d-二聚體的臨床應用及研究進展課件

1、d-二聚體的臨床應用及研究進展課件實驗醫(yī)學的發(fā)展向兩極分化大型、高效率、自動化儀器、快速度、高通量、系列化 模塊式組合 流水線工作站 （Automaton）PC、LIS - 高精密度實驗室計算機管理 - 高精確性數(shù)據(jù)傳送系統(tǒng) - 高效率化診療依據(jù)小型、簡單化、報告即時性、快節(jié)奏、低要求、個體化 儀器體積小 縮短周轉時間 （Point-of-care testing ）急診、門診、手術、監(jiān)護、 床 旁 服務、非診療依據(jù)實驗醫(yī)學的發(fā)展向兩極分化大型、高效率、自動化儀器、 模塊d-二聚體的臨床應用及研究進展課件基礎醫(yī)學臨床醫(yī)學預防醫(yī)學生物醫(yī)學信息技術工程技術飛速發(fā)展促進、支撐實驗醫(yī)學快速進步先進實驗

2、技術現(xiàn)代分析儀器實驗室臨床病因分析治療方案矛盾大為突出之 間 橋 梁急 需 檢 驗 醫(yī) 師完成 分 析 數(shù) 據(jù) 信 息 診 斷臨 床 型科 研 型P O C醫(yī)護其他基礎醫(yī)學飛速發(fā)展促進、支撐實驗醫(yī)學先進實驗技術實驗室臨床 D-D 概述 檢測方法 臨床應用 研究進展PlasminD-Dimer D-D 概述PlasminD-Dimer 現(xiàn)代檢驗醫(yī)學 用先進的技術方法，為臨床提供早期診斷治療和評估監(jiān)測的依據(jù)。 循證醫(yī)學 EBM 證據(jù)： 診斷 、治療 、評估、監(jiān)測 、預防等。 因此：檢驗醫(yī)學的重要任務之一 1、提供新的理論 2、發(fā)現(xiàn)新的證據(jù) 3、建立新的方法 研究、生產、整合技術應用于臨床 不斷完善

3、和進步的過程！因此：檢驗醫(yī)學的重要任務之一特點1 新的分析技術和研究目標需要 多學科 基礎、臨床、預防、統(tǒng)計等醫(yī)學 多部門 行政管理、知識產權 、監(jiān)管機構 多技術 工程學、信息學、衛(wèi)生學、環(huán)境是一項系統(tǒng)工程支撐下完成的工作特點1 是一項系統(tǒng)工程支撐下完成的工作 特點2 應用領域不斷擴展 生物芯片疾病預防（耳聾）藥物開發(fā)個體治療（差異）疾病預防（優(yōu)生）疾病預防（耳聾）國家安全太空探索農業(yè)育種環(huán)境監(jiān)測食品安全 特點2 應用領域不斷擴展 生物芯片疾病預防（耳聾）特點3： 參考體系的建立， 是我們必須應對新的變革和躍遷 。 溯 源 傳 遞， 國家參考品， 參考實驗室， 準確、通用。 特點3： 溯 檢驗

4、醫(yī)學為臨床提供的檢測結果 簡 單 概 括分為四種 ： 1、未知物質的未知功能 2、未知物質的已知功能 3、已知物質的已知功能 4、已知物質的未知功能3、 D-二聚體 檢驗醫(yī)學為臨床提供的檢測結果3、 D-二聚體 一、 D-二聚體的概述內源凝血外源凝血凝血酶交聯(lián)的纖維蛋白降解產物(FbDPs）交聯(lián)的纖維蛋白纖維蛋白原降解產物(FgDPs)纖維蛋白原纖溶酶纖維蛋白的單體FPA、 FPB FXIIIa凝血酶 一、 D-二聚體的概述內源凝血外源凝血凝血酶交聯(lián)的纖維 血漿DD含量變化 鑒別指標體內凝血狀態(tài) 原發(fā)性與繼發(fā)性纖溶 血漿DD含量ELISA免疫滲透法乳膠凝集法D- D 測定方法 10種方法全自動

