劑穩(wěn)定2021/9/30POCT檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的新領(lǐng)域2021/9/30POCT名詞解釋 Point-of-care testing point 時(shí)間、地點(diǎn) care 保健 testing 檢驗(yàn)2021/9/30與POCT相關(guān)的名詞 醫(yī)師診所檢驗(yàn) 家用檢驗(yàn) 檢驗(yàn)科外的檢驗(yàn) 分散檢驗(yàn) 床邊檢驗(yàn) 病人身邊檢驗(yàn) 就地檢驗(yàn) 即時(shí)檢驗(yàn)2021/9/30POCT與中央檢驗(yàn) 在醫(yī)院檢驗(yàn)
10、科集中進(jìn)行的檢驗(yàn)稱(chēng)為中央檢驗(yàn)(centralized testing)2021/9/30病人醫(yī)生結(jié)果解釋?zhuān)?1)(1)填寫(xiě)檢驗(yàn)申請(qǐng)傳送報(bào)告單(10)填寫(xiě)檢驗(yàn)報(bào)告單(9)(3)送至檢驗(yàn)科(2)采取標(biāo)本確認(rèn)結(jié)果(8)(4)登記檢驗(yàn)申請(qǐng)質(zhì)控檢查(7)(5)標(biāo)本準(zhǔn)備(6)分析標(biāo)本和質(zhì)控品中央檢驗(yàn)工作環(huán)節(jié)2021/9/30檢驗(yàn)周轉(zhuǎn)期 從采取標(biāo)本到送出檢驗(yàn)報(bào)告所花的時(shí)間稱(chēng)為檢驗(yàn)周轉(zhuǎn)期(turnaround time,TAT)2021/9/30醫(yī)院內(nèi)和醫(yī)院外的POCT2021/9/30醫(yī)院內(nèi)的POCT 急診檢驗(yàn)室 門(mén)診檢驗(yàn)室 分科門(mén)診POCT 手術(shù)室POCT 監(jiān)護(hù)病房POCT 小兒科POCT 特殊病人的床邊
11、POCT2021/9/30醫(yī)院外的POCT 醫(yī)師診所 醫(yī)務(wù)室 救護(hù)車(chē)上 事故現(xiàn)場(chǎng) 出入境檢驗(yàn) 家庭2021/9/30POCT技術(shù) 簡(jiǎn)便快速 單份測(cè)定 儀器小巧 試劑穩(wěn)定2021/9/30金標(biāo)記膜固相免疫測(cè)定2021/9/30固相免疫測(cè)定(B)和(F)的分離(ELISA)AbAg +Ab*AbAgAb*Ab* Ab*2021/9/30膜固相免疫測(cè)定(Membrane based immunoassay)以微孔膜(硝酸纖維素膜)為固相以有色微粒(紅色的膠體金)為標(biāo)記物簡(jiǎn)便快速測(cè)定2021/9/30固相微孔膜 硝酸纖維素膜 孔徑:0.20.6 m2021/9/302021/9/30硝酸纖維素膜與聚苯
12、乙烯微孔板的比較膜板對(duì)蛋白質(zhì)的吸附強(qiáng)弱表面積大(微孔)?。ㄆ矫妫┪阅芪晃礈爝^(guò)濾,移行沖洗2021/9/30膠體金標(biāo)記2021/9/30膠體金(Colloidal Gold)1560 nm優(yōu) 質(zhì)劣 質(zhì)2021/9/30膠體金結(jié)合物CONJUGATE2021/9/30膠體金結(jié)合物(Conjugate)2021/9/30膜固相免疫測(cè)定分類(lèi) 免疫滲濾測(cè)定(IMMUNOFILTRATION ASSAY,IFA) 免疫層析測(cè)定(IMMUNOCHROMATOGRAPHIC ASSAY,ICA)2021/9/30IFA 穿流(FLOW TROUGH)ICA 橫流(LATERAL FLOW)2021/9/30免疫層析測(cè)定ICA2021/9/302021/9/30ICA 試劑條結(jié)構(gòu)示意圖樣品墊結(jié)合物墊NC膜吸水墊2021/9/30ICA 雙抗體夾心法測(cè)抗原2021/9/30ICA 間接法測(cè)抗體2021/9/30ICA 結(jié)果觀察陽(yáng)性陰性無(wú)效2021/9/30膜固相免疫測(cè)定的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)不足之處簡(jiǎn)便,快速
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