5、血凝檢測儀 半自動血凝檢測儀 免 疫 比濁 免疫熒光ELISA免疫滲透法乳膠凝集法D- D 測定方法 全自二、測定方法的原理 A. 乳膠凝集法 被檢血漿中D-二聚體與包被在乳膠顆粒上的單克隆抗體相作用，產生絮狀沉淀反應。 方法經(jīng)典 1983年R ylat t、 1986年Elms、 第一株D D單克隆抗體 第一次吸附在乳膠顆粒上二、測定方法的原理 B . ELISA 采用2 個針對D-二聚體的單抗建立的 , 以抗原為中心，2 種抗體夾心法， 并加入辣根過氧化酶的底物以作顯色反應 1983年R ylat t 和 Elms 建立了雙抗夾心 ELISA C .免疫滲濾法挪威 將抗D D 單克隆抗體包

6、被于測試卡上,血漿由加樣孔加入 ,膜中抗體捕獲標本中的D D ,洗滌后加入膠體金標記的 D D 單克隆抗體,與被捕獲的 D D分子結合而顯紅色,其顯色程度與含D D量成正比,經(jīng)標準卡比對或用專門檢測計測量可定量測定 D D含量。 C .免疫滲濾法挪威三種方法不同的特點乳膠凝集試驗簡便快捷,適用于急診檢驗。只能定性，半定量，敏感性低。 常用于 S查，半定量結果不理想。EL ISA法敏感精確、速度比較快，可定量分析, 常用于成批檢測。 但操作繁瑣、要求較高，不能滿足急診檢驗需要。膠體金免疫滲濾試驗則結合了上述2種方法的優(yōu)勢, 簡單、快速、特異性好，能定量、單個標本均可隨時檢測。滿足急診檢驗需要。三

7、種方法不同的特點乳膠凝集試驗簡便快捷,適用于急診檢驗。只不同方法的特點 1、全自動 和半自動 血凝檢測儀 ,使DD 檢測結果更加精密、準確，特異 ，具良好的線性關系。但不適合對DD過高的樣本直接檢測！ 會出現(xiàn)陰性結果 2.在儀器上有必要設置預稀釋程序及預稀釋標準曲線、編程時設定兩個DD實驗程序，增加一個生理鹽水試劑位。不同方法的特點 熒光抗體檢測法 法國梅里埃公司VIDAS DD在VIDA免疫分析儀進行，是在酶免疫法基礎上與熒光檢測相結合，利用現(xiàn)成的單劑量試劑和分析儀中儲存的校準系統(tǒng)，對單份樣本進行檢測。VIDAS DD是目前研究最多的檢測技術，敏感性高，與經(jīng)典的ELISA有很好的一致性。 熒

8、光抗體檢測法對DVT的敏感性和NPV分別是96 99 95 99 相比較缺點為速度慢，抽血后離心15分鐘，用紙條吸入血漿后，所有步驟由儀器完成，大約35分鐘。 適合單人檢測 ，不適合大樣本 。對DVT的敏感性和NPV分別是96 99 日本Sysmex CA-1500全自動血凝儀日本Sysmex CA-500半自動血凝儀 德國BE公司 Rack Ratar自動血凝儀美國Beckman Coulter 7000全自動生化儀 意大利亞特斯全自動酶免分析儀日本Sysmex CA-1500全自動血凝儀三、 D- D指標的臨床應用肝病患者心、腦血管疾病惡性腫瘤妊娠高血壓綜合征惡性血液病溶栓藥物的應用三、

9、D- D指標的臨床應用肝病心、腦血管疾惡性腫瘤惡性血液 增高或陽性見于繼發(fā)性纖維蛋白溶解功能亢進，如高凝狀態(tài)、彌散性血管內凝血、腎臟疾病、器官移植排斥反應、溶栓治療等。 增高或陽性見于繼發(fā)性纖維蛋白溶解功能亢進，如高凝狀態(tài) 只要機體血管內有活化的血栓形成及纖維溶解活動，D-二聚體就會升高。心肌梗死、腦梗死、肺栓塞、靜脈血栓形成、手術、腫瘤、彌漫性血管內凝血、感染及組織壞死等均可導致D-二聚體升高。特別對老年人及住院患者，因患菌血癥等病易引起凝血異常而導致D-二聚體升高。 只要機體血管內有活化的血栓形成及纖維溶解活動，D-D-二聚體測定較FDP測定的優(yōu)點D-二聚體可作為溶栓效果的定量監(jiān)測指標 而

10、FDP(纖溶蛋白/原降解產物)可來自纖維蛋白原，且在原發(fā)性纖溶中也升高。因此后者不能作為溶栓效果的定量指標。D-二聚體測定較FDP測定的優(yōu)點D-二聚體可作為溶栓效果的定 D-二聚體或FDP測定都可作為纖溶活性增強的某些疾病的輔助診斷，例如DVT、DIC、腎功能衰竭及溶栓療效判斷。理論上 DIC時纖溶形成的小碎片 對FDP檢測法不敏感， 而D-二聚體試驗較之敏感。 D-二聚體或FDP測定都可作為纖溶活性增強的某些疾 D-二聚體可采用血凝標本(血漿), 而FDP是能采用血清標本。后者受血清制備是否完全的影響。 FDP乳膠顆粒法3分鐘完成試驗, D-二聚體膠體金免疫過濾法2分鐘完成試驗。 前者為半定

11、量測定, 后者若采用讀數(shù)儀可與ELISA法比美。 D-二聚體可采用血凝標本(血漿), 而FDP是能采誘發(fā)新生兒DIC的因素未足月產先兆子癇胎盤早剝妊娠高血壓綜合征DIC誘發(fā)新生兒DIC的因素DICD D 檢測與妊娠高血壓綜合征妊娠高血壓綜合征 患者存在著凝血與纖溶平衡失調的因素, 與非孕及正常妊娠婦女相比, D D 水平有顯著性差異, P0.05，并且隨病情加重而升高,如不及時處置極易形成血栓傾向。提出論點：患者血中D D 水平異常升高可能是妊娠高血壓綜合征發(fā)生D IC 時 最早出現(xiàn)的！D D 檢測與妊娠高血壓綜合征D-D 檢測與胎盤早剝檢測血清D-D 對胎盤早剝診斷的敏感性、特異性、陽性預測

12、值和陰性預測值分別為 67%、93%、91%、48%。血小板計數(shù)、凝血酶原時間、部分凝血活酶時間和纖維蛋白原水平等的敏感性尚不足20%。提出論點： D-D 水平是早期診斷胎盤早剝的快速、有效方法。D-D 檢測與胎盤早剝檢測血清D-D 對胎盤早剝診斷的敏感性DIC診斷標準 DIC臨床表現(xiàn)缺乏特異性 1 : 臨床需要醫(yī)護人員密切觀察， 2 : 診斷需要實驗室提供分析指標， 90%的患者：PLT 、APTT、PT、纖維蛋白原含量、3P實驗及D-D 確診。 要求簡單實用，先易后難 。 提出論點： 后者為首選 ！DIC診斷標準 DIC臨床-二聚體溶栓藥物療效的監(jiān)測指標經(jīng)過溶栓藥物治療了一周后提示溶栓物藥

13、不足 - 含量升高 - 含量下降 DIC的患者提示溶栓物藥達到療效-二聚體溶栓藥物療效的監(jiān)測指標經(jīng)過溶栓藥物提示溶栓 - D-D 檢測與肝病患者 肝病患者：血液呈高凝狀態(tài) 其血管內皮的損傷激活了外源性凝血途徑, 最終激活纖溶系統(tǒng)導致D - D 增加。 肝病并發(fā)纖溶亢進引起的出血傾向, 必須動態(tài)觀察血漿D D水平,預警！ 重要的臨床應用價值 D-D 檢測與肝病患者 肝病患者：血液呈高凝狀態(tài)D- D 檢測與惡性血液病白血病 患者易并發(fā)凝血功能紊亂, 可表現(xiàn)為出血、血栓。白血病細胞釋放多種促凝活性物質及纖溶酶原激活物。進入血中引起凝血功能紊亂所致。 指導臨床治療有較重要的意義提出論點： D D 檢測

14、可作為白血病患者體內出凝血異常及纖溶亢進診斷的有效指標 。D- D 檢測與惡性血液病白血病 DD 檢測與惡性腫瘤大量的文獻表明 ： 腫瘤可以引起患者D- D濃度升高，并且可以作為分期、預后等判斷標準。Masatoshi Oya等在一項研究中發(fā)現(xiàn) ： 結直腸癌患者 D- D比良性疾病患者的明顯要高，術前的D- D與腫瘤的病理結果和分期正相關，術前D- D水平高的患者，術后生存期明顯要比低的患者短。 提出論點： ？！DD 檢測與惡性腫瘤大量的文獻表明 ： d-二聚體的臨床應用及研究進展課件D- D升高與動脈粥樣硬化的發(fā)生和嚴重程度有關。 研究發(fā)現(xiàn)： 血漿C反應蛋白(CRP) 、 纖維蛋白原( Fi

15、b) 、 D D的聯(lián)合檢測, 提出論點： 可反映原發(fā)性高血壓 病情發(fā)展程度, 為早期診斷和及時有效治療提供依據(jù)。 D- D檢測與心、腦血管疾病D- D升高與動脈粥樣硬化的發(fā)生和嚴重程度有關。 D- D急性心肌梗死急性心肌梗死急性心肌梗死實驗冠心病又分為三組：急性心肌梗死組穩(wěn)定性心肌梗死組不穩(wěn)定性心肌梗死冠心病人研究組健康人對照組冠心病BA急性心肌梗死實驗冠心病又分為三組：急性心肌梗死組穩(wěn)定性心急性心肌梗實驗結果1、急性心肌梗死組、不穩(wěn)定心絞痛組 D D 、Fib 含量及陽性檢出率明顯高于穩(wěn)定性心絞痛組 和對照組, 2、而急性心肌梗死組的D D 、Fib含量又明顯高于不穩(wěn)定心絞痛組， 3、 同時

16、發(fā)現(xiàn)：重度病變組 D D 、Fib含 量高于輕、中度病變組。 急性心肌梗實驗結果1、急性心肌梗死組、不穩(wěn)定心絞痛組 急性心肌梗死實驗的結論提出論點： 急性心肌梗死發(fā)病時, 其血漿D-D的含量明顯升高, 反映了患者體內有血栓形成。 血漿D-D 檢測可以為臨床提供急性心肌梗死的診斷指標 。 。急性心肌梗死實驗的結論三、 D- D檢測的進展1. D- D和急性主動脈瘤 Sodeck 等研究發(fā)現(xiàn)D- D水平的檢測,可以排 除急性主動脈瘤，診斷的 敏感性為100%。然而： 急性主動脈瘤是一種威脅生命的疾病 D- D水平不應作為診斷該病的唯一依據(jù), 應結合其他檢查共同確診。三、 D- D檢測的進展1. D

17、- D和急性主動脈瘤D-D 檢測的進展2 .yengli等研究了血中FDP物和DD 水平對硅 沉著(矽肺)病早期診斷的意義。 發(fā)現(xiàn) ：硅沉著病早期FDP和 DD水平很高,隨著病情的發(fā)展, 水平逐漸下降,尤其是 DD特異性較高作者認為： 2項指標有希望用于(矽肺) 的早期診斷, 尤其是對大規(guī)模篩查 有很高適用的價值。即有望用溶栓藥物達到早期治療的效果, 將為(矽肺) 病治療開辟另一途徑。D-D 檢測的進展2 .yengli等研究了血中FDP物和Dd-二聚體的臨床應用及研究進展課件d-二聚體的臨床應用及研究進展課件D- D檢測的進展3. 研究發(fā)現(xiàn)：深靜脈血栓患者其D- D水平低于正常者，復發(fā)概率很

18、低,有較高的陰性預測值。 有研究發(fā)現(xiàn)：608 例無明顯誘因、初患靜脈血栓栓塞的患者，在接受了 3 個月口服抗凝劑治療，停藥1 個月后檢測D- D 。水平異常 正常D- D水平 者較水平正常者的復發(fā)風險率高2.27% 。D- D檢測的進展3. 研究發(fā)現(xiàn)：深靜脈血栓患者其D- D水D-D 檢測的進展 4.血液透析：促紅細胞生成素治療有幾種不良反應，包括血 栓形成、高黏血癥、高血壓和潛在的癌變可能。 接受血液透析 、癌癥或化療引起貧血的患者， 使用促紅細胞生成素有嚴格的用藥指征。 科研人員： 開始研究促紅細胞生成素治療的凝血標志物。D-D 檢測的進展 4.血液透析：D- D檢測的進展5.化療某項關于使用沙利度胺治療多發(fā)性骨髓瘤患者血栓病的研究發(fā)現(xiàn)： D- D水平高者其靜脈